鏈霉素的分析

鏈霉素的分析第一節(jié)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)第二節(jié)鑒別試驗(yàn)第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查第四節(jié)含量測(cè)定主要內(nèi)容

堿性環(huán)己多元醇第一節(jié)結(jié)構(gòu)與性質(zhì)1.氨基糖苷類(lèi)抗生素結(jié)構(gòu)：鏈霉素（streptomycin）鏈霉胍鏈霉糖N-甲基葡萄糖胺（氨基糖）鏈霉雙糖胺2.性質(zhì)（1）溶解性與堿性溶解性

-OH水溶性堿性

-NH2可與酸成鹽臨床上多用硫酸鹽（2）旋光性

各種鏈霉素鹽的分子，均含有許多手性碳原子，故都具有旋光性。一定范圍內(nèi)鏈霉素的比旋度與鏈霉素濃度的關(guān)系可繪制曲線，利用這種關(guān)系就能直接迅速測(cè)得鏈霉素的濃度。（3）穩(wěn)定性鏈霉素pH5~7.5穩(wěn)定OH-N-甲基葡萄糖胺鏈霉糖OH-麥芽酚反應(yīng)坂口反應(yīng)反應(yīng)（4）UV鏈霉素λmax=230nm第二節(jié)鑒別試驗(yàn)坂口反應(yīng)麥芽酚反應(yīng)N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)（一）N-甲基葡萄糖胺反應(yīng)對(duì)二甲氨基苯甲醛H+櫻桃紅色（Elson-Morgan反應(yīng)）乙酰丙酮OH-吡咯衍生物水解水解產(chǎn)物N-甲基葡萄糖胺特有反應(yīng)：對(duì)二甲氨基苯甲醛H+OH-(縮合)乙酰丙酮（二）麥芽酚反應(yīng)鏈霉糖特征反應(yīng)△H+紫紅色（Maltol反應(yīng)）麥芽酚反應(yīng)H+

Fe3+分子重排麥芽酚例硫酸鏈霉素Ch.P（2010）【鑒別】（2）取本品約20mg，加水5ml溶解后，加氫氧化鈉試液0.3ml，置水浴上加熱5分鐘,加硫酸鐵銨溶液（取硫酸鐵銨0.1g，加0.5mol/L硫酸溶液5ml使溶解）0.5ml，即顯紫紅色。（三）坂口反應(yīng)鏈霉胍特征反應(yīng)水解（Sakaguchi反應(yīng)）橙紅色次溴酸鈉8-羥基喹啉（或α-萘酚）坂口反應(yīng)+OH-例硫酸鏈霉素Ch.P（2010）【鑒別】（1）取本品約0.5mg，加水4ml溶解后，加氫氧化鈉試液2.5ml與0.1%8-羥基喹啉的乙醇溶液1ml，放冷至約15℃，加次溴酸鈉試液3滴,即顯橙紅色。（四）光譜法IR法例【鑒別】紅外光吸收?qǐng)D譜Ch.P（2010）

硫酸鏈霉素（光譜集491圖）

第三節(jié)特殊雜質(zhì)檢查有關(guān)物質(zhì)（甘露糖鏈霉素等）的檢查2.方法HPLC1.來(lái)源發(fā)酵時(shí)菌種產(chǎn)生例硫酸鏈霉素Ch.P（2010）【檢查】有關(guān)物質(zhì)

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)：

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑，以0.15mol/L的三氟醋酸溶液為流動(dòng)相，流速為每分鐘0.5ml，用蒸發(fā)光散射檢測(cè)器檢測(cè)（漂移管溫度：110℃，載氣流速：2.8L/min），取鏈霉素對(duì)照品適量，用水溶解并稀釋制成每1ml中約含鏈霉素3.5mg的溶液，置日光燈（3000Lx）下照射24小時(shí)，作為分離度試驗(yàn)用溶液。取妥布霉素對(duì)照品適量，用分離度試驗(yàn)用溶液溶解并稀釋制成每1ml中約含妥布霉素0.06mg的溶液，量取10μl注入液相色譜儀，記錄色譜圖。鏈霉素峰保留時(shí)間約為10～12分鐘，鏈霉素峰（相對(duì)保留時(shí)間為1.0）與相對(duì)保留時(shí)間為0.9處的雜質(zhì)峰的分離度和鏈霉素峰與妥布霉素峰的分離度分別應(yīng)不小于1.2和1.5。連續(xù)進(jìn)樣5次，鏈霉素峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于2.0%。

取本品適量，精密稱(chēng)定，加水溶解并定量稀釋制成每1ml中約含鏈霉素3.5mg的溶液，作為供試品溶液。精密量取供試品溶液適量，加水稀釋制成每1ml中約含鏈霉素35μg、70μg和140μg的溶液，作為對(duì)照溶液（1）、（2）、（3）。照含量測(cè)定項(xiàng)下的色譜條件，量取對(duì)照溶液（2）10μl注入液相色譜儀，調(diào)節(jié)檢測(cè)靈敏度，使主成分色譜峰的峰高為滿量程的10%～20%，精密量取對(duì)照溶液（1）、（2）、（3）各10μl，分別注入液相色譜儀，記錄色譜圖。以對(duì)照溶液濃度的對(duì)數(shù)值與相應(yīng)峰面積的對(duì)數(shù)值計(jì)算回歸方程，相關(guān)系數(shù)（r）應(yīng)不小于0.99。另取供試品溶液，同法測(cè)定，記錄色譜圖至主成分峰保留時(shí)間的2倍，用回歸方程計(jì)算，最大單一雜質(zhì)不得過(guò)2.0%，雜質(zhì)總量不得過(guò)5.0%。單一雜質(zhì)限量=C單一雜質(zhì)濃度/C主成分濃度×100%≦2.0%雜質(zhì)總量=C雜質(zhì)總濃度/C主成分濃度×100%≦5.0%微生物檢定法第四節(jié)含量測(cè)定微生物檢定法例硫酸鏈霉素Ch.P（2010）

【含量測(cè)定】精密稱(chēng)