粗脂肪的提取和定量測定精

會計(jì)學(xué)1粗脂肪的提取和定量測定精一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?/p>

掌握用索氏提取法測定粗脂肪含量的原理及操作。熟悉重量分析的基本步驟。第1頁/共25頁二、實(shí)驗(yàn)原理

脂肪是丙三醇（甘油）和脂肪酸結(jié)合成的脂類化合物，能溶于脂溶性有機(jī)溶劑。

本實(shí)驗(yàn)利用脂肪能溶于脂溶性溶劑這一特性，用脂溶性溶劑將脂肪提取出來，借蒸發(fā)除去溶劑后稱量。整個提取過程均在索氏提取器中進(jìn)行，通常使用的脂溶性溶劑為乙醚，或沸點(diǎn)為30℃～60℃的石油醚。用此法提取的脂溶性物質(zhì)除脂肪外，還有游離脂肪酸、磷酸、固醇、芳香油及某些色素等，故稱為“粗脂肪”。同時，樣品中結(jié)合狀態(tài)的脂類（主要是脂蛋白）不能直接提取出來，所以該法又稱為游離脂類定量測定法。

第2頁/共25頁索氏抽提法測定脂肪最大的不足是耗時過長，如能將樣品先回流1～2次，然后浸泡在溶劑中過夜；次日再繼續(xù)抽提，則可明顯提高提取率。

第3頁/共25頁三、實(shí)驗(yàn)器材

1.電子天平。操作指南：調(diào)整水平度，插上電源，啟動“ON/OFF”開關(guān)，按一下回零擋“TARE”，使屏幕上顯示0.0000。推開玻璃門，輕輕將樣品置于稱量盤上，關(guān)上玻璃門，待屏幕上顯示的數(shù)字穩(wěn)定后記錄下來，即為樣品的重量（g）。注意，每次稱量前都必須按一下回零擋“TARE”，使屏幕上顯示0.0000。稱量室內(nèi)尤其是稱量盤上必須保持清潔、干燥；若有藥品撒落，立即用軟毛刷清理干凈。

第4頁/共25頁2.HH-2型數(shù)顯恒溫水浴鍋

操作指南：調(diào)整水平度，插上電源，啟動“第5頁/共25頁3.101C-3型電熱鼓風(fēng)干燥箱第6頁/共25頁操作指南：插上電源插頭，按下綠按鈕（電源開關(guān)）和黃按鈕（鼓風(fēng)開關(guān)），將“設(shè)定/測量”按鈕置于設(shè)定擋，調(diào)節(jié)“溫度設(shè)定”旋鈕，使顯示器中的數(shù)字為所需的溫度，再將“設(shè)定/測量”按鈕置于測量擋，此時顯示器中的數(shù)字表示烘箱內(nèi)的實(shí)際溫度。將加熱旋鈕（一共有3個）打到適當(dāng)?shù)膿跷?，烘箱開始加熱。此時綠燈亮，當(dāng)溫度達(dá)到所設(shè)定值時，紅燈亮，烘箱停止加熱。以后烘箱會一直通過不斷的加熱-停止過程來保持恒溫，紅綠燈也會相應(yīng)地交替閃亮。請注意，本實(shí)驗(yàn)由于設(shè)定溫度為120℃，故在取出被烘干物品時，請戴上手套。第7頁/共25頁4.索氏提取儀由冷凝管、抽提管和平底燒瓶三個部件組成，通過標(biāo)準(zhǔn)磨口相對接。第8頁/共25頁搭建裝置：用鐵架臺、２只十字夾、２只龍爪、２根乳膠管和１套索氏提取儀來搭建裝置。注意按照由下而上的順序來搭建，參見圖2-7～圖2-11。固定點(diǎn)分別是平底燒瓶的頸部和提取管的頸部，索氏提取儀的高度以平底燒瓶的瓶頸略高于恒溫水浴鍋的液面為宜。注意：用龍爪夾玻璃儀器時，要先用手找好感覺，不能太緊（否則會夾破）也不能太松（否則會打滑而導(dǎo)致索氏提取儀的標(biāo)準(zhǔn)磨口接口漏氣）。

第9頁/共25頁5.其它器材：不銹鋼鑷子、藥勺、濾紙、鐵架臺、十字夾、龍爪、手套、乳膠管。第10頁/共25頁四、實(shí)驗(yàn)試劑稱取樣品的重量根據(jù)材料中脂肪的含量而定（參考表1-1）。通常脂肪含量在10%以下的，稱取樣品10～20g。脂肪含量為50%～60%的，則稱取樣品2～4g。第11頁/共25頁表1-1幾種干的植物種子和種仁中油脂的百分含量

樣品含油量（%）樣品含油量（%）向日葵種籽向日葵種仁蓖麻種籽蓖麻種仁芝麻種籽油菜種籽花生種仁

23.5～45.040.0～67.845.1～58.550.7～72.046.2～61.041.1～42.940.2～60.7大豆種籽油桐種仁玉米谷粒小麥谷粒稻子谷粒豌豆種籽10.0～25.047.8～68.93.0～9.01.6～2.61.3～2.40.7～1.9第12頁/共25頁將樣品在80℃～100℃電熱鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)烘去水分，一般烘4h，烘干時要避免過熱。樣品顆粒不宜太大，一般要在研缽中研碎樣品。樣品若是液體，應(yīng)將一定體積的樣品滴在濾紙上，在60℃～80℃電熱鼓風(fēng)干燥箱內(nèi)烘干后，再進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。第13頁/共25頁實(shí)驗(yàn)試劑

①.花生仁。

②.石油醚：C.P.，沸程30～60℃。第14頁/共25頁五、實(shí)驗(yàn)操作準(zhǔn)備工作：將恒溫水浴鍋的水溫事先加熱（80℃）。務(wù)必保證提取管和燒瓶內(nèi)干燥、潔凈；若否，將其洗凈并置于干燥箱內(nèi)120℃烘干。折濾紙斗：取一張?11cm的濾紙，折成筒狀，再將其一端折起來封死，便做成了濾紙斗。稱樣：先將數(shù)?；ㄉ嗜テ?，在碾缽中用碾錘徹底搗碎作為實(shí)驗(yàn)樣品。參照實(shí)驗(yàn)設(shè)備和器材①，將濾紙斗在電子天平上稱重，然后用藥勺?。采祝s2g）樣品裝入濾紙斗中，把濾紙斗的開口處折起來封死；防止樣品泄出濾紙斗。調(diào)整濾紙斗的高度，使其放在抽提管中時略低于虹吸管的上彎頭處。將裝好樣品的濾紙斗放在電子天平上稱重，兩質(zhì)量之差即為樣品的質(zhì)量。第15頁/共25頁提?。簩⑺魇咸崛x按照圖2-7～圖2-11所示，從下至上安裝。首先安裝好燒瓶，并調(diào)整其高度，使其剛好能浸入水浴鍋中的水中。將裝置從水浴鍋的水中取出，繼續(xù)安裝提取管，把裝有樣品的濾紙斗放入提取管內(nèi)，向提取管中緩緩倒入石油醚直至液面達(dá)到虹吸管上彎頭部，正好虹吸一次；再向提取管中倒入石油醚，使其液面達(dá)到第一次液面的一半。用乳膠管將冷凝管與自來水管相連，將冷凝管安裝到提取管上，檢查一下，確保所有接口均對接完好（不漏氣，不打滑）。輕輕打開自來水（冷凝用），將索氏提取儀整個裝置放入恒溫水浴鍋中加熱提取（水溫80℃左右），請觀看軟件中的視頻《索氏提取儀的安裝》。提取時間2～4h，約虹吸20次以上，記錄每次虹吸所需的時間和虹吸次數(shù)。附注：若要將樣品的粗脂提取完全，提取時間至少為12h以上。由于實(shí)驗(yàn)時間的限制，我們的提取率只能達(dá)到80％左右。

第16頁/共25頁回收石油醚：提取2h后，當(dāng)石油醚在提取管中的液面即將達(dá)到虹吸管的上彎頭處時，從水浴鍋中取出索氏提取儀裝置，室溫冷卻5～10min；取下平底燒瓶，將提取管的下端口插入回收瓶中，傾斜裝置，提取管中的石油醚會虹吸而流入回收瓶中，達(dá)到回收的目的。再裝上平底燒瓶，繼續(xù)放入恒溫水浴鍋中加熱直至冷凝管下端無石油醚滴下，表明平底燒瓶中的石油醚已經(jīng)蒸干。注意：必須蒸干后才能放入干燥箱烘干，否則會引起火災(zāi)。取下平底燒瓶，回收提取管中的石油醚。第17頁/共25頁稱量粗脂質(zhì)量：將平底燒瓶放入120℃的電熱鼓風(fēng)干燥箱中烘15min，取出冷卻后稱重（須戴手套，以免燙傷）。再將平底燒瓶用洗滌劑洗凈，于120℃的電熱鼓風(fēng)干燥箱中烘干（約15min），取出冷卻后稱重，兩者的質(zhì)量之差就是粗脂的質(zhì)量。

第18頁/共25頁

清潔

從提取管中取出濾紙斗，清洗提取管，整理好桌面上的儀器和試劑，并注意清潔自己的操作臺，請老師驗(yàn)收，實(shí)驗(yàn)報告當(dāng)場交給老師。

計(jì)算

樣品粗脂的含量（%）=（粗脂的質(zhì)量/樣品的質(zhì)量）*100%

第19頁/共25頁圖2-9

索氏提取儀示意圖第20頁/共25頁左：

燒瓶的安裝（注意高度）

右：提取管的安裝第21頁/共25頁

左：冷凝管的安裝

右：水浴加熱中的索氏提取儀第22頁/共25頁記錄與計(jì)算匯總虹吸次