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文檔簡介

實驗二細胞器的觀察

一、目的要求

1.掌握油鏡的使用方法。2.觀察并熟悉光鏡下線粒體和高爾基復合體的形態(tài)特征。3.掌握細胞骨架的顯示方法。4.了解光鏡下細胞骨架的基本形態(tài)結構。二、實驗材料和用品洋蔥鱗莖、蛙腎臟切片、兔脊神經(jīng)節(jié)切片；光學顯微鏡、載玻片、蓋玻片、擦鏡紙二甲苯、香柏油等；

PBS、M-緩沖液、2%TritonX-100、0.2％考馬斯亮蘭染液等。

㈠實驗原理真核細胞內存在多種具有特殊形態(tài)結構和功能的細胞器，它們可分為膜性細胞器和非膜性細胞器，通過不同的染色方法，在普通光鏡下可以看到細胞的這些顯微結構。三、實驗內容適當濃度的TritonX-100能溶解質膜結構中及細胞內許多蛋白質，骨架系統(tǒng)不被破壞。油鏡的使用方法高倍鏡找到觀察標本并移至視野中央滴加香柏油觀察擦拭干凈顯微鏡復位㈡實驗方法細胞器的觀察蛙腎臟切片－觀察線粒體；兔脊神經(jīng)節(jié)切片－觀察高爾基復合體；洋蔥鱗莖表皮－制做細胞骨架臨時裝片；蛙腎臟切片－線粒體兔脊神經(jīng)節(jié)切片－高爾基復合體

洋蔥鱗莖表皮－制做細胞骨架臨時裝片取材：洋蔥鱗葉表皮浸入PBS中5分鐘；2%TritonX-100處理：37℃，25分鐘；M-緩沖液沖洗2次，每次5分鐘；3%戊二醛固定10分鐘，PBS洗2次/3分鐘；0.2％考馬斯亮蘭染色8分鐘；PBS洗2次/3分鐘；鏡檢。

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