天津科技大學(xué)氨基酸發(fā)酵工藝學(xué)

氨基酸發(fā)酵工藝學(xué)第一節(jié)

學(xué)習(xí)氨基酸發(fā)酵工藝學(xué)的目的、研究對(duì)象、任務(wù)及內(nèi)容

氨基酸發(fā)酵是典型的代謝控制發(fā)酵,由發(fā)酵所生成的產(chǎn)物——氨基酸,都是微生物的中間代謝產(chǎn)物,它的積累是建立于對(duì)微生物正常代謝的抑制。在脫氧核糖核酸(DNA)的分子水平上改變、控制微生物的代謝,使有用產(chǎn)物大量生成、積累。

以探討氨基酸發(fā)酵工廠的生產(chǎn)技術(shù)為主要目的。氨基酸發(fā)酵生產(chǎn)以發(fā)酵為主,發(fā)酵的好壞是整個(gè)生產(chǎn)的關(guān)鍵,但后處理提純操作和提純?cè)O(shè)備選用當(dāng)否,也會(huì)大大影響總的得率。氨基酸發(fā)酵工藝學(xué)研究的對(duì)象應(yīng)該包括從投入原料到最終產(chǎn)品獲得的整個(gè)過程,其中有微生物生化問題、生化工程問題,也有分析與設(shè)備問題。

今后的發(fā)展是采用誘變、細(xì)胞工程、基因工程的手段選育出從遺傳角度解除了反饋調(diào)節(jié)和遺傳性穩(wěn)定的更理想菌種,提高產(chǎn)酸;采用過程控制,進(jìn)行最優(yōu)化控制,連續(xù)化、自動(dòng)化,穩(wěn)產(chǎn)、高產(chǎn);探求新工藝、新設(shè)備,以提高產(chǎn)率和收得率;研究發(fā)酵機(jī)制等問題,以便能更好地控制氨基酸這樣微生物中間代謝產(chǎn)物的發(fā)酵。

緒論第一章

淀粉水解糖的制備

第一節(jié)淀粉的組成及其特性

淀粉為白色無定形結(jié)晶粉末,淀粉的形狀有圓形、橢圓形和多角形三種。淀粉顆粒的大小隨淀粉種類的不同而差別很大。淀粉的組成:淀粉分子是由許多葡萄糖脫水縮聚而成的高分子化合物,用(C6H10O5)n這個(gè)實(shí)驗(yàn)式來表示。淀粉一般可分為直鏈淀粉和支鏈淀粉兩部分。直鏈淀粉是由不分支的葡萄糖所構(gòu)成,葡萄糖分子間以α-1,4-糖苷鍵聚合而成,呈鏈狀結(jié)構(gòu),聚合度約100～600之間,它的水懸浮液加熱時(shí),不產(chǎn)生糊精,而以膠體狀態(tài)溶解,遇碘反應(yīng)是純藍(lán)色。支鏈淀粉(膠淀粉)其直鏈由葡萄糖分子以α-1,4-糖苷鍵相連結(jié),而支鏈與直鏈葡萄糖分子以α-1,6-糖苷鍵相連結(jié),分子呈樹狀,它是一種膨脹性的物質(zhì),置于水中加熱時(shí)成為膠粘的糊狀物,而且只有在加熱加壓的條件下,才能溶解于水,遇碘呈紫紅色反應(yīng)。淀粉沒有還原性，也沒有甜味，不溶于冷水、酒精、醚等有機(jī)溶劑中。淀粉在熱水中能吸收水分而膨脹，最后淀粉粒破裂，淀粉分子溶解于水中形成帶有粘性的淀粉糊，這個(gè)過程稱為糊化。第一階段:淀粉緩慢地可逆地吸收水分,淀粉顆粒已有些微膨脹。第二階段:當(dāng)溫度升到大約65℃時(shí),淀粉顆粒經(jīng)過不可逆地突然很快地吸收大量水分后,膨脹粘度增加很大。第三階段:當(dāng)溫度繼續(xù)升高,淀粉顆粒變成無形空囊,可溶性淀粉浸出,成為半透明的均質(zhì)膠體。

第一章

淀粉水解糖的制備

第二節(jié)

淀粉水解糖的制備方法

一、淀粉水解糖的生產(chǎn)意義和水解糖的質(zhì)量要求

二、淀粉水解的方法及其比較

1、酸解法

2、酶酸法

3、酸酶法

4、雙酶法

第一章

淀粉水解糖的制備

第三節(jié)

雙酶法制糖工藝

淀粉雙酶法制糖工藝主要包括:淀粉的液化和糖化兩個(gè)步驟。液化是利用液化酶使淀粉糊化,粘度降低,并水解到糊精和低聚糖的程度。糖化是用糖化酶將液化產(chǎn)物進(jìn)一步徹底水解成葡萄糖的過程。

第二章

谷氨酸發(fā)酵機(jī)制第一節(jié)

谷氨酸的生物合成途徑一、生成谷氨酸的主要酶反應(yīng)

(1)谷氨酸脫氫酶(GHD)所催化的還原氨基化反應(yīng)

(2)轉(zhuǎn)氨酶(AT)催化的轉(zhuǎn)氨反應(yīng)(3)谷氨酸合成酶(GS)催化的反應(yīng)第二章

谷氨酸發(fā)酵機(jī)制

二、谷氨酸生物合成的理想途徑

由葡萄糖發(fā)酵生成谷氨酸的理想途徑如下

第二章

谷氨酸發(fā)酵機(jī)制谷氨酸發(fā)酵的代謝途徑如下圖所示

第二章

谷氨酸發(fā)酵機(jī)制黃色短桿菌中谷氨酸的代謝調(diào)節(jié)機(jī)制如下圖所示

第二二章章谷氨氨酸酸發(fā)發(fā)酵酵機(jī)機(jī)制制三、、谷谷氨氨酸酸生生產(chǎn)產(chǎn)菌菌的的育育種種思思路路第二二章章谷氨氨酸酸發(fā)發(fā)酵酵機(jī)機(jī)制制1.切斷斷或或減減弱弱支支路路代代謝謝2.解除除自自身身的的反反饋饋抑抑制制3.增加加前前體體物物的的合合成成4.提高高細(xì)細(xì)胞胞膜膜的的滲滲透透性性5.強(qiáng)化化能能量量代代謝謝6.利用用基基因因工工程程技技術(shù)術(shù)構(gòu)構(gòu)建建谷谷氨氨酸酸工工程程菌菌株株谷氨氨酸酸生生產(chǎn)產(chǎn)菌菌的的具具體體育育種種思思路路第二二章章谷氨氨酸酸發(fā)發(fā)酵酵機(jī)機(jī)制制在谷谷氨氨酸酸發(fā)發(fā)酵酵時(shí)時(shí),糖酵酵解解經(jīng)經(jīng)過過EMP及HMP兩個(gè)個(gè)途途徑徑進(jìn)進(jìn)行行,生物物素素充充足足菌菌HMP所占占比比例例是是38%,控制制生生物物素素亞亞適適量量的的結(jié)結(jié)果果,發(fā)酵酵產(chǎn)產(chǎn)酸酸期期,EMP所占占的的比比例例更更大大,HMP所占占比比例例約約為為26%。由由葡葡萄萄糖糖生生物物合合成成谷谷氨氨酸酸的的代代謝謝途途徑徑中中的的主主要要過過程程至至少少有有16步酶酶促促反反應(yīng)應(yīng)。。在在糖糖質(zhì)質(zhì)原原料料發(fā)發(fā)酵酵法法生生產(chǎn)產(chǎn)谷谷氨氨酸酸時(shí)時(shí),應(yīng)盡盡量量控控制制通通過過CO2固定定反反應(yīng)應(yīng)供供給給四四碳碳二二羧羧酸酸;在谷谷氨氨酸酸發(fā)發(fā)酵酵的的菌菌體體生生長(zhǎng)長(zhǎng)期期,需要要異異檸檸檬檬酸酸裂裂解解酶酶反反應(yīng)應(yīng),走乙乙醛醛酸酸循循環(huán)環(huán)途途徑徑。。菌菌體體生生長(zhǎng)長(zhǎng)期期之之后后,進(jìn)入入谷谷氨氨酸酸生生成成期期,最好好沒沒有有異異檸檸檬檬酸酸裂裂解解酶酶反反應(yīng)應(yīng),封閉閉乙乙醛醛酸酸循循環(huán)環(huán)。。在在生生長(zhǎng)長(zhǎng)之之后后,理想想的的發(fā)發(fā)酵酵按按如如下下反反應(yīng)應(yīng)進(jìn)進(jìn)行行:C6H12O6+NH3+1.5O2───C6H9O4N+CO2+3H2O理論論收收率率為為81.7%。四四碳碳二二羧羧酸酸是是100%通過過CO2固定定反反應(yīng)應(yīng)供供給給。。若若通通過過乙乙醛醛酸酸循循環(huán)環(huán)供供給給四四碳碳二二羧羧酸酸,則理理論論收收率率僅僅為為54.4%,實(shí)際際收收率率處處于于中中間間值值。。四、、谷谷氨氨酸酸發(fā)發(fā)酵酵的的代代謝謝途途徑徑第二二章章谷氨氨酸酸發(fā)發(fā)酵酵機(jī)機(jī)制制第二二節(jié)節(jié)谷氨氨酸酸生生物物合合成成的的調(diào)調(diào)節(jié)節(jié)機(jī)機(jī)制制一、、優(yōu)先先合合成成與與反反饋饋調(diào)調(diào)節(jié)節(jié)二、、糖代代謝謝的的調(diào)調(diào)節(jié)節(jié)三、、氮代代謝謝的的調(diào)調(diào)節(jié)節(jié)四、、其其它它調(diào)調(diào)節(jié)節(jié)第二二章章谷氨氨酸酸發(fā)發(fā)酵酵機(jī)機(jī)制制第三三節(jié)節(jié)谷氨氨酸酸發(fā)發(fā)酵酵中中如如何何控控制制細(xì)細(xì)胞胞膜膜的的滲滲透透性性一、、控控制制細(xì)細(xì)胞胞膜膜滲滲透透性性的的方方法法１.化學(xué)控制制方法2.物理控制制方法二、強(qiáng)制制發(fā)酵控控制工藝藝第三章谷氨酸生生產(chǎn)菌的的特征、、育種及及擴(kuò)大培培養(yǎng)第一節(jié)谷氨酸生生產(chǎn)菌的的主要特特征與菌菌學(xué)性質(zhì)質(zhì)現(xiàn)有谷氨氨酸生產(chǎn)產(chǎn)菌主要要是棒狀狀桿菌屬屬、短桿桿菌屬、、小桿菌菌屬及節(jié)節(jié)桿菌屬屬中的細(xì)細(xì)菌。1.棒狀桿菌菌屬(Corynebacterium)2.短桿菌屬屬(Brevibacterium)3.小桿菌屬屬(Microbacterium)4.節(jié)桿菌屬屬(Arthrobacterium)第三章谷氨酸生生產(chǎn)菌的的特征、、育種及及擴(kuò)大培培養(yǎng)第二節(jié)國(guó)內(nèi)谷氨氨酸生產(chǎn)產(chǎn)菌及其其比較一、北京京棒桿菌菌(AS1299)的形態(tài)和和生理特特征二、鈍齒齒棒桿菌菌(AS1542)的形態(tài)和和生理特特征三、天津津短桿菌菌(T6-13)的形態(tài)和和生理特特征四、北京京棒桿菌菌(7338)與鈍齒棒棒桿菌(B9)的比較五、天津津短桿菌菌(T6-13)與鈍齒桿桿菌(B9)的比較六、目前前味精行行業(yè)采用用的主要要菌株S9114華南理工工大學(xué)FD415上海復(fù)旦旦大學(xué)TG961天津科技技大學(xué)第三章谷氨酸生生產(chǎn)菌的的特征、、育種及及擴(kuò)大培培養(yǎng)第三節(jié)谷氨酸生生產(chǎn)菌在在發(fā)酵過過程中的的形態(tài)變變化一、種子子的菌體體形態(tài)斜面和一一、二級(jí)級(jí)種子培培養(yǎng)在不不同培養(yǎng)養(yǎng)條件下下,細(xì)胞形態(tài)態(tài)基本相相似。斜斜面培養(yǎng)養(yǎng)的菌體體較細(xì)小小,一、二級(jí)級(jí)種子比比斜面菌菌體大而而粗壯,革蘭氏染染色深。。多為短短桿至棒棒桿狀,有的微呈呈彎曲狀狀,兩端鈍圓圓,無分枝;細(xì)胞排列列呈單個(gè)個(gè)、成對(duì)對(duì)及"V"字形,有柵狀或或不規(guī)則則聚塊;分裂的細(xì)細(xì)胞大小小為0.7～0.9*1.0～3.4um。由于生生物素充充足,繁殖的菌菌體細(xì)胞胞均為谷谷氨酸非非積累型型細(xì)胞。。二、谷氨氨酸發(fā)酵酵不同階階段的菌菌體形態(tài)態(tài)從谷氨酸酸發(fā)酵中中菌體形形態(tài)的變變化來看看,大致可以以分為長(zhǎng)長(zhǎng)菌型細(xì)細(xì)胞、轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)移期細(xì)細(xì)胞和產(chǎn)產(chǎn)酸型細(xì)細(xì)胞3種不同時(shí)時(shí)期的細(xì)細(xì)胞形態(tài)態(tài).三、谷氨氨酸發(fā)酵酵感染噬噬菌體后后的菌體體形態(tài)發(fā)酵前期期感染噬噬菌體后后,菌體細(xì)胞胞明顯減減少,細(xì)胞不規(guī)規(guī)則,發(fā)圓、發(fā)發(fā)胖,缺乏"Ｖ"字形排列列,有明顯的的細(xì)胞碎碎片,嚴(yán)重時(shí)出出現(xiàn)拉絲絲、拉網(wǎng)網(wǎng),互相堆在在一起,幾乎找不不到完整整的菌體體細(xì)胞,類似蛛網(wǎng)網(wǎng)或魚翅翅狀。在發(fā)酵中中、后期期感染噬噬菌體后后,菌體細(xì)胞胞形態(tài)不不規(guī)則,邊緣不整整齊,有的邊緣緣似乎有有許多毛毛刺狀的的東西,有細(xì)胞碎碎片。第三章谷氨酸生生產(chǎn)菌的的特征、、育種及及擴(kuò)大培培養(yǎng)第四節(jié)谷氨酸發(fā)發(fā)酵的代代謝控制制育種一、日常常菌種工工作二、選育育耐高滲滲透壓菌菌種三、選育育不分解解利用谷谷氨酸的的突變株株四、選育育細(xì)胞膜膜滲透性性好的突突變株五、選育育強(qiáng)化CO2固定反應(yīng)應(yīng)的突變變株六、選育育減弱乙乙醛酸循循環(huán)的突突變株七、選育育強(qiáng)化三三羧酸循循環(huán)中從從檸檬酸酸到α-酮戊二酸酸代謝的的突變株株八、選育育解除谷谷氨酸對(duì)對(duì)谷氨酸酸脫氫酶酶反饋調(diào)調(diào)節(jié)的突突變株九、強(qiáng)化化能量代代謝十、選育育減弱HMP途徑后段段酶活性性的突變變株第三章谷氨酸生產(chǎn)菌菌的特征、育育種及擴(kuò)大培培養(yǎng)第五節(jié)應(yīng)用生物工程程新技術(shù)選育育谷氨酸生產(chǎn)產(chǎn)菌一、應(yīng)用原生生質(zhì)體融合新新技術(shù)選育谷谷氨酸生產(chǎn)菌菌二、應(yīng)用轉(zhuǎn)化化法選育谷氨氨酸生產(chǎn)菌三、應(yīng)用轉(zhuǎn)導(dǎo)導(dǎo)法選育谷氨氨酸生產(chǎn)菌四、應(yīng)用重組組DNA技術(shù)構(gòu)建谷氨氨酸工程菌五、應(yīng)用固定定化細(xì)胞技術(shù)術(shù)發(fā)酵生產(chǎn)谷谷氨酸第三章谷氨酸生產(chǎn)菌菌的特征、育育種及擴(kuò)大培培養(yǎng)第六節(jié)菌種的擴(kuò)大培培養(yǎng)和種子的的質(zhì)量要求斜面菌種一級(jí)種子培養(yǎng)養(yǎng)二級(jí)種子培養(yǎng)養(yǎng)發(fā)酵罐種子培養(yǎng)過程程第四章谷氨酸發(fā)酵控控制第一節(jié)發(fā)酵培養(yǎng)基一、碳源目前所發(fā)現(xiàn)的的谷氨酸產(chǎn)生生菌均不能利利用淀粉,只能利用葡萄萄糖、果糖、、蔗糖和麥芽芽糖等,有些菌種能夠夠利用醋酸、、乙醇、正烷烷烴等作碳源源。二、氮源無機(jī)氮源:(1)尿素(2)液氮(3)碳酸氫銨有機(jī)氮源:主要是蛋白質(zhì)質(zhì)、胨、氨基基酸等。谷氨氨酸發(fā)酵的有有機(jī)氮源常用用玉米漿、麩麩皮水解液、、豆餅水解液液和糖蜜等。。三、無機(jī)鹽(1)磷酸鹽(2)硫酸鎂(3)鉀鹽(4)微量元素四、生長(zhǎng)因子子(1)生物素(2)維生素B1第四章谷氨酸發(fā)酵控控制第二節(jié)溫度對(duì)谷氨酸酸發(fā)酵的影響響溫度對(duì)谷氨酸酸發(fā)酵的影響響是多方面的的。從酶反應(yīng)應(yīng)動(dòng)力學(xué)來看看,溫度升高,反應(yīng)速度加快快,產(chǎn)物生成速度度提前。酶是是蛋白質(zhì)，收收熱容易失活活，溫度愈高高失活愈快,菌體易衰老,影響發(fā)酵液的的性質(zhì)來間接接影響發(fā)酵,影響基質(zhì)和氧氧的溶解從而而影響發(fā)酵。。溫度影響細(xì)細(xì)胞中酶的活活性,而影響代謝途途徑方向。各種微生物在在一定條件下下,都有一個(gè)最適適的生長(zhǎng)溫度度范圍。谷氨氨酸產(chǎn)生菌的的最適生長(zhǎng)溫溫度為30～40℃,產(chǎn)生谷氨酸的的最適為35～37℃。若溫度過過高,菌體容易衰老老。生產(chǎn)上表表現(xiàn)為OD值增長(zhǎng)慢,pH值高,耗糖慢,發(fā)酵周期長(zhǎng),谷氨酸生成少少。應(yīng)及時(shí)降降溫,采用小通風(fēng),流加尿素以少少量多次;必要是時(shí)可補(bǔ)補(bǔ)加玉米漿,以促進(jìn)生長(zhǎng)。。適當(dāng)提高溫溫度可加快發(fā)發(fā)酵速率。第四章谷氨酸發(fā)酵控控制第三節(jié)pH值對(duì)谷氨酸發(fā)發(fā)酵的影響一、pH值對(duì)谷氨酸發(fā)發(fā)酵的影響二、發(fā)酵過程程pH值的變化及控控制第四章谷氨酸發(fā)酵控控制第四節(jié)供氧對(duì)谷氨酸酸發(fā)酵的影響響一、溶解氧與與谷氨酸的需需氧量二、供氧對(duì)谷谷氨酸發(fā)酵的的影響三、供氧與其其他發(fā)酵工藝藝條件的關(guān)系系四、氧對(duì)發(fā)酵酵影響的微生生物生理學(xué)考考察第四章谷氨酸發(fā)酵控控制第五節(jié)泡沫的消除一、泡沫對(duì)發(fā)發(fā)酵的影響二、泡沫的形形成和性質(zhì)三、發(fā)酵過程程泡沫形成的的規(guī)律四、泡沫的消消除第四章谷氨酸發(fā)酵控控制第六節(jié)發(fā)酵過程主要要變化及中間間代謝控制1.適應(yīng)期2.對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期3.轉(zhuǎn)化期4.產(chǎn)酸期谷氨酸的發(fā)酵酵過程曲線第四章谷氨酸發(fā)酵控控制第七節(jié)異常發(fā)酵現(xiàn)象象及其處理一、常見的異異常發(fā)酵現(xiàn)象象及其處理方方法序異常現(xiàn)象原因分析

處理方法

10時(shí)pH值高(1)初尿過多(2)尿素滅菌溫度過高、時(shí)間過長(zhǎng)停攪拌,小通風(fēng),待菌體生長(zhǎng),pH下降后再按正常發(fā)酵進(jìn)行

2發(fā)酵前期pH值過高(1)初尿過多(2)菌種被燒死(3)種子感染噬菌體(4)培養(yǎng)基缺乏或抑制菌體生長(zhǎng)

(1)按第1項(xiàng)方法處理(2)補(bǔ)種(3)按感染噬菌體處理(4)根據(jù)情況補(bǔ)料,補(bǔ)種(5)均先停攪拌、小通風(fēng)3菌體生長(zhǎng)緩慢或不長(zhǎng)

(1)感染噬菌體

(2)培養(yǎng)基貧乏(3)菌種老化

(4)前期風(fēng)量過大,或初尿過多抑制生長(zhǎng)(1)按感染噬菌體處理(2)補(bǔ)料,并停攪拌(3)換種、補(bǔ)種(4)停攪拌、小通風(fēng)4中后期耗糖慢、產(chǎn)酸低(1)菌種老化

(2)前期風(fēng)量過大后期無力

(3)種子或發(fā)酵前期溫度過高

(4)生物素不足(1)

略減風(fēng)量,如殘?zhí)歉呖裳a(bǔ)種,或并罐發(fā)酵(2)

略減風(fēng)量,如殘?zhí)歉呖裳a(bǔ)種,或并罐發(fā)酵(3)

略減風(fēng)量,如殘?zhí)歉呖裳a(bǔ)種,或并罐發(fā)酵(4)

補(bǔ)料

514h后OD值繼上升

(1)生物素過量(2)染菌

(1)提高風(fēng)量,提高溫度(2)按染菌處理第七節(jié)異常發(fā)酵現(xiàn)象象及其處理6耗糖快,pH偏低,產(chǎn)酸低

(1)

培養(yǎng)基豐富,生物素過量

(2)

pH低,流尿不及時(shí)(3)

通風(fēng)不足,空氣短路,攪拌轉(zhuǎn)速低(4)

感染雜菌(1)提高風(fēng)量,提高pH(2)及時(shí)流尿,提高pH(3)提高風(fēng)量,提高pH(4)按染菌處理

7發(fā)酵液變紅色

生物素充足,風(fēng)量不足提高風(fēng)量8谷氨酸生成后又下跌(1)pH偏低,NH4+過量,谷氨酸轉(zhuǎn)變?yōu)楣弱０?2)大量下跌,可能染菌(1)及時(shí)流尿,提高pH(2)按染菌處理

9泡沫太多(1)水解糖質(zhì)量不好(2)染菌(1)改進(jìn)水解糖質(zhì)量(2)按染菌處理

第七節(jié)異常發(fā)酵現(xiàn)象象及其處理第四章谷氨酸發(fā)酵控控制第八節(jié)發(fā)展方向改進(jìn)發(fā)酵工藝藝1.一次高濃度糖糖發(fā)酵2.降低發(fā)酵初糖糖濃度,連續(xù)流加糖發(fā)發(fā)酵3.混合碳源發(fā)酵酵4.應(yīng)用電子計(jì)算算機(jī)控制和管管理發(fā)酵,使發(fā)酵工藝藝最佳化5.固定化活細(xì)細(xì)胞連續(xù)發(fā)發(fā)酵生產(chǎn)谷谷氨酸第五章噬菌體與雜雜菌的防治治第一節(jié)谷氨酸發(fā)酵酵中噬菌體體的污染與與防治噬菌體對(duì)谷谷氨酸發(fā)酵酵的危害,輕則減產(chǎn),重則會(huì)引起起發(fā)酵液全全部倒棄,造成嚴(yán)重塤塤失。谷氨酸生產(chǎn)產(chǎn)菌的噬菌菌體,一般在25-35℃、pH5-9時(shí)較為穩(wěn)定定,易受熱變性性（60-70℃,10-15min),對(duì)氧化物敏敏感,可被酸堿致致死。凡能引起蛋蛋白質(zhì)變性性的化學(xué)藥藥品都可以以使噬菌體體失活。第五章噬菌體與雜雜菌的防治治第二節(jié)噬菌體浸染染的異常現(xiàn)現(xiàn)象與嚴(yán)重重污染的早早期預(yù)報(bào)1.噬菌體浸染染的異?，F(xiàn)現(xiàn)象2.噬菌體嚴(yán)重重污染的早早期預(yù)報(bào)3.噬菌體污染染的檢查方方法第六章谷氨酸的提提取第一節(jié)概述將谷氨酸生生產(chǎn)菌在發(fā)發(fā)酵液中積積累的L-谷氨酸提取取出來,再進(jìn)一步中中和、除鐵鐵、脫色、、加工精制制成谷氨酸酸單鈉鹽叫叫提煉。谷氨酸是發(fā)發(fā)酵的目的的物,它溶解在發(fā)發(fā)酵液中,而在發(fā)酵液液中還存在在菌體、殘殘?zhí)?、色素素、膠體物物質(zhì)以及其其他發(fā)酵副副產(chǎn)物。提取工藝的的選擇原則則:工藝簡(jiǎn)單,操作方便,提取收率高高,產(chǎn)品純度高高,勞動(dòng)強(qiáng)度小小,設(shè)備簡(jiǎn)單,造價(jià)低,使用的原材材料、藥品品價(jià)廉,來源容易。。第六章谷氨酸的提提取主要提取方方法簡(jiǎn)介(1)等電點(diǎn)法(2)離子交換法法(3)等電-離交法(4)連續(xù)等電點(diǎn)點(diǎn)法(5)金屬鹽法(6)鹽酸水解-等電點(diǎn)法(7)離子交換膜膜電滲析法法提取谷氨氨酸第六章谷氨酸的提提取第二節(jié)谷氨酸發(fā)酵酵液的性質(zhì)質(zhì)和發(fā)酵廢廢液的綜合合利用一、谷氨酸酸發(fā)酵液的的主要性質(zhì)質(zhì)二、菌體分分離方法三、發(fā)酵液的綜綜合利用第六章谷氨酸的提提取第三節(jié)等等電點(diǎn)法提提取谷氨酸酸1、等電點(diǎn)法法提取谷氨氨酸的原理理(1)谷氨酸的兩兩性解離與與等電點(diǎn)I：谷氨酸的離離子狀態(tài)II：不同pH時(shí)谷氨酸的的電離情況況與離子形形式III：谷氨酸等等電點(diǎn)的性性質(zhì)(2)谷氨酸溶解解度I:pH值對(duì)谷氨酸酸溶解度的的影響II:溫度對(duì)谷氨氨酸溶解度度的影響III:雜質(zhì)對(duì)谷氨氨酸溶解度度的影響第六章谷氨酸的提提取等電點(diǎn)法提提取谷氨酸酸的原理等電點(diǎn)法是是谷氨酸提提取方法中中最簡(jiǎn)單的的一種方法法,由于設(shè)備簡(jiǎn)簡(jiǎn)單、操作作簡(jiǎn)便、投投資少等優(yōu)優(yōu)點(diǎn),谷氨酸發(fā)酵酵液不經(jīng)除除菌或除菌菌、不經(jīng)濃濃縮或濃縮縮處理、在在常溫或低低溫下加鹽鹽酸調(diào)至谷谷氨酸的等等電點(diǎn)pH3.22,使谷氨酸呈呈過飽和狀狀態(tài)結(jié)晶析析出。谷氨酸分子子中含有2個(gè)酸性的羧羧基和一個(gè)個(gè)堿性的氨氨基,在不同的pH值溶液中以以GA+、GA±、GA-、GA＝、表示。pH為3.22時(shí),大部分谷氨氨酸以[GA±]形式存在,此時(shí)谷氨酸酸的氨基和和羧基的離離解程度相相等,總靜電荷為為零。谷氨酸的等等電點(diǎn)習(xí)慣慣上常以pI代表?？傡o靜電荷等于于零,由于谷氨酸酸分子之間間的相互碰碰撞,并通過靜電電引力的作作用,會(huì)結(jié)合成較較大的聚合合題體而沉沉淀析出。。因而在等等電點(diǎn)時(shí),谷氨酸的溶溶解度最小小。谷氨酸的溶溶解度lgs=0.533I+0.01613tpH對(duì)谷氨酸溶溶解度的影影響谷氨酸的溶溶解度隨PH值的改變而而改變,pH3.22和在30%以上的高濃濃度鹽酸下下,溶解度便顯顯著減少到到最低點(diǎn)。。溫度對(duì)谷氨氨酸溶解度度的影響谷氨酸溶解解度受溫度度的影響較較大,溫度越低,溶解度越小小。第六章谷氨酸的提提取第三節(jié)等等電點(diǎn)法提提取谷氨酸酸二、谷氨酸酸的結(jié)晶（1）谷氨酸的的晶型及其其性質(zhì)（2）影響谷氨氨酸結(jié)晶的的主要因素素（3）β－型結(jié)結(jié)晶的形成成第六章谷氨酸的提提取第三節(jié)等等電點(diǎn)法提提取谷氨酸酸三、等電點(diǎn)點(diǎn)工藝的類類型（1）直接常溫溫等電點(diǎn)法法（2）帶菌體冷冷凍低溫一一次等電法法（3）除菌體常常溫等電點(diǎn)點(diǎn)法（4）濃縮、水水解等電點(diǎn)點(diǎn)法（5）低溫濃縮縮等電點(diǎn)法法（6）谷氨酸發(fā)發(fā)酵液連續(xù)續(xù)等電工藝藝第六章谷氨酸的提提取第四節(jié)等等電點(diǎn)－離離子交換法法提取谷氨氨酸一、工藝流流程發(fā)酵液加鹽酸（或或高流分母母液pH1.5)育晶2h(pH4-5)育晶2h(pH3.5-3.8)加鹽酸（或或高流分母母液pH1.5)育晶2h(pH3.0-3.2)加鹽酸（或或高流分母母液pH1.5)攪拌育晶20-16h沉淀4h細(xì)谷氨酸母液谷氨酸上離子交換換柱洗脫后流分高流分初流分第六章谷氨酸的提提取第五節(jié)廢液的處理理與環(huán)保高濃度廢水水（7波美）-----通液氨調(diào)節(jié)節(jié)pH至4.6----四效蒸發(fā)器器濃縮（26波美）-----噴漿造粒-----復(fù)合肥低濃度廢水水----厭氧處理----好氧處理-----排放第七章谷氨酸制味味精谷氨酸中和沉淀脫色過濾脫色過濾濃縮結(jié)晶離心分離小結(jié)晶母液結(jié)晶味精干燥拌鹽粉碎粉狀味精水(或渣水)碳酸鈉活性炭硫化堿谷氨酸回調(diào)調(diào)pH活性炭脫色色活性炭二次次脫色硫化堿晶種流加母液蒸餾水GH15顆?；钚蕴刻棵撋稍镞^篩粉狀味精活性炭硫化堿第一節(jié)谷氨酸制味味精的工藝藝流程第七章谷氨酸制味味精第二節(jié)味精的結(jié)晶晶操作結(jié)晶的過程程通常包括括晶核的形形成和晶體體的長(zhǎng)大兩兩個(gè)階段。。首先在溶溶液中產(chǎn)生生細(xì)小的晶晶核,隨后以這些些晶核為中中心,繼續(xù)在晶核核表面吸附附周圍溶質(zhì)質(zhì)分子,使晶粒不斷斷長(zhǎng)大。工業(yè)生產(chǎn)上上結(jié)晶有三三種不同起起晶方法:(1)自然起晶法法(2)刺激激起起晶晶法法(3)晶種種起起晶晶法法晶種種起起晶晶法法是是一一個(gè)個(gè)普普遍遍被被采采用用的的方方法法。。溶液液中中一一旦旦形形成成晶晶核核便便分分為為固固、、液液兩兩相相,固相相晶晶核核周周圍圍包包有有一一層層液液膜膜。。如如果果液液膜膜外外部部的的溶溶液液仍仍保保持持著著一一定定的的過過飽飽和和狀狀態(tài)態(tài),膜外外部部的的溶溶質(zhì)質(zhì)分分子子就就會(huì)會(huì)由由于于濃濃度度差差(c-c')的推推動(dòng)動(dòng),不斷斷地地往往膜膜內(nèi)內(nèi)擴(kuò)擴(kuò)散散,并被被晶晶核核表表面面吸吸附附。。一一層層一一層層地地排排列列,從而而使使晶晶體體逐逐漸漸長(zhǎng)長(zhǎng)大大,直到到溶溶液液的的濃濃度度下下降降到到飽飽和和濃濃度度時(shí)時(shí)為為止止。。第七七章章谷氨氨酸酸制制味味精精第三三節(jié)節(jié)味精精的的分分離離、、干干燥燥、、包裝裝和和成成品品質(zhì)質(zhì)量量標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)一、、味味精精的的分分離離味精精分分離離一一般般采采用用三三足足式式離離心心機(jī)機(jī)分分離離.為保保證證表表面面光光潔潔度度,在離離心心分分離離過過程程中中當(dāng)當(dāng)母母液液離離開開晶晶體體后后,用少少許許50℃熱熱水水噴噴淋淋晶晶體體。。二、、味味精精的的干干燥燥味精精結(jié)結(jié)晶晶含含有有一一個(gè)個(gè)結(jié)結(jié)晶晶水水,晶體體在在120℃就就開開始始失失去去結(jié)結(jié)晶晶水水,因此此干干燥燥溫溫度度應(yīng)應(yīng)嚴(yán)嚴(yán)格格控控制制,以不不超超過過80℃較較為為合合適適。。三、、結(jié)結(jié)晶晶味味精精的的篩篩分分干燥燥后后的的結(jié)結(jié)晶晶味味精精，，通通過過不不同同篩篩目目的的震震動(dòng)動(dòng)篩篩組組合合，，把把不不同同顆顆粒粒的的結(jié)結(jié)晶晶味味精精加加以以分分開開。。一一般般采采用用８８目目、、12目、、20目、、30目四四種種篩篩子子組組合合。。四、、粉粉狀狀味味精精的的混混鹽鹽和和磨磨粉粉１.混鹽鹽為了了調(diào)調(diào)整整味味精精的的含含量量規(guī)規(guī)格格，，通通常常在在味味精精中中添添加加一一定定量量的的精精制制食食鹽鹽。。２.磨粉粉干燥燥后后的的粉粉狀狀味味精精,與鹽鹽混混合合投投入入萬萬能能粉粉碎碎機(jī)機(jī)進(jìn)進(jìn)行行磨磨粉粉過過篩篩,篩目目為為100目。。將將粉粉碎碎后后的的味味精精加加入入ＶＶ型型拌拌粉粉機(jī)機(jī)或或雙雙螺螺旋旋拌拌粉粉機(jī)機(jī)均均勻勻混混合合，，包包裝裝出出廠廠。。1.切斷斷或或減減弱弱支支路路代代謝謝⑴選選育育減減弱弱αα-酮戊二酸酸進(jìn)一步步氧化能能力的突突變株從谷氨酸酸生物合合成的代代謝途徑徑可以看看出，減減弱α-酮戊二酸酸脫氫酶酶復(fù)合體體的活性性，可以以使代謝謝流向谷谷氨酸，，從而使使谷氨酸酸得到積積累。⑵選育減減弱HMP途徑后段段酶活性性的突變變株在谷氨酸酸生物合合成途徑徑中，從從葡萄糖糖到丙酮酮酸的反反應(yīng)是由由EMP途徑和HMP途徑組成成的。但但是，通通過HMP途徑也可可生成核核糖、核核苷酸、、莽草酸酸、芳香香族氨基基酸、輔輔酶Q、維生素素K、葉酸等等物質(zhì)。。這些物物質(zhì)的生生成消耗耗了葡萄萄糖，使使谷氨酸酸的產(chǎn)率率降低。。如果削削弱或切切斷這些些物質(zhì)的的合成途途徑，就就會(huì)使谷谷氨酸的的產(chǎn)率增增加。這這可通過過選育莽莽草酸缺缺陷型或或添加芳芳香族氨氨基酸能能促進(jìn)生生長(zhǎng)的突突變株以以及抗嘌嘌呤、嘧嘧啶類似似物或核核苷酸類類抗生素素，如德德夸菌素素、狹霉霉素C抗性突變變株來實(shí)實(shí)現(xiàn)。⑶選育不不分解利利用谷氨氨酸的突突變株為了積累累谷氨酸酸，就必必須使菌菌種不能能分解利利用谷氨氨酸，這這可通過過選育以以谷氨酸酸為唯一一碳源，，菌體不不長(zhǎng)或生生長(zhǎng)微弱弱的突變變株來實(shí)實(shí)現(xiàn)。⑷選育減減弱乙醛醛酸循環(huán)環(huán)的突變變株四碳二羧羧酸是由由CO2固定反應(yīng)應(yīng)和乙醛醛酸循環(huán)環(huán)所提供供的。減減弱乙醛醛酸循環(huán)環(huán)，CO2固定反應(yīng)應(yīng)所占的的比例就就會(huì)增大大，谷氨氨酸的產(chǎn)產(chǎn)率就高高。這可可通過選選育琥珀珀酸敏感感型突變變株、不不分解利利用乙酸酸突變株株、異檸檸檬酸裂裂解酶活活力降低低菌株來來實(shí)現(xiàn)。。⑸阻止谷谷氨酸進(jìn)進(jìn)一步代代謝由于細(xì)胞胞還可以以谷氨酸酸為前體體繼續(xù)向向下合成成谷氨酰酰胺等，，就必然然會(huì)導(dǎo)致致谷氨酸酸的積累累量減少少，為此此，要避避免谷氨氨酸被菌菌體利用用，還需需要切斷斷谷氨酸酸向下的的代謝途途徑。GOBACK2.解除菌體體自身的的反饋調(diào)調(diào)節(jié)⑴選育耐耐高滲透透壓突變變株要使菌種種能高產(chǎn)產(chǎn)谷氨酸酸,首先要使使菌種具具備在高高糖、高高谷氨酸酸的培養(yǎng)養(yǎng)基中仍仍能正常常生長(zhǎng)、、代謝的的能力，，即在高高滲培養(yǎng)養(yǎng)基中菌菌體的生生長(zhǎng)和谷谷氨酸的的合成不不受影響響或影響響很小。。這可通通過選育育耐高糖糖、耐高高谷氨酸酸及耐高高糖+高谷氨酸酸突變株株來實(shí)現(xiàn)現(xiàn)。⑵選育解解除谷氨氨酸對(duì)谷谷氨酸脫脫氫酶反反饋調(diào)節(jié)節(jié)的突變變株當(dāng)谷氨酸酸合成達(dá)達(dá)到一定定量時(shí)，，谷氨酸酸就會(huì)反反饋抑制制和阻遏遏谷氨酸酸脫氫酶酶，使谷谷氨酸的的合成停停止，使使代謝轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)向天冬冬氨酸的的合成。。若解除除了谷氨氨酸對(duì)谷谷氨酸脫脫氫酶的的反饋調(diào)調(diào)節(jié)，菌菌體就會(huì)會(huì)不斷的的合成谷谷氨酸。。這可通通過選育育酮基丙丙二酸抗抗性、谷谷氨酸結(jié)結(jié)構(gòu)類似似物抗性性（如谷谷氨酸氧氧肟酸鹽鹽）、谷谷氨酰胺胺抗性突突變株來來實(shí)現(xiàn)。。GOBACK3.增加前體體物的合合成⑴選育強(qiáng)強(qiáng)化三羧羧酸循環(huán)環(huán)中從檸檸檬酸到到α-酮戊二酸酸代謝的的突變株株這可通過過選育檸檸檬酸合合成酶活活力強(qiáng)突突變株及及抗氟乙乙酸、氟氟化鈉、、重氮絲絲氨酸、、氟檸檬檬酸等突突變株來來實(shí)現(xiàn)。。⑵選育強(qiáng)強(qiáng)化CO2固定反應(yīng)應(yīng)的突變變株這可通過過選育以以琥珀酸酸或蘋果果酸為唯唯一碳源源生長(zhǎng)良良好的突突變株、、氟丙酮酮酸敏感感突變株株以及丙丙酮酸或或天冬氨氨酸缺陷陷突變株株來實(shí)現(xiàn)現(xiàn)。GOBACK4.提高細(xì)細(xì)胞膜膜的滲滲透性性⑴選育育抗Vp類衍生生物突突變株株選育抗抗Vp類衍生生物，，如香香豆素素、盧盧丁等等突變變株，，都能能遺傳傳性的的改變變細(xì)胞胞膜的的滲透透性。。⑵選育育溶菌菌酶敏敏感突突變株株。⑶選育育二氨氨基庚庚二酸酸缺陷陷突變變株。⑷選育育溫度度敏感感突變變株谷氨酸酸溫度度敏感感突變變株的的突變變位置置是在在決定定與谷谷氨酸酸分泌泌有密密切關(guān)關(guān)系的的細(xì)胞胞膜結(jié)結(jié)構(gòu)基基因上上，發(fā)發(fā)生堿堿基的的轉(zhuǎn)換換或顛顛換，，一個(gè)個(gè)堿基基為另另一個(gè)個(gè)堿基基所置置換，，這樣樣為該該基因因所指指導(dǎo)的的酶，，在高高溫下下失活活，導(dǎo)導(dǎo)致細(xì)細(xì)胞膜膜某些些結(jié)構(gòu)構(gòu)的改改變。。當(dāng)控控制培培養(yǎng)溫溫度為為最適適生長(zhǎng)長(zhǎng)溫度度時(shí)，，菌體體正常常生長(zhǎng)長(zhǎng)；當(dāng)當(dāng)溫度度提高高到一一定程程度時(shí)時(shí)，菌菌體便便停止止生長(zhǎng)長(zhǎng)而大大量產(chǎn)產(chǎn)酸。。GOBACK5.強(qiáng)化能能量代代謝谷氨酸酸高產(chǎn)產(chǎn)菌的的兩個(gè)個(gè)顯著著特點(diǎn)點(diǎn)是:α-酮戊二二酸繼繼續(xù)向向下氧氧化的的能力力微弱弱和乙乙醛酸酸循環(huán)環(huán)微弱弱，使使能量量代謝謝受阻阻，TCA循環(huán)前前一階階段的的代謝謝減慢慢。強(qiáng)強(qiáng)化能能量代代謝可可彌補(bǔ)補(bǔ)上述述兩點(diǎn)點(diǎn)不足足，使使TCA循環(huán)前前一段段代謝謝加強(qiáng)強(qiáng)，谷谷氨酸酸合成成的速速度加加快。。⑴選育育呼吸吸鏈抑抑制劑劑抗性性突變變株如可選選育丙丙二酸酸、氧氧化丙丙二酸酸、氰氰化鉀鉀、氰氰化鈉鈉抗性性突變變株來來實(shí)現(xiàn)現(xiàn)。⑵選育育ADP磷酸化化抑制制劑抗抗性突突變株株如可選選育2,4-二硝基基酚、、羥胺胺、砷砷、胍胍等抗抗性突突變株株來實(shí)實(shí)現(xiàn)。。[3]選育抑抑制能能量代代謝的的抗生生素的的抗性性突變變株如可選選育纈纈氨霉霉素、、寡霉霉素等等抗性性突變變株來來實(shí)現(xiàn)現(xiàn)。GOBACK6.其它遺遺傳標(biāo)標(biāo)記據(jù)報(bào)道道，選選育異異亮氨氨酸缺缺陷、、蛋氨氨酸缺缺陷、、苯丙丙氨酸酸缺陷陷、AEC抗性、、AHV抗性、、棕櫚櫚酰谷谷氨酸酸敏感感等突突變株株，都都可不不同程程度的的提高高谷氨氨酸的的產(chǎn)酸酸率。。GOBACK⑴優(yōu)先先合成成谷氨酸酸比天天冬氨氨酸優(yōu)優(yōu)先合合成，，谷氨氨酸合合成過過量后后，抑抑制和和阻遏遏自身身的合合成途途徑，，使代代謝轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)向合合成天天冬氨氨酸。。⑵谷氨氨酸脫脫氫酶酶(GDH)的調(diào)節(jié)節(jié)谷氨酸酸對(duì)谷谷氨酸酸脫氫氫酶存存在著著反饋饋?zhàn)瓒舳艉头捶答佉忠种?。。⑶檸檬檬酸合合成酶酶的調(diào)調(diào)節(jié)檸檬酸酸合成成酶受受能荷荷調(diào)節(jié)節(jié)、谷谷氨酸酸的反反饋?zhàn)枳瓒艉秃晚槥鯙躅^酸酸的反反饋抑抑制。。⑷異檸檸檬酸酸脫氫氫酶的的調(diào)節(jié)節(jié)細(xì)胞內(nèi)內(nèi)α-酮戊二二酸的的量與與異檸檸檬酸酸的量量需維維持平平衡。。當(dāng)αα-酮戊二二酸過過量時(shí)時(shí),將對(duì)異異檸檬檬酸脫脫氫酶酶發(fā)生生反饋饋抑制制作用用,停止合合成αα-酮戊二二酸。。⑸α-酮戊二二酸脫脫氫酶酶在谷谷氨酸酸產(chǎn)生生菌中中先天天性的的喪失失或微微弱。。⑹磷酸酸烯醇醇式丙丙酮酸酸羧化化酶受受天冬冬氨酸酸的反反饋抑抑制，，受谷谷氨酸酸和天天冬氨氨酸的的反饋饋?zhàn)瓒舳?。GOBACK關(guān)于糖代代謝的調(diào)調(diào)節(jié)，主主要包括括：①能荷控控制：糖代謝謝的調(diào)節(jié)節(jié)主要受受能荷的的控制，，即受細(xì)細(xì)胞內(nèi)能能量水平平的控制制。當(dāng)生生物體內(nèi)內(nèi)生物合合成或其其他需能能反應(yīng)加加強(qiáng)時(shí)，，細(xì)胞內(nèi)內(nèi)ATP分解，生生成ADP和AMP，能荷降降低。低低能荷會(huì)會(huì)激活某某些催化化糖類分分解的酶酶或解除除ATP對(duì)這些酶酶的抑制制，并抑抑制糖原原合成的的酶(如糖原合合成酶、、果糖-1,6-二磷酸酯酯酶等)，從而加加速糖酵酵解，使使TCA循環(huán)產(chǎn)生生能量，，通過磷磷酸化作作用生成成ATP。當(dāng)細(xì)胞胞內(nèi)能荷荷高時(shí)，，ATP增加，抑抑制糖原原降解、、糖酵解解和TCA循環(huán)的關(guān)關(guān)鍵酶，，如糖原原磷酸化化酶、磷磷酸果糖糖激酶、、檸檬酸酸合成酶酶、異檸檸檬酸合合成酶，，并激活活糖類合合成所需需要的酶酶，如糖糖原合成成酶和果果糖-1，6-二磷酸酯酯酶，從從而抑制制糖的分分解，加加速糖原原的合成成。②生物素素的影響響：生物素素對(duì)糖代代謝的影影響，主主要是影影響糖降降解速度度，而不不是影響響EMP與HMP途徑的比比率。在在生物素素充足的的條件下下，丙酮酮酸以后后的氧化化活性雖雖然也得得到提高高，但由由于糖降降解速度度顯著提提高，打打破了糖糖降解速速度與丙丙酮酸氧氧化速度度之間的的平衡，，丙酮酸酸趨于生生成乳酸酸的反應(yīng)應(yīng)，因而而會(huì)引起起乳酸的的溢出。。生物素對(duì)對(duì)CO2固定反應(yīng)應(yīng)也有影影響。研研究表明明，生物物素是丙丙酮酸羧羧化酶的的輔酶，，參與CO2固定反應(yīng)應(yīng)。據(jù)有有關(guān)資料料報(bào)道,當(dāng)生物素素大過量量（100μg/L以上）時(shí)時(shí)，CO2固定反應(yīng)應(yīng)可提高高30%。乙醛酸循循環(huán)的關(guān)關(guān)鍵酶異異檸檬酸酸裂解酶酶受葡萄萄糖、琥琥珀酸的的阻遏，，為醋酸酸所誘導(dǎo)導(dǎo)。以葡葡萄糖為為原料發(fā)發(fā)酵生成成谷氨酸酸時(shí)，通通過控制制生物素素亞適量量，幾乎乎看不到到異檸檬檬酸裂解解酶的活活性。因因?yàn)楸嵫趸芰ο孪陆担状姿岬纳伤俾事蕼p慢，，所以為為醋酸所所誘導(dǎo)形形成的異異檸檬酸酸裂解酶酶就很少少。另外外，該酶酶受琥珀珀酸阻遏遏，生物物素亞適適量時(shí)因因琥珀酸酸氧化能能力降低低而積累累的琥珀珀酸就會(huì)會(huì)反饋抑抑制該酶酶的活性性，并阻阻遏該酶酶的合成成，乙醛醛酸循環(huán)環(huán)基本上上是封閉閉的，代代謝流向向異檸檬檬酸→αα-酮戊二酸酸→谷氨氨酸的方方向高效效率地移移動(dòng)。GOBACK關(guān)于氮代代謝的調(diào)調(diào)節(jié)，眾眾所周知知，控制制谷氨酸酸發(fā)酵的的關(guān)鍵之之一就是是降低蛋蛋白質(zhì)的的合成能能力，使使合成的的谷氨酸酸不能轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)化成其其他氨基基酸或參參與蛋白白質(zhì)合成成。在生生物素亞亞適量的的情況下下，幾乎乎沒有異異檸檬酸酸裂解酶酶，琥珀珀酸氧化化能力弱弱，蘋果果酸和草草酰乙酸酸脫羧反反應(yīng)停滯滯，在銨銨離子適適量存在在下，生生成積累累谷氨酸酸。生成成的谷氨氨酸也不不通過轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)氨作用用生成其其他氨基基酸和合合成蛋白白質(zhì)。在在生物素素充足的的條件下下，異檸檸檬酸裂裂解酶活活性增強(qiáng)強(qiáng)，琥珀珀酸氧化化能力增增強(qiáng)，丙丙酮酸氧氧化力加加強(qiáng)，乙乙醛酸循循環(huán)的比比例增加加，草酰酰乙酸、、蘋果酸酸脫羧反反應(yīng)增強(qiáng)強(qiáng)，蛋白白質(zhì)合成成增強(qiáng)，，谷氨酸酸減少，，合成的的谷氨酸酸通過轉(zhuǎn)轉(zhuǎn)氨作用用生成的的其他氨氨基酸量量增加。。GOBACK9、靜夜四四無鄰，，荒居舊舊業(yè)貧。。。12月-2212月-22Thursday,December29,202210、雨中黃葉葉樹，燈下下白頭人。。。12:17:1712:17:1712:1712/29/202212:17:17PM11、以我我獨(dú)沈沈久，，愧君君相見見頻。。。12月月-2212:17:1712:17Dec-2229-Dec-2212、故人江江海別，，幾度隔隔山川。。。12:17:1712:17:1712:17Thursday,December29,202213、乍乍見見翻翻疑疑夢(mèng)夢(mèng)，，相相悲悲各各問問年年。。。。12月月-2212月月-2212:17:1712:17:17December29,202214、他鄉(xiāng)生白白發(fā)，舊國(guó)國(guó)見青山。。。29十二二月202212:17:17下下午12:17:1712月-2215、比不了了得就不不比，