高三生物一輪復習課件 微生物的培養(yǎng)需要適宜條件

第35講

微生物的培養(yǎng)需要適宜條件

人們對所有形體微小、肉眼不可見的生物的統(tǒng)稱。包括：細菌、病毒、真菌以及一些小型的原生生物、顯微藻類等在內(nèi)的一大類生物群體。微生物：提供合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件確保其它微生物無法混入培養(yǎng)基無菌技術(shù)防止雜菌污染，獲得純凈的微生物培養(yǎng)物是研究和應用微生物的前提，也是發(fā)酵工程的重要基礎實驗室培養(yǎng)微生物，一方面要為人們需要的微生物提供合適的營養(yǎng)和環(huán)境條件，另一方面要確保其它微生物無法混入，并將需要的微生物分離出來。1微生物的培養(yǎng)需要適宜的條件2培養(yǎng)基人們?yōu)闈M足微生物生長繁殖以及積累代謝產(chǎn)物的需求而配置的混合養(yǎng)料——培養(yǎng)基，用以培養(yǎng)、分離、鑒定、保存微生物或積累其代謝物。2.1培養(yǎng)基的一般成分碳源：氮源：水：無機鹽：生長因子：（自養(yǎng)微生物）無機碳源——CO2

、CO32-、HCO3-等提供碳元素的物質(zhì)有機碳源——葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等（異養(yǎng)微生物）提供氮元素的物質(zhì)有機氮源——牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等無機氮源——NH4＋、NO3-、NH3等某些微生物自身缺陷，需要一些特殊成分，如維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等有機化合物。在主要營養(yǎng)物質(zhì)的基礎上，培養(yǎng)基還需要滿足微生物生長的條件有：對pH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及O2的需求。例如：“細菌喜葷、霉菌喜素”；培養(yǎng)乳酸桿菌需添加維生素；培養(yǎng)霉菌需調(diào)至酸性；培養(yǎng)細菌需調(diào)至中性或弱堿性；培養(yǎng)厭氧微生物需提供無氧環(huán)境。思考：

微生物培養(yǎng)基是否都需要人工添加碳源或氮源？培養(yǎng)基不一定都含有碳源、氮源，如培養(yǎng)自養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基中不需加入碳源，分離自生固氮菌的培養(yǎng)基中，不需加入氮源。2.2常見的細菌培養(yǎng)基

組分含量提供的主要營養(yǎng)牛肉膏5g碳源、氮源、磷酸鹽和維生素等蛋白胨10g氮源、碳源和維生素等NaCl5g無機鹽H2O定容至1000mL水1000mL牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成牛肉膏和蛋白胨來源于動物，含有糖、維生素和有機氮等營養(yǎng)物質(zhì)。牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基LB培養(yǎng)基，用酵母浸膏替代牛肉膏2.3培養(yǎng)基的分類

天然培養(yǎng)基：合成培養(yǎng)基：化學成分不十分清楚或成分不恒定的天然有機物制成的培養(yǎng)基；一般用于大規(guī)模的生物發(fā)酵工業(yè)化學成分完全清楚的培養(yǎng)基；一般用于實驗室進行的、要求可重復性強的各項研究按化學成分液體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基：不含凝固劑、呈液體狀態(tài)的培養(yǎng)基：含有凝固劑、呈固體狀態(tài)的培養(yǎng)基加入凝固劑（瓊脂）按物理性質(zhì)分選擇培養(yǎng)基：鑒別培養(yǎng)基：根據(jù)某種微生物的特殊營養(yǎng)要求配置加入能與目的菌的代謝產(chǎn)物發(fā)生顯色反應的指示劑按作用分2無菌技術(shù)獲得純凈微生物的關(guān)鍵是防止雜菌污染（無菌技術(shù)）無菌技術(shù)主要包括消毒和滅菌2.1

消毒是指使用較為溫和的物理、化學和生物等方法殺死物體表面或內(nèi)部一部分微生物對操作空間、操作者的衣著和手進行清潔和消毒常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒、化學藥物消毒、紫外線消毒等在微生物研究、醫(yī)療操作、食品生產(chǎn)中采取的防止其他微生物污染的技術(shù)，就是無菌技術(shù)。煮沸消毒（100℃，5～6min）常用巴氏消毒

62~65℃，30min或80~90℃，

30s~1min不破壞營養(yǎng)成分化學藥物消毒可擦拭的表面、液體紫外線消毒空間消毒消毒方法的選擇不能滅菌時才考慮消毒2.2

滅菌是指使用強烈的理化方法殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子對于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等進行滅菌滅菌方法有濕熱滅菌、干熱滅菌和灼燒滅菌等孢子是脫離親本后能直接或間接發(fā)育成新個體的生殖細胞。有時候可直接由營養(yǎng)細胞通過細胞壁加厚和積貯養(yǎng)料而形成，能抵抗不良環(huán)境條件。芽孢，又稱內(nèi)生孢子，是細菌休眠體。芽孢含水量極低，抗逆性強，能經(jīng)受高溫、紫外線，電離輻射以及多種化學物質(zhì)滅殺等。惡劣環(huán)境下，一個細菌產(chǎn)生一個芽孢，條件適宜時重新成為一個細菌。濕熱滅菌（高壓蒸汽滅菌）干熱滅菌灼燒滅菌水蒸氣為介，100kPa，121℃，15~20min；112℃，30min（葡萄糖）熱空氣為介質(zhì)，160~170℃，2~3h利用充分燃燒層灼燒滅菌方法的選擇最常用耐高溫，需要保持干燥接種用具如涂布器、接種環(huán)、接種針或其它金屬用具過濾除菌不耐高溫的物質(zhì)（如維生素、尿素、酶制品等）抽濾無菌技術(shù)小結(jié)常見物品的消毒或滅菌方法3配制可用于培養(yǎng)酵母菌的馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基3.1制備培養(yǎng)基3.2滅菌

將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中，加棉塞包上牛皮紙，并用皮筋勒緊壓力1kg/cm2、溫度為121℃的條件下，滅菌15~30min制作流程小結(jié)：稱量→溶解→調(diào)pH→分裝→加瓊脂→滅菌→制（倒）平板3.3倒平板待培養(yǎng)基冷卻至50℃左右，在酒精燈火焰附近倒平板拔出錐形瓶的棉塞將瓶口迅速通過火焰

用拇指和食指將培