藥物代謝動(dòng)力學(xué)進(jìn)展

摘要中藥藥物及復(fù)方代謝動(dòng)力學(xué)是在中醫(yī)理論指導(dǎo)下，利用動(dòng)力學(xué)原理與數(shù)學(xué)處理方法定量描述中藥活性成分在機(jī)體內(nèi)的吸收、分布、代謝及代謝過程(ADME)，是一門新興的介于數(shù)學(xué)與藥理學(xué)之間的邊緣學(xué)科。中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究不同于傳統(tǒng)的藥動(dòng)學(xué)的研究，由于復(fù)方中含有多味藥，多種化學(xué)成分,故對(duì)研究方法提出了更高的要求。本文綜述了近年來關(guān)于中藥及其復(fù)方復(fù)方藥物代謝動(dòng)力學(xué)的研究進(jìn)展,著重介紹了一些新的理論與方法,并對(duì)今后該領(lǐng)域的發(fā)展進(jìn)行了展望。關(guān)鍵詞：中藥；中藥復(fù)方；代謝動(dòng)力學(xué)AbstractMetabolicpharmacokineticsoftraditionalChinesemedicineisabrinksciencebetweenmathematicsandpharmacyunderChinesemedicinetheorywithdynamicstheoryandmathematicalmethodthatdepicttheprocessofeffectivecompositionbyabsorption,distribution,metabolismandeliminationinorganism.ThePharmacokineticsstudyoftraditionalchinesecompoundmedicineisverydifferentfromthenormalPharmacokineticsstudybecausethecompoundcontainsmanydrugsandchemicalcompositions,sotherequestofthestudymethodismorehigh.ThisarticlereviewedtherecentprogressinthepharmacokineticsoftraditionalChinesemedicineremedy,especiallytheinvolvementofquiteafewofnewtheoriesandmethods.Somefutureresearchdirectionswerealsosuggested.Keywords:TraditionalChinesemedicine;Compoundmedicine;Metabolicpharmacokinetics.目錄摘要 1Abstract 21研究概況 51.1國內(nèi)研究概況 51.2國外研究概況 62中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究的特點(diǎn) 62.1中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)整體觀思想 62.2中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)的科學(xué)性 62.3中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)的難點(diǎn)和熱點(diǎn)[5] 63多組分藥代動(dòng)力學(xué)研究中生物樣品的預(yù)處理 73.1液-液萃取 73.2固相萃取 73.3蛋白沉淀 74中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)研究的方法 84.1體內(nèi)藥物分析檢測(cè)法 84.2體外培養(yǎng)法 84.3藥物濃度法 84.4生物效應(yīng)法 94.4.1藥理效應(yīng)法 94.4.2藥物累積法 94.4.3微生物指標(biāo)法 105中藥復(fù)方藥物動(dòng)力學(xué)研究中的現(xiàn)代分析方法 105.1光譜法 105.1.1紫外分光光度法(UV) 105.1.2熒光分光光度法 105.2色譜法 105.2.1薄層色譜(TLC)法 105.2.2高效液相色譜(HPLC) 115.2.3氣相色譜(GC) 115.3高效毛細(xì)管電泳(GPCE) 115.4超臨界流體萃取技術(shù)(SFE)和超臨界流體色譜技術(shù)(SFC) 116中藥藥動(dòng)學(xué)研究的新理論 126.1血清藥理字與證治藥動(dòng)學(xué) 126.2中藥胃腸藥動(dòng)學(xué) 126.3PK-PD模型與特征圖譜藥動(dòng)學(xué) 126.4證治藥動(dòng)學(xué) 137研究的熱點(diǎn)與難點(diǎn) 137.1中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究的指導(dǎo)思想 137.2中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)檢側(cè)指標(biāo)的選擇 137.3中藥復(fù)方的配伍組方因素 147.4多峰現(xiàn)象多峰現(xiàn)象 148中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究的展望 148.1關(guān)于測(cè)定指標(biāo)的選擇 148.2關(guān)于動(dòng)物模型的選擇 158.3關(guān)于給藥方案的制定 158.4關(guān)于測(cè)定方法的建立及評(píng)價(jià) 158.5關(guān)于房室模型的確定及藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的計(jì)算 159總結(jié) 15參考文獻(xiàn) 17藥物動(dòng)力學(xué)是借助動(dòng)力學(xué)原理研究藥物在體內(nèi)吸收、分布、代謝、排泄等過程的速度規(guī)律的科學(xué)，并用數(shù)學(xué)方程定量地預(yù)測(cè)這些過程的性質(zhì)，其根本為研究體內(nèi)藥物的存在位置、濃度(數(shù)量)與時(shí)間之間的函數(shù)關(guān)系。中藥復(fù)方指在辨證審因決定治法之后，選擇合適的藥物，酌定用量，按照組成原則，妥善配伍而成的一組藥物[1]。中藥及復(fù)方藥動(dòng)學(xué)是借助于動(dòng)力學(xué)原理，研究中藥復(fù)方中的有效成分在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律及其體內(nèi)時(shí)量及時(shí)效關(guān)系，并用數(shù)學(xué)函數(shù)加以定量描述的一門學(xué)科。但由于中藥復(fù)方成分復(fù)雜，有效單體不明確，血藥濃度低，檢測(cè)方法欠缺，單體成分的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)難以完整地表達(dá)中藥復(fù)方藥物的體內(nèi)作用規(guī)律，中藥復(fù)方藥物藥動(dòng)學(xué)研究受到一定限制，但中醫(yī)藥理論提倡整體觀念，臨床用藥以復(fù)方為主，中藥復(fù)方藥物能體現(xiàn)中藥配伍的整體性，發(fā)揮綜合性作用，臨床療效好。進(jìn)行中藥及復(fù)方動(dòng)力學(xué)研究，對(duì)完善中醫(yī)的方藥理論，揭示中藥的配伍規(guī)律和作用機(jī)制，優(yōu)化制劑工藝，制定質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)，實(shí)現(xiàn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化并走向國際市場(chǎng)等方而均具重要意義，因而備受關(guān)注。通過對(duì)中藥及復(fù)方藥動(dòng)學(xué)已取得的研究進(jìn)展進(jìn)行回顧，才能更好地總結(jié)經(jīng)驗(yàn)并取得新的成果。1研究概況1.1國內(nèi)研究概況中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)的研究是在對(duì)中藥物質(zhì)基礎(chǔ)及單味藥藥動(dòng)學(xué)研究不斷深人的基礎(chǔ)上發(fā)展起來的。我國中藥藥動(dòng)學(xué)的研究始于1963年陳瓊?cè)A教授對(duì)中藥大黃的體內(nèi)過程的研究[2]。20世紀(jì)70年代末曾衍霖等先后發(fā)表了很有影響的藥動(dòng)學(xué)綜述報(bào)告,推動(dòng)了我國藥動(dòng)體內(nèi)過程研究向房室模型擬合及數(shù)學(xué)函數(shù)解析發(fā)展。20世紀(jì)80年代后才有了迅速的發(fā)展20世紀(jì)80年代赫梅生等提出毒理效應(yīng)法與藥理效應(yīng)法研究中藥藥動(dòng)學(xué)。隨著高靈敏度的現(xiàn)代分析儀器和測(cè)定方法的應(yīng)用，研究方法的創(chuàng)新使得中藥藥動(dòng)學(xué)得到迅速發(fā)展，房室模型擬合也廣泛應(yīng)用于藥一時(shí)數(shù)據(jù)的解析和參數(shù)計(jì)算，新理論、新學(xué)說及新觀點(diǎn)的提出更推動(dòng)了中藥藥動(dòng)學(xué)向更深更高水平發(fā)展。但是目前對(duì)中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究多數(shù)只限于一種化學(xué)成分藥動(dòng)學(xué)特征來代表全方的藥動(dòng)學(xué)特征。而事實(shí)上，各種成分之間的藥動(dòng)學(xué)的特征是不同的，它們之間可能存在相關(guān)性和差異性，某一成分的體內(nèi)過程可能受其他成分吸收、分布和排泄的影響。由于中藥復(fù)方其效應(yīng)物質(zhì)的多樣性和不確定性，體內(nèi)外效應(yīng)物質(zhì)的不一致性，藥效作用的多靶點(diǎn)與整體綜合性，配伍規(guī)律的復(fù)雜性，使得中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究仍然面臨很多困難。1.2國外研究概況在歐美等西方國家，中醫(yī)藥理論尚未被廣泛理解和接受，對(duì)中藥復(fù)方研究報(bào)道較少。20世紀(jì)60年代，Brodie在生物堿等天然藥物活性成分的藥動(dòng)學(xué)方面進(jìn)行了卓有成就的研究。日本從20世紀(jì)70年代開始許多學(xué)者對(duì)多種中藥活性成分的血藥濃度測(cè)定方法進(jìn)行了研究，建立了人參皂苷、芍藥苷及其主要活性代謝物、甘草甜素、甘草次酸等成分的放免測(cè)定及酶免疫測(cè)定等微量測(cè)定方法，從而促進(jìn)了中藥臨床藥動(dòng)學(xué)的發(fā)展[3]。1985年，日本學(xué)者寺澤捷年用HPLC研究了甘草芍藥湯喂飼大鼠后血中甘草次酸濃度發(fā)生的變化，提出了芍藥伍用甘草可以提高甘草次酸的血藥濃度[4]，從而證實(shí)了中醫(yī)“相須相使”理論的正確性。20世紀(jì)80年代田代真一等提出血清藥理學(xué)新概念，已被中藥學(xué)者廣泛接受和應(yīng)用。2中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究的特點(diǎn)中藥復(fù)方有其自身的特點(diǎn)，同一味藥往往處于不同處方環(huán)境中，因此同一味藥的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)會(huì)受很多因素影響，這是與西藥的顯著不同之處，也是中藥最大的特點(diǎn)。因此在臨床實(shí)驗(yàn)中中藥復(fù)方形成了獨(dú)特的理論體系，對(duì)其藥動(dòng)學(xué)研究應(yīng)有獨(dú)特的特點(diǎn)。2.1中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)整體觀思想中藥復(fù)方是一個(gè)巨大的復(fù)雜體系，其藥效是其中多種化學(xué)成分相互作用產(chǎn)生的綜合效果。中藥復(fù)方的“君臣佐使”的配伍理論和辨證論治的原則，正是中藥復(fù)方整體觀思想體現(xiàn)，是中醫(yī)用藥的精髓。因而整體觀是中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究的一大特點(diǎn)和應(yīng)遵循的指導(dǎo)思想，顯然單獨(dú)用一個(gè)指標(biāo)或幾個(gè)指標(biāo)成分來研究中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)是不能解決問題的。自20世紀(jì)80年代國內(nèi)采用毒理、藥理效應(yīng)法研究中藥藥動(dòng)學(xué)正是體現(xiàn)了這種整體觀。2.2中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)的科學(xué)性隨著分析技術(shù)的發(fā)展，人們逐漸意識(shí)到中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究應(yīng)在中醫(yī)藥的理論指導(dǎo)之下，借助現(xiàn)代分析技術(shù)對(duì)中藥復(fù)方體內(nèi)成分進(jìn)行分析研究，以科學(xué)地揭示中醫(yī)藥治療疾病的本質(zhì)，充分體現(xiàn)現(xiàn)中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)的科學(xué)性。2.3中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)的難點(diǎn)和熱點(diǎn)[5]中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)的難點(diǎn)也是其特點(diǎn)。許多中藥復(fù)方的藥效作用并不是已知的化學(xué)成分產(chǎn)生的，這些成分在體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)過程中發(fā)生了較大變化，很難在生物體內(nèi)測(cè)定到該成分的存在，并且每一成分量極微。這些客觀存在的問題構(gòu)成其藥效學(xué)和藥動(dòng)學(xué)研究的難點(diǎn)，即藥效物質(zhì)基礎(chǔ)不明，這些物質(zhì)在體內(nèi)發(fā)生了怎樣的變化，這些變化又與藥效有什么樣的關(guān)系。另外，中藥復(fù)方由于存在多成分、多靶點(diǎn)、多效應(yīng)的特殊性，中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)中的指標(biāo)選擇、配伍組方因素、多峰現(xiàn)象[6]等方而不同于單體化合物的藥動(dòng)學(xué)研究。中藥復(fù)方化學(xué)成分的復(fù)雜性和多樣性，中藥配伍的變異性和機(jī)體狀態(tài)的不可預(yù)測(cè)性，給中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究帶來許多問題，但是現(xiàn)代分析技術(shù)和儀器的發(fā)展為認(rèn)識(shí)中藥體內(nèi)過程提供了有力武器。3多組分藥代動(dòng)力學(xué)研究中生物樣品的預(yù)處理在多中藥復(fù)方藥代研究中，首先給藥的就是復(fù)雜成分的樣品，其中可能含有成百上千種的化合物，而且生物樣品中還含有大量的內(nèi)源性物質(zhì)能與藥物及其代謝物結(jié)合，這都會(huì)給生物介質(zhì)中多組分的測(cè)定帶來相當(dāng)大的困難，從而對(duì)樣品的前處理技術(shù)提出了更高的要求。3.1液-液萃取液-液萃取凈化法簡(jiǎn)單，使用的儀器、試劑便宜，一般實(shí)驗(yàn)室都能完成。Ye等[7]利用甲醇-乙酸乙酯-三氟乙酸萃取血漿樣品，萃取液氮?dú)獯蹈桑瑲堅(jiān)煤?.1%甲酸的20%甲醇溶液復(fù)溶，離心后取上層清液進(jìn)行液質(zhì)聯(lián)用分析。Zhang等[8]采用乙酸乙酯色醚)萃取血漿樣品后進(jìn)行LC/MS分析，綠原酸和肉桂酸的絕對(duì)回收率分別高于74.62%和76.21%。3.2固相萃取固相萃取發(fā)展于上世紀(jì)70年代，是一種比液-夜萃取效率更高的分離方法，更容易獲得高回收率，更徹底地去除生物樣品中的干擾雜質(zhì)，從而在很大程度上降低干擾成分對(duì)于待測(cè)組分檢測(cè)的干擾。洗脫僅需少量的有機(jī)溶劑，可高度富集被測(cè)物。Liang等[9]以固相萃取小柱進(jìn)行血漿樣品處理，以甲醇-水洗淋，收集甲醇-水)洗脫部分，揮干，殘?jiān)昧鲃?dòng)相復(fù)溶后進(jìn)行HPLC分析。楊赴云[10]以SEP-PAKC18、固相萃取柱處理血漿樣品，銀杏內(nèi)酯A和銀杏內(nèi)酯B的分離效果良好，血漿雜質(zhì)峰不干擾測(cè)定，專一性強(qiáng)，本方法的平均回收率大于92.8%。3.3蛋白沉淀蛋白沉淀(PPT)的機(jī)理是降低水的介電常數(shù)，導(dǎo)致具有表面水層的生物大分子脫水，相互聚集，最后析出。通常應(yīng)用最多的是有機(jī)溶劑，其選擇首先是能和水混溶，使用較多的蛋白沉淀劑有乙醇、甲醇、乙腈以及酸溶液等。居文政等[11]采用甲醇沉淀血漿蛋白，吸取上清液進(jìn)行超高效液相色譜UPLC分析。Quyang等[12]將血漿加入甲醇渦旋1min，12000r/min離心10min，直接取上層清液進(jìn)行高效液相色譜法分析。4中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)研究的方法4.1體內(nèi)藥物分析檢測(cè)法體內(nèi)藥物濃度法是藥動(dòng)學(xué)研究的經(jīng)典方法。其原理是利用藥物在血、尿或其它體液、組織中的濃度與其藥理效應(yīng)大體呈平行關(guān)系，測(cè)定給藥后體內(nèi)的血(尿)藥濃度，建立藥動(dòng)學(xué)模型，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，了解藥物在體內(nèi)的變化規(guī)律[13]。王雪峰等研究小柴胡湯(柴胡、黃芩、人參、半夏等)中黃芩苷在大鼠體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)參數(shù)，結(jié)果證實(shí)灌胃給藥后，黃芩苷在大鼠體內(nèi)的代謝符合二室模型，并發(fā)現(xiàn)黃芩苷在心、肝中含量較高。夏東亞[14]等用HPLC法測(cè)定心舒口服液中阿魏酸的血漿濃度，并對(duì)其在大鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)進(jìn)行了研究，結(jié)果表明，心舒口服液中阿魏酸在大鼠體內(nèi)的藥州同曲線符合二房室模型。該方法簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確、重現(xiàn)性好，適用于阿魏酸血藥濃度測(cè)定及藥動(dòng)學(xué)研究。4.2體外培養(yǎng)法體外研究方法主要有:器官灌流、亞細(xì)胞組分法、溫孵法、勻漿法和游離細(xì)胞法等。溫孵法在體外培養(yǎng)中應(yīng)用較多，用以研究藥物在體內(nèi)的代謝過程4.3藥物濃度法藥物濃度法是通過直接或間接測(cè)定體液中中藥一個(gè)或幾個(gè)成分的濃度，并使用相關(guān)軟件計(jì)算動(dòng)力學(xué)參數(shù)，擬合藥時(shí)曲線，確定藥動(dòng)學(xué)模型，反映中藥中成分的體內(nèi)行為與規(guī)律的研究方法。傳統(tǒng)的藥物濃度法是針對(duì)于有效成分明確的化藥，而在中藥藥代動(dòng)力學(xué)研究中，其應(yīng)用主要受限于中藥復(fù)雜組分的不明確性，難以對(duì)未知成分的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究[15-18]。近年來，隨著質(zhì)譜檢測(cè)技術(shù)及高效分離技術(shù)的迅速發(fā)展，藥物濃度法的適用范圍與檢測(cè)能力得到了極大的拓展，中藥藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及藥理作用網(wǎng)絡(luò)的研究不斷深入，研究者已經(jīng)可以對(duì)中藥制劑中的大量有效成分的體內(nèi)濃度進(jìn)行快速同時(shí)檢測(cè)，藥物濃度法已經(jīng)成為中藥藥代動(dòng)力學(xué)研究中應(yīng)用最為廣泛的研究方法[19]。Xie等在2008年銀杏內(nèi)酯注射液的藥代動(dòng)力學(xué)研究中使用高效液相一串聯(lián)質(zhì)譜大氣壓離子源多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式和液液萃取技術(shù)對(duì)大鼠血漿中銀杏內(nèi)酯A,B,C和白果內(nèi)酯含量進(jìn)行了同時(shí)檢測(cè)，第一次對(duì)銀杏內(nèi)酯注射液中銀杏內(nèi)酯C的藥代動(dòng)力學(xué)性質(zhì)進(jìn)行研究[20]。Liu等在2011年對(duì)人參皂普Re的代謝物進(jìn)行了藥代動(dòng)力學(xué)研究，使用高效液相一串聯(lián)質(zhì)譜點(diǎn)噴霧多反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式和固相萃取技術(shù)對(duì)人血漿和尿液中人參皂普Re,Rgl,Rg2,Rh2和原人參三醇的濃度進(jìn)行了同時(shí)檢測(cè)，分析方法僅耗時(shí)10min，最低定量限均低于20ng/mL，在尿液和血漿樣品中均可以檢測(cè)出人參皂普Re,Rgl,Rh1和原人參三醇，并發(fā)現(xiàn)尿液樣品在人參皂普Re代謝產(chǎn)物研究中可以提供更多的信息，為人參皂普Re的臨床研究和藥代動(dòng)力學(xué)研究提供了參考[21]。4.4生物效應(yīng)法藥效的變化取決于體內(nèi)藥量的變化，可以通過測(cè)定藥效的經(jīng)時(shí)過程來反映體內(nèi)藥量動(dòng)態(tài)變化。生物效應(yīng)法從整體觀點(diǎn)出發(fā)研究中藥的藥代動(dòng)力學(xué)特征，更符合中醫(yī)藥理論。該法包括藥理效應(yīng)法、藥物累計(jì)法、微生物指標(biāo)法。4.4.1藥理效應(yīng)法藥理效應(yīng)法是一種以藥理效應(yīng)為指標(biāo)研究藥代動(dòng)力學(xué)的方法。該法己越來越廣泛地用于中藥及其復(fù)方，特別是有效成分不明的中草藥及其復(fù)方的藥代動(dòng)力學(xué)研究。肇麗梅[22]采用小鼠熱板致痛模型，以鎮(zhèn)痛效應(yīng)為指標(biāo)，測(cè)定黃芩苷及清熱合劑的藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)，結(jié)果黃芩苷及清熱合劑口服給藥后體存藥量的表觀動(dòng)力學(xué)過程符合一室開放模型，中藥復(fù)方清熱合劑的達(dá)峰時(shí)間明顯慢于單方黃芩苷。李成洪等[23]以血清一氧化氮變化為藥理效應(yīng)指標(biāo)，研究了中藥復(fù)方制劑禽病康在免疫抑制雛雞體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)特征。以時(shí)間刁本存量進(jìn)行數(shù)學(xué)模型擬合，符合一級(jí)吸收二室模型，禽病康藥代動(dòng)力學(xué)結(jié)果表明其口服后吸收較快，分布也快，而消除較慢，體內(nèi)存留時(shí)間長(zhǎng)，藥效維持時(shí)間長(zhǎng)。宋麗等[24]使用藥理效應(yīng)法通過測(cè)定痛閾值平均值與痛閾值提升率比較了口服花椒與青椒鎮(zhèn)痛藥效的差異。杜婷等[25]使用血壓值為藥理效應(yīng)指標(biāo)，對(duì)參附注射液的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)進(jìn)行了研究。4.4.2藥物累積法藥物累積法亦稱急性死亡率法或LD50。補(bǔ)量法是將藥代動(dòng)力學(xué)多點(diǎn)測(cè)定的原理與動(dòng)物急性死亡率測(cè)定藥物蓄積性方法相結(jié)合，在首次用藥后不同時(shí)間點(diǎn)對(duì)多組動(dòng)物按相同劑量重復(fù)給藥，求出不同時(shí)間點(diǎn)的體存百分率的動(dòng)態(tài)變化，以此計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。藥物累積法，以小鼠急性死亡率為指標(biāo)，測(cè)小鼠灌胃給藥后不同時(shí)間的藥物體存量，估算表觀藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)，由藥動(dòng)學(xué)參數(shù)可知熱痹清片灌胃給藥后易于吸收，分布快，消除較慢。有人用寇氏法進(jìn)行中藥復(fù)方提取液的急性毒性試驗(yàn)，計(jì)算藥物動(dòng)力學(xué)參數(shù)。研究表明該復(fù)方提取液在螂魚體內(nèi)代謝較快，藥物的生物利用度高，藥物與血漿蛋白結(jié)合率低，主要分布在組織中。4.4.3微生物指標(biāo)法微生物法主要針對(duì)一些具有抗菌活性的中藥。藥物在含試驗(yàn)菌株的瓊脂平板中形成抑菌環(huán)，在一定的濃度內(nèi)，抑菌環(huán)的直徑與藥物的濃度成線性關(guān)系。微生物法簡(jiǎn)單易行，測(cè)定的藥代動(dòng)力學(xué)指標(biāo)直接反應(yīng)藥效。以抑菌效應(yīng)為指標(biāo)進(jìn)行川芎揮發(fā)油藥動(dòng)學(xué)參數(shù)測(cè)定，川芎揮發(fā)油的藥動(dòng)學(xué)過程符合一室開放模型。5中藥復(fù)方藥物動(dòng)力學(xué)研究中的現(xiàn)代分析方法5.1光譜法5.1.1紫外分光光度法(UV)紫外分光光度法儀器簡(jiǎn)單，操作方便，但靈敏度低。吳堅(jiān)東[26]等用板藍(lán)根注射液對(duì)健康家兔進(jìn)行耳緣靜脈注射，在給藥后不同時(shí)間用分光光度法測(cè)定兔血漿靛藍(lán)的濃度，結(jié)果表明:板藍(lán)根注射體內(nèi)動(dòng)力學(xué)模型為一室模型。由于靈敏度低，檢測(cè)限高，專一性差，因此該法在體內(nèi)藥物濃度的檢測(cè)上的應(yīng)用越來越少。5.1.2熒光分光光度法熒光法的靈敏度很高，現(xiàn)在發(fā)展起來的膠束熒光法靈敏度更高、選擇性更強(qiáng)，適用于測(cè)定微量和痕量熒光物質(zhì)，它是利用表面活性物質(zhì)在水溶液中能聚集形成膠束的特點(diǎn)，達(dá)到增溶、增敏，提高檢測(cè)靈敏度的目的，使最低檢測(cè)限達(dá)到2.5×10-11g/mL。如龐志功[27]等采用膠束熒光法使延胡索乙素的熒光強(qiáng)度增大5.5倍，結(jié)果表明,延胡索乙素在兔血漿中的處置過程符合二房室模型，其達(dá)峰時(shí)間為2h，最大峰濃度為1.83ug/mL.5.2色譜法5.2.1薄層色譜(TLC)法TLC法為色譜法的經(jīng)典技術(shù)，是中藥及其制劑早期檢測(cè)血藥濃度的常用方法。該法具有操作方便、速度快、應(yīng)用范圍廣的特點(diǎn)，但其靈敏度低、重現(xiàn)性差，結(jié)果不能令人滿意。近年來出現(xiàn)的高效薄層色譜法(HPTLC)由于減小了測(cè)定誤差，使薄層色譜的分離達(dá)到或接近了高效液相色譜水平，而被廣泛地應(yīng)用于生物樣品的分析中。5.2.2高效液相色譜(HPLC)HPLC法不受藥物的熱不穩(wěn)定性和揮發(fā)性限制，具有樣品適用范圍廣、預(yù)處理簡(jiǎn)單等優(yōu)點(diǎn)，為快速、靈敏、專一的體內(nèi)藥物分析方法。川芎煎湯劑中阿魏酸、穿心蓮膠囊中的穿心蓮內(nèi)酯、復(fù)方丹參丸中的丹參素、雙黃連粉針中的黃芩苷、四君子湯中的甘草甜素等檢測(cè)都采用了HPLC法。5.2.3氣相色譜(GC)氣相色譜是最先興起的具有分離和分析兩種功能的測(cè)定技術(shù)，與光譜法相比，無論在靈敏度方面，還是在選擇性方面都具有顯著優(yōu)點(diǎn)，只要選擇適當(dāng)?shù)膶游鰲l件，母體藥物、代謝物及其它結(jié)構(gòu)相似的藥物都能得到很好分離，因而同HPLC一樣，GC也常作為體內(nèi)藥物濃度的測(cè)定方法之一。但GC法有一個(gè)主要的缺點(diǎn)就是要求樣品可以氣化，從而限制了氣相色譜的廣泛應(yīng)用。5.3高效毛細(xì)管電泳(GPCE)高效毛細(xì)管電泳是近十幾年來發(fā)展起來的一種新的分離技術(shù)，它是電泳技術(shù)和層析技術(shù)結(jié)合的產(chǎn)物，兼有高壓電泳的高速、高分辨率及HPLC的高效率等優(yōu)點(diǎn)，其選擇性與高效液相色譜層析有很大的互補(bǔ)性。而且高效毛細(xì)管電泳由于電滲流的作用，不能分離的物質(zhì)可隨緩沖溶液流出，不會(huì)對(duì)毛細(xì)管柱構(gòu)成污染，這一特點(diǎn)非常適合于中藥的成分分析。5.4超臨界流體萃取技術(shù)(SFE)和超臨界流體色譜技術(shù)(SFC)SFE集萃取分離于一體，具有低溫萃取，溶質(zhì)與溶劑易于分離，可選擇性地萃取非揮發(fā)性組分，無環(huán)境污染等優(yōu)點(diǎn)。在中藥成分研究中有重要價(jià)值。某些物質(zhì)用氣相色譜和液相色譜法無法分析時(shí)，可采用超臨界流體色譜分析法。SFC分為開管柱和填充柱。前者采用氣相色譜型檢測(cè)器，適用于揮發(fā)性低，熱不穩(wěn)定物質(zhì)的分離，缺點(diǎn)是柱的負(fù)荷能力低。后者使用液相色譜型檢測(cè)器，負(fù)荷能力強(qiáng)，分析時(shí)間短，缺點(diǎn)是易發(fā)生柱壓過高，有拖尾現(xiàn)象[28]。Bhoir[29]等用該法測(cè)定人血中卡馬西平的血藥濃度，結(jié)果良好。6中藥藥動(dòng)學(xué)研究的新理論6.1血清藥理字與證治藥動(dòng)學(xué)中藥血清藥理字是指給動(dòng)物灌胃給藥，一定時(shí)間后采集、分離其血清，并用此含藥血清進(jìn)行藥效學(xué)實(shí)驗(yàn)。中藥血清藥理學(xué)是近幾年發(fā)展起來的一種研究中藥的新方法。它是用含藥血清代替中藥進(jìn)行藥理研究的體外試驗(yàn)方法,是中藥藥理和藥動(dòng)學(xué)研究的新思路。這種方法已用在中藥藥動(dòng)學(xué)研究中,有人用血清藥理學(xué)方法研究了中藥苦參、仙鶴草的抗腫瘤作用。結(jié)果苦參煎劑及含苦參血清均有明顯的抗腫瘤活性,且后者對(duì)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率還高于前者;而仙鶴草卻相反,其含藥血清無效。汪云等[30]采用血清藥理學(xué)方法探討了冠心蘇合膠囊對(duì)過氧化氫(H2O2)致心肌細(xì)胞過氧化損傷的保護(hù)作用，結(jié)果表明冠心蘇合膠囊能夠提高H2O2誘導(dǎo)的原代乳鼠心肌細(xì)胞存活率，對(duì)氧化損傷的心肌細(xì)胞起保護(hù)作用。6.2中藥胃腸藥動(dòng)學(xué)1998年楊奎等提出“中藥胃腸藥動(dòng)學(xué)”新概念，并定義為研究中藥復(fù)方制劑有效成分的溶出、吸收的因素，揭示各有效成分之間協(xié)同或領(lǐng)頑的規(guī)律，闡明有效成分在胃腸內(nèi)藥動(dòng)學(xué)變化的學(xué)科，稱之為中藥胃腸藥動(dòng)學(xué)。它必將影響到復(fù)方中各種成分在體內(nèi)的全過程。通過對(duì)藥物腸內(nèi)菌代謝的研究，有助于發(fā)現(xiàn)天然前體藥物，揭示中藥復(fù)方的真正作用成分，推動(dòng)藥物動(dòng)力學(xué)的研究。如高曉山等研究了十二指腸以上消化道對(duì)中藥的吸收能力，發(fā)現(xiàn)大鼠結(jié)扎食道下端后，經(jīng)灌注大黃煎液，最快的5min后尿液中即可檢出蒽醌。如用中藥血清藥理學(xué)與中藥胃腸藥動(dòng)學(xué)相結(jié)合的思路和方法研究人參皂普的腸內(nèi)菌代謝及其產(chǎn)物吸收。李興平等[31]探討了脫水穿心蓮內(nèi)醋、穿心蓮內(nèi)酯于鼠胃腸的吸收情況，結(jié)果表明脫水穿心蓮內(nèi)酯吸收較穿心蓮內(nèi)酯為差，其分散體吸收較好。6.3PK-PD模型與特征圖譜藥動(dòng)學(xué)由于藥物在體內(nèi)的吸收、分布和代謝等過程的影響,使得藥物劑量與藥物效應(yīng)的相關(guān)性比較低,直接調(diào)整藥物劑量往往不能及時(shí)有效地控制藥物的效應(yīng)。但是,藥物的濃度和藥物效應(yīng)相關(guān)性良好,建立藥物劑量與血藥濃度對(duì)時(shí)間變化關(guān)系(藥動(dòng)學(xué),PK),通過解析藥代動(dòng)力學(xué)微分方程,可以設(shè)計(jì)出比較精確地控制藥物效應(yīng)的給藥方案。PK-PD模型還可用于研究時(shí)間、濃度和效應(yīng)三相的藥物動(dòng)力學(xué)特征，目前PK-PD模型主要有對(duì)數(shù)線性模型、s型最大效應(yīng)模型、Sheiner效應(yīng)模型、Paaizow效應(yīng)模型、多重受體反應(yīng)理論等幾種。其研究的基本步驟為：第一，藥動(dòng)學(xué)研究，用以查明藥物體內(nèi)過程的動(dòng)態(tài)變化規(guī)律；第二，判明藥效作用產(chǎn)生的部位和方式；第三，了解藥效隔室中藥量(濃度)與效應(yīng)之間的定量轉(zhuǎn)換關(guān)系，求出定量轉(zhuǎn)換公式第四，將轉(zhuǎn)換公式與原藥動(dòng)學(xué)模型的藥效室聯(lián)系起來，構(gòu)成統(tǒng)一的PK-PD模型，并求算藥動(dòng)學(xué)和藥效學(xué)參數(shù)，進(jìn)行血藥濃度與藥效間定量關(guān)系的預(yù)測(cè)。關(guān)于中藥PK-PD模型的研究有不少論文報(bào)道，如師少軍等[32]用Sheiner效應(yīng)模型，綜合分析了蝙蝠葛蘇林堿血藥濃度、時(shí)間、效應(yīng)三者之間的關(guān)系。PK-PD模型將藥物濃度、效應(yīng)和時(shí)間結(jié)合起來,更加準(zhǔn)確地評(píng)價(jià)藥物在體內(nèi)的動(dòng)力學(xué)過程和產(chǎn)生藥理效應(yīng)的動(dòng)態(tài)變化,正逐漸成為藥動(dòng)學(xué)研究的熱點(diǎn)方法。6.4證治藥動(dòng)學(xué)1994年，黃熙[33]提出了“證治藥動(dòng)力”假說，證治藥動(dòng)學(xué)包括辨證藥動(dòng)學(xué)和復(fù)方藥動(dòng)學(xué)。復(fù)方藥動(dòng)學(xué)后改名為復(fù)方效應(yīng)動(dòng)力學(xué)辨證藥動(dòng)學(xué)是指同一藥物的不同證的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)處理有顯著差別，這種差別明顯影響藥物療效和毒副作用。經(jīng)用辨證施治后，這種差異可消失和減輕。在中醫(yī)臨床診治中，“證”的判定占有重要的地位，但目前還未能對(duì)“證”確立科學(xué)客觀的判斷標(biāo)準(zhǔn)體系。有人認(rèn)為，復(fù)方是藥物依據(jù)君臣佐使原則組合，其組方原則和劑量的改變可以影響到復(fù)方藥動(dòng)學(xué)的參數(shù)，并與臨床療效和毒性密切相關(guān)，可用以驗(yàn)證和診釋某些中醫(yī)基礎(chǔ)理論。劉瑩瑩等[34]探討了四君子湯對(duì)脾虛模型大鼠頭飽羚氨節(jié)藥動(dòng)學(xué)的影響，其研究結(jié)果為證明該假說提供了依據(jù)。7研究的熱點(diǎn)與難點(diǎn)7.1中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究的指導(dǎo)思想整體觀是中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究的關(guān)鍵和應(yīng)遵循的指導(dǎo)思想。整體觀念是中醫(yī)臨床的經(jīng)驗(yàn)總結(jié)，單味中藥或復(fù)方即可視為有機(jī)整體，故研究方法也必須體現(xiàn)復(fù)方”整體性”特點(diǎn)，復(fù)方與機(jī)體之間的作用可理解為系統(tǒng)與系統(tǒng)相互作用的復(fù)雜體系，可借鑒系統(tǒng)生物學(xué)的研究思路和方法。復(fù)方的研究必須堅(jiān)持中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)，離開了中醫(yī)藥整體觀，單純追求西藥化，將使中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)研究的路子越走越窄。7.2中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)檢側(cè)指標(biāo)的選擇單味中藥即可視為一個(gè)小復(fù)方，若單味中藥組成的復(fù)方就可視為一個(gè)復(fù)雜的系統(tǒng)，成分眾多，不同種類的成分可能對(duì)應(yīng)不同的藥理效應(yīng)，且成分之間存在復(fù)雜的交互作用。因此，選擇何種成分或藥理效應(yīng)為指標(biāo)才能代表整方就顯得尤為關(guān)鍵。在復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究中指標(biāo)的選擇應(yīng)包含:①藥效相關(guān)成分及其代謝產(chǎn)物可視為可行的監(jiān)測(cè)指標(biāo)，但并非最佳選擇。即使測(cè)得了一個(gè)或多個(gè)成分的藥動(dòng)學(xué)，但是其代表性尚值得商榷；②所選擇的指標(biāo)盡量與藥效密切相關(guān)，使其測(cè)定的各種表觀藥動(dòng)學(xué)參數(shù)與復(fù)方功能主治及臨床用藥目的一致；③要能體現(xiàn)中藥復(fù)方組分在數(shù)量及其之間相互比例的動(dòng)態(tài)變化。中藥復(fù)方的研究必須強(qiáng)調(diào)結(jié)合量效關(guān)系，藥量的改變不僅會(huì)引起配伍關(guān)系的改變，甚至主治及功能也發(fā)生變化，而最佳配比的劑量能夠使其藥理、藥效作用最為顯著。7.3中藥復(fù)方的配伍組方因素中藥復(fù)方配伍從本質(zhì)上講就是中藥間的相互作用，復(fù)方君臣佐使、七情(如相須、相使、相畏、相殺等)配伍在某種程度上可理解為協(xié)同、拮抗、加和、敏化的通俗語言。7.4多峰現(xiàn)象多峰現(xiàn)象即血藥濃度一時(shí)間曲線圖上出現(xiàn)兩個(gè)或多個(gè)血藥濃度峰。單體藥物多峰現(xiàn)象的出現(xiàn)可能存在以下幾個(gè)原因:①腸肝循環(huán)，即藥物被攝取后，可能以代謝物或以原形分泌人膽汁，而后經(jīng)膽總管進(jìn)人腸道，經(jīng)腸道細(xì)菌水解，其中一部分被腸重吸收，另一部分則被消除，而重吸收的部分借門靜脈血流再次人肝，如此形成腸肝循環(huán)。如果重吸收的藥量足夠大，導(dǎo)致血藥濃度可多次升高，便形成多峰；②多部位吸收，即可能存在不同吸收速率的幾個(gè)腸段，或者胃、腸吸收速率不同所致；③其他再循環(huán)過程:胃腸循環(huán)，腸腸循環(huán)等。8中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究的展望8.1關(guān)于測(cè)定指標(biāo)的選擇中藥復(fù)方動(dòng)力學(xué)的研究多數(shù)是以1-2種有效成分的藥動(dòng)學(xué)特征代表全方的藥動(dòng)學(xué)特征。中藥復(fù)方中存在著多種有效成分，僅以某一成分的藥動(dòng)學(xué)特征代表整個(gè)復(fù)方的藥動(dòng)學(xué)特征顯然是不全而的。多組分藥動(dòng)學(xué)參數(shù)對(duì)臨床用藥更具有實(shí)際意義。隨著今后檢測(cè)技術(shù)和條件的不斷提高，中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)研究的基本出發(fā)點(diǎn)應(yīng)立足于對(duì)復(fù)方中多種有效成分的研究。這將能更全而的反映中藥復(fù)方的藥動(dòng)學(xué)特征，指導(dǎo)臨床合理用藥[35]。8.2關(guān)于動(dòng)物模型的選擇采用復(fù)方有效成分體內(nèi)藥物濃度法進(jìn)行藥動(dòng)學(xué)研究的復(fù)方，多數(shù)實(shí)驗(yàn)選擇了健康的人、兔、大鼠作為研究對(duì)象。實(shí)踐證明中醫(yī)證型可以明顯改變藥物在體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。在今后的研究中不僅要考察復(fù)方在健康動(dòng)物體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)特征，也要對(duì)造模后的動(dòng)物進(jìn)行研究。把復(fù)方有效成分藥動(dòng)學(xué)的研究與中醫(yī)“證”的研究結(jié)合起來，探討兩者之間的內(nèi)在聯(lián)系，同時(shí)進(jìn)一步探討以血藥濃度為指標(biāo)的藥動(dòng)學(xué)與以生物效應(yīng)為指標(biāo)的藥動(dòng)學(xué)的相關(guān)性，開展更深層次的中藥藥動(dòng)學(xué)尾與效學(xué)(PK-PD)模型的研究，對(duì)于全而地反映中藥復(fù)方藥動(dòng)學(xué)特征具有重要的意義。8.3關(guān)于給藥方案的制定藥動(dòng)學(xué)實(shí)驗(yàn)的給藥劑量由于受檢測(cè)靈敏度的限制，最小劑量不宜太低，可設(shè)定低劑量為臨床等效劑量。血藥濃度并不能與給藥劑量呈等倍數(shù)的提高，同時(shí)，中藥復(fù)方體內(nèi)給藥劑量常較大，給藥劑量可以提高的倍數(shù)受到藥物濃度和體積的限制。中藥復(fù)方臨床最常用的給藥方式為口服給藥，在藥動(dòng)學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中可采用灌胃法。中藥復(fù)方多采用水煎劑或制成其他劑型給藥?？谇爸兴帍?fù)方藥動(dòng)學(xué)研究多是考察單次給藥后體內(nèi)藥動(dòng)學(xué)特征。而中藥復(fù)方臨床治療通常是連續(xù)給藥超過數(shù)天、數(shù)周，甚至數(shù)月。單次給藥和連續(xù)給藥的藥物動(dòng)力學(xué)會(huì)有一定差別。8.4關(guān)于測(cè)定方法的建立及評(píng)價(jià)在進(jìn)行中藥藥動(dòng)學(xué)研究之前，建立一個(gè)滿意的體內(nèi)藥物濃度測(cè)定方法至關(guān)重要。首先對(duì)復(fù)方及生物樣品中有效成分進(jìn)行初步定性，然后對(duì)方法進(jìn)行專屬性和可靠性考察。8.5關(guān)于房室模型的確定及藥動(dòng)學(xué)參數(shù)的計(jì)算在藥動(dòng)學(xué)研究中，可應(yīng)用有關(guān)藥動(dòng)學(xué)計(jì)算公式對(duì)實(shí)驗(yàn)測(cè)得的血藥濃度-時(shí)間數(shù)據(jù)進(jìn)行處理，計(jì)算藥動(dòng)學(xué)參數(shù)。9總結(jié)中藥是中華民族燦爛文明的瑰寶。但長(zhǎng)期以來，中藥多憑經(jīng)驗(yàn)用藥，缺少臨床指導(dǎo)，從而為其應(yīng)用帶來困難。越來越多的中藥單體化合物得到分離，僅用單體化合物進(jìn)行藥代動(dòng)力學(xué)研究只能映單體成分本身的藥代動(dòng)力學(xué)特點(diǎn)，中藥單方和復(fù)方制劑中單組分的藥代動(dòng)力學(xué)研究不能全面反映中藥整體的藥代動(dòng)力學(xué)特征，只有多組分的藥代動(dòng)力學(xué)研究才能體現(xiàn)中藥的整體性。當(dāng)前隨著分析技術(shù)的發(fā)展，新理論的產(chǎn)生，使在復(fù)雜的生物樣品中測(cè)定多種成分成為可能，可以更好的體現(xiàn)中藥整體的吸收、分布、代謝、排泄的體內(nèi)過程，為闡明中藥的作用機(jī)制、優(yōu)化臨床給藥方案以及中藥新藥的開發(fā)研究奠定基礎(chǔ)。隨著現(xiàn)代分析技術(shù)的發(fā)展,在中醫(yī)藥理論的指導(dǎo)下,通過中藥化學(xué)、藥理學(xué)、計(jì)算機(jī)科學(xué)等多學(xué)科的共同努力,對(duì)中藥及其復(fù)方藥動(dòng)學(xué)進(jìn)行系統(tǒng)研究,建立符合中藥特色的藥動(dòng)學(xué)研究模式,以促進(jìn)中藥現(xiàn)代化進(jìn)程,提高中藥的國際市場(chǎng)競(jìng)爭(zhēng)力。隨著各相關(guān)學(xué)科領(lǐng)域科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，將會(huì)有更多新思路、新方法、新技術(shù)為其研究服務(wù)，建立合理的復(fù)方藥動(dòng)學(xué)分析方法，以促進(jìn)中藥現(xiàn)代化進(jìn)程。我國應(yīng)在世界各地廣泛宣傳中醫(yī)藥傳統(tǒng)文化，讓世界接受中醫(yī)藥，并加強(qiáng)對(duì)中藥復(fù)方特別是那些經(jīng)驗(yàn)方的研究和復(fù)方專利保護(hù)，以及擴(kuò)大中藥復(fù)方制劑的研究和臨床運(yùn)用，推動(dòng)中藥復(fù)方走向世界。參考文獻(xiàn)[1]李偉東，蔡寶昌.中藥復(fù)方研究思路的探討[J].中藥新藥與臨床藥理，2004．15(3)：216-218．[2]陳瓊?cè)A，高士美，杜學(xué)芳，等.中藥大黃的綜合研究大黃蒽醌衍生物在體內(nèi)的吸收、排泄和分布[J].藥學(xué)學(xué)報(bào)，1963，10(9)；525．[3]HeJX,AkaoT,TaniT.Influenceofco-administeredantibioticsonthepharmacokineticfateinratsofpaeoniflorinanditsactivemetabolitepaeonimetabolin-IfromShaoyao-Gancao-tang[J].JPharmPharmacol,2003,55(3);313.[4]寺澤捷年.甘草次酸體內(nèi)代謝研究：大鼠體內(nèi)代謝[J].國外醫(yī)學(xué).中醫(yī)藥分冊(cè)，1987，9(2)；31．[5]劉昌孝．中藥的藥代動(dòng)力學(xué)研究在中藥現(xiàn)代化中而臨的任務(wù)[J].天津中醫(yī)藥，2003，20(6)：1-5．[6]羅佳波，中藥復(fù)方藥代動(dòng)力學(xué)研究的特殊性[J]．2004，26（8）：665-666．[7]YeJX,WeiW,QuanLll,etal.AnLC-MS/MSmethodforthesimultaneousdeterminationofchlorogenicacid,forsythiasideAandbaicalininratplasmaanditsapplicationtopharmacokineticstudyofshuangAruang-lianinrats[J].JPharmBiomedArray2010,52(4):625-630[8]Zhang,J,ChenM,,JuW,etal.Liquidchromatograph/tandemmassspectrometryassayforthesimultaneousdeterminationofchlorogenicacidandcinnamicacidinplasmaanditsapplicationtoapharma-cokineticstudy[J].JPharmBiomedAnal,2010,51(3):685-690[9]LungY,LiuA,QinS,etal.SimultaneousdeterminationandpharmacokineticsoffivebufadienolidesinratplasmaafteroraladministrationofChansuextractbySPE-HPLCmethod［J］．JPharmBiomedAnal,2008,46（3):442-448[10]楊赴云，工景田，金有豫．銀杏內(nèi)酯A，B在家兔體內(nèi)的藥代動(dòng)力學(xué)研究［J］中國藥學(xué)雜志，2000．35(8)：541．[11]居文政，劉芳，吳婷，等UPLC/MS/MS法同時(shí)測(cè)定人血漿中黃芩苷和綠原酸[J]．藥學(xué)學(xué)報(bào)，2007，42(10)：1074-1077．[12]OuyangLQ,WuHL,Nie,JF,etal.SimultaneousdeterminationofpsoralenandisopsoraleninplasmaanChinesemedicineXianLingGuBaocapsulebyusingHPLC-DADcoupledwithalternatingtrilineardecompositionalgorithm[J].AnalChimActa,2009,650(2):160-166.[13]夏東亞，郭濤，潘文瀕，等．HPLC法測(cè)定心舒口服液中阿魏酸血漿濃度及其在人鼠體內(nèi)的藥動(dòng)學(xué)研究[J]．中草藥，2004．35(1