抗腫瘤的生物技術(shù)藥物課件

抗腫瘤的生物技術(shù)藥物抗腫瘤的生物技術(shù)藥物1（優(yōu)選）抗腫瘤的生物技術(shù)藥物（優(yōu)選）抗腫瘤的生物技術(shù)藥物2至2008年底，F(xiàn)DA共批準99種生物技術(shù)藥物上市2007年29/110種生物技術(shù)藥物的銷售額超過10億美元2007年銷售額超過40億美元的藥物有16種，基因工程藥物占據(jù)7種：1.治療非霍奇金淋巴瘤的anti-CD20抗體Rituxan2.治療乳腺癌的anti-EGFRII抗體Herceptin3.治療腫瘤放化療后出現(xiàn)的白細胞減少的G-CSF4.治療肺癌、乳腺癌和結(jié)直腸癌的anti-VEGF抗體Avastin5.治療類風濕關(guān)節(jié)炎的anti-TNFα抗體Enbrel、Remicade單克隆抗體藥物至2008年底，F(xiàn)DA共批準99種生物技術(shù)藥物上市單克隆抗3美羅華聯(lián)合Galiximab治療初治FL的臨床試驗也在進行。1987年以后單抗的體內(nèi)診斷和治療制劑被列入863計劃CDR-grafted在V區(qū)中，某些特定位置的氨基酸殘基的組成和排列順序高度可變，稱為HVR，或互補決定區(qū)（CDR）。擴大了篩選容量，易于獲得高親和力抗體。EpratuzumabI/II期臨床試驗結(jié)果Zenapax

Organrejectionprophylaxis目前單克隆抗體均是鼠源性抗體，應(yīng)用于人體內(nèi)可產(chǎn)生人抗鼠抗體（humanantimouseantibody,HAMA)治療類風濕關(guān)節(jié)炎的anti-TNFα抗體Enbrel、Remicade可單藥使用,不良反應(yīng)輕，耐受性好,可在門診治療Fab段：抗原結(jié)合片段受刺激后促進癌細胞的增殖20～30％的癌細胞。商品名：美羅華故目前多傾向于根據(jù)細胞形態(tài)結(jié)合免疫功能分類：Herceptin

MetastaticbreastcancerTypeProductMarketerApprovedChimericRituxanNon-Hodgkin'slymphoma

Genentech

November1997

ChimericSimulectOrganrejectionprophylaxis

NovartisMay1998ChimericRemicadeRheumatoidarthritis,Crohn'sdiseaseohnson&JohnsonAugust1998CDR-graftedZenapax

OrganrejectionprophylaxisRocheDecember1997CDR-graftedSynagis

RespiratorysyncytialvirusMedimmuneJune1998CDR-graftedHerceptin

MetastaticbreastcancerGenentechSeptember1998CDR-graftedMylotarg

AcutemyeloidleukemiaAmericanHomeProductsMay2000MonoclonalAntibodiesontheMarket美羅華聯(lián)合Galiximab治療初治FL的臨床試驗也在進行。4TypeProductMarketerApprovedMurine

RadiolabeledZevalin

Non-Hodgkin'sLymphomaIDECPharmaceuticalsandScheringAGMarch2002PhageDisplayHumira

RheumatoidarthritisAbbottLaboratoriesDecember2002CDR-graftedXolair

ModeratetoseverepersistentasthmaGenentechandNovartisJune2003Murine

RadiolabeledBexxar

CD20positive,follicular,Non-Hodgkin'sLymphomaCorixaandGlaxoSmithKlineJune2003CDR-graftedRaptiva

Chronicmoderate-to-severepsoriasisGenentechandXomaOctober2003ChimericErbitux

ColorectalcancerImcloneandBristol-MyersSquibbFebruary2004CDR-grafted

Avastin（Bevacizumab）colonandrectumcancer

GenentechFebruary2004TypeProductMarketerApprovedMur51979-1980國內(nèi)個別單位開始單抗的研制1984年以前基本是技術(shù)方法的建立和完善1985年以后單抗為基礎(chǔ)的診斷試劑用于研究和臨床

1987年以后單抗的體內(nèi)診斷和治療制劑被列入863計劃1992年我國第一個單抗衍生物被SDA批準進入臨床2005年第四軍醫(yī)大學研制的治療肝癌新藥——碘131

美妥昔單抗注射液，這是全球第一個專門用于治療原發(fā)性肝癌的單抗導向同位素藥物.

單克隆抗體技術(shù)在我國的發(fā)展.1979-1980國內(nèi)個別單位開始單抗的研制單6由分化成熟的終末B細胞--漿細胞合成、分泌的一類能與相應(yīng)抗原（antigen，Ag）特異性結(jié)合的具有免疫功能的糖蛋白。什么是抗體（Antibody，Ab）？Ag1234B抗體，Ab一個

B細胞只能生產(chǎn)一種抗體，對付某一抗原決定基。由分化成熟的終末B細胞--漿細胞合成、分泌的一類能October2003(90-95%人源)Intracellular受刺激后促進癌細胞的增殖20～30％的癌細胞。其他針對B,T細胞的單抗到達靶組織的藥量僅有1％受刺激后促進癌細胞的增殖20～30％的癌細胞。2005年第四軍醫(yī)大學研制的治療肝癌新藥——碘131美羅華聯(lián)合Galiximab治療初治FL的臨床試驗也在進行。美妥昔單抗注射液，這是全球第一個專門用于目前單克隆抗體均是鼠源性抗體，應(yīng)用于人體內(nèi)可產(chǎn)生人抗鼠抗體（humanantimouseantibody,HAMA)曲妥珠單抗輔助治療可以選擇的方案人類表皮生長因子受體-2療效顯著，中位緩解時間長嵌合性CD30單抗SGN-30及人源化CD30單抗MDX-60治療耐藥性HD、ALCL和其他CD30+淋巴瘤的I/II期臨床試驗正在進行中B1B2B3B4

多克隆抗體Ag2341B4B4B4

單克隆抗體October2003B1B2B3B4多克隆抗體Ag8抗腫瘤的生物技術(shù)藥物課件9在V區(qū)中，某些特定位置的氨基酸殘基的組成和排列順序高度可變，稱為HVR，或互補決定區(qū)（CDR）。VL區(qū)和VH區(qū)各存在個3CDRFR1~4為骨架區(qū)，穩(wěn)定HVR的結(jié)構(gòu)。Fab段：抗原結(jié)合片段Fc段：可結(jié)晶段FabFc在V區(qū)中，某些特定位置的氨基酸殘基的組成和排列順序高度可變，10抗腫瘤的生物技術(shù)藥物課件11抗體的發(fā)展過程單克隆抗體基因工程抗體多克隆抗血清抗體庫抗體的發(fā)展過程單克隆抗體基因工程抗體多克隆抗血清抗體庫12傳統(tǒng)抗血清抗原免疫所有抗體混合123412341234多克隆抗體傳統(tǒng)抗血清抗原免疫所有抗體混合123412341234多13單克隆抗體1975年建立了單克隆抗體技術(shù)（淋巴細胞雜交瘤技術(shù)）。1984年獲得諾貝爾醫(yī)學和生理學獎。單克隆抗體1975年建立了單克隆抗體技術(shù)（淋巴細胞雜交瘤技術(shù)14B淋巴細胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤細胞培養(yǎng)骨髓瘤細胞融合B淋巴細胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤細胞培養(yǎng)骨髓瘤細胞融合15B淋巴細胞骨髓瘤細胞雜交瘤BBB瘤瘤瘤HAT選擇培養(yǎng)液（黃嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶）選擇培養(yǎng)骨髓瘤細胞因缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶而死亡B淋巴細胞骨髓瘤細胞雜交瘤BB16檢測到所需的X抗體分離單個細胞進行克隆化培養(yǎng)檢測到所需的X抗體檢測到所需的X抗體分離單個細胞進行克隆化培養(yǎng)檢測到所需的X抗17注入小鼠腹腔擴大培養(yǎng)體外培養(yǎng)大量單克隆抗體注入小鼠腹腔擴大培養(yǎng)體外培養(yǎng)大量單克隆抗體182005年第四軍醫(yī)大學研制的治療肝癌新藥——碘131美妥昔單抗注射液，這是全球第一個專門用于Fab段：抗原結(jié)合片段Zenapax

Organrejectionprophylaxis2=-mRNA轉(zhuǎn)錄單克隆抗體藥物：Bevacizumab美妥昔單抗注射液，這是全球第一個專門用于嵌合性CD30單抗SGN-30及人源化CD30單抗MDX-60治療耐藥性HD、ALCL和其他CD30+淋巴瘤的I/II期臨床試驗正在進行中CD40在惡性T和B淋巴細胞中表達，CD40被認為與細胞的增殖及分化相關(guān)。RituxanNon-Hodgkin'slymphoma嵌合性CD30單抗SGN-30及人源化CD30單抗MDX-60治療耐藥性HD、ALCL和其他CD30+淋巴瘤的I/II期臨床試驗正在進行中SGN-40是一種人源化IgG1型抗CD40抗體，臨床前研究表明其對淋巴瘤細胞具有明顯的殺傷效應(yīng)。癌細胞表面存在著Her-2蛋白，CDR-graftedSeptember19982005年第四軍醫(yī)大學研制的治療肝癌新藥19鼠單抗人單抗大鼠小鼠產(chǎn)量高、操作比小鼠麻煩少用易操作、多用HAMA反應(yīng)人人雜交瘤人B細胞、骨髓瘤細胞融合人鼠雜交瘤人B細胞、鼠骨髓瘤細胞融合細胞雜交瘤技術(shù)鼠單抗人單抗大鼠小鼠產(chǎn)量高、操作比小鼠麻煩少用易操作、多用20單克隆抗體的不足：目前單克隆抗體均是鼠源性抗體，應(yīng)用于人體內(nèi)可產(chǎn)生人抗鼠抗體（humanantimouseantibody,HAMA)人體的排斥反應(yīng)人體內(nèi)半衰期只有5-6小時到達靶組織的藥量僅有1％21單克隆抗體的不足：21基因工程抗體鼠單抗100%鼠源鼠/人嵌合單抗(66-75%人源)人源化單抗(90-95%人源)100%人源為了降低免疫原性，降低相對分子量，增加穿透力，開發(fā)了新的基因工程抗體。恒定區(qū)人源化可變區(qū)人源化基因工程抗體鼠單抗鼠/人嵌合單抗人源化單抗100%人源為22Pr鼠VH人CHPr鼠VL人CL免疫球蛋白基因載體的構(gòu)建H鏈嵌合載體L鏈嵌合載體共轉(zhuǎn)染細胞啟動子人-鼠嵌合抗體基因工程改造策略Pr鼠VH人CH23鼠VH鼠VL人CL人CH抗體分泌細胞鼠VH鼠VL人CL人CH抗體分泌細胞24CDR序列CDR序列鼠單克隆抗體人抗體人源化抗體CDR移植CDR序列CDR序列鼠單克隆抗體人抗體人源化抗體CDR25小分子抗體小分子抗體26小分子抗體的優(yōu)點：分子質(zhì)量小，免疫原性低。易于進入實體瘤周圍的微循環(huán)。無Fc片段，不易與具有Fc受體的非靶細胞結(jié)合，用于免疫診斷時成像清晰。構(gòu)建較簡單，易于操作和改造?？稍诩毦斜磉_，易于大量生產(chǎn)。小分子抗體的缺點：與抗原結(jié)合活性相對較弱。半衰期短。小分子抗體的優(yōu)點：27抗體庫抗體庫技術(shù)：用基因克隆技術(shù)克隆全套抗體的重鏈和輕鏈的可變區(qū)基因，然后重組到特定的表達載體中，轉(zhuǎn)化特定的宿主細胞表達有功能的抗體分子，并通過親和篩選獲得特異性抗體可變區(qū)基因的技術(shù)。利用抗體庫技術(shù)篩選到的抗體可變區(qū)基因可被用于構(gòu)建基因工程抗體?？贵w庫抗體庫技術(shù)：28噬菌體抗體庫噬菌體抗體庫29抗體庫的優(yōu)點：越過了細胞融合的步驟，省時省力。擴大了篩選容量，易于獲得高親和力抗體。不需進行人工體內(nèi)免疫?？贵w庫的優(yōu)點：30單克隆抗體藥物：Trastuzumab商品名：赫賽汀英文名：Herceptin通用名：注射用曲妥珠單抗

(Trastuzumab)針對HER2的特異性單克隆抗體，用于治療HER2過度表達的轉(zhuǎn)移性乳腺癌

重組DNA衍生的人源化單克隆抗體可單藥使用,不良反應(yīng)輕，耐受性好,可在門診治療療效顯著，中位緩解時間長單克隆抗體藥物：Trastuzumab商品名31HER2人類表皮生長因子受體-2

HumanEpidermalgrowthFactorReceptor-2

分子量185kDa的糖蛋白:細胞外區(qū)（配體結(jié)合區(qū)）跨膜區(qū)（傳導信號）細胞內(nèi)區(qū)（激酶活性）HER2細胞內(nèi)細胞外細胞膜HER2HER2細胞內(nèi)細胞外細胞膜32Cellmembrane基因轉(zhuǎn)錄提高細胞運動抑制凋亡細胞生長和增殖轉(zhuǎn)移化療耐藥腫瘤生長EGFEGFREGFRTGFTGFEGFRHER2HER2HER3NRGNRGHER2HER4HER2HER2信號級聯(lián)放大核膜IntracellularCellmembrane基因轉(zhuǎn)錄提高細胞運動抑制凋亡細胞生331=-

基因拷貝數(shù)2=-

mRNA

轉(zhuǎn)錄3=-

細胞表面受體蛋白表達4=-

細胞外受體功能域釋放A=HER2DNAB=HER2信使RNAC=HER2受體蛋白細胞核細胞質(zhì)細胞膜1234CBAHER2陽性：過度表達/擴增HER2正常表達細胞(HER2–)(~2萬個受體）HER2過表達的細胞(HER2+)(100–200萬個受體）1=-基因拷貝數(shù)A=HER2DNA細胞核細胞質(zhì)細34正常HER2表達HER2基因擴增導致HER2過表達HER2過表達導致腫瘤增殖促進細胞的生長和增殖------腫瘤發(fā)生抑制細胞的凋亡誘導血管新生提高細胞運動能力,增強腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移作用正常HER2表達HER2基因擴增導致HER2過表達HER35HER2在癌癥中過表達：30％以上的人類腫瘤中存在HER2基因的擴增/過度表達（如乳腺癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、輸卵管癌、胃癌和前列腺癌等。20％－30％的原發(fā)性浸潤性乳腺癌有HER2基因的擴增/過度表達。Herceptin即為一種針對HER2受體的人源化單克隆抗體，是乳腺癌治療領(lǐng)域的第一個分子靶向性藥物，具有高效、低毒、選擇性強的特點。2010年，歐洲和美國先后批準化療聯(lián)合使用曲妥珠單抗治療HER2陽性胃及胃食管交界癌患者。HER2在癌癥中過表達：36刺激刺激HER2タンパクがん細胞増殖刺激刺激HER2タンパク癌細胞増殖抑制Heceptin作用Heceptin癌細胞表面存在著Her-2蛋白，受刺激后促進癌細胞的增殖20～30％的癌細胞。Heceptin與Her-2結(jié)合阻斷和抑制細胞的增殖，用于

轉(zhuǎn)移性乳腺癌病人的治療。刺激刺激HER2がん細胞増殖刺激刺激HER2癌細胞増殖抑制37HER2檢測流程免疫組織化學原位雜交HER2檢測流程免疫組織化學原位雜交38440mg 凍干粉針劑20ml 無菌注射用水赫賽汀?用法用量所需溶液的體積=體重（Kg）劑量（4mg/Kg負荷量或2mg/Kg維持量）

21（mg/ml，配置好溶液的濃度）每周方案三周方案用法用量首劑

4mg/kg，90分鐘內(nèi)靜脈滴注，觀察2小時維持劑量

2mg/kg，每周一次，30分鐘靜脈滴注首劑

8mg/kg，90分鐘內(nèi)靜脈滴注，觀察2小時維持劑量

6mg/kg，每三周一次，30分鐘靜脈滴注療程建議轉(zhuǎn)移性乳腺癌至少6個月輔助治療一年440mg 凍干粉針劑赫賽汀?用法用量所需溶液的體積=

曲妥珠單抗輔助治療可以選擇的方案曲妥珠單抗輔助治療可以選擇的方案40單克隆抗體藥物：Rituximab商品名：美羅華英文名：Mabthera通用名：利妥昔單抗(Rituximab)針對CD20的特異性單克隆抗體，通過基因重組技術(shù)生產(chǎn)的一種嵌合鼠/人的單克隆抗體,用于治療非霍奇淋巴瘤。單克隆抗體藥物：Rituximab商品名：41非霍奇淋巴瘤（non-hodgkin’s

lymphoma，NHL）瘤細胞成分單一，大多起源于B淋巴細胞，部分來自T淋巴細胞，只有少數(shù)來自組織細胞。故目前多傾向于根據(jù)細胞形態(tài)結(jié)合免疫功能分類：B細胞淋巴瘤（臨床多見）T細胞淋巴瘤CD20抗原在從前B細胞到活化B細胞的各個階段都表達,但在正常造血干細胞、分化成熟的漿細胞及其他類型造血細胞系卻未見表達，且CD20在超過90%的B細胞性NHL中均有表達。因此CD20成為腫瘤治療的一個較好的靶點。

非霍奇淋巴瘤（non-hodgkin’42

Rituximab：通過ADCC，CDC促凋亡與化療藥物協(xié)同作用Rituximab：通過ADCC，CDC促凋亡與化療43淋巴瘤治療單克隆抗體Rituxi-CD20CD20淋巴瘤治療單克隆抗體Rituxi-CD20CD2044Epratuzumab：人源性IgG1抗CD22單抗60%－80％的B-NHL細胞表達CD22濾泡性淋巴瘤、套細胞淋巴瘤和邊緣區(qū)B細胞性淋巴瘤高表達CD22Anti-CD22與CD22結(jié)合后迅速內(nèi)在化抗CD22單抗其他針對B,T細胞的單抗Epratuzumab：人源性IgG1抗CD22單抗抗CD245

復發(fā)濾泡性淋巴瘤劑量組總有效率（CR＋PR）中位TTP360mg/m243％23.7月480mg/m227％彌漫大B細胞淋巴瘤240mg/m233％8.1月360mg/m215％480mg/m220％EpratuzumabI/II期臨床試驗結(jié)果復發(fā)濾泡性淋巴瘤劑量組總有效率（CR＋PR）中位TTP3Imcloneand治療類風濕關(guān)節(jié)炎的anti-TNFα抗體Enbrel、RemicadeHerceptin

MetastaticbreastcancerRemicadeRheumatoidarthritis,Crohn'sdisease8mg/kg，90分鐘內(nèi)靜脈滴注，觀察2小時單克隆抗體藥物：Trastuzumab2005年第四軍醫(yī)大學研制的治療肝癌新藥——碘131Galiximab是一種人-靈長類嵌合型抗CD80抗體，臨床研究表明在復發(fā)FL中具有較好的安全性和有效性。故目前多傾向于根據(jù)細胞形態(tài)結(jié)合免疫功能分類：30％以上的人類腫瘤中存在HER2基因的擴增/過度表達（如乳腺癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、輸卵管癌、胃癌和前列腺癌等。產(chǎn)量高、操作比小鼠麻煩少用CD52表達于不同分化階段的淋巴細胞，以及單核、巨噬和嗜酸性粒細胞。非霍奇淋巴瘤（non-hodgkin’s

lymphoma，NHL）瘤細胞成分單一，大多起源于B淋巴細胞，部分來自T淋巴細胞，只有少數(shù)來自組織細胞。美妥昔單抗注射液，這是全球第一個專門用于到達靶組織的藥量僅有1％抗CD30單抗CD30在霍奇金淋巴瘤的RS細胞和間變大細胞淋巴瘤高度表達，是治療淋巴瘤的理想靶點嵌合性CD30單抗SGN-30及人源化CD30單抗MDX-60治療耐藥性HD、ALCL和其他CD30+淋巴瘤的I/II期臨床試驗正在進行中Imcloneand抗CD30單抗CD30在霍奇金淋巴瘤47抗CD40抗體CD40在惡性T和B淋巴細胞中表達，CD40被認為與細胞的增殖及分化相關(guān)。SGN-40是一種人源化IgG1型抗CD40抗體，臨床前研究表明其對淋巴瘤細胞具有明顯的殺傷效應(yīng)。目前正在DLBCL中進行兩項II期臨床試驗，一項為SGN-40單用，另一項為SGN-40與細胞毒性藥物聯(lián)合應(yīng)用?？笴D40抗體CD40在惡性T和B淋巴細胞中表達，CD40被48抗CD80抗體CD80為淋巴瘤治療中的另一靶點，其表達在不同時期的B細胞和霍奇金淋巴瘤細胞表面，其參與T和B淋巴細胞的激活。Galiximab是一種人-靈長類嵌合型抗CD80抗體，臨床研究表明在復發(fā)FL中具有較好的安全性和有效性。目前正在復發(fā)FL中進行III期臨床試驗，比較美羅華聯(lián)合Galiximab與美羅華單用之間的療效。美羅華聯(lián)合Galiximab治療初治FL的臨床試驗也在進行。

抗CD80抗體CD80為淋巴瘤治療中的另一靶點，其表達在不同49抗CD52單抗CD52表達于不同分化階段的淋巴細胞，以及單核、巨噬和嗜酸性粒細胞。表達T-PLL＞B-CLL＞正常B細胞Alemtuzumab(Campath-1H，阿侖單抗)為人源性IgG1型單抗FDA已批準Alemtuzumab作為氟達拉濱耐藥的CLL的一線治療，可單獨使用Alemtuzumab單獨用于CLL療效優(yōu)于瘤可寧等化療藥抗CD52單抗CD52表達于不同分化階段的淋巴細胞，以及單核50單克隆抗體藥物：Bevacizumab商品名：阿瓦斯汀英文名：Avastin通用名：貝伐單抗（Bevacizumab）針對VEGF（

vascularendothelialgrowthfactor，血管內(nèi)皮生長因子）的人源化單克隆抗體，通過與腫瘤細胞分泌的VEGF特異性結(jié)合,阻礙VEGF經(jīng)由VEGF-1和VEGF-2受體進行的信號傳導，阻止腫瘤細胞中新血管的生成，起到抑制腫瘤細胞增殖的作用，主要用于治療結(jié)腸癌。單克隆抗體藥物：Bevacizumab商品51“抗血管生成療法”示意圖細胞癌變小腫瘤腫瘤生長分泌生長因子誘發(fā)新生血管新生血管向腫瘤供養(yǎng)癌細胞通過血管擴散腫瘤休眠血管阻斷新生血管血管血管“抗血管生成療法”示意圖細胞癌變小腫瘤腫瘤生長分泌生長因子誘52抗腫瘤的生物技術(shù)藥物抗腫瘤的生物技術(shù)藥物53（優(yōu)選）抗腫瘤的生物技術(shù)藥物（優(yōu)選）抗腫瘤的生物技術(shù)藥物54至2008年底，F(xiàn)DA共批準99種生物技術(shù)藥物上市2007年29/110種生物技術(shù)藥物的銷售額超過10億美元2007年銷售額超過40億美元的藥物有16種，基因工程藥物占據(jù)7種：1.治療非霍奇金淋巴瘤的anti-CD20抗體Rituxan2.治療乳腺癌的anti-EGFRII抗體Herceptin3.治療腫瘤放化療后出現(xiàn)的白細胞減少的G-CSF4.治療肺癌、乳腺癌和結(jié)直腸癌的anti-VEGF抗體Avastin5.治療類風濕關(guān)節(jié)炎的anti-TNFα抗體Enbrel、Remicade單克隆抗體藥物至2008年底，F(xiàn)DA共批準99種生物技術(shù)藥物上市單克隆抗55美羅華聯(lián)合Galiximab治療初治FL的臨床試驗也在進行。1987年以后單抗的體內(nèi)診斷和治療制劑被列入863計劃CDR-grafted在V區(qū)中，某些特定位置的氨基酸殘基的組成和排列順序高度可變，稱為HVR，或互補決定區(qū)（CDR）。擴大了篩選容量，易于獲得高親和力抗體。EpratuzumabI/II期臨床試驗結(jié)果Zenapax

Organrejectionprophylaxis目前單克隆抗體均是鼠源性抗體，應(yīng)用于人體內(nèi)可產(chǎn)生人抗鼠抗體（humanantimouseantibody,HAMA)治療類風濕關(guān)節(jié)炎的anti-TNFα抗體Enbrel、Remicade可單藥使用,不良反應(yīng)輕，耐受性好,可在門診治療Fab段：抗原結(jié)合片段受刺激后促進癌細胞的增殖20～30％的癌細胞。商品名：美羅華故目前多傾向于根據(jù)細胞形態(tài)結(jié)合免疫功能分類：Herceptin

MetastaticbreastcancerTypeProductMarketerApprovedChimericRituxanNon-Hodgkin'slymphoma

Genentech

November1997

ChimericSimulectOrganrejectionprophylaxis

NovartisMay1998ChimericRemicadeRheumatoidarthritis,Crohn'sdiseaseohnson&JohnsonAugust1998CDR-graftedZenapax

OrganrejectionprophylaxisRocheDecember1997CDR-graftedSynagis

RespiratorysyncytialvirusMedimmuneJune1998CDR-graftedHerceptin

MetastaticbreastcancerGenentechSeptember1998CDR-graftedMylotarg

AcutemyeloidleukemiaAmericanHomeProductsMay2000MonoclonalAntibodiesontheMarket美羅華聯(lián)合Galiximab治療初治FL的臨床試驗也在進行。56TypeProductMarketerApprovedMurine

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Non-Hodgkin'sLymphomaIDECPharmaceuticalsandScheringAGMarch2002PhageDisplayHumira

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CD20positive,follicular,Non-Hodgkin'sLymphomaCorixaandGlaxoSmithKlineJune2003CDR-graftedRaptiva

Chronicmoderate-to-severepsoriasisGenentechandXomaOctober2003ChimericErbitux

ColorectalcancerImcloneandBristol-MyersSquibbFebruary2004CDR-grafted

Avastin（Bevacizumab）colonandrectumcancer

GenentechFebruary2004TypeProductMarketerApprovedMur571979-1980國內(nèi)個別單位開始單抗的研制1984年以前基本是技術(shù)方法的建立和完善1985年以后單抗為基礎(chǔ)的診斷試劑用于研究和臨床

1987年以后單抗的體內(nèi)診斷和治療制劑被列入863計劃1992年我國第一個單抗衍生物被SDA批準進入臨床2005年第四軍醫(yī)大學研制的治療肝癌新藥——碘131

美妥昔單抗注射液，這是全球第一個專門用于治療原發(fā)性肝癌的單抗導向同位素藥物.

單克隆抗體技術(shù)在我國的發(fā)展.1979-1980國內(nèi)個別單位開始單抗的研制單58由分化成熟的終末B細胞--漿細胞合成、分泌的一類能與相應(yīng)抗原（antigen，Ag）特異性結(jié)合的具有免疫功能的糖蛋白。什么是抗體（Antibody，Ab）？Ag1234B抗體，Ab一個

B細胞只能生產(chǎn)一種抗體，對付某一抗原決定基。由分化成熟的終末B細胞--漿細胞合成、分泌的一類能October2003(90-95%人源)Intracellular受刺激后促進癌細胞的增殖20～30％的癌細胞。其他針對B,T細胞的單抗到達靶組織的藥量僅有1％受刺激后促進癌細胞的增殖20～30％的癌細胞。2005年第四軍醫(yī)大學研制的治療肝癌新藥——碘131美羅華聯(lián)合Galiximab治療初治FL的臨床試驗也在進行。美妥昔單抗注射液，這是全球第一個專門用于目前單克隆抗體均是鼠源性抗體，應(yīng)用于人體內(nèi)可產(chǎn)生人抗鼠抗體（humanantimouseantibody,HAMA)曲妥珠單抗輔助治療可以選擇的方案人類表皮生長因子受體-2療效顯著，中位緩解時間長嵌合性CD30單抗SGN-30及人源化CD30單抗MDX-60治療耐藥性HD、ALCL和其他CD30+淋巴瘤的I/II期臨床試驗正在進行中B1B2B3B4

多克隆抗體Ag2341B4B4B4

單克隆抗體October2003B1B2B3B4多克隆抗體Ag60抗腫瘤的生物技術(shù)藥物課件61在V區(qū)中，某些特定位置的氨基酸殘基的組成和排列順序高度可變，稱為HVR，或互補決定區(qū)（CDR）。VL區(qū)和VH區(qū)各存在個3CDRFR1~4為骨架區(qū)，穩(wěn)定HVR的結(jié)構(gòu)。Fab段：抗原結(jié)合片段Fc段：可結(jié)晶段FabFc在V區(qū)中，某些特定位置的氨基酸殘基的組成和排列順序高度可變，62抗腫瘤的生物技術(shù)藥物課件63抗體的發(fā)展過程單克隆抗體基因工程抗體多克隆抗血清抗體庫抗體的發(fā)展過程單克隆抗體基因工程抗體多克隆抗血清抗體庫64傳統(tǒng)抗血清抗原免疫所有抗體混合123412341234多克隆抗體傳統(tǒng)抗血清抗原免疫所有抗體混合123412341234多65單克隆抗體1975年建立了單克隆抗體技術(shù)（淋巴細胞雜交瘤技術(shù)）。1984年獲得諾貝爾醫(yī)學和生理學獎。單克隆抗體1975年建立了單克隆抗體技術(shù)（淋巴細胞雜交瘤技術(shù)66B淋巴細胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤細胞培養(yǎng)骨髓瘤細胞融合B淋巴細胞注射特定抗原蛋白骨髓瘤細胞培養(yǎng)骨髓瘤細胞融合67B淋巴細胞骨髓瘤細胞雜交瘤BBB瘤瘤瘤HAT選擇培養(yǎng)液（黃嘌呤、氨基喋呤和胸腺嘧啶）選擇培養(yǎng)骨髓瘤細胞因缺乏次黃嘌呤-鳥嘌呤-磷酸核糖轉(zhuǎn)移酶而死亡B淋巴細胞骨髓瘤細胞雜交瘤BB68檢測到所需的X抗體分離單個細胞進行克隆化培養(yǎng)檢測到所需的X抗體檢測到所需的X抗體分離單個細胞進行克隆化培養(yǎng)檢測到所需的X抗69注入小鼠腹腔擴大培養(yǎng)體外培養(yǎng)大量單克隆抗體注入小鼠腹腔擴大培養(yǎng)體外培養(yǎng)大量單克隆抗體702005年第四軍醫(yī)大學研制的治療肝癌新藥——碘131美妥昔單抗注射液，這是全球第一個專門用于Fab段：抗原結(jié)合片段Zenapax

Organrejectionprophylaxis2=-mRNA轉(zhuǎn)錄單克隆抗體藥物：Bevacizumab美妥昔單抗注射液，這是全球第一個專門用于嵌合性CD30單抗SGN-30及人源化CD30單抗MDX-60治療耐藥性HD、ALCL和其他CD30+淋巴瘤的I/II期臨床試驗正在進行中CD40在惡性T和B淋巴細胞中表達，CD40被認為與細胞的增殖及分化相關(guān)。RituxanNon-Hodgkin'slymphoma嵌合性CD30單抗SGN-30及人源化CD30單抗MDX-60治療耐藥性HD、ALCL和其他CD30+淋巴瘤的I/II期臨床試驗正在進行中SGN-40是一種人源化IgG1型抗CD40抗體，臨床前研究表明其對淋巴瘤細胞具有明顯的殺傷效應(yīng)。癌細胞表面存在著Her-2蛋白，CDR-graftedSeptember19982005年第四軍醫(yī)大學研制的治療肝癌新藥71鼠單抗人單抗大鼠小鼠產(chǎn)量高、操作比小鼠麻煩少用易操作、多用HAMA反應(yīng)人人雜交瘤人B細胞、骨髓瘤細胞融合人鼠雜交瘤人B細胞、鼠骨髓瘤細胞融合細胞雜交瘤技術(shù)鼠單抗人單抗大鼠小鼠產(chǎn)量高、操作比小鼠麻煩少用易操作、多用72單克隆抗體的不足：目前單克隆抗體均是鼠源性抗體，應(yīng)用于人體內(nèi)可產(chǎn)生人抗鼠抗體（humanantimouseantibody,HAMA)人體的排斥反應(yīng)人體內(nèi)半衰期只有5-6小時到達靶組織的藥量僅有1％73單克隆抗體的不足：21基因工程抗體鼠單抗100%鼠源鼠/人嵌合單抗(66-75%人源)人源化單抗(90-95%人源)100%人源為了降低免疫原性，降低相對分子量，增加穿透力，開發(fā)了新的基因工程抗體。恒定區(qū)人源化可變區(qū)人源化基因工程抗體鼠單抗鼠/人嵌合單抗人源化單抗100%人源為74Pr鼠VH人CHPr鼠VL人CL免疫球蛋白基因載體的構(gòu)建H鏈嵌合載體L鏈嵌合載體共轉(zhuǎn)染細胞啟動子人-鼠嵌合抗體基因工程改造策略Pr鼠VH人CH75鼠VH鼠VL人CL人CH抗體分泌細胞鼠VH鼠VL人CL人CH抗體分泌細胞76CDR序列CDR序列鼠單克隆抗體人抗體人源化抗體CDR移植CDR序列CDR序列鼠單克隆抗體人抗體人源化抗體CDR77小分子抗體小分子抗體78小分子抗體的優(yōu)點：分子質(zhì)量小，免疫原性低。易于進入實體瘤周圍的微循環(huán)。無Fc片段，不易與具有Fc受體的非靶細胞結(jié)合，用于免疫診斷時成像清晰。構(gòu)建較簡單，易于操作和改造?？稍诩毦斜磉_，易于大量生產(chǎn)。小分子抗體的缺點：與抗原結(jié)合活性相對較弱。半衰期短。小分子抗體的優(yōu)點：79抗體庫抗體庫技術(shù)：用基因克隆技術(shù)克隆全套抗體的重鏈和輕鏈的可變區(qū)基因，然后重組到特定的表達載體中，轉(zhuǎn)化特定的宿主細胞表達有功能的抗體分子，并通過親和篩選獲得特異性抗體可變區(qū)基因的技術(shù)。利用抗體庫技術(shù)篩選到的抗體可變區(qū)基因可被用于構(gòu)建基因工程抗體?？贵w庫抗體庫技術(shù)：80噬菌體抗體庫噬菌體抗體庫81抗體庫的優(yōu)點：越過了細胞融合的步驟，省時省力。擴大了篩選容量，易于獲得高親和力抗體。不需進行人工體內(nèi)免疫?？贵w庫的優(yōu)點：82單克隆抗體藥物：Trastuzumab商品名：赫賽汀英文名：Herceptin通用名：注射用曲妥珠單抗

(Trastuzumab)針對HER2的特異性單克隆抗體，用于治療HER2過度表達的轉(zhuǎn)移性乳腺癌

重組DNA衍生的人源化單克隆抗體可單藥使用,不良反應(yīng)輕，耐受性好,可在門診治療療效顯著，中位緩解時間長單克隆抗體藥物：Trastuzumab商品名83HER2人類表皮生長因子受體-2

HumanEpidermalgrowthFactorReceptor-2

分子量185kDa的糖蛋白:細胞外區(qū)（配體結(jié)合區(qū)）跨膜區(qū)（傳導信號）細胞內(nèi)區(qū)（激酶活性）HER2細胞內(nèi)細胞外細胞膜HER2HER2細胞內(nèi)細胞外細胞膜84Cellmembrane基因轉(zhuǎn)錄提高細胞運動抑制凋亡細胞生長和增殖轉(zhuǎn)移化療耐藥腫瘤生長EGFEGFREGFRTGFTGFEGFRHER2HER2HER3NRGNRGHER2HER4HER2HER2信號級聯(lián)放大核膜IntracellularCellmembrane基因轉(zhuǎn)錄提高細胞運動抑制凋亡細胞生851=-

基因拷貝數(shù)2=-

mRNA

轉(zhuǎn)錄3=-

細胞表面受體蛋白表達4=-

細胞外受體功能域釋放A=HER2DNAB=HER2信使RNAC=HER2受體蛋白細胞核細胞質(zhì)細胞膜1234CBAHER2陽性：過度表達/擴增HER2正常表達細胞(HER2–)(~2萬個受體）HER2過表達的細胞(HER2+)(100–200萬個受體）1=-基因拷貝數(shù)A=HER2DNA細胞核細胞質(zhì)細86正常HER2表達HER2基因擴增導致HER2過表達HER2過表達導致腫瘤增殖促進細胞的生長和增殖------腫瘤發(fā)生抑制細胞的凋亡誘導血管新生提高細胞運動能力,增強腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移作用正常HER2表達HER2基因擴增導致HER2過表達HER87HER2在癌癥中過表達：30％以上的人類腫瘤中存在HER2基因的擴增/過度表達（如乳腺癌、卵巢癌、子宮內(nèi)膜癌、輸卵管癌、胃癌和前列腺癌等。20％－30％的原發(fā)性浸潤性乳腺癌有HER2基因的擴增/過度表達。Herceptin即為一種針對HER2受體的人源化單克隆抗體，是乳腺癌治療領(lǐng)域的第一個分子靶向性藥物，具有高效、低毒、選擇性強的特點。2010年，歐洲和美國先后批準化療聯(lián)合使用曲妥珠單抗治療HER2陽性胃及胃食管交界癌患者。HER2在癌癥中過表達：88刺激刺激HER2タンパクがん細胞増殖刺激刺激HER2タンパク癌細胞増殖抑制Heceptin作用Heceptin癌細胞表面存在著Her-2蛋白，受刺激后促進癌細胞的增殖20～30％的癌細胞。Heceptin與Her-2結(jié)合阻斷和抑制細胞的增殖，用于

轉(zhuǎn)移性乳腺癌病人的治療。刺激刺激HER2がん細胞増殖刺激刺激HER2癌細胞増殖抑制89HER2檢測流程免疫組織化學原位雜交HER2檢測流程免疫組織化學原位雜交90440mg 凍干粉針劑20ml 無菌注射用水赫賽汀?用法用量所需溶液的體積=體重（Kg）劑量（4mg/Kg負荷量或2mg/Kg維持量）

21（mg/ml，配置好溶液的濃度）每周方案三周方案用法用量首劑

4mg/kg，90分鐘內(nèi)靜脈滴注，觀察2小時維持劑量

2mg/kg，每周一次，30分鐘靜脈滴注首劑

8mg/kg，90分鐘內(nèi)靜脈滴注，觀察2小時維持劑量

6mg/kg，每三周一次，30分鐘靜脈滴注療程建議轉(zhuǎn)移性乳腺癌至少6個月輔助治療一年440mg 凍干粉針劑赫賽汀?用法用量所需溶液的體積=

曲妥珠單抗輔助治療可以選擇的方案曲妥珠單抗輔助治療可以選擇的方案92單克隆抗體藥物：Rituximab商品名：美羅華英文名：Mabthera通用名：利妥昔單抗(Rituximab)針對CD20的特異性單克隆抗體，通過基因重組技術(shù)生產(chǎn)的一種嵌合鼠/人的單克隆抗體,用于治療非霍奇淋巴瘤。單克隆抗體藥物：Rituximab商品名：93非霍奇淋巴瘤（non-hodgkin’s

lymphoma，NHL）瘤細胞成分單一，大多起源于B淋巴細胞，部分來自T淋巴細胞，只有少數(shù)來自組織細胞。故目前多傾向于根據(jù)細胞形態(tài)結(jié)合免疫功能分類：B細胞淋巴瘤（臨床多見）T細胞淋巴瘤CD20抗原在從前B細胞到活化B細胞的各個階段都表達,但在正常造血干細胞、分化成熟的漿細胞及其他類型造血細胞系卻未見表達，且CD20在超過90%的B細胞性NHL中均有表達。因此CD20成為腫瘤治療的一個較好的靶點。

非霍奇淋巴瘤（non-hodgkin’94

Rituximab：通過ADCC，CDC促凋亡與化療藥物協(xié)同作用Rituximab：通過ADCC，CDC促凋亡與化療95淋巴瘤治療單克隆抗體Rituxi-CD20CD20淋巴瘤治療單克隆抗體Rituxi-CD20CD2096Epratuzumab：人源性IgG1抗CD22單抗60%－80％的B-NHL細胞表達CD22濾泡性淋巴瘤、套細胞淋巴瘤和邊緣區(qū)B細胞性淋巴瘤高表達CD22Anti-CD22與CD22結(jié)合后迅速內(nèi)在化抗CD22單