香菇、平菇多糖成分的提取 第二組課件

香菇、平菇多糖成分的提取第二組組長(zhǎng)：于海燕組員：楊昕韓驍常梓靖貢博辰馬思聰何煒倫香菇多糖定義香菇是我國(guó)傳統(tǒng)的著名食用菌，在世界上最早人工馴化栽培。香菇營(yíng)養(yǎng)豐富，味道鮮美，被視為“菇中之王”。其中含有十多種氨基酸，其中有異亮氨酸、賴氨酸、苯丙氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸、纈氨酸等7種人體必需的氨基酸，還含有維生素B1、B2、PP及礦物鹽。香菇多糖成分

香菇多糖是從優(yōu)質(zhì)香菇子實(shí)體中提取的有效活性成分，香菇多糖中的活性成分是具有分支的β—(1—3)—D—葡聚糖，主鏈由β—(1—3)—連接的葡萄糖基組成，沿主鏈隨機(jī)分布著由β—(1—6)連接的葡萄糖基，呈梳狀結(jié)構(gòu)。分子式：(C6H10O5)n，分子量：40～80萬(wàn)。香菇的主要成分是多糖類和不飽和脂肪酸，還含有大量的可轉(zhuǎn)變?yōu)榫S生素D的麥角甾醇和菌甾醇。2.香菇多糖的免疫調(diào)節(jié)

香菇多糖的免疫調(diào)節(jié)作用是其生物活性的重要基礎(chǔ)。香菇多糖是典型的T細(xì)胞激活劑，促進(jìn)白細(xì)胞介素的產(chǎn)生，還能促進(jìn)單核巨噬細(xì)胞的功能，被認(rèn)為是一種特殊免疫增強(qiáng)劑。其免疫作用特點(diǎn)在于它能促進(jìn)淋巴細(xì)胞活化因子（LAE）的產(chǎn)生，釋放各種輔助性T細(xì)胞因子，增強(qiáng)宿主腹腔巨噬細(xì)胞吞噬率，恢復(fù)或刺激輔助性T細(xì)胞的功能。另外，香菇多糖還能促進(jìn)抗體生成，抑制巨噬細(xì)胞釋放。3.香菇多糖的抗病毒活性

日本石田博士研究認(rèn)為，香菇含有一種雙鏈核糖核酸，能刺激人體網(wǎng)狀細(xì)胞及白血球釋放干擾素，而干擾素具有抗病毒作用。香菇菌絲體提取物可抑制細(xì)胞的吸附皰疹病毒，從而防治單純皰疹病毒、巨細(xì)胞病毒引起的各類疾病。英國(guó)從培養(yǎng)的香菇菌絲體中提取到一種物質(zhì)，可使因艾滋病病毒感染的T淋巴細(xì)胞復(fù)原，刺激巨噬細(xì)胞，有助于產(chǎn)生抗體治療艾滋病，且安全無(wú)副作用。近年來(lái)，有學(xué)者發(fā)現(xiàn)硫酸化香菇多糖具有抗艾滋病病毒（HIV）的活性，可干擾反轉(zhuǎn)錄病毒及其他病毒的吸附和侵入。日本學(xué)者報(bào)道，從香菇子實(shí)體中獲得的一種具有良好抗腫瘤作用的葡聚糖的硫酸化衍生物可抑制HIV的活性。4.香菇多糖抗感染作用

據(jù)報(bào)道，香菇多糖能提高巨噬細(xì)胞功能。香菇多糖對(duì)Abelson病毒、12型腺病毒及流感病毒感染均有抑制作用，是治療各種肝炎特別是慢性遷移型肝炎的良好藥物。香菇多糖產(chǎn)品香菇多糖的提取香菇多糖主要的提取方法有熱水浸提法、稀酸(堿)浸提法、酶解法、超聲波提取法、微波提取法和深層發(fā)酵培養(yǎng)提取法等。酶解法：酶解法就是指在浸提的過(guò)程中加入相應(yīng)的酶來(lái)水解纖維素、果膠、蛋白質(zhì)分子等，以使多糖從細(xì)胞中分離出來(lái)。微波提取法：

微波提取法是一種新型提取法，由于溶劑及細(xì)胞液吸收微波能，微波射線輻射于溶劑并透過(guò)細(xì)胞壁內(nèi)部時(shí)，細(xì)胞內(nèi)部溫度升高壓力增大，當(dāng)壓力超過(guò)細(xì)胞的承受能力時(shí)，細(xì)胞壁破裂，位于細(xì)胞內(nèi)部的多糖就從細(xì)胞中釋放出來(lái)。超聲波提?。合愎蕉嗵堑某暡?20KHz一50MHz)提取利用超聲波的空化作用分散破壞植物組織，加速植物多糖成分的浸出提取。實(shí)驗(yàn)樣品：香菇、平菇實(shí)驗(yàn)儀器：天平、稱量紙、量筒（500ml）、電爐、石棉網(wǎng)、鐵鍋、溫度計(jì)、燒杯、玻璃棒、紗布、小刀、標(biāo)簽紙、分液漏斗、鐵架臺(tái)、紫外分光光度計(jì)、石英比色皿、離心管(50ml)、移液管、洗耳球、層析柱、G-75填料、試管、膠頭滴管、恒流泵、試管架實(shí)驗(yàn)藥品：蒸餾水、95％乙醇、氯仿、正丁醇、磷酸二氫鉀、磷酸氫二鉀、蒽酮、95％硫酸、G-75凝膠、丙酮、無(wú)水乙醇實(shí)驗(yàn)所需樣品、儀器、藥品六.柱層析1.檢查層析柱的氣密性下端有膜、有膠墊2.裝柱先在柱子里加入1/5的磷酸鹽緩沖液，再加入G-75凝膠。裝柱時(shí)柱子應(yīng)無(wú)氣泡、裂痕、分層。3.平衡：用磷酸鹽緩沖液沖洗兩個(gè)柱體積4.上樣：將樣品倒在柱床上（香菇樣品體積0.3ml平菇樣品體積：0.3ml）5.洗脫：用硫酸鹽緩沖液洗脫6.收集：前3ml樣品不要，后面3ml/管，收集6管，收集的樣品用紫外分光光度計(jì)200nm測(cè)吸光值，有數(shù)值的留下，無(wú)數(shù)值的倒掉。香菇平菇七.硫酸蒽酮法分別取2ml樣品，6ml硫酸蒽酮加入到6根試管中，置于100℃水浴15min，冰浴15min。在紫外分光光度計(jì)625nm下測(cè)吸收值。蒽酮試劑配置：精密稱取0.1g蒽酮，加80%濃硫酸100mL使溶解，搖勻。當(dāng)日配制使

用；

80%硫酸配置：濃硫酸77mL蒸餾水31.5mL香菇平菇實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中的圖片旋蒸儀sevag法除蛋白（左為香菇右為平菇）水浴、冰浴前加入硫酸蒽酮圖水浴、冰浴后香菇多糖的應(yīng)用1.香菇多糖在醫(yī)藥領(lǐng)域的應(yīng)用香菇多糖在治療胃癌、結(jié)腸癌、肺癌等方面具有良好療效。作為免疫輔助藥物，香菇多糖主要用來(lái)抑制腫瘤的發(fā)生、發(fā)展與轉(zhuǎn)移，提高腫瘤對(duì)化療藥物的敏感性，改善患者的身體狀況，延長(zhǎng)其壽命。香菇多糖與化療劑聯(lián)合使用，有減毒、增效的作用?；熕幬餁[瘤細(xì)胞的選擇性較差，對(duì)正常細(xì)胞也具有殺傷作用，產(chǎn)生毒副作用，造成化療不能按期按量進(jìn)行；由于化療的劑量不足，常引起腫瘤細(xì)胞的耐藥性，成為難治性癌癥，影響療效?；熯^(guò)程中服用香菇多糖，可以增強(qiáng)化療的療效，并減輕化療的毒性作用；同時(shí)，化療過(guò)程中患者的白細(xì)胞下降的發(fā)生率、胃腸毒性、肝功能損害及嘔吐的發(fā)生明顯降低。這充分說(shuō)明了香菇多糖與化療并用可以增效、減毒，并增強(qiáng)患者機(jī)體的免疫功能。香菇多糖配合其他藥物治療慢性乙型肝炎，可提高乙肝病毒標(biāo)志物的轉(zhuǎn)陰作用，減少抗病毒藥物的副作用。此外，香菇多糖可用于治療結(jié)核桿菌感染。平菇多糖的功效

平菇多糖是可食真菌-平菇中顯生物活性的一種高分子多糖類活性物質(zhì)。平菇中的蛋白多糖體對(duì)癌細(xì)胞有很強(qiáng)的抑制作用，能增強(qiáng)機(jī)體免疫功能。常食平菇不僅能起到改善人體的新陳代謝，調(diào)節(jié)植物神經(jīng)的作用，而且對(duì)減少人體血清膽固醇、降低血壓和防治肝炎、胃潰瘍、十二指腸潰瘍、高血壓等有明顯的效果，而這些藥理作用主要得益于平菇多糖的活性。1、平菇性味甘、溫。具有追風(fēng)散寒、舒筋活絡(luò)的功效。用于治腰腿疼痛、手足木、筋絡(luò)不通等病癥。2、平菇多糖對(duì)人外周血單個(gè)核細(xì)胞有明顯促進(jìn)增殖作用，增殖程度與平菇多糖劑量相關(guān)。而人外周血單核細(xì)胞來(lái)源的樹突狀細(xì)胞轉(zhuǎn)染含前列腺特異性抗原片段的重組腺相關(guān)病毒后,其所誘導(dǎo)的特異性T細(xì)胞對(duì)前列腺癌細(xì)胞株LNCaP和DU145的體外殺傷抑制作用。3、平菇多糖具有一定清除超氧陰離子自由基的作用．