藥物分析(人衛(wèi)版)第11章A課件

第十一章抗生素類藥物的分析進入返回主目錄思考與練習第一節(jié)概述第二節(jié)β–內(nèi)酰胺類抗生素

第三節(jié)氨基糖苷類抗生素第四節(jié)四環(huán)素類抗生素第五節(jié)抗生素類藥物中高分子雜質(zhì)的檢查基本要求基本要求一、掌握抗生素類藥物的結(jié)構(gòu)特點與分析方法之間的關(guān)系。二、掌握抗生素類藥物的鑒別原理與方法。三、掌握抗生素類藥物法定含量測定方法的原理、測定方法與計算。四、熟悉抗生素類藥物雜質(zhì)檢查的方法。五、了解抗生素類藥物中高分子聚合物檢查。返回2.微生物學法與理化法的比較微生物檢定法理化法以抗生素對微生物的殺傷或抑制程度為指標衡量抗生素的生物效價

根據(jù)抗生素結(jié)構(gòu)特點，利用其特有的理化性質(zhì)測定其含量已知或新發(fā)現(xiàn)的抗生素、精致品或粗制品均能測定

測定化學結(jié)構(gòu)已知、已提純的抗生素靈敏度高、樣品需用量小、反映抗生素的醫(yī)療價值，但操作步驟多、費時、誤差大

迅速、準確、專屬性高、樣品需用量小、操作簡單、省時3.抗生素的活性以效價單位來表示：每ml或每mg中含有某種抗生素的有效成分的多少，用單位（u）或μg表示。

1mg青霉素G鈉鹽定為1667單位

1mg青霉素G鉀鹽的單位（u）=1667×356.4/372.5=1595u/mg分類（按結(jié)構(gòu)與性質(zhì)）：β–內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、氯霉素類、多肽類、抗腫瘤類林可霉素類、其他抗生素類返回第二節(jié)β–內(nèi)酰胺類抗生素

青霉素類NSCH3CH3COOHOHN1234567RCO母核（6-氨基青霉烷酸）AB青霉素（青霉素鉀、鈉）阿莫西林

（羥氨芐青霉素）頭孢氨芐頭孢拉啶頭孢羥氨芐頭孢噻吩鈉酸性結(jié)構(gòu)特點與性質(zhì)一、Na與堿金屬(Na+、K+)成鹽

（一）羧基

易溶于水

（二）手性C

頭孢菌素類

C6C7青霉素類C3C5C6

旋光性﹡﹡﹡﹡﹡

（三）共軛體系

頭孢菌素類母核有共軛體系

青霉素類母核無明顯UV多數(shù)有苯環(huán)取代基

UV青霉素類某些氧化劑酸、堿、青霉素酶（某些金屬離子）（溫度）降解失效頭孢菌素類酸、堿、胺類-內(nèi)酰胺酶降解失效（一）呈色反應(yīng)1.羥肟酸鐵反應(yīng)β-內(nèi)酰胺類呈色羥肟酸衍生物Fe3+/3H+鑒別試驗二、NaOH?2HClNOHH-b內(nèi)酰胺類H+Fe3+/3（紅、棕、褐）2.茚三酮反應(yīng)α-氨基-氨基茚三酮藍紫色4.與重氮苯磺酸反應(yīng)橙黃色重氮苯磺酸--56OHHC（偶合）酚羥基頭孢哌酮5.與變色酸-硫酸反應(yīng)活潑“-CH2-”青霉素阿莫西林氨芐西林△（分解）變色酸顯色1.K+、Na+的火焰反應(yīng)（二）各種鹽的反應(yīng)

焰色→鮮黃色+醋酸氧鈾鋅→↓黃

Na+

焰色→紫色+0.1%四苯硼鈉+Ac→↓白

K+2.沉淀反應(yīng)（青霉素鹽）遇酸→↓在過量HCl或有機溶劑中溶解白青霉素青霉素鈉

青霉素鉀

緘+H3.重氮化-偶合反應(yīng)

重氮化-偶合反應(yīng)芳伯氨基4.與三硝基苯酚反應(yīng)

△二芐基乙二胺mp三硝基苯酚光譜法（三）1、UV法樣品、分解產(chǎn)物Cu2+頭孢氨芐λmax=262nm青霉素V鈉A280nm/A264nm=1.30～1.50pH3.8分子重排2、IR法3180cm-1N-Hβ–內(nèi)酰胺C=O1780cm-13470cm-1O-H1690cm-1仲酰胺C=O1250cm-1C-O以阿莫西林為例色譜法（四）1、TLC法對照品對照法2、HPLC法三、雜質(zhì)檢查

藥物

檢查項目

檢查方法

頭孢他啶聚合物HPLC法

頭孢曲松鈉

頭孢哌酮鈉

頭孢噻肟鈉

頭孢呋辛酯有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體HPLC法

頭孢氨芐有關(guān)物質(zhì)反相TLC法

青霉素鉀（鈉）吸收度紫外分光光度法

1.頭孢他啶聚合物的測定

固定相：葡聚糖凝膠G-10（40~120μm）

流動相A：3.5%硫酸銨的0.01mol/L磷酸鹽緩沖液

流動相B：0.01%十二烷基硫酸鈉

對照品溶液：頭孢他啶對照品100μg/ml

1）系統(tǒng)適用性試驗：理論塔板數(shù)和拖尾因子用1mg/ml藍色葡聚糖2000、流動相A測定；重復性用對照品溶液、流動相B測定。

N不低于900，拖尾因子0.75~1.5，峰面積的RSD應(yīng)小于5.0%。

2）測定方法

進樣供試液，用流動相A；進樣對照液，用流動相B。以外標法計算，含頭孢他啶聚合物以頭孢他啶計不得超過0.3%。2.頭孢呋辛酯中有關(guān)物質(zhì)和異構(gòu)體的檢查

固定相：ODS

流動相：0.2mol/L磷酸二氫銨-甲醇（62:38）

1）頭孢呋辛酯Δ2-異構(gòu)體的制備：頭孢呋辛酯對照品+流動相頭孢呋辛酯Δ2-異構(gòu)體。

2）系統(tǒng)適用性試驗：各異構(gòu)體之間的R>1.5，以頭孢呋辛酯A異構(gòu)體計算n>1500。

3）異構(gòu)體：t‘R1

相對保留時間r12=-----1----被測物

t’R22----標準物異構(gòu)體相對保留時間判斷B異構(gòu)體0.85供試液譜圖中A異構(gòu)體的峰面積A異構(gòu)體1.0與A、B異構(gòu)體峰面積和之比應(yīng)為0.48~0.55。3.頭孢氨芐中有關(guān)物質(zhì)的檢查---反相TLC法

固定相：活化后的硅膠G板置5%（V/V）正十四烷的正己烷溶液中，展至頂部，涼干展開劑：0.1mol/L枸櫞酸-0.2mol/L磷酸氫二鈉-丙酮（120：80：3）

供試液：本品50mg/ml

對照液（1）：本品0.5mg/