血糖的測(cè)定及激素對(duì)血糖濃度的影響

關(guān)于血糖的測(cè)定及激素對(duì)血糖濃度的影響第1頁(yè)，共13頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)38分，星期六一實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆誈OD-POD法測(cè)定血糖的原理及方法。觀察胰島素，腎上腺素對(duì)血糖濃度的影響。了解動(dòng)物實(shí)驗(yàn)的基本知識(shí)和兔耳緣靜脈取血的方法。第2頁(yè)，共13頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)38分，星期六二原理(2)激素對(duì)血糖濃度的影響

葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡萄糖酸，并產(chǎn)生過(guò)氧化氫，過(guò)氧化氫被過(guò)氧化物酶（POD）催化釋放初生態(tài)氧，氧又對(duì)與色原性氧受體4－氨基安替比林偶聯(lián)的酚氧化，并與4－氨基安替比林結(jié)合生成紅色醌類(lèi)化合物。第3頁(yè)，共13頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)38分，星期六二原理(2)顯色原理

葡萄糖在葡萄糖氧化酶的催化下生成葡萄糖酸，并產(chǎn)生過(guò)氧化氫，過(guò)氧化氫被過(guò)氧化物酶（POD）催化釋放初生態(tài)氧，氧又對(duì)與色原性氧受體4－氨基安替比林偶聯(lián)的酚氧化，并與4－氨基安替比林結(jié)合生成紅色醌類(lèi)化合物。第4頁(yè)，共13頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)38分，星期六

葡萄糖＋O2+H2OGOD葡萄糖酸＋H2O24－氨基安替比林＋酚＋H2O2

POD

紅色醌類(lèi)化合物+4H2O

葡萄糖越多，生成的醌類(lèi)物質(zhì)就越多，顏色就越深，通過(guò)所講過(guò)的比色法，求出它的葡萄糖含量，即血糖濃度。（標(biāo)準(zhǔn)管法）第5頁(yè)，共13頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)38分，星期六三操作1．準(zhǔn)備抗凝試管：首先放入試管一小勺抗凝劑（草酸鈉）。2．分組。稱(chēng)重：Kg，共有四只兔子，兩只注射胰島素，兩只注射腎上腺素。兔子抓取方法：一手抓取頸部皮膚，另一只手托臀部，把它放在天平上稱(chēng)重。第6頁(yè)，共13頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)38分，星期六

操作3.注射前取血:一般多以心臟取血的方式進(jìn)行。第7頁(yè)，共13頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)38分，星期六

操作4．注射激素:抓住兔子，肚皮朝上，在腹部的皮下注射，注意要抓緊兔耳以免被咬住，方法是掂起皮膚，刺入皮下有落空感，然后緩慢注入激素。首先注射胰島素0.75mg/kg（注意記錄時(shí)間）然后注入腎上腺素0.5mg/kg，并記錄時(shí)間。5．制備無(wú)蛋白血慮液:這是注射前的血液，在胰島素等待一個(gè)小時(shí)，腎上腺素等待半個(gè)小時(shí)期間制備注射前無(wú)蛋白血慮液。方法：蛋白沉淀劑4ml＋全血0.2ml混勻，室溫放置7分鐘后，在漏斗上過(guò)濾，這時(shí)標(biāo)記為注射前無(wú)蛋白血濾液。第8頁(yè)，共13頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)38分，星期六

操作6．注射后再次取血7．再制備無(wú)蛋白血慮液:標(biāo)記為注射后8．比色：最后我們用標(biāo)準(zhǔn)管法來(lái)測(cè)定血糖濃度，按表操作：第9頁(yè)，共13頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)38分，星期六

混勻，置37℃水浴15分鐘調(diào)波長(zhǎng)為505nm，以空白管調(diào)零，分別讀取A測(cè)A標(biāo),根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)管法求測(cè)定管血糖濃度。

加入物（ml）測(cè)定管（注射前）測(cè)定管（注射后）標(biāo)準(zhǔn)管空白管去蛋白血濾液

0.50.5處理后的葡萄糖

0.5標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液

蛋白沉淀劑0.5酶酚混合試劑

3333第10頁(yè)，共13頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)38分，星期六四結(jié)果與計(jì)算C測(cè)（mmol/l）=（A測(cè)/A標(biāo)）×5mmol/L(5為葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)應(yīng)用液濃度值)通過(guò)計(jì)算比較一下家兔注射前后血糖濃度的變化情況。第11頁(yè)，共13頁(yè)，2022年，5月20日，5點(diǎn)38分，星期六五分析

(1)對(duì)家兔而言血糖正常值：2.8－5.2mmol/L，驗(yàn)證是否在此范圍。

(2)