中鑒班復方莪術(shù)油抗菌作用初步研究

誠信我，所呈交的（設(shè)計）是本人在老師指導下進行的研究工作及取得的研究成果。據(jù)我查證，除了文中特別加以標注和致謝的地方外，（設(shè)計）中不包含其他人已經(jīng)或撰寫過的研究成果，也不包含為獲得其他教育機構(gòu)的學位或而使用過的材料。我承諾，（設(shè)計）中的所有內(nèi)容均真實、。（設(shè)計）作者（簽名 ..................................................................Ⅰ-前 材料與儀 材 試驗儀器與設(shè) 實驗方 莪術(shù)鑒別與檢 莪術(shù)油的及優(yōu) 復方精油抗菌實驗方 復方莪術(shù)油的質(zhì)量評 實驗結(jié) 莪術(shù)鑒別和檢查結(jié) 莪術(shù)油的及優(yōu)化結(jié) 抑菌試驗結(jié) 復方莪術(shù)油的質(zhì)量評價結(jié) 實驗結(jié) 實驗...............................................................莪術(shù)油的及優(yōu) 抑菌實 參考文 綜 致 復方莪術(shù)油抗菌作用的初步研：目的探索提取莪術(shù)油的工藝流程并優(yōu)化莪術(shù)油的提取率，以及對莪術(shù)油和其他精油復方配比后抗菌作用的初步研究。方法采用水蒸氣蒸餾的方法莪術(shù)油通過單因素試驗分別粒徑大小料液比提取溫度這三種——圈試驗探究莪術(shù)油與其他固定比例的精油混合配比后的抗菌作用。結(jié)果當粉末301:8110C10%葡萄球菌、曲霉菌的抗菌作用最佳。結(jié)論：莪術(shù)油；復方精油；工藝流程；抗菌作IPreliminaryStudyonAntibacterialEffectofCompoundCurcumaOil:ObjectiveToexploretheprocessofextractionofzedoaryoilandoptimizetheextractionrateofzedoaryoil,andthepreliminarystudyontheantibacterialactionofzedoaryoilandotheressentialoilcompounds.MethodZedoaryoilwaspreparedby distillation.Thesinglefactortestcontrolledthereactionconditionsfromthreeaspectsofparticlesize,liquidratioandextractiontemperaturetodeterminetheoptimalextractionprocess.Theantimicrobialeffectofzedoaryturmericoilandotherfixedproportionofessentialoilswasstudiedbyfilterpaperdiffusionmethod.ResultWhenthepowderthroughthe30mesh,andsolid-liquidratioof1:8,extractiontemperatureof110°C,guangxirhizomazedoariaeextractionyieldthebest;Compoundzedoaryturmericoilhascertainantibacterialactionandisthebestantibacterialeffecttostaphylococcusaureusandaspergillus,whentheoilcontentis10%.InconclusionTheformulaofthecompoundzedoaryturmericoilextractionofnaturaldrugs,andotheressentialoilcompoundratio,hasobviousantibacterialeffect,andcanreducetheswellingitching,wakeup:god,efficacysignificantly,canbeusedasauniversaloilindailylife.Keywords:Zedoaryturmericoil;Compoundessentialoil;Processflow;Antibacterialactivity[9]；倘若每天給予足夠量大的莪術(shù)高蛋白粉末，在一周內(nèi)大鼠率達以把莪術(shù)油與其他稀釋劑混合成其他劑型或和其他精油復方配伍使用，油、蜂標莪術(shù)油等，價格昂貴，貨源難求，難以滿內(nèi)龐大的市場需檸檬草8種藥材的揮發(fā)油與基礎(chǔ)油橄欖油按一定的比例和組合方式進行混定性評價和藥效評價不同組方對細菌活性的影響及消腫止癢等療效，材料與儀2.1-阿芙精油旗艦阿芙精油旗艦阿芙精油旗艦金黃色葡萄球 藥學微生物大腸 藥學微生物 藥學微生物 杭州微生物試劑營養(yǎng)肉湯原 杭州微生物試劑試驗儀器與設(shè)2-2儀 型 生產(chǎn)廠紫外分光光度 佑科儀器儀表搖擺式高速萬能 溫嶺市機械 立式壓力蒸汽滅菌 申安醫(yī)療器械 HPX-9162MBE 博迅實業(yè) 精密科學儀器實驗方莪術(shù)鑒別與檢性狀鑒定性鑒熒光鑒別法是根據(jù)中藥的某些成分在紫外光燈下能產(chǎn)生特定的熒光鑒別來鑒別中藥的法。對于鑒別、鑒別環(huán)境及設(shè)備均無特殊要求，（365n下觀察其熒光顏色[105g2mol/L2mol/LL溶液中浸泡適當時間，蘸取適量的莪術(shù)水浸液、2mol/LH浸液、2molLL浸液于濾紙上，在紫外光燈（254nm365nm）下觀察其熒光顏色。吸光度檢10mL24h10mL的量瓶中，補加氯仿至刻度，搖勻，照紫外-242nm莪術(shù)油的及優(yōu)粒徑的優(yōu)30、4070g1000mL3~48（如圖3-1裝置所時間至揮發(fā)油量不再增加，放置0.5h后揮發(fā)油量，同時計算提取率。莪術(shù)油提取率見公式(3-1)Yv

(公式3-式中 為揮發(fā)油提取率 為樣品質(zhì)量，g3-1料液比的將莪術(shù)過30目篩取50g粉置于1000mL的圓底燒瓶中分別加6、8、10、12倍水量，如上操作，調(diào)節(jié)溫度保持微沸狀態(tài)蒸餾足夠時間至揮發(fā)油量不再增加，放置0.5h后揮發(fā)油量，同時計算提取率。將提取的莪加熱溫度的優(yōu)油的提取至關(guān)重要。將莪術(shù)過30目篩，取70g粉置于1000mL的圓底8100℃110℃120℃、130℃0.5h后揮發(fā)油量，同時計算提取率，并觀察揮發(fā)油的顏色。將提取的莪術(shù)油復方精油抗菌實驗方復方精油的組方成參考市場上幾種復方莪術(shù)油的配比及獻調(diào)研初步固定部分精油的配比（1%100%。當復方精油復合后，應(yīng)用強力攪拌機攪拌以混合均勻，3-1種 科 屬 主要有效成 主要作莪 姜 姜黃(Christm.)Rosc

抗菌抗炎、 廣藿 唇形

橄 橄欖 橄欖 對皮膚無刺激性，Canariumalbum(Lour.)

Ramusoliue

茶 桃金娘 白千層

Camelliasinensis(L.)O.Ktze.

瘤迷迭 唇形

抗氧化、抗、

菌抗炎、抗血栓尤加 桃金娘 桉油醇、芳香烯

種 科 屬 主要有效成 主要作檸檬 禾本 香茅

歐薄 唇形 薄荷 天竺 牻牛兒苗 天竺葵

有驅(qū)避作用抗菌實驗儀器準（5mm棒、鑷子等用牛皮紙后放置于立式壓力蒸汽滅菌器中進行濕熱高壓滅菌（121℃，30min）培養(yǎng)基3-2。3-2名 成 使用方

10.0g3.0g5.0g；5.0g15.0g；PH值

稱取本品3.3100mL15min70℃以下裝置高

5.0g；pH7.2±0.2

18.0g,1000mL蒸餾水中,分別裝于三角瓶或試管,用牛皮注：配置好的培養(yǎng)基應(yīng)用兩層牛皮紙包好，以避免雜菌的污染0.8μm左大腸菌：為革蘭氏菌，短桿狀且為兼性厭氧菌，直徑1μm發(fā)燒、、等癥狀[21-22]。本實驗所用到的細菌或真菌的菌種已經(jīng)采用平板分區(qū)劃分離培養(yǎng)保存于微生物中制作菌懸液時首先配置好營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基，121℃30min121℃30min。滅菌完畢，取出營養(yǎng)肉湯，待稍冷后，于超凈工作臺中，點燃燈，用已經(jīng)高溫滅菌的接種環(huán)于燈上灼燒2~3s，待冷卻后，在相應(yīng)細菌的培養(yǎng)基中挑取2~3個單個菌落放入營養(yǎng)肉湯中稍振搖瓶口在燈外焰處旋轉(zhuǎn)一圈密塞，37℃24h，即得大腸桿菌菌懸液，金黃色葡萄4℃保存?zhèn)溆谩Ｒ志崪缇戤吅?，于超凈工作臺中，點燃燈（注：接種環(huán)必須經(jīng)過燈高10100μL稀釋液置于營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中5mm4~5片單方精油5μL滴加在濾紙片上，待精油被濾紙充分吸收后，將培養(yǎng)基倒平37℃24h后觀察實驗結(jié)果，并用游標卡尺測量抑菌3次，記錄數(shù)據(jù)。3-3抑菌圈直徑≤-7.0~9.+10.0~15.≥3.4方莪術(shù)油的質(zhì)量評外觀性35mL離心實體驗反5mL20個易被蚊蟲叮10人，A組為用藥組即被咬后涂抹復方莪術(shù)油，B組為空白對照組即被咬后涂抹蒸餾水，并請求他們配合在使用前用工具尺測出被蚊蟲叮咬腫了的部分的直徑大小以及使用復方莪術(shù)油1min、2min、3min實驗結(jié)莪術(shù)鑒別和檢查結(jié)莪術(shù)的性狀鑒莪術(shù)的定性鑒別結(jié)液顯藍紫色熒光，2mol/LNaOH浸出液顯淺黃色熒光，2mol/LHCL浸出顯4.1.3術(shù)紫外檢查結(jié)123450.45對莪術(shù)吸光度的規(guī)定，判斷廣西莪術(shù)為合格品。莪術(shù)油的及優(yōu)化結(jié)粒徑的優(yōu)化結(jié)表4-2度對提取率的影水平（目得油量提取率實驗結(jié)果如表4-2所示。實驗表明10目提取率為1.09%，20目提取率為1.44%，30目提取率為1.83%，40目提取率為1.78%，在實驗過程發(fā)30目篩。料液比的優(yōu)化結(jié)得油量提取率注：1:61g6倍的水量，1:8、1:10、1:121:8時的提取率為1.78%，1:10時的提取率為1.76%，1:121:10時，隨著料液比的增加，揮發(fā)油提取率增加的幅度并不明顯，故為節(jié)約資源，在優(yōu)化提取的過程中選擇加入8倍水量。加熱溫度的優(yōu)化結(jié)4-4溫度得油量提取率4-4100℃1.29%101.83%，120℃1.80%，130℃1.86%；經(jīng)過多次的調(diào)溫10℃120℃130℃100℃中優(yōu)先考慮提取溫度為以提取品質(zhì)良好、化學成分穩(wěn)定的莪術(shù)油。圖4-1棕黃色 圖4-2墨綠色 圖4-3黑褐色抑菌試驗結(jié)4-5抑菌圈直徑茶樹 迷迭 尤加 檸檬 -- ---- ---- --4-6抑菌圈直徑菌----------實驗表明：(1)所有的單方精油對金黃色葡萄球菌菌均起抑菌作用，其顯中度敏感作用，而歐薄荷精油和天竺葵精油顯低度敏感作用；(2)除了茶4-74-7莪術(shù)油含量

金黃色葡萄球 曲霉 抑菌圈平均直徑注：其他精油的固定配比參考了市場上幾種復方莪術(shù)油的成分含量以及文獻得4-14-2a為單方莪術(shù)精油，b6%，c8%,，d10%，e莪術(shù)12%。實驗表明：(1)復方莪術(shù)油的質(zhì)量評價結(jié)外觀性離心實體驗反4-9直徑大小ABSPSS224-104-10t側(cè)t側(cè)A組上藥前A組上藥1minA組上藥2min

95%置信

A3minAA在A組中，通過對比上藥前與上藥后3min叮咬部位的直徑大小發(fā)現(xiàn)P=0.02<0.05，原假設(shè)，認為使用復方莪術(shù)油前與使用后3min存在顯著差1min與上藥后3min叮咬部位的直徑大小發(fā)現(xiàn)原假設(shè)，認為使用復方莪術(shù)油1min后和3min后存在顯著差異；同理比較上藥后2min和3min叮咬部位的直徑大小發(fā)現(xiàn)P=0.003<0.05,認為使用復方莪術(shù)2min3min后存在顯著差異。實驗結(jié)經(jīng)實驗證明，提取莪術(shù)油的最佳條件為：粒徑大小過30目，料液比為1:8，110℃。10%的莪術(shù)精油配成的復方莪術(shù)油配比為橄欖油(80%)莪術(shù)油(10%)藿香油(2%)茶樹油(2%)歐薄荷油(2%)迷迭香油(1%)尤加利油(1%)天竺葵油(1%)檸檬草油(1%)所得的對金黃色葡萄球菌和曲霉菌的抑菌效果最佳，且穩(wěn)定性良好。由有效量的莪術(shù)油與其他精油復合搭配使用，具有行氣活血、消積止痛、活血化瘀、去腐生肌增強機體免疫的功能,,局部無刺激性,不影響皮膚正常生理功能。3min能有效防止紅腫部位的直徑大小增大，發(fā)揮明顯的藥效作用，具有消腫止實驗莪術(shù)油的及優(yōu)本實驗研究發(fā)現(xiàn)，不同批次、不同季節(jié)的生藥莪術(shù)，在同樣的提取條藥材的粒度、浸泡時間、料液比、蒸發(fā)量與蒸發(fā)速度等都會影響揮發(fā)在[24]研究中發(fā)現(xiàn)，正交試驗提取莪術(shù)油最佳的工藝條件為：度后發(fā)現(xiàn)，的研究中，其度幅較小，而加水量增幅相對較大，而本實抑菌實在[25]的研究中表明莪術(shù)油對大腸埃希菌也有一定的抑制作用，在經(jīng)對大腸埃希菌也沒有預想的實驗結(jié)果。造成上述的原因可能有二：(1)所接種油對大腸埃希菌有抑菌作用也無法體現(xiàn)出來；(2)在王影[22]的研究中發(fā)現(xiàn)大腸埃希菌極易產(chǎn)生耐藥性，可通過重復用藥或者突變、轉(zhuǎn)移產(chǎn)生。但本故推斷此菌種可能經(jīng)過多代繁衍后發(fā)生突變、產(chǎn)生耐藥性，使莪術(shù)油 參考文國家藥典.中民藥典(2015年版一部)[M].：中國醫(yī)藥科技,2015:274-275.朱凱.中藥廣西莪術(shù)的化學成分研究[D].沈陽藥學展曉日,,孟凡莉,等.莪術(shù)油藥學研究進展[J].杭州師范大學學報(自然科學版),2011,10(05):454-458.王德立.中藥莪術(shù)研究進展[J].農(nóng)業(yè)科學,2014,42(11):3240-王琰,王慕鄒.中藥莪術(shù)的質(zhì)量研究[C]藥物分析優(yōu)秀交流會李瑤,吳建華,.莪術(shù)油的研究進展[J].陜西中大學學報,2017,ShinobuGocho,J.Antibact,AntifungAgents.1988,19(7):329-StammatiA,BonsiP,ZuccoF,etal.Toxicityofselectedplantvolatilesinmicrobialandmammalianshort-termassays[J].Food&ChemicalToxicology,1999,37(8):813-823.,,劉明德,等.莪術(shù)對免疫性肝纖維化大鼠肝細胞膜功能的影[J].湖南中大學學報,2003,23(1):7-劉葆琴,劉雅伶.百種中藥不同溶媒浸出液的熒光鑒別[J].醫(yī)教研究,曾慶錢,蔡岳文,嚴振,等.廣藿香精油的殺蟲作用及其活性成分分析[J].資源與環(huán)境學報,2006,15(3):21-成珍.初榨橄欖油中酚醛抗菌、抗氧化和抗炎的研究進展[J].食品科技,吳鵬昌,.茶樹油的研究進展[J].中國藥業(yè),2009,18(3):61-,時顯蕓,.迷迭香研究進展[J].農(nóng)業(yè)科學,2010,951-陳彥樺.藍膠尤加利精油與茉莉花精油對五專登階運動率恢復之影響[J].實證自然醫(yī)學,2013,1(1):5-14.佟棽棽.迷迭香和檸檬草的揮發(fā)性成分及其抗抑郁、抑菌作用的研究交通大學,劉穎.薄荷有效物質(zhì)基礎(chǔ)研究[D].中大學,.香葉天竺葵精油的植物生物學及其藥理研究[D].華東師范大學.金黃色葡萄球菌及其腸毒素研究進展[J].中國衛(wèi)生檢驗雜志,,王紫婷,徐瑗聰,等.[J].生物技術(shù)通報,2016,32(11):80-王影,李欣南,韓鐫竹,等.大腸桿菌耐藥性產(chǎn)生與機制研究現(xiàn)狀[J].現(xiàn)代畜牧獸醫(yī),2016(1):32-37..介紹幾種曲霉菌[J].植物雜志,1986(4):1-4+40-曾秋瓊,,張征,等.曲霉病診療進展[J].皮膚科學通報,,,于萍,等.莪術(shù)細粉提取揮發(fā)油的工藝研究[J].時珍國醫(yī)國藥,2007,18(6):1437-1438.,鄭彩娟,陳光英,等.[J].中國實驗方劑學雜志,2015,21(20):67-植物精油的研究進、了的研究發(fā)現(xiàn)揮發(fā)油具有抗過敏活性酶抑制活性、抗炎活性、抗突變和抗癌活，抗微生物活性、抗活性、驅(qū)蟲活性抗氧化活性及中樞神經(jīng)等諸多藥理活性和用途[1]如篙子油丁香T具有抑制作用;[2淋巴循環(huán)動靜脈循環(huán)系統(tǒng)腦脊髓神經(jīng)組織臟腑及內(nèi)外腺及心理健康均有醫(yī)療功效[3廣泛應(yīng)用于行業(yè)比如大家都比較熟精油多有適宜的香味,作為添香劑中的香料[4或有效成分添加應(yīng)用于日用品和化妝品種，最常見的就是香水、花露水等;也會利用其揮發(fā)性強的特點通過鼻腔呼吸道皮膚等進入達到舒緩精神消腫祛痛的功效醫(yī)學之父希波克拉底曾在古雅典時讓民眾在街。我國國地大物博、植物藥種類繁多，植物藥精油資源相當豐富，為植物精油的開發(fā)利用提供了有利的條件。、[6]等人對此還創(chuàng)新性地提出了利用中藥配伍的原理對具有這一類作用的精油的提取方精油的抑菌研究概。、其能夠開發(fā)層為殺菌藥劑等人研究了植物精油的熏蒸殺。、抑菌實驗用于測定抑菌劑在體外抑制微生物生長的效能雖然已的此現(xiàn)在還沒有一個的實驗操作標準。目前,精油體外抑菌的實驗方法大[9]瓊脂擴散法就是利用化合物可以在瓊脂中擴散,使化合物擴散到的地方濾紙片牛津杯瓊脂塊植物精油的發(fā)展前少工作,今后植物精油的發(fā)展不應(yīng)僅僅局限于傳統(tǒng)的、食品、日植物精油的組分、結(jié)構(gòu)和功能日趨化,它必將會在、品、病害成分被認為是安全的,但是也有研究,個別成分具有微量的毒性或刺激性。例如長時間使用某些植物精油或其成分,可能會過敏性皮炎。一些常見的精油成分,如香芹酚和百里香酚,在動物實驗中沒有副作用,但總莪術(shù)藥用價值廣泛，目前已有不少莪術(shù)油劑型用于行業(yè)中，如：莪上，一些化合物對的影響存在經(jīng)時性問題。利用中藥配伍原理復配也是也是目前的一個研究熱點。本課題順應(yīng)人們的消費潮流，本著綠色環(huán)保參考文[1]滑艷,鄧雁如,汪漢卿.各種揮發(fā)油的藥理活性及在醫(yī)學方面的應(yīng)用[J].天然產(chǎn)物研究與開發(fā),2003,15(