上課實驗 固定化酶制劑課件

實驗6a-淀粉酶的固定化及1．制作固定化α-淀粉酶。2．進行淀粉水解的測定?；疽螅喊l(fā)展要求：通過此實驗探討固定化酶的應(yīng)用價值。1、酶制劑的概念和種類（一）酶制劑含有酶的制品①定義：多酶片、加酶洗衣粉中的蛋白酶和脂肪酶②種類：A、液體酶制劑治療某些胃病的胃蛋白酶液B、固體酶制劑

1、通常對強酸、強堿、高溫和有機溶劑等條件非常敏感，容易失活；

2、溶液中的酶很難回收，不能被再次利用，提高了生產(chǎn)成本；

3、反應(yīng)后會混在產(chǎn)物中，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量。(難分離）3、酶制劑的缺點1、固定化酶技術(shù)。即將酶固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)（如固定在不溶于水的載體上）。2、固定化酶技術(shù)的優(yōu)點：（1）使酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離；酶不溶解在催化反應(yīng)的溶液中，產(chǎn)物更易純化（2）固定在載體上的酶可以被反復(fù)利用?？奢^長時間地貯存和使用。（二）固定化酶固定化酶：就是將水溶性的酶用物理或化學(xué)的方法固定在某種介質(zhì)上，使之成為不溶于水而又有酶活性的制劑。介質(zhì)本身不溶于水。固定化的方法：吸附法、交聯(lián)法、包埋法、共價偶連法等3.固定化酶方法吸附法酶蛋白分子吸附在載體交聯(lián)法交聯(lián)法是指通過雙功能試劑，將酶和酶聯(lián)結(jié)成網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)的方法。結(jié)合部位也不是酶的活性中心，也不是維持其空間結(jié)構(gòu)的必需基團。實驗原理：本實驗是用吸附法將α-淀粉酶固定在石英砂上，一定濃度的淀粉溶液經(jīng)過固定化酶柱后，可使淀粉水解成糊精，用淀粉指示劑溶液測試，流出物呈紅色表明水解產(chǎn)物糊精生成淀粉α-淀粉酶糊精β淀粉酶葡萄糖糖化淀粉酶麥芽糖這里使用的是枯草桿菌的α-淀粉酶，其作用的最適溫度為50~75℃；最適PH為5.5~7.5遇碘顯藍(lán)色遇碘顯紅色遇碘不顯色（三）實驗固定化裝置反應(yīng)柱固定化酶氣門心夾子5ml注射器步驟:1.將灌注了固定化酶的注射器放在注射器架上,用滴管滴加淀粉溶液,使淀粉溶液以0.3ml/min的流速過柱.在流出5ml后接收0.5ml流出液,加入1~2滴KI-I2溶液,觀察顏色。用水稀釋1倍后再觀察顏色。反應(yīng)柱固定化酶氣門心夾子5ml注射器淀粉實驗結(jié)果12341、2mL水+1~2滴KI-I2溶液、2mL淀粉液+1~2滴KI-I2溶液、2mL淀粉濾液+1~2滴KI-I2溶液、2mL淀粉濾液+1~2滴KI-I2溶液+稀釋1倍2.實驗后,用10倍柱體積的蒸餾水洗滌此柱,放置在4℃冰箱中,幾天后再重復(fù)上述實驗,看是否有相同的結(jié)果.課后練習(xí)1.如何證明洗滌固定化酶柱的流出液中沒有淀粉酶?2.耐高溫的淀粉酶有哪些可能的用途?可在試管中加入1ml可溶性淀粉，再加幾滴淀粉酶柱流出液，保溫幾分鐘后用碘液檢驗。如