腫瘤標志物檢測概要課件

1、 腫瘤標志物檢測 2022/10/151腫瘤標記物 腫瘤標志物檢測 2022/近二十多年來，為了提高對腫瘤的早期檢測、鑒別診斷、療效觀察以及預(yù)后判斷，人們從腫瘤細胞的化學(xué)特性、細胞病理、免疫反應(yīng)和基因表達產(chǎn)物等諸多方面尋找各種特異性強、靈敏度高的腫瘤標志物，并取得了較快的進展。腫瘤標志物的研究對腫瘤的診斷有極其重要的意義，推動了臨床實驗室的檢測水平的提高和發(fā)展。2022/10/152腫瘤標記物 近二十多年來，為了提高對腫瘤的早期檢測、鑒別診斷、療效觀察以第一節(jié)概述 在世界上首先報告腫瘤標志物的是1846年由Bence-Jones發(fā)現(xiàn)在尿中有一種隨溫度變化而改變成凝溶狀態(tài)的蛋白質(zhì)，后經(jīng)證實這是患

2、有多發(fā)性骨髓瘤病人的漿細胞所產(chǎn)生，由尿液排泄的蛋白質(zhì)，并被命名為B-J蛋白。 2022/10/153腫瘤標記物 第一節(jié)概述 在世界上首先報告腫瘤標志物的是1846年由Be腫瘤標志物的定義腫瘤標志物（tumor marker）是指在腫瘤發(fā)生和增殖過程中，由腫瘤細胞本身合成、釋放或者是由機體對腫瘤細胞反應(yīng)而產(chǎn)生的一類物質(zhì)。存在于血液、細胞、組織或體液中。2022/10/154腫瘤標記物 腫瘤標志物的定義腫瘤標志物（tumor marker）是一 腫瘤標志物的類型分類命名尚未統(tǒng)一按本質(zhì)分為：蛋白質(zhì)類；糖類；脂類；酶類；激素類和多胺類等。按性質(zhì)： 腫瘤相關(guān)標志物：正常分化抗原、MHC、病毒抗原、癌基因

3、產(chǎn)物等。 腫瘤標志物：胚胎性標志物、激素、酶和糖蛋白等。2022/10/155腫瘤標記物 一 腫瘤標志物的類型分類命名尚未統(tǒng)一2022/10/115按存在部位： 細胞腫瘤標志物：位于細胞中的物質(zhì)或抗原，如激素受體、生長因子受體、白血病表型、分子基因等。 體液腫瘤標志物：病理情況下，在血液、尿液或其他體液中由癌細胞分泌或脫落或是宿主對腫瘤細胞反應(yīng)而產(chǎn)生的物質(zhì)。 2022/10/156腫瘤標記物 按存在部位：2022/10/116腫瘤標記物 只是一種腫瘤所產(chǎn)生的特異性物質(zhì)，稱之為該腫瘤的特異性標志物。例如前列腺特異性抗原（PSA）就是前列腺腫瘤所產(chǎn)生的特異性標志物質(zhì)，只有患前列腺癌時，PSA才會顯

4、著性升高。 2022/10/157腫瘤標記物 只是一種腫瘤所產(chǎn)生的特異性物質(zhì)，稱之為該腫瘤的特異性標志物。二.腫瘤標志物的標準和應(yīng)用價值“理想”的腫瘤標志物1.特異性100%2.靈敏度100%3.器官特異性4.與腫瘤大小或分期有關(guān)5.能進行療效監(jiān)測6.與預(yù)后有關(guān)7.可靠的預(yù)測價值2022/10/158腫瘤標記物 二.腫瘤標志物的標準和應(yīng)用價值“理想”的腫瘤標志物2022/應(yīng)用價值1 .普查：滿足1，2兩點，該TM可用于普查?？紤]原則： 1）應(yīng)十分清楚該腫瘤的發(fā)病率 2）該TM應(yīng)能檢測早期腫瘤 3）該腫瘤的早期治療比晚期治療更經(jīng)濟有效 4）測定方法的靈敏度、特異性和重復(fù)性良好 5）普查所需費用能

5、被接受2022/10/159腫瘤標記物 應(yīng)用價值1 .普查：滿足1，2兩點，該TM可用于普查。2022.定位：TM基本不能定位。3.確診：一般不能單憑TM確診。本周蛋白、AFP、HCG等有助于確診。4.分期：多數(shù)TM與分期有關(guān)，濃度與腫瘤大小或分期有關(guān)聯(lián)。但不能具此判斷。2022/10/1510腫瘤標記物 2.定位：TM基本不能定位。2022/10/1110腫瘤標記5.療效監(jiān)測：明確手術(shù)、放療或藥物治療是否有效1）濃度下降至正常水平：去除或緩解2）濃度下降仍持續(xù)在正常水平以上或短期下降到正常水平又重新增高：殘留或轉(zhuǎn)移3）濃度下降到正常水平一段時間又重新增加：復(fù)發(fā)或轉(zhuǎn)移6.預(yù)后：如HCG和AFP

6、 與睪丸癌；CEA與結(jié)腸癌； CA125與卵巢癌。2022/10/1511腫瘤標記物 5.療效監(jiān)測：明確手術(shù)、放療或藥物治療是否有效1）濃度下降至7.預(yù)測：預(yù)測個體發(fā)生癌的危險性及社會人群所處的危險程度和預(yù)防重點。 臨界值：腫瘤標志物臨床評價的生命線。按照臨床流行病學(xué)原理和方法來確定臨界值和臨床診斷價值。是根據(jù)金標準確診為患者和正常對照組兩組人群來確定。 正常參考值：來自一組對照人群。 2022/10/1512腫瘤標記物 7.預(yù)測：預(yù)測個體發(fā)生癌的危險性及社會人群所處的危險程度和預(yù)三.腫瘤標志物測定的影響因素1.體內(nèi)因素：肝腎功能異常和膽汁淤滯等：TM濃度增高。風濕病時：CA19-9濃度可增高

7、。強烈的治療作用（手術(shù)、放化療）；連續(xù)的細胞死亡；腫瘤部位供血障礙等：導(dǎo)致TM濃度變化。某些藥物影響TM濃度：抗雄激素治療-PSA多次直腸檢查：PSA升高。2022/10/1513腫瘤標記物 三.腫瘤標志物測定的影響因素1.體內(nèi)因素：2022/10/12.體外因素血液稀釋，陽性率有局限性，直接收集腫瘤組織或其附近組織分泌的體液進行測定，可提高靈敏度和特異性。 如胰液CA19-9,CA72-4，胰腺癌 乳汁CEA,CA15-3 ， 乳腺癌樣本的放置：微生物污染：抗原濃度過高；不同試劑盒：嗜異性抗體2022/10/1514腫瘤標記物 2.體外因素2022/10/1114腫瘤標記物 3.引起假陽性的

8、因素良性疾病時，如炎癥性疾病會使一些TM表達增加。生理變化：如妊娠時，AFP，CA125，HCG可升高；月經(jīng)時，CA125可升高。腫瘤手術(shù)、化療和放療過程中，由于腫瘤組織受到破壞或腫瘤壞死時某些腫瘤標志產(chǎn)生增加，影響測定。2022/10/1515腫瘤標記物 3.引起假陽性的因素2022/10/1115腫瘤標記物 4.引起假陰性的因素產(chǎn)生TM的腫瘤細胞數(shù)目少。細胞或細胞表面被封閉?？贵w與TM形成免疫復(fù)合物。腫瘤組織本身血循環(huán)差，TM不能分泌到外周血中。血標本的采集或儲存不當2022/10/1516腫瘤標記物 4.引起假陰性的因素2022/10/1116腫瘤標記物 四.TM的合理應(yīng)用及注意事項1.

9、動態(tài)記錄TM的濃度變化：2.定期測定TM濃度；3.合理選用TM：4.TM組合測定： 順序檢測（series testing)： 平列檢測 (parallel testing)：2022/10/1517腫瘤標記物 四.TM的合理應(yīng)用及注意事項1.動態(tài)記錄TM的濃度變化：20五.常用TM的檢測和臨床應(yīng)用2022/10/1518腫瘤標記物 五.常用TM的檢測和臨床應(yīng)用2022/10/1118腫瘤標記1.甲胎蛋白測定（AFP）甲胎蛋白（a-fetoprotein,AFP）是胎兒發(fā)育早期產(chǎn)生的一種血清糖蛋白。正常情況下僅存在于胎兒血清中，出生后幾周內(nèi)消失，正常人血清為陰性。目前臨床常用的檢測方法是ELI

10、SA法，放免法，化學(xué)發(fā)光法等。正常值 200ug/L,甚至超過400ug/L時應(yīng)考慮肝癌診斷。 注意事項 正常孕婦AFP也可陽性，肝癌病人也有1520AFP含量在正常范圍。要結(jié)合臨床及其他檢查作出正確判斷。2022/10/1522腫瘤標記物 AFP檢測也可用于肝癌高危人群隨訪監(jiān)測。對于慢性乙型肝 2.癌胚抗原（cea）（carcinoembryonic Antigen ） 癌胚抗原是一種胚胎性糖蛋白。胚胎期主要存在于胎兒的腸管、胰腺和肝臟內(nèi)。出生后正常組織內(nèi)含量很少，主要分布于細胞微絨毛的表面并呈特定的極性分布規(guī)律。當細胞惡變時，組織內(nèi)CEA含量增加，極性分布規(guī)律消失，并分泌入血清及體液。目前

11、臨床主要使用抗CEA單克隆或多克隆抗體建立的酶聯(lián)免疫法和放射免疫法，化學(xué)發(fā)光法等進行血清檢測。2022/10/1523腫瘤標記物 2.癌胚抗原（cea）（carcinoembry正常值 ELISA法：3.20.77g/L. 5g/L為異常，吸煙可使CEA值增加，45g/L. 放免法：一般20g/L為異常 電化學(xué)發(fā)光法：10ng/ml2022/10/1524腫瘤標記物 正常值 ELISA法：3.20.77g/L. 臨床意義 CEA升高主要見于：結(jié)腸癌、直腸癌、肺癌、乳腺癌、胃癌；骨肉瘤、甲狀腺髓樣癌、肝臟腫瘤等CEA濃度也可升高。2022/10/1525腫瘤標記物 臨床意義 CEA升高主要見于：

12、結(jié)腸癌、直腸癌、肺癌、乳CEA濃度與腫瘤細胞的分化程度有關(guān)，分化差者濃度低，甚至在正常范圍，分化程度高的則濃度高。判斷療效和預(yù)后。術(shù)前CEA濃度較高，術(shù)后CEA濃度沒有降低，提示有殘存腫瘤。手術(shù)6周后，定期或連續(xù)測定，CEA濃度緩慢上升者，提示有局部復(fù)發(fā)，快速上升或達到很高水平，常見有肝或胃轉(zhuǎn)移發(fā)生。2022/10/1526腫瘤標記物 CEA濃度與腫瘤細胞的分化程度有關(guān)，分化差者濃度低，甚至在正注意事項 血清中CEA的濃度一般不用于篩選懷疑腫瘤的無癥狀病人，CEA測定在高危人群中的診斷效果尚不確定。CEA含量因測定方法而不同，監(jiān)測病人應(yīng)用同一種方法。2022/10/1527腫瘤標記物 注意事項

13、 血清中CEA的濃度一般不用于篩選懷疑腫瘤的 3.CA 19-9 （Carbohydrate antigen 19-9 CA 19-9). CA199是一種單唾液酸的神經(jīng)節(jié)苷脂，在血液中以唾液酸粘液糖蛋白的形式存在。檢測方法主要有固相放免和夾心ELISA方法,化學(xué)發(fā)光法等。正常值 0-37ku/L.2022/10/1528腫瘤標記物 3.CA 19-9 （Carbohydrate ant臨床意義 對胰腺癌、膽管癌、膽囊癌的診斷有較大的價值，尤其胰腺癌患者血清CA 19-9 濃度增高明顯，并隨病情發(fā)展而上升。胃癌、結(jié)腸癌、直腸癌、肝癌患者血清CA 19-9 濃度也可升高。血清CA 19-9濃度升

14、高有時也可見于卵巢粘液性腫瘤、宮體腺瘤、宮頸管腺瘤、乳腺癌肝轉(zhuǎn)移和胰腺癌肝轉(zhuǎn)移患者。某些良性疾病如膽石癥、慢性胰腺炎、肝硬化等也可見CA 19-9 升高。2022/10/1529腫瘤標記物 臨床意義 對胰腺癌、膽管癌、膽囊癌的診斷有較大的價值，注意事項 CA 19-9 對胰腺癌早期診斷意義不大。用于癌癥篩選，特異性和敏感性都不足。臨床可聯(lián)合應(yīng)用CEA、AFP，提高診斷價值。2022/10/1530腫瘤標記物 注意事項 CA 19-9 對胰腺癌早期診斷意義不大。用 4.神經(jīng)元特異性烯醇化酶測定（Neuron specific enolase，NSE） NSE是烯醇酶的同工酶，僅存在于神經(jīng)元和神經(jīng)

15、內(nèi)分泌細胞內(nèi)，參與糖原酵解，其作用是使二磷酸甘油酸向烯醇磷酸丙酮酸轉(zhuǎn)化。 檢測方法有固相夾心ELISA，放射免疫測定法,化學(xué)發(fā)光法等。正常值 12.5ng/ml（12.5ug/L）。 0-15.2ug/L（電化學(xué)發(fā)光法）2022/10/1531腫瘤標記物 4.神經(jīng)元特異性烯醇化酶測定（Neuron speci 臨床意義 小細胞肺癌患者NSE水平明顯高于腺癌、鱗狀上皮癌和大細胞肺癌，并與癌腫的轉(zhuǎn)移及病期相關(guān)。當手術(shù)切除或化療有效時，NSE濃度可降低至正常水平，復(fù)發(fā)時血清NSE升高較臨床檢查確診早12周。檢測及隨查NSE對小細胞肺癌的診斷、病情判斷、療效評價及監(jiān)測復(fù)發(fā)有一定意義。2022/10/1

16、532腫瘤標記物 臨床意義 小細胞肺癌患者NSE水平明顯高于腺癌、鱗 神經(jīng)元細胞瘤患者NSE濃度增高，兒童患者增高更為顯著，增高程度可作為預(yù)后判斷的指標。神經(jīng)節(jié)細胞瘤患者NSE增高多不明顯。大多數(shù)神經(jīng)膠質(zhì)瘤病人NSE水平基本正常。但神經(jīng)元非特異性烯醇酯酶（NNE）升高并有助于早期診斷。 神經(jīng)內(nèi)分泌細胞腫瘤，如嗜鉻細胞瘤、甲狀腺髓樣癌、胰島細胞瘤、燕麥細胞瘤等患者NSE濃度也可增高。檢測NSE可協(xié)助診斷和估計預(yù)后。 2022/10/1533腫瘤標記物 神經(jīng)元細胞瘤患者NSE濃度增高，兒注意事項 血液采集后在1小時內(nèi)離心；不要溶血；不能放置時間過長。血清分離后立即20保存待測。避免反復(fù)凍融。濃度過

17、高應(yīng)稀釋樣品后重新測定。應(yīng)與CEA等其他指標聯(lián)合應(yīng)用。2022/10/1534腫瘤標記物 注意事項 2022/10/1134腫瘤標記物 5.CA125 測定CA125是一種糖蛋白，存在于卵巢腫瘤的上皮細胞內(nèi)，是一種廣譜的標志物。正常值：0-35U/ml臨床意義：卵巢癌升高明顯，輔助診斷，療效觀察，預(yù)后判斷。 其他腫瘤也可升高。如宮頸癌；乳癌；胰腺癌；肝癌；肺癌等。 部分良性腫瘤也可升高。如子宮肌瘤。2022/10/1535腫瘤標記物 5.CA125 測定CA125是一種糖蛋白，存在于卵巢腫瘤的6.CA15-3測定CA15-3是乳腺細胞上皮表面糖蛋白的變異體，輔助診斷乳腺癌。正常值：0-30ku

18、/L臨床意義： 1）乳腺癌時明顯升高，與病理分期、疾病發(fā)展程度相關(guān)，與CEA聯(lián)合檢測可提高診斷靈敏度。 2）在轉(zhuǎn)移性卵巢癌 、結(jié)腸癌、支氣管癌時，血清水平也可升高。2022/10/1536腫瘤標記物 6.CA15-3測定CA15-3是乳腺細胞上皮表面糖蛋白的變7.CYFRA21-1測定CYFRA21-1又稱為細胞角蛋白19。細胞角蛋白是細胞體的中間絲，分為20多種不同類型。正常值：0.1-3.3ng/ml臨床意義：主要用于非小細胞肺癌的診斷、治療監(jiān)測，也見于支氣管癌等。高水平CYFRA21-1提示病情發(fā)展或預(yù)后差。水平正常不能完全排除診斷。與CEA聯(lián)合檢測可提高肺癌的檢出率。2022/10/1

19、537腫瘤標記物 7.CYFRA21-1測定CYFRA21-1又稱為細胞角蛋白8.前列腺特異性抗原（PSA）測定PSA是目前診斷前列腺癌最敏感的指標。PSA 是由前列腺上皮細胞產(chǎn)生的一種大分子糖蛋白，具有極高的器官特異性。正常值：0-4ng/ml，隨年齡而增長。50歲 70歲 7.7ng/ml臨床意義：用于前列腺癌的早期診斷、治療監(jiān)測及預(yù)測復(fù)發(fā)。良性前列腺瘤、前列腺肥大、急性前列腺炎時，PSA也可升高。2022/10/1538腫瘤標記物 8.前列腺特異性抗原（PSA）測定PSA是目前診斷前列腺癌最9.CA72-4測定CA72-4是一種腫瘤相關(guān)糖蛋白抗原，是胃腸道和卵巢腫瘤的標志。正常值：0-5

20、.3u/ml臨床意義：主要見于卵巢癌、胃癌、大腸癌、乳腺癌、胰腺癌等。常與CEA和CA19-9同時檢測。與CA125聯(lián)合檢測，可提高卵巢癌的檢出率。2022/10/1539腫瘤標記物 9.CA72-4測定CA72-4是一種腫瘤相關(guān)糖蛋白抗原，是10.鐵蛋白測定(Ferritin) 鐵蛋白為貯存及利用鐵的蛋白質(zhì)，主要貯存于網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)及骨髓中。人鐵蛋白微量存在于血清中。檢測方法為雙抗體夾心ELISA和放射免疫法。正常值 不同地區(qū)，不同群體差異較大，男性高于女性，成人高于兒童。 成年男性20200ug/L 女性17200ug/L 小于20ug/L提示缺鐵性貧血，大于300ug/L提示鐵負荷過度。

21、電化學(xué)發(fā)光法：13-400ug/L2022/10/1540腫瘤標記物 10.鐵蛋白測定(Ferritin) 鐵蛋白為貯存及利用臨床意義1.血清鐵蛋白濃度是診斷缺鐵性貧血及鐵負荷過度的有效指標。鐵蛋白減低可見于缺鐵性貧血及營養(yǎng)不良等。2.惡性腫瘤（消化道腫瘤 、肺癌等）及白血病等血清鐵蛋白可隨病情發(fā)展而升高，是腫瘤標志物之一。癌性胸、腹水中鐵蛋白亦見升高，可作為輔助診斷指標。3.嚴重感染性疾病及慢性，遷延性肝病患者血清鐵蛋白高于正常。4.成人stills病可明顯升高。2022/10/1541腫瘤標記物 臨床意義1.血清鐵蛋白濃度是診斷缺鐵性貧血及鐵負荷過度注意事項 依方法、試劑盒不同，正常參考值

22、不同。結(jié)果評價應(yīng)動態(tài)觀察，并結(jié)合臨床及其他指標作出正確判斷。2022/10/1542腫瘤標記物 注意事項 依方法、試劑盒不同，正常參考值不同。結(jié)果評價11.2微球蛋白測定（2M）2微球蛋白是一種小分子量的蛋白質(zhì)，存在于有核細胞的表面，是HLAA、B、C抗原的輕鏈，可以控制細胞表面抗原的表達并可能控制其生物合成。測定2微球蛋白有多種方法，包括ELISA、放免、速率散射比濁法等。其基本原理是應(yīng)用抗2微球蛋白抗體與樣本中的2微球蛋白反應(yīng)，先后加入酶標或同位素標記抗微球蛋白抗體，測定反應(yīng)產(chǎn)物，計算樣本中含量。正常值 血清0.9-2.2mg/L, 尿均值98ug/L。2022/10/1543腫瘤標記物

23、11.2微球蛋白測定（2M）2微球蛋白是一種小分臨床意義 1、惡性腫瘤的診斷：如原發(fā)性肝癌、肺癌、胃癌、大腸癌等實質(zhì)性腫瘤，某些B細胞型惡性腫瘤如骨髓瘤，非何杰金氏淋巴瘤，慢性淋巴細胞性白血病等，血清 2M水平增加。2022/10/1544腫瘤標記物 臨床意義 1、惡性腫瘤的診斷：如原發(fā)性肝癌、肺癌、胃癌2、腎功能評價：在沒有惡性腫瘤或免疫性疾病的病人中，血清2M與血清肌酐呈正相關(guān)。血清和尿2M的測定對評定腎移植后患者的腎功能狀況有幫助。而且測定血清2M對估價腎功能比測定血清肌酐更為靈敏。如果血清肌酐濃度正常而血清2M升高，則提示有潛在性腎損害。腎小管機能障礙所致的尿液2M升高，可見于重金屬中

24、毒以及藥物性損害等。如用慶大霉素、多粘菌素后，尿液2M明顯升高時，應(yīng)考慮停藥或改用其它藥物。急慢性腎盂腎炎時，尿2M升高，而單純性膀胱炎時尿2M正常，因此可作為上、下尿路感染的鑒別診斷指標。2022/10/1545腫瘤標記物 2、腎功能評價：在沒有惡性腫瘤或免疫性疾病的病人中，血清23、免疫性疾?。鹤陨砻庖咝约膊∪鏢LE、溶血性貧血等，血清2M可升高。注意事項 因測定方法不同，2M正常值可有不同。標本采集后應(yīng)放4保存或20保存，隨年齡增加，2M會增長。2022/10/1546腫瘤標記物 3、免疫性疾?。鹤陨砻庖咝约膊∪鏢LE、溶血性貧血等，血清其他TM：胎盤堿性磷酸酶（placental alkaline phosphatase ,