有機分析實驗講義

1、實驗一水楊酸的紫外光譜分析一實驗?zāi)康?、熟悉紫外-可見分光光度計的使用方法。2、掌握使用經(jīng)驗規(guī)則計算有機化合物的最大吸收波長。3、掌握溶劑極性最有機化合物紫外光譜圖的影響。二實驗原理具有不飽和共軛結(jié)構(gòu)的有機化合物，在紫外光區(qū)（200400nm）有特征吸收， 可為有機化合物的結(jié)構(gòu)解析提供信息。水楊酸又名鄰羥基苯甲酸，結(jié)構(gòu)式為該化合物在紫外光區(qū)有吸收，可用紫外可見分光光度計測定該化合物的最大吸收 波長，并與紫外光譜入max的經(jīng)驗計算值相比較，分析水楊酸的紫外光譜圖。溶劑的極性對紫外光譜吸收峰波長和吸收強度有一定的影響。溶劑極性增加，使n 一n *躍遷吸收帶紅移；使nn *躍遷吸收帶藍移。三儀器試劑

2、1儀器：GBC916型紫外分光光度計；石英比色皿（1cm） 2只；10ml比色管3 只；100ml容量瓶1只；1ml吸量管1只。2試劑：水楊酸；，無水乙醇；蒸餾水；正己烷。四實驗操作：1、水楊酸紫外吸收光譜的繪制稱取約0.0010g水楊酸，加少量水溶解后加入100ml的容量瓶中，用蒸餾水 稀釋至刻度。再移取1ml水楊酸至10ml的比色管中，用蒸餾水稀釋到刻度。將 試樣倒入1cm的石英比色皿中，以蒸餾水作參比，在220nm350nm波長范圍內(nèi) 進行掃描。繪制紫外吸收光譜圖，確定吸收峰波長及其吸收帶類型。2、溶劑極性對紫外光譜的影響在2支10ml的比色管中，各加入0.0010g的水楊酸（約1粒），

3、分別用乙醇 和正己烷稀釋至刻度，搖勻。用1cm的石英比色皿，以各自的溶劑作參比，在 220nm350nm波長范圍內(nèi)進行掃描。繪制各自的吸收光譜，比較它們各吸收帶 入max的變化，并加以解釋。五數(shù)據(jù)處理1、繪制水楊酸的紫外吸收光譜圖，確定其吸收峰波長及吸收帶類型。2、用紫外光譜的經(jīng)驗公式計算水楊酸的入max，并把計算值與實驗值相比較。3、比較不同極性溶劑，水楊酸紫外光譜吸收帶入max的變化，并加以解釋。實驗二紫外分光光度法測定維生素C的含量一實驗?zāi)康?、學(xué)習(xí)759S紫外可見分光光度計的使用方法。2、學(xué)習(xí)紫外光譜區(qū)測定有機化合物組分含量。二實驗原理維生素C又稱抗壞血酸，是一種含不飽和烯酯結(jié)構(gòu)的酸性

4、多羥基化合物；分 子式為C6H8O6 ；分子量為176.13 ；結(jié)構(gòu)式為維生素C具有不飽和共軛結(jié)構(gòu)，在紫外-可見光區(qū)有吸收，紫外吸收最大波長在 245nm附近。維生素C呈無色無臭的片狀品體，易溶于水,不溶于脂溶劑.在酸性環(huán) 境中穩(wěn)定，遇空氣中氧、熱、光、堿性物質(zhì),特別是有氧化酶及痕量銅、鐵等金屬 離子存在時，具有抗氧化作用，是知名度最高的營養(yǎng)素。三儀器試劑1儀器：紫外分光光度計（型號759S）,石英比色皿2只；100ml容量瓶1只； 50ml容量瓶7只；25 ml容量瓶或具比色管1只；10ml吸量管1只；10ml移液 管1支。2試劑：維生素C （抗壞血酸）；10%的鹽酸四實驗步驟:1標準溶液的

5、配制 用分析天平準確稱取0.0010g的抗壞血酸，用少量水溶解 后，加2 ml 10%的鹽酸，在用蒸餾水定容至100ml，配成濃度為100ug/ml的標 準溶液。再分別吸取0、2、4、6、8、10 ml維生素C標準溶液（100ug/ml）于6 個50ml的容量瓶中，用水稀釋成一系列不同濃度的標準溶液（020ug/ml）。2樣品的制備將果蔬樣品洗凈、擦十、切碎。稱取5.00g于50ml的小燒杯中，加入1滴10%的鹽酸，勻漿。轉(zhuǎn)于到25ml的容量瓶（具比色管）中，用水 稀釋到刻度。若提取液澄清，可直接取樣測定，若渾濁，用離心機來消除。取 0.5ml提取液于50ml的容量瓶中，加入2ml 10%的鹽

6、酸，用水稀釋到刻度。3吸收曲線的繪制用某一中間濃度的標準溶液，用蒸餾水作參比，于210300nm范圍內(nèi)測定吸光度，制作吸收曲線，從曲線上查得最大吸收波長（245nm附近）。波長間隔在210nm300nm范圍內(nèi)每隔5nm測定一個數(shù)值，在最大吸收波長5nm范圍內(nèi)每隔1nm測定一個數(shù)值。4標準曲線的繪制于最大吸收波長處分別測定標準溶液的吸光度，然后以濃度 為橫坐標，相應(yīng)的吸光度為縱坐標繪制標準曲線。5樣品的測定于最大吸收波長處測定試樣的吸光度，從標準曲線上查出試樣 的濃度，平行測定兩次。實驗數(shù)據(jù)記錄表格一吸收曲線的繪制標準溶液的濃度： X/nmAX/nmAX/nmA最大吸收波長 Amax= nm二試樣的含量測定1標準曲線的繪制：測量波長：；標準溶液的原始濃度：溶液代號012345吸取體積/ml濃度/ug/mlA2未知物含量測定平行測定次數(shù) 吸光度，A試樣濃度，ug/