有機(jī)分析實(shí)驗(yàn)講義

1、實(shí)驗(yàn)一水楊酸的紫外光譜分析一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、熟悉紫外-可見(jiàn)分光光度計(jì)的使用方法。2、掌握使用經(jīng)驗(yàn)規(guī)則計(jì)算有機(jī)化合物的最大吸收波長(zhǎng)。3、掌握溶劑極性最有機(jī)化合物紫外光譜圖的影響。二實(shí)驗(yàn)原理具有不飽和共軛結(jié)構(gòu)的有機(jī)化合物，在紫外光區(qū)（200400nm）有特征吸收， 可為有機(jī)化合物的結(jié)構(gòu)解析提供信息。水楊酸又名鄰羥基苯甲酸，結(jié)構(gòu)式為該化合物在紫外光區(qū)有吸收，可用紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)測(cè)定該化合物的最大吸收 波長(zhǎng)，并與紫外光譜入max的經(jīng)驗(yàn)計(jì)算值相比較，分析水楊酸的紫外光譜圖。溶劑的極性對(duì)紫外光譜吸收峰波長(zhǎng)和吸收強(qiáng)度有一定的影響。溶劑極性增加，使n 一n *躍遷吸收帶紅移；使nn *躍遷吸收帶藍(lán)移。三儀器試劑

2、1儀器：GBC916型紫外分光光度計(jì)；石英比色皿（1cm） 2只；10ml比色管3 只；100ml容量瓶1只；1ml吸量管1只。2試劑：水楊酸；，無(wú)水乙醇；蒸餾水；正己烷。四實(shí)驗(yàn)操作：1、水楊酸紫外吸收光譜的繪制稱(chēng)取約0.0010g水楊酸，加少量水溶解后加入100ml的容量瓶中，用蒸餾水 稀釋至刻度。再移取1ml水楊酸至10ml的比色管中，用蒸餾水稀釋到刻度。將 試樣倒入1cm的石英比色皿中，以蒸餾水作參比，在220nm350nm波長(zhǎng)范圍內(nèi) 進(jìn)行掃描。繪制紫外吸收光譜圖，確定吸收峰波長(zhǎng)及其吸收帶類(lèi)型。2、溶劑極性對(duì)紫外光譜的影響在2支10ml的比色管中，各加入0.0010g的水楊酸（約1粒），

3、分別用乙醇 和正己烷稀釋至刻度，搖勻。用1cm的石英比色皿，以各自的溶劑作參比，在 220nm350nm波長(zhǎng)范圍內(nèi)進(jìn)行掃描。繪制各自的吸收光譜，比較它們各吸收帶 入max的變化，并加以解釋。五數(shù)據(jù)處理1、繪制水楊酸的紫外吸收光譜圖，確定其吸收峰波長(zhǎng)及吸收帶類(lèi)型。2、用紫外光譜的經(jīng)驗(yàn)公式計(jì)算水楊酸的入max，并把計(jì)算值與實(shí)驗(yàn)值相比較。3、比較不同極性溶劑，水楊酸紫外光譜吸收帶入max的變化，并加以解釋。實(shí)驗(yàn)二紫外分光光度法測(cè)定維生素C的含量一實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、學(xué)習(xí)759S紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的使用方法。2、學(xué)習(xí)紫外光譜區(qū)測(cè)定有機(jī)化合物組分含量。二實(shí)驗(yàn)原理維生素C又稱(chēng)抗壞血酸，是一種含不飽和烯酯結(jié)構(gòu)的酸性

4、多羥基化合物；分 子式為C6H8O6 ；分子量為176.13 ；結(jié)構(gòu)式為維生素C具有不飽和共軛結(jié)構(gòu)，在紫外-可見(jiàn)光區(qū)有吸收，紫外吸收最大波長(zhǎng)在 245nm附近。維生素C呈無(wú)色無(wú)臭的片狀品體，易溶于水,不溶于脂溶劑.在酸性環(huán) 境中穩(wěn)定，遇空氣中氧、熱、光、堿性物質(zhì),特別是有氧化酶及痕量銅、鐵等金屬 離子存在時(shí)，具有抗氧化作用，是知名度最高的營(yíng)養(yǎng)素。三儀器試劑1儀器：紫外分光光度計(jì)（型號(hào)759S）,石英比色皿2只；100ml容量瓶1只； 50ml容量瓶7只；25 ml容量瓶或具比色管1只；10ml吸量管1只；10ml移液 管1支。2試劑：維生素C （抗壞血酸）；10%的鹽酸四實(shí)驗(yàn)步驟:1標(biāo)準(zhǔn)溶液的

5、配制 用分析天平準(zhǔn)確稱(chēng)取0.0010g的抗壞血酸，用少量水溶解 后，加2 ml 10%的鹽酸，在用蒸餾水定容至100ml，配成濃度為100ug/ml的標(biāo) 準(zhǔn)溶液。再分別吸取0、2、4、6、8、10 ml維生素C標(biāo)準(zhǔn)溶液（100ug/ml）于6 個(gè)50ml的容量瓶中，用水稀釋成一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液（020ug/ml）。2樣品的制備將果蔬樣品洗凈、擦十、切碎。稱(chēng)取5.00g于50ml的小燒杯中，加入1滴10%的鹽酸，勻漿。轉(zhuǎn)于到25ml的容量瓶（具比色管）中，用水 稀釋到刻度。若提取液澄清，可直接取樣測(cè)定，若渾濁，用離心機(jī)來(lái)消除。取 0.5ml提取液于50ml的容量瓶中，加入2ml 10%的鹽

6、酸，用水稀釋到刻度。3吸收曲線(xiàn)的繪制用某一中間濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，用蒸餾水作參比，于210300nm范圍內(nèi)測(cè)定吸光度，制作吸收曲線(xiàn)，從曲線(xiàn)上查得最大吸收波長(zhǎng)（245nm附近）。波長(zhǎng)間隔在210nm300nm范圍內(nèi)每隔5nm測(cè)定一個(gè)數(shù)值，在最大吸收波長(zhǎng)5nm范圍內(nèi)每隔1nm測(cè)定一個(gè)數(shù)值。4標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制于最大吸收波長(zhǎng)處分別測(cè)定標(biāo)準(zhǔn)溶液的吸光度，然后以濃度 為橫坐標(biāo)，相應(yīng)的吸光度為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)。5樣品的測(cè)定于最大吸收波長(zhǎng)處測(cè)定試樣的吸光度，從標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)上查出試樣 的濃度，平行測(cè)定兩次。實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)記錄表格一吸收曲線(xiàn)的繪制標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度： X/nmAX/nmAX/nmA最大吸收波長(zhǎng) Amax= nm二試樣的含量測(cè)定1標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)的繪制：測(cè)量波長(zhǎng)：；標(biāo)準(zhǔn)溶液的原始濃度：溶液代號(hào)012345吸取體積/ml濃度/ug/mlA2未知物含量測(cè)定平行測(cè)定次數(shù) 吸光度，A試樣濃度，ug/