疫苗研發(fā)藥事管理學作業(yè)

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)專心-專注-專業(yè)精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上專心-專注-專業(yè)新型冠狀病毒疫苗及其治療特效藥組員：楊娜 言煥棟 摘要：疫苗在疾病預防中的地位日益重要,對疫苗質(zhì)量的要求也日益提高。近年來,在傳統(tǒng)和新型疫苗的制備中,應用先進的分離純化技術(shù)是提高疫苗效力降低副反應的有效手段。綜述了我國疫苗制品研發(fā)過程、疫苗市場與疫苗生產(chǎn)企業(yè)的發(fā)展現(xiàn)狀,指出了我國疫苗產(chǎn)業(yè)的市場前景與發(fā)展方向。研究目的新型冠狀病毒概述一種類SARS病毒（以下均簡稱為SSARS）與SARS（非典型性肺炎）病毒屬同一家族，是一種新型冠狀病毒。冠狀病毒屬巢狀病毒目，冠狀病毒科，

2、主要分為，、 三個屬，屬僅對哺乳動物致病，屬主要引起鳥類感染，人類冠狀病毒主要通過直接接觸分泌物或經(jīng)氣溶膠、飛沫傳播。也有證據(jù)表明可經(jīng)糞口途徑傳播。病例概況 2012年初，一名沙特籍60歲男子在荷蘭死亡。 2012年9月，英國衛(wèi)生防護局向世界衛(wèi)生組織報告，一名在英國就醫(yī)的卡塔爾男子患有急性呼吸道感染。實驗室檢測發(fā)現(xiàn)，病人攜帶一種新型冠狀病毒。研究人員對比從年初沙特死者肺部組織提取的病毒樣本和卡塔爾男子的病毒樣本，發(fā)現(xiàn)兩種病毒相似度達99.5%。 2012年9月24日，世界衛(wèi)生組織給予證實。過去3個月曾在中東發(fā)現(xiàn)了一系列患有嚴重呼吸道疾病的病例，但還沒有證據(jù)顯示這些病例是由新型病毒引起。 201

3、2年9月25日，丹麥發(fā)現(xiàn)5名疑似感染新型冠狀病毒患者 。登塞大學醫(yī)院院長延斯彼得斯蒂森說：“世界衛(wèi)生組織日前發(fā)出了發(fā)現(xiàn)新型冠狀病毒的警告，這種病毒和SARS病毒同屬一個家族。為此，我們正在對這5名患者進行病毒測試，預計26日下午可獲得測試結(jié)果?！毖芯磕康拇舜窝芯康闹饕康臑檠兄瞥鲂滦凸跔畈《镜目共《疽呙缫约爸委熖匦幰砸种撇《镜膫鞑ヒ约翱赡茉斐傻念愃芐ARS病毒全球范圍內(nèi)的大疫情。SSARS疫苗研發(fā)方案 （）小鼠細胞培養(yǎng)疫苗實驗階段 細胞培養(yǎng)疫苗有細胞培養(yǎng)滅活疫苗和細胞培養(yǎng)活疫苗兩類，前者多以強毒毒株培養(yǎng)增殖制造，后者則用弱毒毒株增殖生產(chǎn)，兩者的制造程序既有相同之處，又有區(qū)別。由于病毒不同與疫

4、苗性質(zhì)不同，所采用的細胞及細胞培養(yǎng)方法也有所不同。種毒與毒種繼代 用于制苗用的種毒應經(jīng)毒力、最小免疫量、安全性、無菌檢定合格，通常為凍干品，由國家指定的苗毒種保藏部門檢定分發(fā)。 領(lǐng)取的種毒應按規(guī)定在細胞繼代培養(yǎng)適應后用作毒種，制苗用毒種應按規(guī)定控制在一定代數(shù)以內(nèi)，或為濕毒毒種，或為凍干毒種。細胞制備 制造疫苗用的細胞大體為原代細胞和傳代細胞兩類，根據(jù)病毒種類、疫苗性質(zhì)與工藝流程選擇不同的細胞。 選擇的依據(jù)包括：病毒的適應性高、毒價高、細胞來源方便、制備簡單、生命力強。 如脊髓灰質(zhì)炎活疫苗選擇vero細胞；狂犬病弱毒細胞適應疫苗采取BHK21細胞增殖病毒豬瘟兔化弱毒牛睪丸細胞疫苗采用犢牛睪丸原代

5、細胞等。 培養(yǎng)細胞和增殖病毒用的營養(yǎng)液又稱培養(yǎng)液，通常分為細胞培養(yǎng)用的生長液和病毒增殖用的維持液，兩者不同的之處通常只是生長液內(nèi)含有5%-10%的血清；維持液血清濃度為2%-5%。 不同細胞所需的營養(yǎng)成分和生長條件不盡相同。 目前常用的細胞培養(yǎng)方法為靜止培養(yǎng)和轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)，至于微載體培養(yǎng)和懸浮培養(yǎng)在我國尚處于試驗之中。 接毒與收獲 病毒接種培養(yǎng)有同步與異步之分，前者在細胞分裝同時或不久接種毒種，進行培養(yǎng)，如貓、犬傳染性腸炎疫苗(細小病毒)；后者在細胞形成單層后接種毒種，如流行性乙型腦炎細胞培養(yǎng)疫苗。通常在細胞形成單層后傾去培養(yǎng)液，按1%-2%量接種毒種，經(jīng)吸附后加入維持液繼續(xù)進行培養(yǎng)，待出現(xiàn)70%

6、-85%以上細胞病變時即可收獲。病毒培養(yǎng)液收獲時間和方法依疫苗性質(zhì)而定，可將培養(yǎng)瓶凍融數(shù)次后收集；或加入EDTA-胰蛋白酶液消化分散收取；或在病毒增殖培養(yǎng)過程中可收獲5-7次毒液，細胞毒液經(jīng)無菌檢驗、毒價測定合格后供配苗用。病毒在易感動物體內(nèi)可大量增殖，但在各器官組織、部位中增殖病毒的量卻有很大的差異，利用病毒增殖迅速、含毒量高的組織制造的疫苗稱為組織疫苗(tissue vaccine)。 動物組織疫苗包括動物組織滅活疫苗和動物組織弱毒活苗兩類，前者多數(shù)由強毒株制造，如豬瘟結(jié)晶紫疫苗、狂犬病羊腦組織疫苗；后者均以弱毒株生產(chǎn)，如豬瘟兔化弱毒乳兔組織疫苗、牛瘟兔化弱毒組織疫苗等。動物選擇 動物質(zhì)量

7、直接影響到組織疫苗的質(zhì)量，特別是對疫苗的安全性和效力有著決定性的作用，動物必須符合下列標準： (1)應該是清潔級(二級)以上的等級實驗動物，即無規(guī)定的人獸共患性病原體動物； (2)應是對所接種病毒易感性高的動物，即在品種、年齡和體重方面合乎要求的實驗動物。 種毒與接種 種毒既可用抗原性優(yōu)良、致死力強的自然毒株臟器組織毒或強毒株增殖培養(yǎng)物，也可用弱毒株組織毒種。無論何種種毒都須經(jīng)純粹、抗原性和免疫原性檢查合格后使用。 接種途徑依病毒性質(zhì)和目的而異，例如豬瘟結(jié)晶紫苗，采取豬肌肉注射血液毒種；牛瘟兔化弱毒疫苗，以兔耳靜脈注射脾淋毒種；狂犬病疫苗，用兔腦毒種接種綿羊腦內(nèi)途徑感染。 幾種動物常用的接種途

8、徑如下： 1. 腦內(nèi)注射：顱前后中線5mm平行線與瞳孔橫線交叉處。 2. 靜脈注射：家兔由耳靜脈注入；雞自翅下肢靜脈注入。 3. 肌肉注射：選擇腿部、胸部、臀部等肌肉豐滿處注射。 4. 皮下注射：家兔和豚鼠可選擇在腹部或后腿內(nèi)注射。 5. 腹腔注射：家兔與豚鼠可選腹股溝處刺入腹腔。 （三）觀察與收獲 動物在接種感染后應每天觀察和檢查規(guī)定的各項指標，指標或項目因不同病毒而異。常規(guī)觀察、檢查的項目如食欲、精神和活動狀態(tài)、體溫、糞便、尿和血液變化等。 根據(jù)觀察的征象和檢查的結(jié)果選出符合要求的發(fā)病動物按規(guī)定方式剖殺，采取收集含毒量高的器官組織。如豬瘟結(jié)晶紫疫苗采取發(fā)病豬的血液制備；兔出血癥組織滅活疫苗

9、采集病兔肝臟生產(chǎn)；狂犬病疫苗利用發(fā)病羊的羊腦組織制造。制 苗1組織滅活疫苗 采取收獲的組織經(jīng)無菌檢驗及毒價測定合格后，按規(guī)定比例加入平衡液和滅活劑（甲醛、酚、結(jié)晶紫等）制成勻漿，然后按不同病毒的滅活溫度、時間進行滅活。如狂犬病疫苗配制按腦組織1:4加入含有甘油及1%酚蒸餾水，于360.5C滅活7天制成；豬瘟結(jié)晶紫疫苗配制，按血毒4份，結(jié)晶紫甘油溶液1份混合，于37C38C滅活68天。2. 弱毒組織疫苗 在無菌操作下剔除臟器上的脂肪與結(jié)締組織等，稱重后剪碎，加入適最保護劑制成勻漿，然后濾過扣除殘渣量，再按濾液中的實際組織量計算稀釋倍數(shù)，加入余量保護劑和青鏈霉素5001000U(g/ml)，充分搖

10、勻后置04C冷暗處處理一定時間后作無菌檢驗與毒價測定。合格者進行分裝，冷凍真空干燥制成凍干疫苗。 疫苗檢定，測定有效性和安全性 臨床前研究、臨床研究、生產(chǎn)、經(jīng)營方案臨床前及臨床研究表1 臨床試驗進度表臨床試驗臨床前研究向SFDA提出研發(fā)中新藥申請期期期向SFDA提出新藥申請SFDA期所需時間（年）3.5向FDA提出研發(fā)中新藥申請123向FDA提出新藥申請2.5共12SFDA 要求的附加的上市后試驗試驗人群實驗室和動物試驗向FDA提出研發(fā)中新藥申請2080 例健康志愿者100300 例病患志愿者10003000 例病患試驗者向FDA提出新藥申請過程審核/批準SFDA 要求的附加的上市后試驗試驗目

11、的評定藥物安全性和生物活性向FDA提出研發(fā)中新藥申請確定藥物安全性和劑量評估藥物有效性，尋找副作用驗證藥物有效性，監(jiān)控長期使用的不良反應向FDA提出新藥申請成功率5000 種化合物被評估向FDA提出研發(fā)中新藥申請5 種進入臨床試驗向FDA提出新藥申請1 種被批準新藥開發(fā)階段如下：臨床前試驗：由制藥公司進行的實驗室和動物研究，以觀察化合物針對目標疾病的生物活性，同時對化合物進行安全性評估。這些試驗大概需要3.5 年的時間。研發(fā)中新藥申請（Investigational New Application, IND）：在臨床前試驗完成后，公司要向FDA 提請一份IND，之后才能開始進行藥物的人體試驗。

12、如果30 天內(nèi)FDA 沒有發(fā)出不予批準的申明，此IND 即為有效。提出的IND 需包括以下內(nèi)容：先期的試驗結(jié)果，后續(xù)研究的方式、地點以及研究對象；化合物的化學結(jié)構(gòu)；在體內(nèi)的作用機制；動物研究中發(fā)現(xiàn)的任何毒副作用以及化合物的生產(chǎn)工藝。另外，IND 必須得到制度審核部門（the Institutional Review Board）的審核和批準。同時，后續(xù)的臨床研究需至少每年向FDA 提交一份進展報告并得到準許。臨床試驗，期：此階段大概需要1 年時間，由2080 例正常健康志愿者參加。這些試驗研究了藥物的安全性方面，包括安全劑量范圍。此階段的研究同時確定了藥物在體內(nèi)的吸收、分布、代謝和排泄、以及藥

13、物的作用持續(xù)時間等項目。臨床試驗，期：此階段需要約100 到300 名志愿患者參與進行一些控制研究，以評價藥物的療效。這個階段大約需要2 年時間。臨床研究，期：此階段持續(xù)約3 年時間，通常需要診所和醫(yī)院的1000300 名患者參與。醫(yī)師通過對病患的監(jiān)測以確定療效和不良反應。（二）注冊申請新藥（化學藥）注冊的過程 以下介紹新藥物注冊公司的注冊流程，方法及注意事項。一、報省局所有研究工作完成(有合格的樣品、完整原始記錄)，帶一套資料報往省局。 其中應注意：1.上海注冊公司申請表要認真填寫，是否屬于非處方藥、是否減免臨床。版本應是最新的（最新的版本很快就會出來，可在SDA網(wǎng)上下載）。 2、現(xiàn)受理權(quán)已

14、下放到省局，5日內(nèi)公司注冊處人員告知你資料是否被退審，若沒，說明已受理。二、現(xiàn)場考核、抽樣現(xiàn)場考核（準備好樣品、原始記錄（含檢驗記錄，批生產(chǎn)記錄）、剪刀，膠衣、“信封”等），抽樣（仿制藥連續(xù)三批；新藥一批）后，將藥品抽樣單、已封好的藥品、一套資料報往省所，跟蹤藥品檢驗進度，交納藥檢費，寄三份檢驗報告往國家局（省所辦理）。三、拿回省局初審的材料申請表、現(xiàn)場考核表、省局審查意見表、省局受理通知書申請表的電子版需由省局的專用郵箱發(fā)往SDA。四、報國家局審評中心該類申報資料國家局共需要2套完整的及1套第一部分，每套資料需要單獨裝袋。1、 第一套為原件（全部紅章，化學原料藥特別注意結(jié)構(gòu)確證的圖譜必須要由

15、試驗單位加蓋紅章）。資料按下列順序放置：藥品注冊申請表（2份）現(xiàn)場考核表（1份）省局審查意見表（1份）受理通知書軟盤1份（可以進行網(wǎng)上提交）申報資料1套2、 第二套為原件（全部紅章，化學原料藥結(jié)構(gòu)確證的圖譜可不加蓋紅章）。資料按下列順序放置：藥品注冊申請表（1份）現(xiàn)場考核表（1份）省局審查意見表（1份）受理通知書申報資料1套3、 第三套為復印件資料按下列順序放置：藥品注冊申請表（1份）現(xiàn)場考核表（1份）省局審查意見表（1份）受理通知書申報資料的第一部分1套五、審評1、在的網(wǎng)站上通過企業(yè)名稱、受理號、受理日期跟蹤藥品的審評進度。（如有補充資料，再對其補充）。2、按CDE的要求制作藥品說明書、標簽

16、、質(zhì)量標準?。ㄗⅲ哼@階段要非常注意，不危害給藥品上市會造成很大的麻煩。包裝最好是多報幾種規(guī)格，其可以在網(wǎng)上提交?。?。六、轉(zhuǎn)注冊司 制作生產(chǎn)批件、臨床批件或退審！圖4 新藥（中藥）注冊的過程圖5 新藥申報流程 圖6 新藥加快申報流程圖7 新藥生產(chǎn)注冊流程向中檢所報送制備標準品的原材料及有關(guān)標準物質(zhì)的研究資料申請人提出生產(chǎn)申請向中檢所報送制備標準品的原材料及有關(guān)標準物質(zhì)的研究資料申請人提出生產(chǎn)申請 不受理不受理不受理通知書及理由省級藥監(jiān)局形式審查不受理通知書及理由省級藥監(jiān)局形式審查藥檢所進行標準復合60日省級藥監(jiān)局5日內(nèi)組織30日內(nèi)完成對藥物臨床試驗情況及原始資料進行現(xiàn)場核查，抽取3批樣品通知藥檢所進行標準復合。藥檢所進行標準復合60日省級藥監(jiān)局5日內(nèi)組織30日內(nèi)完成對藥物臨床試驗情況及原始資料進行現(xiàn)場核查，抽取3批樣品通知藥檢所進行標準復合。受理審評符合規(guī)定4個月內(nèi)一次性補充資料需補充資料藥品審評中心技術(shù)審評審評符合規(guī)定4個月內(nèi)一次性補充資料需補充資料藥品審評中心技術(shù)審評150日藥審中心對補充資料進行審評藥審中心對補充資料進行審評50日通知申請人向藥品認證中心申請生產(chǎn)現(xiàn)場檢查通知申請人向藥品認證中心申請生產(chǎn)現(xiàn)場檢查動態(tài)抽取1批樣品動態(tài)抽取1批樣品現(xiàn)場檢查報告10日6個月內(nèi)申請現(xiàn)場檢查現(xiàn)場檢查報告10日6個月內(nèi)申請現(xiàn)場檢查藥審中心依據(jù)審評意見、現(xiàn)場檢查報告及藥品檢驗報告形成綜合意見國