《生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)》實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱_第1頁
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文檔簡介

1、生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)教學(xué)大綱課程代碼:UHOR1010課程名稱:生物化學(xué)實(shí)驗(yàn) 英文名稱:Experiments in Biochemistry 實(shí)驗(yàn)室名稱:園藝園林實(shí)驗(yàn)室課程學(xué)時(shí):36實(shí)驗(yàn)學(xué)時(shí):36一、本課程實(shí)驗(yàn)教學(xué)目的與要求生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)是增強(qiáng)學(xué)生理解理論內(nèi)容、提高學(xué)生實(shí)驗(yàn)操作能力和加強(qiáng)實(shí)踐環(huán)節(jié)鍛煉的應(yīng)用基礎(chǔ)課。本課程以實(shí)踐環(huán)節(jié)為主,根據(jù)課程的性質(zhì)、任務(wù)、要求及學(xué)習(xí)的對象,將課程內(nèi)容分為基礎(chǔ)實(shí)驗(yàn)、綜合性實(shí)驗(yàn)和創(chuàng)新設(shè)計(jì)性實(shí)驗(yàn)等三種類型。通過實(shí)驗(yàn)課教學(xué)與實(shí)驗(yàn)操作,使學(xué)生掌握生物分子分離、純化、鑒定的一般技術(shù)和原理及其基本操作技能。使學(xué)生鞏固和加深生物化學(xué)理論知識,通過實(shí)踐進(jìn)一步學(xué)生獨(dú)立分析問題和解決問

2、題的能力,同時(shí)要求學(xué)生要有創(chuàng)新精神,學(xué)會從生產(chǎn)中找出問題,用實(shí)事求是的科學(xué)態(tài)度認(rèn)識問題,提高社會實(shí)踐的應(yīng)變能力,為今后學(xué)習(xí)和工作打下基礎(chǔ)。二、主要儀器設(shè)備及現(xiàn)有臺套數(shù) 儀器設(shè)備需要數(shù)量儀器設(shè)備需要數(shù)量高壓電泳儀1臺超低溫冰箱1臺生化培養(yǎng)箱2臺空氣振蕩培養(yǎng)箱1臺超純水制備系統(tǒng)1套水浴振蕩培養(yǎng)箱2臺電子顯示水浴鍋2臺普通臺式離心機(jī)3臺多用途電泳儀及配件2套冷凍高速離心機(jī)1臺752分光光度計(jì)3臺酸度計(jì)(pH計(jì)) 3臺紫外分光光度計(jì)1臺電子天平3臺微量移液器(2-1000 l)10套凝膠成像儀1臺凝膠層析裝置6套玻璃儀器30套三、實(shí)驗(yàn)課程內(nèi)容和學(xué)時(shí)分配序號實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目名 稱目的與要求實(shí)驗(yàn)內(nèi)容學(xué)時(shí)分配實(shí)驗(yàn)類

3、型每組人數(shù)必開選開1蛋白質(zhì)等電點(diǎn)的簡易測定了解蛋白質(zhì)的兩性電離性質(zhì),學(xué)習(xí)一種pI測定方法配制不同pH梯度的溶液,觀察、分析待測蛋白質(zhì)的沉淀情況3基礎(chǔ)性2-3選開2分光光度計(jì)線性分辨范圍測定了解光譜技術(shù)的基本原理,學(xué)會正確使用分光光度計(jì)進(jìn)行分析制備待測溶液,用多種不同類型的分光光度計(jì)進(jìn)行定量分析3設(shè)計(jì)性2-3選開3雙縮脲法測定蛋白質(zhì)含量掌握雙縮脲法定量分析蛋白質(zhì)的原理與方法配制雙縮脲試劑,制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,在540nm下檢測蛋白質(zhì)樣品的吸光度3設(shè)計(jì)性2-3必開4考馬斯亮藍(lán)染色法測定蛋白質(zhì)含量掌握考馬斯亮藍(lán)法定量分析蛋白質(zhì)的原理與方法配制顯色試劑,制作標(biāo)準(zhǔn)曲線,在595nm下檢測蛋白質(zhì)樣品的吸光度3綜

4、合性2-3選開5酵母RNA的分離了解核酸的理化性質(zhì),掌握核酸及其組分的制備方法準(zhǔn)備樣品和配制試劑,樣品經(jīng)加熱、離心、洗滌及干燥后,稱量計(jì)算得率3綜合性2-3必開6酵母RNA組分的鑒定學(xué)習(xí)鑒定核酸組分的方法,加深理解核酸的理化性質(zhì)配制檢測試劑,RNA樣品加酸加熱水解,對水解液的核酸組分進(jìn)行鑒定3綜合性2-3必開7維生素C含量的測定掌握維生素C定量分析的基本原理與操作方法配制2,6-二氯酚靛酚試劑,滴定待測樣品,計(jì)算Vc含量3基礎(chǔ)性2-3選開8綠豆總蛋白及SOD的提取掌握植物蛋白質(zhì)提取的基本方法,加深理解蛋白質(zhì)理化性質(zhì)配制磷酸鹽緩沖液,新鮮材料加緩沖液研磨勻漿,冷凍離心得到SOD粗提液3綜合性2-

5、3必開9硫酸銨沉降法純化SOD學(xué)習(xí)蛋白質(zhì)沉淀與變性的相關(guān)理論,掌握蛋白質(zhì)的硫酸銨沉降法取總蛋白粗提液,按要求加入硫酸銨至目的濃度,鹽析獲得SOD組分3設(shè)計(jì)性2-3必開10葡聚糖凝膠層析脫鹽學(xué)習(xí)凝膠層析的基本原理,掌握利用葡聚糖凝膠層析進(jìn)行蛋白質(zhì)脫鹽的技術(shù)和方法選取葡聚糖凝膠,清洗、裝柱、平衡、上樣、洗脫、收集、鑒定,繪制洗脫曲線,評價(jià)脫鹽效果6綜合性2-3必開11SOD活性的測定學(xué)習(xí)SOD催化反應(yīng)的基本原理,掌握SOD活性測定的方法和步驟選取不同量酶液,依次加入NBT等試劑反應(yīng),560nm下比色,根據(jù)抑制相關(guān)曲線,計(jì)算SOD活力3設(shè)計(jì)性2-3必開12轉(zhuǎn)氨酶的提取及活力測定學(xué)習(xí)生物體內(nèi)轉(zhuǎn)氨酶活性

6、測定的原理和方法配制提取緩沖液,新鮮材料勻漿、離心,測定提取液的谷丙轉(zhuǎn)氨酶活力3綜合性2-3必開13SDS法測定蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量學(xué)習(xí)蛋白質(zhì)電泳的基本原理,掌握聚丙烯酰胺凝膠電泳技術(shù)配制凝膠緩沖液,制備電泳凝膠、加樣電泳、染色,計(jì)算遷移率和相對分子質(zhì)量9綜合性2-3必開四、考核方式1、實(shí)驗(yàn)報(bào)告:實(shí)驗(yàn)報(bào)告的撰寫要求使用專用實(shí)驗(yàn)報(bào)告紙。實(shí)驗(yàn)報(bào)告的內(nèi)容應(yīng)包括:實(shí)驗(yàn)?zāi)康?,?shí)驗(yàn)的基本原理,實(shí)驗(yàn)所用的儀器設(shè)備及試劑,實(shí)驗(yàn)操作程序,實(shí)驗(yàn)結(jié)果與分析,實(shí)驗(yàn)應(yīng)注意事項(xiàng)等內(nèi)容。2、考核方式考核可采取閉卷、開卷、實(shí)驗(yàn)操作等形式,或多種形式相結(jié)合,對學(xué)生的實(shí)驗(yàn)及學(xué)習(xí)情況做出全面科學(xué)的評價(jià)。成績評定把學(xué)生的實(shí)際動手能力放在重要地位。根據(jù)平時(shí)實(shí)驗(yàn)完成情況、實(shí)驗(yàn)報(bào)告撰寫情況等給予綜合評定,實(shí)驗(yàn)課考核成績按百分制計(jì)算。(1)學(xué)習(xí)與實(shí)驗(yàn)態(tài)度 (20%)(2)實(shí)驗(yàn)技能與操作 (35%)(3)解答問題 (10%) (4)實(shí)驗(yàn)報(bào)告 (35%)五、實(shí)驗(yàn)教材、參考書1、教材:王秀奇等.基礎(chǔ)生物化學(xué)實(shí)驗(yàn)(第二版).

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