淺談“內(nèi)標(biāo)法”知識實驗人收藏起來

1、Word文檔 淺談“內(nèi)標(biāo)法”知識，實驗人收藏起來！ 內(nèi)標(biāo)法是結(jié)合了峰面積歸一法和外標(biāo)法的優(yōu)點的一種方法，它在加入內(nèi)標(biāo)物后，按峰面積歸一法的分析方法進(jìn)行分析，這就避開了由于進(jìn)樣的全都性及樣品卑視效應(yīng)導(dǎo)致的偶然誤差。因而，它的分析精密度也是比較高的，是一種比較抱負(fù)的定量分析方法。 內(nèi)標(biāo)法的優(yōu)缺點內(nèi)標(biāo)法對進(jìn)樣量不嚴(yán)格要求，測定的結(jié)果也較為精確，由于通過測量內(nèi)標(biāo)物及被測組分的峰面積的相對值來進(jìn)行計算的，因而在肯定程度上消退了進(jìn)樣量、儀器不穩(wěn)定等變化所引起的誤差，只對欲分析的組分峰做校正。不過內(nèi)標(biāo)法必需加一個組分進(jìn)到樣品，易增加面積測量誤差。操作程序較為麻煩，每次分析時內(nèi)標(biāo)物和試樣都要精確稱量，有時查找

2、合適的內(nèi)標(biāo)物也有困難。內(nèi)標(biāo)物的選擇原則采納內(nèi)標(biāo)法定量時，內(nèi)標(biāo)物的選擇是一項非常重要的工作。抱負(fù)地說，內(nèi)標(biāo)物應(yīng)當(dāng)是一個能得到純樣的已知化合物，這樣它能以精確、已知的量加到樣品中去，它應(yīng)當(dāng)和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能全都的物理化學(xué)性質(zhì)(如化學(xué)結(jié)構(gòu)、極性、揮發(fā)度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應(yīng)特征，最好是被分析物質(zhì)的一個同系物。當(dāng)然，在色譜分析條件下，內(nèi)標(biāo)物必需能與樣品中各組分充分分別。需要指出的是，在少數(shù)狀況下，分析人員可能比較關(guān)懷化合物在一個簡單過程中所得到的回收率，此時，他可以使用一種在這種過程中很簡單被完全回收的化合物作內(nèi)標(biāo)，來測定感愛好化合物的百分回收率，而不必遵循以上所說的

3、選擇原則。對于內(nèi)標(biāo)法定量分析來說，內(nèi)標(biāo)物的選擇必需滿意如下的條件：1、內(nèi)標(biāo)物與被分析物質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)要相像（如：沸點、極性、化學(xué)結(jié)構(gòu)等）；2、內(nèi)標(biāo)物應(yīng)是該試樣中不存在的純物質(zhì)；3、它必需完全溶于被測樣品（或溶劑）中，且不與被測樣品起化學(xué)反應(yīng)；并與試樣中各組分的色譜峰能完全分別；4、能加入內(nèi)標(biāo)物的量應(yīng)接近于被測組分；5、色譜峰的位置應(yīng)與被測組分的色譜峰的位置相近，或在幾個被測組分色譜峰中間。且又不共溢出，目的是為了避開儀器的不穩(wěn)定性所造成的靈敏度的差異；6、選擇合適的內(nèi)標(biāo)物加入量，使得內(nèi)標(biāo)物和被分析物質(zhì)二者峰面積的匹配性大于75%，以免由于它們處在不同響應(yīng)值區(qū)域而導(dǎo)致的靈敏度偏差。需要指出的是

4、，在少數(shù)狀況下，分析人員可能比較關(guān)懷化臺物在一個簡單過程中所得到的回收率，此時，可以使用在這過程中很簡單被完全回收的化臺物作內(nèi)標(biāo)，來測定感愛好化合物的百分回收率，而不必遵循以上所說的選擇原則。內(nèi)標(biāo)法的操作將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入標(biāo)準(zhǔn)樣品，制成混合標(biāo)樣，并配制一系列的已知濃度的工作標(biāo)樣。混合標(biāo)樣中標(biāo)樣與內(nèi)標(biāo)樣的摩爾比不變。注入色譜柱，以（標(biāo)樣峰面積/內(nèi)標(biāo)樣峰面積）為響應(yīng)值。依據(jù)響應(yīng)值與工作標(biāo)樣濃度之間存在的線性關(guān)系，即W=fA，制成標(biāo)準(zhǔn)曲線。將已知量的內(nèi)標(biāo)樣加入未知樣品，注入色譜柱，得到欲測組分的響應(yīng)值。依據(jù)已知的系數(shù)f，即可求出欲測組分的濃度。操作過程中樣品和內(nèi)標(biāo)是混合在一起注入色譜柱的，因此只要

5、混合溶液中被測組分與內(nèi)標(biāo)的量的比值恒定，上樣體積的變化不會影響影響定量結(jié)果。內(nèi)標(biāo)法抵消了上樣體積，乃至流淌相、檢測器的影響，因此比外標(biāo)法精確。制作內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線在用內(nèi)標(biāo)法做色譜定量分析時，先配制肯定重量比的被測組分和內(nèi)標(biāo)樣品的混合物做色譜分析，測量峰面積，做重量比和面積比的關(guān)系曲線，此曲線即為標(biāo)準(zhǔn)曲線。在實際樣品分析時所采納的色譜條件應(yīng)盡可能與制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時所用的條件全都，因此，在制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時，不僅要注明色譜條件(如固定相、柱溫、載氣流速等)，還應(yīng)注明進(jìn)樣體積和內(nèi)標(biāo)物濃度。在制作內(nèi)標(biāo)標(biāo)準(zhǔn)曲線時，各點并不完全落在直線上，此時應(yīng)求出面積比和重量比的比值與其平均位的標(biāo)準(zhǔn)偏差，在使用過程中應(yīng)定期進(jìn)行單點校正，若所得值與平均值的偏差小于2，曲線仍可使用，若大于2，則應(yīng)重作曲線，假如曲線在鉸短時期內(nèi)即產(chǎn)生變動，則不宜使用內(nèi)標(biāo)法定量。遠(yuǎn)慕