PCR實(shí)驗(yàn)室作業(yè)指導(dǎo)書

1、PCR實(shí)驗(yàn)室作業(yè)指導(dǎo)書文件編號(hào)：第 2 版編制：審核：批準(zhǔn)：生效日期： 2012 年 月 日目 錄序號(hào)主 題 內(nèi) 容代 號(hào)頁(yè) 號(hào)1PCR實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及管理PCR實(shí)驗(yàn)室工作制度2345實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理及清潔制度PCR實(shí)驗(yàn)室人員的配置及管理實(shí)驗(yàn)人員的培訓(xùn)程序67PCR實(shí)驗(yàn)室清潔 程序樣品編號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序8PCR基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的要求PCR廢棄物的處理程序91011試劑準(zhǔn)備區(qū)工作制度、標(biāo)準(zhǔn)操作、程序文件標(biāo)本制備區(qū)工作制度、標(biāo)準(zhǔn)操作、程序文件擴(kuò)增區(qū)工作制度、標(biāo)準(zhǔn)操作、程序文件產(chǎn)物分析區(qū)工作制度、標(biāo)準(zhǔn)操作、程序文件PCR標(biāo)本的保存操作程序12131415161718192021222324PCR標(biāo)本的采集

2、、運(yùn)送、接收程序PCR生物安全防護(hù)措施PCR實(shí)驗(yàn)室化學(xué)試劑配PCR實(shí)驗(yàn)室記錄管理制度PCR應(yīng)急處理程序PCR試劑的質(zhì)檢標(biāo)準(zhǔn)操作程序PCR消耗品進(jìn)購(gòu)質(zhì)檢貯存程序PCR室內(nèi)質(zhì)量控制操作程序PCR室間質(zhì)量控制操作程序PCR溫度校準(zhǔn)標(biāo)準(zhǔn)操作程序1252627282930伯樂 PTC-200 型核酸擴(kuò)增儀操作規(guī)程ABI 7300 型熒光定量擴(kuò)增儀操作維護(hù)規(guī)程DYY-6C電泳儀操作維護(hù)規(guī)程Bio-Rad GelDoc_XR 凝膠成像儀使用說(shuō)明書恒溫水浴箱操作維護(hù)規(guī)程旋渦振蕩器操作維護(hù)規(guī)程313233普通離心機(jī)操作維護(hù)規(guī)程高速離心機(jī)操作維護(hù)規(guī)程低溫高速離心機(jī)操作維護(hù)規(guī)程3435363738冰箱操作維護(hù)規(guī)程超

3、低溫冰箱操作維護(hù)規(guī)程生物安全柜操作維護(hù)規(guī)程超凈工作臺(tái)操作維護(hù)規(guī)程移液器操作維護(hù)規(guī)程1修 訂 頁(yè)序號(hào)文件編號(hào)頁(yè)碼需更改的內(nèi)容更改內(nèi)容批準(zhǔn)人批準(zhǔn)日期1234567891011121314151617181920PCR實(shí)驗(yàn)室的設(shè)置及管理1目的： 建立實(shí)驗(yàn)室的合理設(shè)置和科學(xué)管理，防止實(shí)驗(yàn)污染，保證檢測(cè)結(jié)果的可靠性。2適用范圍： 本程序適用于分子診斷室的設(shè)置、工作流程和日常管理等。3負(fù)責(zé)人：4細(xì)則：41 分子診斷室為檢驗(yàn)科下設(shè)的專業(yè)實(shí)驗(yàn)室，從事基因擴(kuò)增檢測(cè)及相關(guān)實(shí)驗(yàn)工作。42 本實(shí)驗(yàn)室采用普通 RT-PCR擴(kuò)增和實(shí)時(shí)熒光定量 PCR兩種技術(shù)作為臨床基因診斷的主要手段，實(shí)驗(yàn)室分為四個(gè)區(qū)：試劑準(zhǔn)備區(qū)（第一區(qū)

4、） 、標(biāo)本處理區(qū)（第二區(qū)） 、擴(kuò)增區(qū)（第三區(qū)）及產(chǎn)物分析區(qū)（第四區(qū)） 。每一工作區(qū)配備專用的設(shè)備、儀器、輔助設(shè)施、耗材、清潔用品、辦公用品、專用工作服，并有明顯的區(qū)分標(biāo)識(shí)。 各區(qū)標(biāo)簽顏色： 紅色 （第一區(qū)） 、白色或綠色 （第二區(qū)） 、藍(lán)色 （第三區(qū)） ；專用工作服： 粉紅色 （第一區(qū)）、白色（第二區(qū)） 、藍(lán)色（第三區(qū)） 。標(biāo)本的接收則在檢驗(yàn)科標(biāo)本接收處進(jìn)行。43 各工作區(qū)專用的儀器設(shè)備、辦公用品、工作服、實(shí)驗(yàn)耗材和清潔用具等，不可混用。44 各工作區(qū)配置、功能和內(nèi)務(wù)管理見各相關(guān)SOP文件。45 嚴(yán)格遵守從 “試劑準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本處理區(qū)擴(kuò)增區(qū)產(chǎn)物分析區(qū)”的單一流向制度，不得逆向進(jìn)入前一工作區(qū)。46

5、非本實(shí)驗(yàn)室工作人員，未經(jīng)許可不得入內(nèi)；進(jìn)修、實(shí)習(xí)或其他科室人員因需要，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)區(qū)域（試劑準(zhǔn)備區(qū)、標(biāo)本處理區(qū)、擴(kuò)增區(qū)、產(chǎn)物分析區(qū)）人員監(jiān)督指導(dǎo)下進(jìn)行。需首先熟悉本程序的各項(xiàng)規(guī)定并嚴(yán)格遵守執(zhí)行，在本實(shí)驗(yàn)室47 實(shí)驗(yàn)完畢后做好清潔消毒工作。5. 本文涉及以下圖表：1. 實(shí)驗(yàn)室設(shè)計(jì)平面圖PCR實(shí)驗(yàn)室工作制度1目的 ：保持良好的工作環(huán)境，以確保檢測(cè)結(jié)果的可靠性，防止交叉污染，防止差錯(cuò)、事故及糾紛的發(fā)生。2適用范圍： 所有本實(shí)驗(yàn)室人員。3負(fù)責(zé)人：4細(xì)則：41 本實(shí)驗(yàn)室用于基因擴(kuò)增檢測(cè)及相關(guān)實(shí)驗(yàn)工作，不得進(jìn)行其它實(shí)驗(yàn)操作。42 各區(qū)的用品不得混用。43 在各區(qū)的實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中，操作者必須戴手套和帽子，嚴(yán)格按

6、照操作規(guī)程。44 試劑準(zhǔn)備區(qū)只能進(jìn)行試劑的貯存及配制等相關(guān)操作（見相關(guān)SOP文件）。45 標(biāo)本處理區(qū)只能進(jìn)行臨床標(biāo)本的保存，核酸提取、保存及其加入至擴(kuò)增反應(yīng)管和測(cè)定合成（見相關(guān) SOP文件）。RNA時(shí) cDNA的46 擴(kuò)增區(qū)只能進(jìn)行 DNA或 cDNA的擴(kuò)增、實(shí)時(shí)熒光 PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的分析（見相關(guān)SOP文件）。47 產(chǎn)物分析區(qū)只能進(jìn)行 RT-PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的分析（見相關(guān)SOP文件）。4. 8 進(jìn)行實(shí)驗(yàn)時(shí)嚴(yán)格執(zhí)行本實(shí)驗(yàn)室的各項(xiàng)操作規(guī)程，及時(shí)做好各種操作記錄，力求準(zhǔn)確、可靠。實(shí)驗(yàn)完畢，做好清潔、整理及分析統(tǒng)計(jì)等工作。49 室內(nèi)儀器由專人負(fù)責(zé)，未經(jīng)許可，不得隨意使用或挪用；愛護(hù)使用儀器，定期進(jìn)行保養(yǎng)

7、與維修。4. 10 愛護(hù)醫(yī)院財(cái)產(chǎn)，注意安全；離開實(shí)驗(yàn)室前應(yīng)關(guān)好門窗，檢查水、電等。PCR實(shí)驗(yàn)室內(nèi)務(wù)管理及清潔制度1目的： 保證實(shí)驗(yàn)室日常內(nèi)務(wù)管理及清潔工作順利進(jìn)行。2適用范圍： 實(shí)驗(yàn)室相關(guān)人員及相關(guān)清潔工人。3負(fù)責(zé)人：4細(xì)則：41 內(nèi)務(wù)管理制度a. 非本室工作人員未經(jīng)允許不得進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。b. 各區(qū)的用品不得混用。c. 實(shí)驗(yàn)人員要有強(qiáng)烈的時(shí)間觀念，按時(shí)上下班，不遲到、早退。d. 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須遵守實(shí)驗(yàn)室的單一流向的規(guī)定，禁止逆向走動(dòng)。e. 所有儀器（如 PCR擴(kuò)增儀）須有專人負(fù)責(zé)，并有使用維護(hù)記錄；實(shí)驗(yàn)人員必須熟悉儀器性能后方允許操作，并嚴(yán)格遵守操作規(guī)程。f. 所有試劑進(jìn)購(gòu)、配制、質(zhì)檢

8、、使用均要有記錄，未經(jīng)允許不得隨意帶出本實(shí)驗(yàn)室。g. 各區(qū)的各種清潔消毒均應(yīng)有記錄，工作衣消毒時(shí)注意各區(qū)應(yīng)分開進(jìn)行處理。h. 注意保持實(shí)驗(yàn)室衛(wèi)生整潔，嚴(yán)禁在室內(nèi)抽煙、吃零食，非實(shí)驗(yàn)操作人員應(yīng)盡量少入。i. 每天了解儀器運(yùn)轉(zhuǎn)情況及試劑使用情況，負(fù)責(zé)儀器的整潔，安全；下班前檢查門、窗、水、電，節(jié)假日指定人員負(fù)責(zé)檢查實(shí)驗(yàn)室的儀器、設(shè)備，確保安全。4.2 內(nèi)務(wù)清潔制度a. 實(shí)驗(yàn)室地面保持平整、干凈，通道要利于通行，沒有無(wú)用的物品阻礙。b. 合理規(guī)劃實(shí)驗(yàn)室內(nèi)物品，做到擺放整齊、有序，無(wú)用的或使用效率低的物品放置到儲(chǔ)存處，常用的物品要容易尋找到。c. 抽屜、柜子、文件類物品要作好標(biāo)記，以方便識(shí)別。d. 實(shí)

9、驗(yàn)結(jié)束后用 75%酒精對(duì)臺(tái)面進(jìn)行清潔，并經(jīng)紫外燈進(jìn)行消毒。e. 每天實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，紫外燈消毒60 分鐘后，依次關(guān)閉各區(qū)紫外燈并記錄照射時(shí)間f. 搞衛(wèi)生時(shí)，依次清潔四個(gè)區(qū)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)面和地面，各區(qū)清潔消毒工具均專用，不可混用，注意按照單一方向流程的原則來(lái)進(jìn)行清潔。g. 處理好各區(qū)廢棄物，高壓消毒后集中處理。h. 每周將工作服交消毒洗滌，不同實(shí)驗(yàn)區(qū)的工作服分開洗PCR實(shí)驗(yàn)室人員的配置及管理1目的 ： 保證實(shí)驗(yàn)室有足夠數(shù)量的合格的具備開展該類實(shí)驗(yàn)?zāi)芰Φ膶?shí)驗(yàn)人員。2適用范圍 ：適用于實(shí)驗(yàn)室人員配置、管理、培訓(xùn)及考核。3負(fù)責(zé)人：4細(xì)則 ：41 人員要求a. 鑒于 PCR 技術(shù)要求的特殊性、復(fù)雜性，本實(shí)驗(yàn)室工人

10、員應(yīng)為有經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)專業(yè)人員。b. 實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)參加上級(jí)舉辦的c. 對(duì)于新進(jìn)入本室的人員，如尚未取得PCR 技術(shù)培訓(xùn)，并取得合格證。PCR 技術(shù)培訓(xùn)合格證，應(yīng)在實(shí)驗(yàn)室有培訓(xùn)合格證的上級(jí)技術(shù)人員的指導(dǎo)下進(jìn)行實(shí)驗(yàn)工作， 實(shí)驗(yàn)報(bào)告由有資格人員出具， 并應(yīng)在最短的時(shí)間內(nèi)取得上崗培訓(xùn)合格證。d. 實(shí)驗(yàn)室工作人員上崗前必須學(xué)習(xí)并掌握42 人員配置PCR 實(shí)驗(yàn)室管理文件。a. 實(shí)驗(yàn)室應(yīng)根據(jù)工作需要配備足夠的工作人員，目前實(shí)驗(yàn)室有主管技師2 人、技師？人，？人都已獲得培訓(xùn)合格證，視工作量的增加和業(yè)務(wù)發(fā)展需要，會(huì)適當(dāng)增加工作人員。b. 由實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)全面管理、技術(shù)指導(dǎo)、解決與臨床溝通及技術(shù)疑難問(wèn)題；其

11、他各級(jí)技術(shù)人員履行相應(yīng)的工作職責(zé)。43 人員管理實(shí)驗(yàn)室建立所有工作人員的技術(shù)檔案，包括：學(xué)歷、任職資格、發(fā)表論文、研究成果、培訓(xùn)等相關(guān)材料復(fù)印件。技術(shù)檔案分文本檔案和電子檔案，文本檔案每年更新1 次，電子檔案隨時(shí)更新。5. 本文涉及以下圖表：實(shí)驗(yàn)室主要負(fù)責(zé)人簡(jiǎn)歷表PCR實(shí)驗(yàn)室工作人員一覽表人員檔案卡實(shí)驗(yàn)室人員的培訓(xùn)程序1. 目的 : 保證實(shí)驗(yàn)室有足夠的技術(shù)力量和科室適應(yīng)長(zhǎng)遠(yuǎn)發(fā)展的需要。2. 適用范圍 : 核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室實(shí)驗(yàn)人員及預(yù)備培訓(xùn)的人員。3. 負(fù)責(zé)人 :4. 細(xì)則：4. 1 實(shí)驗(yàn)室負(fù)責(zé)人或負(fù)責(zé)人指定人員參加每年省CDC的室間質(zhì)評(píng)總結(jié)會(huì)。4. 2 實(shí)驗(yàn)室工作人員每 12 年至少參加

12、 1 次 PCR技術(shù)的省級(jí)或國(guó)家級(jí)繼續(xù)教育項(xiàng)目，參加相關(guān)學(xué)術(shù)交流會(huì)議。4. 3 安排未取得上崗培訓(xùn)合格證的工作人員在合適的時(shí)間內(nèi)參加技術(shù)培訓(xùn)。4. 4 科室不定期組織實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部實(shí)驗(yàn)人員學(xué)習(xí)、更新核酸擴(kuò)增方面的相關(guān)知識(shí)，提升自身的理論學(xué)習(xí)水平。 特別是在標(biāo)本接收區(qū)采血、 接收標(biāo)本的人員， 需定期對(duì)其進(jìn)行有關(guān)核酸擴(kuò)增技術(shù)， 標(biāo)本采集、保存、運(yùn)輸?shù)戎R(shí)的培訓(xùn)。4. 5 本實(shí)驗(yàn)室工作人員每年進(jìn)行考核一次a) 日常工作質(zhì)量, 考核內(nèi)容 :b) 室內(nèi)質(zhì)控測(cè)評(píng)c) 室間質(zhì)控測(cè)評(píng)d) 在抱怨處理中的表現(xiàn)4. 6 本實(shí)驗(yàn)室工作人員均建立業(yè)績(jī)檔案對(duì)于不適合本室工作的人員要及時(shí)調(diào)離。5. 本文涉及以下表格培訓(xùn)申請(qǐng)表

13、, 實(shí)行能進(jìn)能出制度 , 不斷吸收高質(zhì)量人員 , 加強(qiáng)培訓(xùn)和提高 ,年度培訓(xùn)計(jì)劃表培訓(xùn)記錄表員工培訓(xùn)履歷表PCR實(shí)驗(yàn)室清潔程序1目的： 保證實(shí)驗(yàn)室環(huán)境的整潔，防止污染。2適用范圍： 適于實(shí)驗(yàn)室工作環(huán)境、實(shí)驗(yàn)臺(tái)面、工作服、移液器等的清潔消毒工作。3負(fù)責(zé)人：4細(xì)則：操作人：41 實(shí)驗(yàn)室地面必須平整、干凈，通道要利于通行，沒有無(wú)用的物品阻礙。42 合理規(guī)劃實(shí)驗(yàn)室內(nèi)物品，做到擺放整齊、有序，無(wú)用的或使用效率低的物品放置到儲(chǔ)存處，常用的物品要容易尋找到。43 抽屜、柜子、文件類物品要作好標(biāo)記，以方便識(shí)別。44 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后用 75%酒精對(duì)臺(tái)面進(jìn)行清潔，并用紫外燈進(jìn)行消毒。45 每天對(duì)使用過(guò)的移液器用75%

14、酒精進(jìn)行擦拭。4 6 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中如發(fā)生標(biāo)本或試劑外濺，應(yīng)立即用75%酒精滴上，濾紙蓋上半小時(shí)，然后用酒精擦洗，并用移動(dòng)紫外燈消毒。4 7 每天實(shí)驗(yàn)前開啟各區(qū)的通風(fēng)系統(tǒng)，各區(qū)實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，分別打開傳遞窗紫外燈、天花板紫外燈消毒實(shí)驗(yàn)室，每次開啟 30 60 分鐘。4 8 待紫外燈消毒時(shí)間足夠后，依次關(guān)閉各區(qū)紫外燈并記錄。4 9 依次清潔四個(gè)區(qū)的實(shí)驗(yàn)臺(tái)面和地面，各區(qū)清潔消毒工具均專用，不可混用，注意按照單一方向流程的原則來(lái)進(jìn)行清潔。4 10 處理好各區(qū)廢棄物，交醫(yī)院集中處理。4 11 每周將工作服交院洗衣房洗滌消毒，不同實(shí)驗(yàn)區(qū)的工作服隔開洗滌。5. 本文涉及以下表格實(shí)驗(yàn)室清潔消毒記錄表垃 圾 處 理

15、記 錄 表PCR樣品編號(hào)的標(biāo)準(zhǔn)操作程序1目的： 保證標(biāo)本編號(hào)的唯一性，也是準(zhǔn)確發(fā)放報(bào)告的基礎(chǔ)。2適用范圍： 使用核酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室所開展的 幾？ 種檢測(cè)項(xiàng)目：流感病毒、手足口病毒、霍亂弧菌等。3負(fù)責(zé)人：4細(xì)則：操作人：41 按檢測(cè)類型分類標(biāo)記根據(jù)檢測(cè)項(xiàng)目的不同，每種檢測(cè)項(xiàng)目對(duì)應(yīng)標(biāo)記一種唯一的代號(hào)。如流感病毒標(biāo)記為？，手足口病毒001，第二個(gè)。標(biāo)記為？。42 按標(biāo)本接收順序編號(hào)在同種檢測(cè)類型的標(biāo)本中，按標(biāo)本檢測(cè)順序編號(hào)。如第一個(gè)檢測(cè)流感病毒的標(biāo)本編為？檢測(cè)流感病毒的標(biāo)本編為？ 002，第三個(gè)檢測(cè)結(jié)核的驗(yàn)單編為？ 003 等。43 編號(hào)步驟a. 對(duì)接受的標(biāo)本，根據(jù)編號(hào)的基本原則編號(hào)，每個(gè)樣本對(duì)

16、應(yīng)一個(gè)唯一的編號(hào)（如？）b. 在樣品送檢單和對(duì)應(yīng)的樣品管上作好相同的標(biāo)記。c. 做好標(biāo)本的接收記錄， 每個(gè)樣本的記錄都應(yīng)包括以下信息： 接收時(shí)間、 送檢單位、 患者姓名、 性別、年齡、標(biāo)本類別、標(biāo)本狀態(tài)、送標(biāo)本者、接收人、標(biāo)本編號(hào)等。d. 處理好樣品、點(diǎn)樣后，將反應(yīng)管放入擴(kuò)增儀上開始擴(kuò)增。e. 擴(kuò)增得到結(jié)果后，先在登記表上填入結(jié)果，作好記錄，再一一把實(shí)驗(yàn)結(jié)果填入相應(yīng)報(bào)告單。f. 發(fā)放檢驗(yàn)報(bào)告單。5. 本文涉及以下圖表：PCR標(biāo)本接收記錄表PCR結(jié)果登記表表PCR基因擴(kuò)增實(shí)驗(yàn)室的要求1目的： 規(guī)定在各區(qū)內(nèi)所進(jìn)行的工作及其操作。2適用范圍： 所有在本區(qū)內(nèi)進(jìn)行的工作。3負(fù)責(zé)人：4程序：操作人：實(shí)驗(yàn)室

17、分四？區(qū) : 試劑貯存、準(zhǔn)備區(qū)；標(biāo)本制備區(qū)；擴(kuò)增區(qū)；產(chǎn)物分析區(qū)。進(jìn)入各區(qū)嚴(yán)格按照單一方向進(jìn)行， 即試劑貯存、 準(zhǔn)備區(qū)標(biāo)本制備區(qū)擴(kuò)增區(qū)產(chǎn)物分析區(qū)。及其設(shè)備、物品必須有明確的標(biāo)記，嚴(yán)禁混用。各區(qū)進(jìn)入 PCR實(shí)驗(yàn)室的工作人員 （含衛(wèi)生員） ，都必須遵守實(shí)驗(yàn)室的規(guī)則， 尤其嚴(yán)格遵守進(jìn)入PCR實(shí)驗(yàn)室的唯一流向。不可進(jìn)入 PCR擴(kuò)增后區(qū)打掃衛(wèi)生，再返回?cái)U(kuò)增前區(qū)工作。防止非本室工作人員串崗，進(jìn)入本室。尤其不得為找人，而逆向誤入總則PCR實(shí)驗(yàn)室。（1） PCR實(shí)驗(yàn)室工作人員應(yīng)具備醫(yī)學(xué)檢驗(yàn)、微生物檢驗(yàn)基本知識(shí)，并受過(guò)PCR實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)知識(shí)和技能培訓(xùn)。（2） PCR實(shí)驗(yàn)室分試劑準(zhǔn)備， 樣本準(zhǔn)備， PCR擴(kuò)增和產(chǎn)物分

18、析四個(gè)室，各室的實(shí)驗(yàn)物品（含加樣器，試管架，吸頭，記錄紙，筆等） ，不得混用，須貼上標(biāo)簽予以區(qū)別。（3） 實(shí)驗(yàn)室技術(shù)人員必須嚴(yán)格按照PCR實(shí)驗(yàn)室操作程序進(jìn)行，包括實(shí)驗(yàn)室擦洗。臺(tái)面消毒，離心管，吸頭的無(wú)菌滅活準(zhǔn)備，儀器使用和廢棄物處理等。（4） 進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的工作人員必須更換各室不同的工作服 （含帽和鞋） ，勤換洗工作服，以及遵守實(shí)驗(yàn)室的唯一流向的規(guī)定，嚴(yán)禁反向流動(dòng)。（5） 進(jìn)入 PCR實(shí)驗(yàn)室后區(qū)的物品不許帶進(jìn)PCR實(shí)驗(yàn)室前區(qū)。每天實(shí)驗(yàn)開始前，必須清潔地面和消毒實(shí)驗(yàn)室前區(qū)。實(shí)驗(yàn)結(jié)束應(yīng)紫外線消毒實(shí)驗(yàn)臺(tái)面。每天下班前處理好廢物，應(yīng)關(guān)好水、電、煤氣和門窗。（6） 定期校準(zhǔn)和維修 PCR儀、酶標(biāo)儀及離心機(jī)

19、、水浴箱等儀器設(shè)備。（7） 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不得飲食、吸煙。4. 1 標(biāo)本接收區(qū)a. 實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)白色工作服，接收標(biāo)本須戴一次性手套。b. 記錄實(shí)驗(yàn)室干、濕度，登記冰箱溫度。使用帶有本區(qū)標(biāo)識(shí)的記錄本、紙和筆，每項(xiàng)記錄，書寫工整詳細(xì)。c. 對(duì)送檢的標(biāo)本實(shí)行雙簽制度， 并仔細(xì)檢查是否符合檢測(cè)要求， 對(duì)有不符合要求的標(biāo)本及時(shí)通知相關(guān)科室重新采樣，并作記錄，每份標(biāo)本需給出唯一性編號(hào)。d. 本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋， 封好， 在垃圾筐上套好新的垃圾袋， 將垃圾帶出實(shí)驗(yàn)室。e. 每次實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)及地面打開紫外燈消毒30 分鐘。記錄紫外燈使用情況。4.2 試劑貯存、準(zhǔn)備區(qū)a. 使用帶有本區(qū)

20、標(biāo)識(shí)的記錄本、紙和筆，每項(xiàng)記錄，書寫工整詳細(xì)。b. 準(zhǔn)備好的試劑送入下一區(qū) ，還原實(shí)驗(yàn)臺(tái)面，將本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋，封口，在垃圾筐上套好新的垃圾袋，將本區(qū)垃圾帶出實(shí)驗(yàn)室。c. 白色工作服留在本區(qū)。d. 本區(qū)維持相對(duì)正壓狀態(tài)（開啟緩沖區(qū)的排氣扇） 。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，清潔實(shí)驗(yàn)臺(tái)及地面打開紫外燈消毒 30 分鐘。4.3 標(biāo)本制備區(qū)a. 實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須在緩沖區(qū)更換專用藍(lán)色工作服及拖鞋。實(shí)驗(yàn)中須使用一次性帽子，戴手套，手套在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中疑有污染應(yīng)立即更換。b. 將傳入本區(qū)的試劑放入冰箱冷凍室試劑存放專區(qū)暫存。冰箱溫度。記錄實(shí)驗(yàn)室干、 濕度， 登記c. 將檢測(cè)完的標(biāo)本密封保存在毒種間-70 冰箱中，

21、然后記錄標(biāo)本的保存情況。d. 使用帶有本區(qū)標(biāo)識(shí)的記錄本、紙和筆，每項(xiàng)記錄，書寫工整詳細(xì)。e. 按試劑盒說(shuō)明書對(duì)標(biāo)本進(jìn)行處理， 將處理好的標(biāo)本在生物安全柜內(nèi)加樣， 記錄標(biāo)本的處理過(guò)程。f. 將加樣后的試劑傳送下一區(qū)， 還原實(shí)驗(yàn)臺(tái)面， 關(guān)閉所有儀器， 記錄儀器使用時(shí)間和運(yùn)行狀態(tài)。g. 使用過(guò)的離心管、 吸頭實(shí)驗(yàn)結(jié)束后須高壓消毒后方丟入垃圾袋， 所有樣品應(yīng)按有生物傳染性危險(xiǎn)品對(duì)待。h. 將本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋， 封口， 在垃圾筐上套好新的垃圾袋， 將垃圾帶出本區(qū)。i. 將藍(lán)色工作服留在本區(qū)。j. 本區(qū)應(yīng)避免不必要的走動(dòng)，同時(shí)維持相對(duì)正壓狀態(tài)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，清潔安全柜、實(shí)驗(yàn)臺(tái)及地面，打開紫外燈消

22、毒4.4 擴(kuò)增區(qū)30 分鐘。a. 實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須在緩沖區(qū)更換專用？色工作服及拖鞋。b. 記錄實(shí)驗(yàn)室干、濕度，登記冰箱溫度。c. 使用帶有本區(qū)標(biāo)識(shí)的記錄本、紙和筆，每項(xiàng)記錄，書寫工整詳細(xì)。d. 將傳入本區(qū)加樣后的試劑上機(jī)擴(kuò)增。e.RT-PCR 擴(kuò)增完成后，將樣品通過(guò)傳遞窗傳入下一區(qū)；實(shí)時(shí)熒光PCR擴(kuò)增完成后，記錄檢測(cè)結(jié)果，及時(shí)發(fā)放報(bào)告單；記錄儀器使用時(shí)間和運(yùn)行狀態(tài)。f. 將本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋， 封口， 在垃圾筐上套好新的垃圾袋， 然后將垃圾帶出實(shí)驗(yàn)室。g. 將粉色工作服留在本室再離開實(shí)驗(yàn)室。4. 5 產(chǎn)物分析區(qū)a. 將傳入本區(qū)加樣后的試劑上機(jī)擴(kuò)增b. 擴(kuò)增完成后，記錄檢測(cè)結(jié)果，及時(shí)

23、發(fā)放報(bào)告單，記錄儀器使用時(shí)間和運(yùn)行狀態(tài)。c. 將本區(qū)所有廢棄物分類裝入垃圾袋， 封口， 在垃圾筐上套好新的垃圾袋， 然后將垃帶出實(shí)驗(yàn)室。d. ？工作服留在本室再離開實(shí)驗(yàn)室e. 嚴(yán)禁本區(qū)物品帶至其他區(qū)，實(shí)驗(yàn)結(jié)束后清潔該區(qū)打開紫外燈照射，最好整夜消毒，記錄紫外燈使用情況。5. 本文涉及以下表格PCR實(shí)驗(yàn)室環(huán)境溫濕度記錄表冰箱溫度登記表實(shí)驗(yàn)室清潔消毒記錄表垃 圾 處 理 記 錄 表紫外消毒車消毒記錄表PCR廢棄物的處理程序1目的： 保證實(shí)驗(yàn)室、實(shí)驗(yàn)人員和外部環(huán)境的安全。2適用范圍： 核酸擴(kuò)增檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室常用化學(xué)試劑（NaOH、EDTA、乙醇、生理鹽水等） 、實(shí)驗(yàn)室廢棄物的處理；3負(fù)責(zé)人：4細(xì)則：操作人

24、：4.1 科室職責(zé)應(yīng)對(duì)本室工作人員講明本程序在預(yù)防交叉、實(shí)驗(yàn)室污染及切斷傳播途徑中的重要性，并要求嚴(yán)格執(zhí)行。4.2 實(shí)驗(yàn)室所有垃圾，裝入專用污物袋內(nèi)，各區(qū)備有：生活垃圾袋（黑色）及生物污染垃圾袋（黃色）。使用過(guò)的一次性消耗品 ( 如試管、吸頭、離心管、等壓消毒， 再放入黃色垃圾袋內(nèi)， 使用過(guò)的手套、 鞋套等直接放入黃色垃圾袋內(nèi)再集中處理。) 在實(shí)驗(yàn)結(jié)束后立即高4.3 夾取標(biāo)本的工具，如鉗、鑷、吸管等，用后均應(yīng)消毒清潔，進(jìn)行微生物檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)重新滅菌，金屬工具可燒灼滅菌或消毒液浸泡；玻璃制品高壓蒸汽滅菌。4.6 盛標(biāo)本的容器， 若為一次性使用的紙質(zhì)容器及其外面包被的廢紙， 用高壓蒸汽滅菌后集中處理

25、；對(duì)可再次使用的玻璃、塑料或搪瓷容器，煮沸15 分鐘或加入 10%次氯酸鈉溶液浸泡 24 小時(shí)，消毒液每日更換，消毒后用洗滌劑及流水刷洗，瀝干，用壓力蒸汽滅菌后備用。4.7 廢棄標(biāo)本及其容器裝入黃色垃圾袋內(nèi)，高壓蒸汽滅菌后，交污物處理中心集中處理。4.8 日常生活垃圾如紙屑等按一般垃圾處理。5. 本文涉及以下表格PCR 廢棄標(biāo)本處理交接表試劑準(zhǔn)備區(qū)工作制度 標(biāo)準(zhǔn)操作、程序文件1目的： 規(guī)范試劑準(zhǔn)備區(qū)的配置、功能、內(nèi)務(wù)管理等。2適用范圍： PCR實(shí)驗(yàn)室。3負(fù)責(zé)人：4細(xì)則：操作人：4.1 配置：普通冰箱？一臺(tái)，超凈工作臺(tái)一臺(tái)，臺(tái)式離心機(jī)一臺(tái)，混勻器一臺(tái)，加樣器一套，空調(diào)一臺(tái)，生物垃圾桶和生活垃圾桶

26、各一個(gè)，辦公用品若干?？梢苿?dòng)紫外燈？一臺(tái)，4.2 功能：儲(chǔ)存溶液的準(zhǔn)備，反應(yīng)體系的準(zhǔn)備，分裝，成品試劑和化學(xué)試劑的貯存，試劑的配制。75%乙醇，？病毒培養(yǎng)液等簡(jiǎn)單4.3 內(nèi)務(wù)管理：f. 著裝和標(biāo)識(shí)：本區(qū)工作服以 白色？ 、專用設(shè)備以 綠色？ 為標(biāo)識(shí)。g. 實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)專用 白色 工作服。實(shí)驗(yàn)中須戴一次性手套、鞋套或本區(qū)專用拖鞋。h. 記錄溫濕度計(jì)讀數(shù)和冰箱的溫度計(jì)讀數(shù)。 （本區(qū)每天在工作前利用本區(qū)的溫控設(shè)備使溫度控制在15- 25之間）i. 根據(jù)當(dāng)天的標(biāo)本取出當(dāng)天實(shí)驗(yàn)須配制和使用的試劑，其余試劑要立即收好放回冰箱內(nèi)。試劑的配制須在超凈工作臺(tái)內(nèi)完成。j. 每次實(shí)驗(yàn)均應(yīng)清點(diǎn)庫(kù)存試劑，每

27、周檢查有無(wú)過(guò)期或?qū)⒔狡诘脑噭?，或作?bào)廢處理或優(yōu)先使用，避免浪費(fèi)，然后記錄試劑的詳細(xì)保存情況。k. 實(shí)驗(yàn)中使用的離心管、吸頭等均為一次性用品，使用時(shí)應(yīng)在消毒有效期內(nèi)。l. 試劑準(zhǔn)備工作完成后，將使用過(guò)的離心管、吸頭置于盛有84 消毒液的廢液缸中，還原實(shí)驗(yàn)臺(tái)面。m. 將準(zhǔn)備好的試劑放入傳遞窗中。其他區(qū)的用品不得帶入本區(qū)。每次實(shí)驗(yàn)記錄，書寫工整詳細(xì)，應(yīng)使用本室專用的、帶本室標(biāo)識(shí)的記錄本、紙和筆。n. 走出試劑準(zhǔn)備室，在緩沖區(qū)脫下工作服，將手套及鞋套置于專用污物桶中。o. 工作完畢打開紫外燈消毒5. 本文涉及以下表格試劑保存使用登記表耗材使用登記表30 分鐘。實(shí)驗(yàn)記錄本反應(yīng)體系配置說(shuō)明書標(biāo)本制備區(qū)工

28、作制度 標(biāo)準(zhǔn)操作、程序文件1. 目的： 規(guī)范樣本處理區(qū)的配置、功能、內(nèi)務(wù)管理等。2. 適用范圍： PCR實(shí)驗(yàn)室。3負(fù)責(zé)人：4細(xì)則：操作人：4.1 配置：冰箱一臺(tái)，生物安全柜一臺(tái)，臺(tái)式高速冷凍離心機(jī)一臺(tái)，混勻器一臺(tái)，加樣器一套，臺(tái)， 電熱恒溫水浴箱？ 一臺(tái)，空調(diào)一臺(tái)，其它耗品、辦公用品若干?？梢苿?dòng)紫外燈？ 一4.2 功能：本區(qū)負(fù)責(zé)各種標(biāo)本、質(zhì)控樣品的核酸提取純化，儲(chǔ)藏，樣本貯存。4.3 內(nèi)務(wù)管理：a. 著裝和標(biāo)識(shí)：本區(qū)工作服、專用設(shè)備均以 藍(lán)色？ 為標(biāo)識(shí)。b. 驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)專用 藍(lán)色 工作服。 實(shí)驗(yàn)中須戴一次性手套 （手套需常更換） 、鞋套或本區(qū)專用拖鞋。c. 從傳遞窗中取出試劑放入冰

29、箱試劑存放專區(qū)暫存。d. 記錄溫濕度計(jì)讀數(shù)和冰箱的溫度計(jì)讀數(shù)。 （本區(qū)每天在工作前利用本區(qū)的溫控設(shè)備使溫度控制在15- 25之間）e. 核對(duì)標(biāo)本的編號(hào)、類型和標(biāo)本數(shù)量。f. 按試劑盒要求進(jìn)行標(biāo)本的裂解和提取處理， 在生物安全柜上進(jìn)行加樣， 加樣后低 12000rpm 離心數(shù)秒。g. 使用本室專用的經(jīng)過(guò)無(wú)菌處理的加樣器和帶濾芯的吸頭。h. 使用過(guò)的離心管、吸頭須置于盛有5%施康消毒液的廢液缸中。i. 使用帶有本室標(biāo)識(shí)的記錄本、紙和筆。其他區(qū)的用品不得帶入本室。j. 患者標(biāo)本應(yīng)按有生物傳染性危險(xiǎn)品對(duì)待。k. 標(biāo)本處理完成后，關(guān)閉所有儀器，記錄運(yùn)行狀態(tài)。l. 走出標(biāo)本處理區(qū)，在緩沖區(qū)脫下專用工作服，

30、將手套、鞋套置于專用污物桶中。m. 實(shí)驗(yàn)完畢打開紫外燈消毒60 分鐘。4.4 核酸提取操作規(guī)程本實(shí)驗(yàn)室使用江蘇碩世的核酸提取試劑取 200l 樣品于 1.5ml 離心管中加入 400l Lysis Buffer, 振蕩混勻，室溫孵育 10 分鐘加入 450l Binding Buffer ( 已加無(wú)水乙醇 ) ，振蕩混勻?qū)?600l 混合液移至一新吸附柱中，412000rpm ，離心 1 分鐘；棄廢液，將吸附柱放入同一收集管中將剩余混合液移至吸附柱中，4 12000rpm ，離心 1 分鐘；棄廢液，將吸附柱放入新收集管中加入 400l WB1 ，4 12000rpm ，離心 30 秒；棄廢液，

31、將吸附柱放入同一收集管中加入 600l WB2 ( 已加無(wú)水乙醇 )，4 12000rpm ，離心 30 秒；棄廢液，將吸附柱放入同一收集管中4 12000rpm ，空柱離心 3 分鐘將吸附柱放入新離心管中，在吸附柱膜中央小心加入50l Elution Buffer, 室溫靜置 2-5 分鐘4 12000rpm ，離心 1 分鐘-20 保存?zhèn)溆?. 本文涉及以下表格試劑保存使用登記表核酸提取說(shuō)明書擴(kuò)增區(qū)工作制度 標(biāo)準(zhǔn)操作、程序文件1. 目的： 規(guī)范基因擴(kuò)增、分析區(qū)的配置、功能、內(nèi)務(wù)管理等。2. 適用范圍： PCR實(shí)驗(yàn)室。3負(fù)責(zé)人：4細(xì)則：操作人：4.1 配置：美國(guó)伯樂 PTC-200 型核酸擴(kuò)

32、增儀一臺(tái)， ABI7300 熒光定量檢測(cè)儀一臺(tái)，電腦一臺(tái)、可移動(dòng)紫外燈一臺(tái)空調(diào)一臺(tái)、其它耗品、辦公用品若干。4.2 功能：進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)并對(duì)產(chǎn)物進(jìn)行分析。4.3 內(nèi)務(wù)管理：?、a. 著裝和標(biāo)識(shí)：本區(qū)工作服、專用設(shè)備均以紅色為標(biāo)識(shí)。b. 實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)專用紅色工作服。實(shí)驗(yàn)中須戴一次性手套專用拖鞋。（手套需常更換） 、鞋套或本區(qū)c. 從傳遞窗中取出已加樣并離心好的反應(yīng)管上機(jī)擴(kuò)增。d. 按熒光擴(kuò)增儀的標(biāo)準(zhǔn)操作文件對(duì)各種標(biāo)本進(jìn)行檢測(cè)。擴(kuò)增結(jié)束后對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行分析。e. 記錄溫濕度計(jì)讀數(shù)。 （本區(qū)每天在工作前利用本區(qū)的溫控設(shè)備使溫度控制在f. 作好擴(kuò)增儀的維護(hù)、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的記錄、質(zhì)控記錄。g. 關(guān)

33、閉擴(kuò)增儀，記錄運(yùn)行狀態(tài)。15- 25之間）h. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將已經(jīng)擴(kuò)增的反應(yīng)管放入塑料套袋中密閉后帶出，脫下手套、鞋套置于專用污物桶中，由衛(wèi)生員清除。i. 實(shí)驗(yàn)完畢打開紫外燈消毒4.4 核酸擴(kuò)增操作規(guī)程60 分鐘本實(shí)驗(yàn)室使用美國(guó)伯樂PTC-200 型核酸擴(kuò)增儀和 ABI7300 熒光定量檢測(cè)儀，在此對(duì)其操作 規(guī)范？ 進(jìn)行描述a. 伯樂 PTC-200型核酸擴(kuò)增儀操作 開機(jī), 打開電源開關(guān)，儀器進(jìn)行自檢（約一分鐘結(jié)束） ； 運(yùn)行，顯示主菜單，運(yùn)行一個(gè)程序：從主菜單中選擇 RUN，按 Proceed ，顯示 菜單 （和自己創(chuàng)建的文件夾）？ 用 Select 鍵選擇要運(yùn)行的程序，按 Proceed ；

34、 設(shè)置樣品管子類型及反應(yīng)體積在“Vessel Type”項(xiàng)中選擇，要使用的（管子、微型板和玻片） ，按 Proceed ； 在“Volume”項(xiàng)中輸入樣品體積（微升）按 Proceed ； 在“Use heated lid ”中選擇程序運(yùn)行過(guò)程中是否熱蓋，按b. ABI 7300 型熒光定量檢測(cè)儀操作Proceed ；程序開始運(yùn)行。 打開計(jì)算機(jī)，打開擴(kuò)增儀電源開關(guān)；雙擊桌面上“序界面（圖 1）；7300 System Software ”圖標(biāo)，進(jìn)入 ABI 7300 程圖 1 點(diǎn)擊 “New document”進(jìn)入新建實(shí)驗(yàn)界面（圖2）；圖 2 點(diǎn)擊進(jìn)入模版選擇界面（圖3）；圖 3 選擇 hbv

35、 后點(diǎn)擊按鈕， 回到前一個(gè)界面； 點(diǎn)擊按鈕， 進(jìn)入樣本設(shè)置界面 （圖 4）；圖 4 在這個(gè)界面里，默認(rèn)所有的孔位都有樣品。該圖標(biāo)表示：第 35 號(hào)標(biāo)本，該圖標(biāo)4表示：標(biāo)準(zhǔn)品 4，濃度誒 510 拷貝 / 毫升。根據(jù)當(dāng)天標(biāo)本的實(shí)際情況把沒有放置標(biāo)本的孔位去除：首先拖動(dòng)鼠標(biāo)將沒有放置標(biāo)本的孔位選中（按住Ctrl 鍵的同時(shí)用鼠標(biāo)選擇相應(yīng)孔位） ，點(diǎn)擊“Hide/Show WellInspector ”, 進(jìn)入選擇界面（圖 5）。圖 5將選擇框中的“”去掉，變成，點(diǎn)擊回到圖 4，同時(shí)被選中孔中的 會(huì)被去掉。在圖 5 中請(qǐng)確認(rèn)中顯示的為“（none）”。 輸入標(biāo)準(zhǔn)品的方法：請(qǐng)先選擇要設(shè)置為標(biāo)準(zhǔn)品的孔位點(diǎn)

36、擊進(jìn)入如下界面，將“ Task”下選項(xiàng)設(shè)50000”( 圖 6)置為“ Standard ”, 在“Quantity ”下輸入相應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)品的拷貝數(shù)，如“圖 6 設(shè)置好標(biāo)本及標(biāo)準(zhǔn)品后，點(diǎn)擊中的進(jìn)入反應(yīng)條件設(shè)置界面（圖7）。圖 7 一切設(shè)定好后，點(diǎn)擊“Save Document ”, 在跳出的如下界面中輸入文件名（一般用項(xiàng)目名+年月日表示），如“ HBV20060526”( 圖 8). 然后點(diǎn)擊回到圖 7。圖 8 點(diǎn)擊進(jìn)入實(shí)驗(yàn)階段 ( 圖中“ Start ”因?yàn)闆]有聯(lián)機(jī)呈灰色 ), 此時(shí)機(jī)器會(huì)調(diào)用實(shí)驗(yàn)所需的程序，稍后會(huì)出現(xiàn)實(shí)驗(yàn)所需時(shí)間及實(shí)驗(yàn)中的溫度變化情況。一般等這些數(shù)字顯示出來(lái)就可以放心離開了。

37、實(shí) 驗(yàn) 過(guò) 程 中 可 以 點(diǎn) 擊 圖 7 中進(jìn) 入 實(shí) 時(shí) 熒 光 PCR 界 面 。 點(diǎn) 擊中的可以進(jìn)入實(shí)時(shí)熒光 PCR擴(kuò)增曲線的實(shí)時(shí)顯示界面。 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后分析實(shí)驗(yàn)結(jié)果并保存數(shù)據(jù)，退出軟件的主菜單；關(guān)掉電腦，關(guān)閉源開關(guān) .ABI-7300 儀器正面的電c. ABI 7300 型熒光定量檢測(cè)儀實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析A. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)效的判斷標(biāo)準(zhǔn)：出現(xiàn)下述四種情況中的任何一種或多種，當(dāng)次實(shí)驗(yàn)結(jié)果不可發(fā)，查找原因，重做實(shí)驗(yàn)。 陰性對(duì)照出現(xiàn)擴(kuò)增。 陽(yáng)性對(duì)照無(wú)擴(kuò)增。 大批甚至所有的標(biāo)本都擴(kuò)增了。 室內(nèi)質(zhì)控檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)失控情況，實(shí)驗(yàn)失控的具體標(biāo)準(zhǔn)詳見室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。B. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效的判斷標(biāo)準(zhǔn)：達(dá)到下列要求

38、后，當(dāng)次實(shí)驗(yàn)有效，可以發(fā)放結(jié)果。 陰性對(duì)照沒有擴(kuò)增，陽(yáng)性對(duì)照擴(kuò)增。 熒光擴(kuò)增儀陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品梯度曲線平滑均勻，斜率、截距和相關(guān)系數(shù)三個(gè)參數(shù)的數(shù)值均在范圍內(nèi)。 室內(nèi)質(zhì)控檢測(cè)結(jié)果處于在控狀態(tài)。5. 本文涉及以下表格室間質(zhì)評(píng)記錄表PCR室內(nèi)質(zhì)控記錄表室內(nèi)質(zhì)控圖產(chǎn)物分析區(qū)工作制度 標(biāo)準(zhǔn)操作、程序文件1、目的： 保證擴(kuò)增結(jié)果分析的標(biāo)準(zhǔn)化、規(guī)范化。2適用范圍 ：適用于本室使用的六一儀器的DYY 6C 型瓊脂糖凝膠電泳儀和美國(guó)伯樂BIO-RAD Gel Doc XR凝膠成像儀。3負(fù)責(zé)人：4細(xì)則：操作人：4.1 配置：凝膠電泳儀一臺(tái)，凝膠成像儀一臺(tái)，電腦一臺(tái)、可移動(dòng)紫外燈一臺(tái)其它耗品、辦公用品若干。?、 高壓消毒

39、鍋一臺(tái)？、 空調(diào)一臺(tái)、4.2 功能：進(jìn)行擴(kuò)增反應(yīng)產(chǎn)物進(jìn)行分析。4.3 內(nèi)務(wù)管理：a. 著裝和標(biāo)識(shí)：本區(qū)工作服、專用設(shè)備均以？色為標(biāo)識(shí)。b. 實(shí)驗(yàn)人員進(jìn)入該區(qū)須穿本區(qū)專用？色工作服。實(shí)驗(yàn)中須戴一次性手套專用拖鞋。（手套需常更換） 、鞋套或本區(qū)c. 從傳遞窗中取出已擴(kuò)增好的反應(yīng)管取樣電泳并分析結(jié)果。d. 記錄溫濕度計(jì)讀數(shù)（本區(qū)每天在工作前利用本區(qū)的溫控設(shè)備使溫度控制在的維護(hù)、實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)的記錄。15- 25之間）；作好儀器e. 關(guān)閉儀器，記錄運(yùn)行狀態(tài)。f. 實(shí)驗(yàn)結(jié)束后將已經(jīng)擴(kuò)增的反應(yīng)管放入塑料套袋中密閉后帶出，脫下手套、鞋套置于專用污物桶中，由衛(wèi)生員（經(jīng)培訓(xùn)）清除。g. 實(shí)驗(yàn)完畢打開紫外燈消毒60 分

40、鐘4.4 凝膠電泳儀及凝膠成像儀操作規(guī)程a. 凝膠電泳儀操作 確認(rèn)電源符合要求后，開啟電泳儀的“電源開關(guān)” ； 儀器蜂鳴 4 聲后顯示上一次工作的設(shè)定值； 因是重復(fù)同一參數(shù)使用時(shí)， 即可直接選擇 Start 后啟動(dòng)； 按【啟 / ?！挎I后，儀器鳴響4 聲，輸出啟動(dòng)， “輸出指示燈”閃亮，開始工作（當(dāng)輸出穩(wěn)定后，穩(wěn)2 聲以示提醒用戶） ；壓/ 穩(wěn)流狀態(tài)改變時(shí)，儀器會(huì)自動(dòng)鳴響 定時(shí)到后儀器自動(dòng)顯示已用時(shí)間并反復(fù)鳴響，關(guān)機(jī)取出凝膠；B. 凝膠成像儀操作、 將取出的凝膠置于適當(dāng)?shù)妮d物平臺(tái)上 關(guān)閉暗箱門 調(diào)整濾光片 打開相應(yīng)光源 接下來(lái)打開 Quantity One 軟件，選擇 File 中選 GelD

41、oc XR 菜單, 進(jìn)入圖像采集界面 按下 Live/Focus ，成像儀進(jìn)入實(shí)時(shí)成像11 選擇照明模式，一般熒光樣品選擇12 儀器面板上有三個(gè)上下鍵按鈕：或在儀器面板上手工調(diào)節(jié)UV,普通透射或反射樣品選擇White 模式IRIS （光圈），ZOOM（縮放），F(xiàn)OCUS（聚焦），可在軟件上直接調(diào)節(jié)13 單擊 Auto Expose, 系統(tǒng)將自動(dòng)選擇曝光時(shí)間成像（系統(tǒng)默認(rèn)0.15%的像素飽和的成像時(shí)間為最佳時(shí)間，在 Options 對(duì)話框中可以修改該項(xiàng)設(shè)置） ，如不滿意， 單擊 Manual Expose，并輸入曝光時(shí)間 （秒）14 圖像曝光滿意后，按下“ Freeze ”按鈕15 按下“ An

42、alyze ”按鈕，將彈出一個(gè)新窗口顯示圖像，以供分析16 第 5 步結(jié)束后，也可以按下“ Save”鍵，保存圖像5. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析5.1 實(shí)驗(yàn)結(jié)果無(wú)效的判斷標(biāo)準(zhǔn)：出現(xiàn)下述四種情況中的任何一種或多種，當(dāng)次實(shí)驗(yàn)結(jié)果不可發(fā)，查找原因，重做實(shí)驗(yàn)。 陰性對(duì)照出現(xiàn)擴(kuò)增。 陽(yáng)性對(duì)照無(wú)擴(kuò)增。 大批甚至所有的標(biāo)本都擴(kuò)增了。 室內(nèi)質(zhì)控檢測(cè)結(jié)果出現(xiàn)失控情況，實(shí)驗(yàn)失控的具體標(biāo)準(zhǔn)詳見室內(nèi)質(zhì)控標(biāo)準(zhǔn)操作程序。5.2 實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效的判斷標(biāo)準(zhǔn)：達(dá)到下列要求后，當(dāng)次實(shí)驗(yàn)有效，可以發(fā)放結(jié)果。 陰性對(duì)照沒有擴(kuò)增，陽(yáng)性對(duì)照擴(kuò)增。 室內(nèi)質(zhì)控檢測(cè)結(jié)果處于在控狀態(tài)。6. 本文涉及以下表格標(biāo)本的保存操作程序1目的： 標(biāo)本正確保存，以便必要時(shí)

43、復(fù)查。2適用范圍： 分子診斷室的所有檢測(cè)標(biāo)本。3負(fù)責(zé)人：4程序：操作人：41 處理前的標(biāo)本保存標(biāo)本可 4下短期（ 24h 內(nèi)）保存，長(zhǎng)期保存則需取出棉簽，保存于-70 下。42 報(bào)告發(fā)出后的標(biāo)本保存：a） 提取的核酸標(biāo)本當(dāng)天檢測(cè)可置4保存，如當(dāng)天不檢測(cè)應(yīng)置-70保存；報(bào)告發(fā)出后第二周丟棄。b）原始樣本在報(bào)告發(fā)出后放入低溫冰箱-7 0長(zhǎng)期保存，以備復(fù)查或送檢。c）標(biāo)本放置低溫冰箱保存時(shí)須有記錄，按編號(hào)順序存放，并由專人負(fù)責(zé)管理。43 特殊標(biāo)本的處理：對(duì)暫不檢測(cè)的項(xiàng)目和規(guī)定時(shí)間外收到的零散樣本， 要隨時(shí)登記和交班， 以免漏檢， 遺失和延誤檢驗(yàn)。標(biāo)本一律置于 -70 下長(zhǎng)期保存，使用時(shí)再按需取出檢測(cè)

44、。5. 本文涉及以下圖表：PCR擴(kuò)增接收標(biāo)本記錄表拒收標(biāo)本記錄本標(biāo)本 超低溫保存記錄表PCR標(biāo)本的采集、運(yùn)送、接收程序1目的： 規(guī)范待檢標(biāo)本的正確采集、送檢和處理。2適用范圍： 分子診斷室的所有檢測(cè)標(biāo)本。3負(fù)責(zé)人：4程序：操作人：41 標(biāo)本的采集411 標(biāo)本由接受過(guò)基因擴(kuò)增檢測(cè)有關(guān)標(biāo)本采集、保存、運(yùn)輸知識(shí)培訓(xùn)的人員采集并送至實(shí)驗(yàn)室。412 標(biāo)本采集要求a. 咽拭子：讓患者用清水漱口，然后讓患者張口發(fā)“啊”音，必要時(shí)使用壓舌板；取出培養(yǎng)管中的拭子輕柔、迅速地擦拭兩腭弓、咽及扁桃體；將拭子插入試管中，塞緊瓶塞；b. 肛拭子：用棉花拭子在生理鹽水中浸濕，插入肛門2-3cm 處，自肛門周圍皺襞處拭取，

45、或在肛門口內(nèi)輕輕旋轉(zhuǎn)涂擦，然后插入盛有生理鹽水的試管內(nèi)；c. 糞便：采集的糞便務(wù)求新鮮，不可混入尿液；一般檢查留取少量（5g 左右）糞便即可。盛糞便的容器要求干燥而清潔，不可有消毒劑和防腐劑，最好用一次性便盒。做細(xì)菌培養(yǎng)時(shí)，應(yīng)采集于滅菌的糞便培養(yǎng)管內(nèi)送檢（采集標(biāo)本時(shí)，應(yīng)選擇帶膿血和粘液部分。如無(wú)膿血和粘液，可就糞便表面不同部分及糞端采取。如懷疑霍亂患者的糞便標(biāo)本的采集。 ）；d. 皰疹液：用消毒針將皰疹挑破，然后用棉簽蘸取皰疹液，迅速將棉簽放入內(nèi)裝有35ml 保存液（維持液或生理鹽水，推薦使用維持液）的采樣管中，在靠近頂端處折斷棉簽桿，旋緊管蓋并密封；以上操作均需使用無(wú)菌器材，并將拭子放入滅菌

46、試管；注明標(biāo)本留取時(shí)間，及時(shí)送檢。e. 腦脊液：腦脊液標(biāo)本的采集量為42 標(biāo)本的運(yùn)送標(biāo)本采集后，密閉、標(biāo)（貼）姓名，應(yīng)盡可能快的送至檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室，如運(yùn)送時(shí)間需冰盒送至實(shí)驗(yàn)室。標(biāo)本中如加入了適當(dāng)?shù)姆€(wěn)定劑，如用于1.0 2.0ml ，采集后，即裝入無(wú)菌帶墊圈的血清管中；2 小時(shí)以上，必須用RNA測(cè)定加入 4mol/L 異硫氰酸胍鹽（ GITC）的血清（漿）標(biāo)本和用于 DNA測(cè)定的 EDTA抗凝血等，則可在室溫下運(yùn)送或郵寄。45 接收451 嚴(yán)格對(duì)各類樣本的查對(duì)和雙簽制度，對(duì)病房各樣本及時(shí)進(jìn)行驗(yàn)收，查對(duì)，不符合要求的樣本一律退回，并有書面記錄。452 分類驗(yàn)證a. 一般內(nèi)容進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的樣本在進(jìn)行編號(hào)、

47、離心前，工作人員應(yīng)再次認(rèn)真查對(duì)姓名，編號(hào)等。對(duì)不符合要求者應(yīng)作記錄，并及時(shí)通知送檢單位，正確及時(shí)地補(bǔ)采樣，以免延檢測(cè)結(jié)果報(bào)告。對(duì)書寫不清楚的申請(qǐng)單，要及時(shí)與送檢單位聯(lián)系 ( 可電話 ) ，明確受檢者姓名，性別，年齡，地址和發(fā)病時(shí)間等；并作相應(yīng)記錄。b. 實(shí)驗(yàn)室人員對(duì)標(biāo)本進(jìn)行查驗(yàn)，出現(xiàn)下表中不合要求的情況時(shí)，應(yīng)拒收標(biāo)本，登記并告知相關(guān)科室。類別拒收原因123456未正確使用采樣液保存的標(biāo)本采樣液不足（ 3mL） 或過(guò)量（ 5ml）標(biāo)本容器破裂，標(biāo)本被污染標(biāo)本的病人姓名、年齡、性別等與送檢單不相符RNA檢測(cè)，采樣時(shí)間超過(guò) 2 小時(shí)其他可能嚴(yán)重影響檢驗(yàn)結(jié)果的原因c. 拒收程序a）對(duì)拒收的不合格標(biāo)本應(yīng)

48、在拒收標(biāo)本記錄本上登記。b）填寫不合格標(biāo)本處置單，并隨同申請(qǐng)單送返送檢科室。c）必要時(shí)電話告之相關(guān)科室醫(yī)生或護(hù)士。5. 本文涉及以下圖表：PCR擴(kuò)增接收標(biāo)本記錄表PCR擴(kuò)增拒收標(biāo)本記錄表PCR生物安全防護(hù)措施1目的： 預(yù)防工作人員在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中被感染或污染。2適用范圍： 適用于本室所有工作人員。3負(fù)責(zé)人：4細(xì)則：操作人：41 實(shí)驗(yàn)人員在實(shí)施生物防護(hù)措施時(shí)， 應(yīng)嚴(yán)格遵守各項(xiàng)相應(yīng)的規(guī)章制度， 建立起強(qiáng)烈的生物防護(hù)意識(shí)。42 每天更換廢液缸的 ？2 %戊二醛溶液， 并保證 2 %戊二醛溶液用量為廢液缸內(nèi)總液量的五分之一左右。配置消毒液時(shí)，正確量取足量的消毒劑（用量杯，保證濃度），水的用量也要正確，缸體

49、密封性良好。43 實(shí)驗(yàn)臺(tái)面日常清潔時(shí)使用44 每區(qū)每次實(shí)驗(yàn)后紫外燈照射75%的酒精擦拭。3060 分鐘，如有需要可延長(zhǎng)照射時(shí)間。45 所有標(biāo)本均應(yīng)視作傳染源，因此在標(biāo)本的采集、運(yùn)輸過(guò)程中，標(biāo)本容器應(yīng)完好無(wú)泄漏。46 處理標(biāo)本時(shí)應(yīng)穿工作服、戴手套，以免沾上皮膚。如手或其它部位的皮膚沾上血液或體液標(biāo)本以及試劑，應(yīng)立即沖洗干凈。有下列情況之一者，需另外消毒：手接觸有傳染性的微生物，水龍頭、水池肥皂可能被污染，工作服可能被大量細(xì)菌污染。消毒劑可用“84”消毒液。47 在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，病人標(biāo)本（血液、體液）或試劑不慎濺入眼內(nèi)應(yīng)立即用清水洗。48 實(shí)驗(yàn)過(guò)程中在使用針具等銳器時(shí)，盡量小心防止受傷。若被銳器刺破

50、時(shí)，應(yīng)立即脫下手套，盡量擠壓傷處，使血流出，然后用碘酒、酒精消毒，必要時(shí)進(jìn)行預(yù)防補(bǔ)救措施。49 在實(shí)驗(yàn)過(guò)程中病人標(biāo)本（血液、體液）外漏時(shí)，應(yīng)立即用然后用酒精擦洗，并用紫外燈消毒。2 %戊二醛滴上，濾紙或紗布蓋上半小時(shí)，410 實(shí)驗(yàn)完畢離開時(shí)，應(yīng)脫下所有該實(shí)驗(yàn)區(qū)個(gè)人防護(hù)裝備。411 實(shí)驗(yàn)完畢后應(yīng)對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行紫外消毒。412 遇有意外事故應(yīng)立即報(bào)告科室負(fù)責(zé)人，當(dāng)事人應(yīng)立即注射相關(guān)疫苗或進(jìn)行預(yù)防性治療，并進(jìn)行醫(yī)學(xué)觀察，嚴(yán)重者應(yīng)報(bào)告上級(jí)領(lǐng)導(dǎo) ？。5. 本文涉及以下表格紫外消毒車消毒記錄表實(shí)驗(yàn)室清潔消毒記錄表PCR實(shí)驗(yàn)室化學(xué)試劑配制程序1 目的： 保證實(shí)驗(yàn)中用到的各種溶液符合實(shí)驗(yàn)要求。2 適用范圍： 核

51、酸擴(kuò)增熒光檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室常用溶液：異氰尿酸鈉） 、2 %戊二醛溶液等。？電泳液4%NaOH溶液、 75%酒精、消毒劑（三氯異氰尿酸或 二氯3負(fù)責(zé)人：4程序：操作人：44 化學(xué)試劑的配制：441 用具：干燥潔凈的 250ml 量桶一只， 1000ml 量桶一只， 1000ml 燒杯一只，三角燒瓶?jī)芍?，天平一架?00ml 塑料試劑瓶、 2000ml 廣口瓶各一只。442 配制步驟：4421 配制 4%NaOH溶液:a）用天平稱取 4 克分析純的 NaOH固體，置于一只三角燒瓶中。b）用 250ml 量桶準(zhǔn)確取 100ml 水，緩緩注入盛放 NaOH固體的三角燒瓶中。c）搖蕩三角燒瓶使 NaOH固體充

52、分溶解。d）然后緩緩傾倒入 100ml 塑料試劑瓶中密封保存?zhèn)溆谩?422 配制消毒劑 :a）一般桌面、器具和地面的消毒只要使有效氯達(dá)到500mg/L，即可達(dá)到消毒作用。500g，倒入燒杯中，緩緩加入b）消毒劑為粉狀（ 20 克/ 袋），如配制一升的消毒劑溶液，則取水充分溶解，備用。1000mlc）如需加大消毒力度，則有效氯濃度加大。4423 配制 75%酒精溶液 :a）一般常規(guī)消毒的 75%酒精由醫(yī)院藥劑科提供。b）RNA提取的 75%酒精的配制，試劑盒提供進(jìn)行配制。DEPC水，酒精用分析純的無(wú)水酒精，根據(jù)當(dāng)天的標(biāo)本數(shù)量4424 配制 2%戊二醛溶液 :a）準(zhǔn)確量取戊二醛原液b）量取 980

53、ml 水，緩緩倒入 1000ml 燒杯中，混勻，加至 2000ml 廣口瓶中備用。注意事項(xiàng)：每份配制好的溶液保質(zhì)期為 14 天20ml 倒入 1000ml 燒杯中。PCR實(shí)驗(yàn)室記錄管理制度1、目的： 確保檢驗(yàn)資料的記錄、保存狀態(tài)在控2、適用范圍 ：實(shí)驗(yàn)過(guò)程中產(chǎn)生的數(shù)據(jù)、文本資料的記錄3負(fù)責(zé)人：操作人：4、工作程序：4.1 書面記錄文件的管理：4.1.1 本實(shí)驗(yàn)室的書面記錄包括：001 ABCD人民醫(yī)院檢驗(yàn)科基因檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室平面圖-編號(hào) ABCD/001編號(hào) ABCD/002編號(hào) ABCD/003編號(hào) ABCD/004編號(hào) ABCD/005編號(hào) ABCD/006編號(hào) ABCD/007編號(hào) ABCD

54、/008編號(hào) ABCD/009編號(hào) ABCD/010編號(hào) ABCD/011編號(hào) ABCD/012編號(hào) ABCD/013編號(hào) ABCD/014編號(hào) ABCD/015編號(hào) ABCD/016編號(hào) ABCD/017編號(hào) ABCD/018編號(hào) ABCD/019編號(hào) ABCD/020編號(hào) ABCD/021編號(hào) ABCD/022編號(hào) ABCD/023編號(hào) ABCD/024編號(hào) ABCD/025002 實(shí)驗(yàn)室主要負(fù)責(zé)人簡(jiǎn)歷表 -003PCR實(shí)驗(yàn)室工作人員一覽表 -004PCR擴(kuò)增接收標(biāo)本記錄表 -005 拒收標(biāo)本記錄本 -006 標(biāo)本超低溫保存記錄表 -007PCR試劑購(gòu)買記錄表 -008 試劑驗(yàn)收記錄表 -

55、009PCR室特殊耗材驗(yàn)收記錄表 -010 普通耗材驗(yàn)收記錄表 -011 室間質(zhì)評(píng)記錄表 -012PCR室內(nèi)質(zhì)控記錄表 -013 室內(nèi)質(zhì)控圖 -014 PCR 實(shí)驗(yàn)室環(huán)境溫濕度記錄表 -015 冰箱溫度質(zhì)控圖 -016 儀器使用記錄表 -017 儀器設(shè)備維護(hù)和校準(zhǔn)記錄表-018 紫外消毒車消毒記錄表 -019 應(yīng)急處理登記表 -020 PCR 廢棄標(biāo)本處理交接表 -021 垃圾處理記錄表 -022 實(shí)驗(yàn)室清潔消毒記錄表 -023 PCR 檢驗(yàn)報(bào)告單 -024 耗材進(jìn)購(gòu)記錄表 -025 試劑耗材供應(yīng)商一覽表 -4.1.2 填寫書面記錄，需使用黑色墨水或圓珠筆，字跡清晰，如有涂改，在涂改處應(yīng)有涂改

56、人簽名，不得在記錄表上進(jìn)行無(wú)關(guān)書寫，保持記錄表清潔、完整。實(shí)驗(yàn)記錄表嚴(yán)格專用，不同實(shí)驗(yàn)區(qū)不得混用。4.1.3 每個(gè)記錄本要納入檔案管理， 寫完后及時(shí)放入檔案柜， 每月分類裝訂成冊(cè) , 并依照要求進(jìn)行編號(hào) , 如2003年 5 月的實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄本、試劑消耗記錄本、室內(nèi)質(zhì)控圖分別編為分別放于檔案柜的不同位置以便查詢。標(biāo)本原始檢測(cè)申請(qǐng)單最后保存于倉(cāng)庫(kù)實(shí)驗(yàn)操作區(qū)內(nèi)，保存 5 年。200305SYJG、200305SJXH、200305SLZK，2 年，其它實(shí)驗(yàn)記錄保存于各自4.1.4 定期對(duì)保存的記錄進(jìn)行分析總結(jié)，形成總結(jié)報(bào)告，以便改進(jìn)工作。4.1.5 在沒有實(shí)驗(yàn)室職責(zé)同意的情況下，不得隨意將記錄借出

57、。在記錄借出時(shí)需有實(shí)驗(yàn)室職責(zé)、經(jīng)手人、借閱人的簽名方可。4.2 電腦上記錄文件的管理4.2.1 記錄文件必須保存在非系統(tǒng)分區(qū)中，如D盤，保存路徑要清晰、便捷、易查找。4.2.2 文件夾目錄結(jié)構(gòu)要求層次分明， 一整年的實(shí)驗(yàn)結(jié)果均保存在一個(gè)年度文件夾里， 如“2003 年”文件夾；每個(gè)年度文件夾包含 12 個(gè)月文件夾，如“ J an01”、“Feb02”，每天的實(shí)驗(yàn)結(jié)果就保存在當(dāng)月文件夾里。4.2.3 實(shí)驗(yàn)文件保存時(shí)以當(dāng)天日期命名，若某天進(jìn)行了多次實(shí)驗(yàn)，命名時(shí)在后面以2003 年 5 月 8 日做的兩次實(shí)驗(yàn)，分別保存為 20030508a 和 20030508b。4.2.4 為了防止儲(chǔ)存實(shí)驗(yàn)結(jié)果的

58、電腦發(fā)生系統(tǒng)崩潰、硬件故障等問(wèn)題導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)結(jié)果丟失、無(wú)法查詢等情況，每個(gè)月的實(shí)驗(yàn)結(jié)果記錄文件都要用移動(dòng)存儲(chǔ)設(shè)備（如軟盤、 USB硬盤等）拷貝到另一部 PC機(jī)上做備份；一年的數(shù)據(jù)要用刻錄機(jī)刻制一張 CD光盤備份儲(chǔ)存， 貼上標(biāo)簽， 如“200 3 年實(shí)驗(yàn)結(jié)果備份” , 放入檔案柜妥善存放。a、b、c 等字母標(biāo)識(shí)，如PCR應(yīng)急處理程序1目的： 在實(shí)際工作中，儀器設(shè)備發(fā)生故障、試劑盒發(fā)生質(zhì)量問(wèn)題時(shí)，為保證檢驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性、及時(shí)，應(yīng)正確采取應(yīng)急措施，最大程度上避免或減輕不利影響。2 適用范圍： 適用于滿足核酸擴(kuò)增檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)需要并可能對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果造成誤差的儀器設(shè)備和試劑盒。3 負(fù)責(zé)人：4 細(xì)則：41 核酸

59、擴(kuò)增檢測(cè)實(shí)驗(yàn)室工作人員在職責(zé)范圍內(nèi)均有責(zé)任熟悉各種儀器和相關(guān)設(shè)備的性能、養(yǎng)、常見故障的排除、尤其要嚴(yán)格按照操作規(guī)程操作。要求、 維護(hù)和保42 工作人員在職責(zé)范圍內(nèi)均有責(zé)任有意識(shí)地注意以求及時(shí)發(fā)現(xiàn)并報(bào)告儀器設(shè)備和試劑盒的異常情況。43 作為應(yīng)急處理，潛在著一定的可能影響檢測(cè)質(zhì)量的不確定因素。室負(fù)責(zé)人負(fù)責(zé)在第一時(shí)間檢查核實(shí)應(yīng)急措施的有效性。44 儀器設(shè)備故障d. 科室負(fù)責(zé)人接到異常情況報(bào)警后，立即現(xiàn)場(chǎng)確認(rèn)異常情況的性質(zhì)：觀察有誤、誤操作、偶發(fā)現(xiàn)象或確屬不能立即排除的故障。e. 用紅牌故障標(biāo)志標(biāo)示故障儀器，以防被錯(cuò)誤使用。f. 有滿足要求的替用設(shè)備的，啟用替用設(shè)備（準(zhǔn)用儀器） 。借用其他部門儀器設(shè)備

60、時(shí)，及時(shí)聯(lián)系借用并核實(shí)該設(shè)備的使用狀態(tài)。替用、借用或備用設(shè)備的使用在滿足質(zhì)量要求的同時(shí)，必須同時(shí)滿足實(shí)驗(yàn)室管理措施（特別是防污染）的要求。g. 不能解決的問(wèn)題，應(yīng)及時(shí)與供應(yīng)方會(huì)同解決。根據(jù)雙方合同約定，及時(shí)通知供應(yīng)方。供應(yīng)方技術(shù)支持人員將在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)隨身攜帶備用設(shè)備到達(dá)現(xiàn)場(chǎng)。h. 儀器維修后，必須經(jīng)驗(yàn)收合格并供需雙方簽字，調(diào)試實(shí)驗(yàn)通過(guò)后才能重新啟用。取下紅色故障標(biāo)示（暫停使用） ，換上 ？ 藍(lán)色正常標(biāo)示（正常使用） 。i. 科室主任須檢查并隨時(shí)跟蹤所采取措施的有效性。j. 對(duì)未能及時(shí)排除故障時(shí)，必須及時(shí)上報(bào)辦公室，在主任批準(zhǔn)下，應(yīng)積極聯(lián)系附近的其他已得到認(rèn)證的基因擴(kuò)增檢驗(yàn)實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)，以滿足檢