抗癲癇藥物皮膚不良反應(yīng)與HLA-B1502基因的相關(guān)性研究

1、抗癲癇藥物皮膚不良反響與HLAB*1502基因的相關(guān)性研究抗癲癇藥物皮膚不良反響與HLAB*1502基因的相關(guān)性研究抗癲癇藥物AEDs如卡馬西平BZ、奧卡西平X、拉莫三嗪LTG、苯巴比妥PB及苯妥英鈉PHT均可引起皮膚不良反響，包括輕度斑丘疹PE、Stevens-Jhnsn綜合征SJS、中毒性表皮壞死松解癥txiepideralnerlysis，TEN及藥物超敏綜合征Drughypersensitivitysyndre，DHS。其中SJS和TEN是嚴(yán)重的皮膚和黏膜反響，可導(dǎo)致永久性殘疾甚至致命，TEN致死率高達(dá)40%1。目前研究證據(jù)最多的引起皮膚不良反響是卡馬西平，研究說明，這些嚴(yán)重的皮膚不良

2、反響與HLA基因相關(guān)，中國臺灣、香港及東南亞國家研究說明BZ所致SJS與HLA-B*1502基因相關(guān)。近年來，中國內(nèi)陸如廣州、武漢等地的亦有研究說明BZ等芳香族AEDs所致SJS與HLA-B*1502基因有強(qiáng)相關(guān)性，目前尚未有人對江西漢族人群做過此項(xiàng)研究。本文擬對46例因服用芳香族AEDs而導(dǎo)致皮膚不良反響的病例作為研究對象，根據(jù)皮膚不良反響的輕重分為Stevens-Jhnsn綜合征SJS、細(xì)微皮膚反響PE組、對照組包括耐受者和正常志愿者，采用序列特異性引物聚合酶鏈反響SSP-PR技術(shù)檢測HLA-B*1502的基因型，采用Fisher確切概率法檢驗(yàn)分析HLA-B*1502與AEDS-ADRs的

3、相關(guān)性。以期為臨床合理用藥提供指導(dǎo)。1資料與方法1.1一般資料以筆者所在醫(yī)院2022年7月-2022年12月神經(jīng)內(nèi)科門診及住院部的因服用芳香族抗癲癇藥物而導(dǎo)致皮膚不良反響的46例患者作為研究對象，其中研究組32例，包含SJS13例，PE19例；對照組14例包括耐受者8例和正常志愿者6例。對照組為服用抗癲癇藥物無不良反響患者和無神經(jīng)系統(tǒng)疾并無遺傳病家本文由論文聯(lián)盟.Ll.搜集整理族史的安康體檢者。1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1儀器與試劑美國egaBi-Tek公司的全血基因組DNA提取試劑盒，美國BI-RAD公司的DNAEnginePR儀、凝膠電泳儀及凝膠成像系統(tǒng)。診斷試劑由北京全式金生物技術(shù)提供，引物

4、由美國Invitrgen生命技術(shù)公司提供。1.2.2步驟1血標(biāo)本采集及DNA提?。?DNA濃度和純度測定；3引物稀釋；4PR反響；5瓊脂糖凝膠電泳；6結(jié)果判斷。1.3統(tǒng)計學(xué)處理使用SPSS17.0軟件對所得數(shù)據(jù)進(jìn)展處理，計數(shù)資料采用Fisher確切概率法檢驗(yàn)，P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。2結(jié)果2.1電泳結(jié)果瓊脂糖凝膠電泳結(jié)果顯示SJS組HLA-B*1502陽性率達(dá)100%13/13。PEHLA-B*1502陽性率為10.5%2/19。對照組HLA-B*1502陽性率為7.1%1/14，詳見圖18。SJS組113號、PE組1432號、對照組3346號。1、2、S1、S2、S3和S4的目的條帶大

5、小分別為796bp、256bp、1331bp、125bp、572bp、373bp。特異性引物S1、S2、S3和S4全部擴(kuò)增出目的條帶者為HLA-B*1502陽性，假設(shè)有一對或幾對引物無目的條帶那么為陰性。2.2各樣本組HLA-B*1502基因頻率分析SJS組陽性13例100%，陰性0例；PE組陽性2例10.5%，陰性17例89.5%；對照組陽性1例7.1%，陰性13例92.9%。SJS組與PE組陽性率比擬，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P0.05；SJS組與對照組陽性率比擬，差異有統(tǒng)計學(xué)意義P0.05；對照組與PE組陽性率比擬，差異無統(tǒng)計學(xué)意義。3討論抗癲癇藥物是神經(jīng)內(nèi)科常用藥物，而由此引發(fā)的不良反響最常見

6、的為皮膚不良反響，包括輕度斑丘疹aulpapulareruptins，PE以及致命性的皮膚不良反響severeutaneusreatins，SR如Stevens-Jhnsn綜合征SJS、中毒性表皮壞死松解癥txiepideralnerlysis，TEN及藥物超敏綜合征Drughypersensitivitysyndre，DHS。SJS和TEN均是嚴(yán)重威脅生命的SR，病變累及皮膚面積少于10%為SJS，而大于30%為TEN，在10%30%之間的為SJS與TEN共存2。SJS/TEN的發(fā)病機(jī)制目前還不完全清楚，多數(shù)研究認(rèn)為由免疫反響引起，也有學(xué)者4在易感基因方面做了深化研究，首先發(fā)現(xiàn)SJS的發(fā)病具

7、有家族性，且多為同胞或同卵雙胞胎3。自2022年中國臺灣學(xué)者h(yuǎn)ung等5在Nature上發(fā)表文章說明BZ所致SJS/TEN與HLA-B*1502具有強(qiáng)相關(guān)性以來，又有很多學(xué)者對此作了更多深化的研究。中國香港學(xué)者an等的研究結(jié)果也支持上述觀點(diǎn)，不僅在中國人群有這種相關(guān)性，在很多東南亞國家同樣發(fā)現(xiàn)了這種現(xiàn)象。泰國學(xué)者ihittraTassaneeyakul6的研究說明，泰國人群HLA-B*1502陽性與BZ-SJS/TEN發(fā)生高度相關(guān)。其他芳香族AEDs如PHT、LTG、X等所致SJS/TEN均與HLA-B*1502有相關(guān)性7-8。我國內(nèi)地對此也有相關(guān)研究，以廣州、武漢等地的研究機(jī)構(gòu)對此研究最多。

8、如廣州的秦兵9、武漢的孫丹10等研究發(fā)現(xiàn)以水皰型損傷反響為主要臨床表現(xiàn)的SJS/TEN與HLA-B*1502強(qiáng)相關(guān)性。本研究將耐受者和正常志愿者均歸類于對照組，主要分為三組，即SJS組、PE組和對照組包括耐受者和正常志愿者，其HLA-B*1502陽性率分別為100%13/13、10.5%2/19、7.1%1/14。這一結(jié)果與以往研究結(jié)果一致，提示江西省漢族人群中芳香族AEDs所致SJS/TEN與HLA-B*1502具有強(qiáng)相關(guān)性，而AEDs所致PE與之無相關(guān)性。本研究中SJS組13例均出現(xiàn)不同程度的水皰型皮膚黏膜損傷，結(jié)果HLA-B*1502陽性率到達(dá)100%，而PE組均為非水皰型皮膚損傷，HL

9、A-B*1502陽性率僅為10.5%，與對照組無明顯差異，這一結(jié)果也可從一定程度上證明AEDs所致ADRs與HLA-B*1502的相關(guān)性跟皮膚不良反響的臨床表型有關(guān)，即以水皰型損傷反響為主要臨床表現(xiàn)的SJS/TEN與HLA-B*1502強(qiáng)相關(guān)性，非水皰型的PE那么與之無相關(guān)性11。本研究尚缺少DHS病例，因?yàn)镈HS也是一種比擬嚴(yán)重的藥疹類型，但臨床表型大多以非水皰型皮膚損傷的斑丘疹為主，局部可開展為SJS甚至TEN，所以還需較大樣本量研究以進(jìn)一步證實(shí)。然而，以上這些研究結(jié)果并不適應(yīng)于所有地區(qū)人群，導(dǎo)致這些現(xiàn)象的原因是不同地區(qū)人群中攜帶HLA-B*1502頻率是不一致的4，HLA基因系統(tǒng)最重要的特點(diǎn)就是豐富的多態(tài)性12-13。本研究也提示江西省漢族人群中芳香族AEDs-SJS/TEN與HLA-B*1502強(qiáng)相關(guān)，而AEDs-PE那么與之無相關(guān)性。本研究建立了一套檢測HLA-B*1502基因型的方法，建議在服用BZ等芳香族A