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1、第一節(jié) DNA是主要的遺傳物質(zhì)第3章 基因的本質(zhì)1.說出肺炎雙球菌體內(nèi)、體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的過程和結(jié)論。2.說出肺炎雙球菌體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)的設(shè)計(jì)思路。3.分辨自變量控制中的“加法原理”和“減法原理”。學(xué)習(xí)目標(biāo):1提出“遺傳因子”,并總結(jié)遺傳規(guī)律孟德爾2把“遺傳因子”命名為基因約翰遜3提出基因在染色體上的假說薩 頓4實(shí)驗(yàn)證明基因位于染色體上摩爾根科學(xué)家發(fā)現(xiàn):染色體的主要組成成分是 DNA和蛋白質(zhì)5遺傳物質(zhì)的探索DNA? 蛋白質(zhì)20世紀(jì)20年代:蛋白質(zhì)是由多種氨基酸連接而成的生物大分子。氨基酸多種多樣的排列順序,可能蘊(yùn)含著遺傳信息。蛋白質(zhì)是生物體的遺傳物質(zhì)20世紀(jì)30年代:DNA是由許多脫氧核苷酸聚合而成的
2、生物大分子。但由于對(duì)DNA的結(jié)構(gòu)沒有清晰的了解,認(rèn)為蛋白質(zhì)是遺傳物質(zhì)的觀點(diǎn)仍占主導(dǎo)地位。一、對(duì)遺傳物質(zhì)的早期推測艾弗里赫爾希格里菲思 向蛋白質(zhì)是遺傳物質(zhì)的觀點(diǎn)提出挑戰(zhàn)的學(xué)者是誰呢?蔡斯實(shí)驗(yàn)材料:小白鼠和R型、S型肺炎鏈球菌項(xiàng)目S型細(xì)菌R型細(xì)菌菌落菌體有無致?。ǘ荆┬员砻婀饣?Smooth表面粗糙 Rough有(人鼠患肺炎,小鼠敗血癥死亡)無多糖莢膜 1928年,格里菲思二、肺炎鏈球菌的體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)無多糖莢膜閱讀課本43頁的旁欄,思考:S型肺炎鏈球菌的致病性是直接由多糖類莢膜引起的嗎?不是,是由于多糖類莢膜的保護(hù)作用使得S型肺炎鏈球菌可以抵抗吞噬細(xì)胞的吞噬小組討論實(shí)驗(yàn)中控制單一變量和設(shè)置對(duì)照組。
3、自變量:注射的菌種類型因變量:小鼠的存活情況無關(guān)變量:小鼠的生理狀況、菌種注射計(jì)量等格里菲思實(shí)驗(yàn)的自變量、因變量和無關(guān)變量分別是什么?格里菲思是如何設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)的?肺炎鏈球菌體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)過程第一組小鼠不死亡結(jié)論:R型活細(xì)菌無致病性第二組小鼠死亡,從小鼠體內(nèi)分離出S型活菌注射S型活細(xì)菌S型活細(xì)菌有致病性加熱致死的S型細(xì)菌無致病性第三組小鼠不死亡注射加熱致死的S型活細(xì)菌第四組小鼠死亡,從小鼠體內(nèi)分離出S型活細(xì)菌將R型活細(xì)菌與加熱致死的S型細(xì)菌混合后注入 R型活細(xì)菌S型活細(xì)菌轉(zhuǎn)化死S型注射R型活細(xì)菌二、肺炎鏈球菌的體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn) 1928年,格里菲思結(jié)論:已經(jīng)加熱致死的S型細(xì)菌,含有某種促使R型活細(xì)菌轉(zhuǎn)化
4、為S型活細(xì)菌的活性物質(zhì)轉(zhuǎn)化因子這種轉(zhuǎn)化因子究竟是什么物質(zhì)呢?多糖脂質(zhì) 蛋白質(zhì)RNA DNA多糖蛋白質(zhì)RNADNA脂質(zhì)S型細(xì)菌這種轉(zhuǎn)化因子究竟是什么物質(zhì)呢? 艾弗里及同事將加熱致死的S型菌破碎后,設(shè)法除去絕大部分糖類、蛋白質(zhì)和脂質(zhì),制成細(xì)胞提取物(直接分離法)。三、肺炎鏈球菌的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)(艾弗里和他的同事)第一組R型細(xì)菌S型細(xì)菌有R型細(xì)菌的培養(yǎng)基S型細(xì)菌的細(xì)胞提取物+混合現(xiàn)象:培養(yǎng)基上有R型、S型兩種細(xì)菌分析:去除絕大多數(shù)蛋白質(zhì)、糖類和脂質(zhì)后,細(xì)胞提取物仍然具有轉(zhuǎn)化活性。第二至第四組R型細(xì)菌S型細(xì)菌有R型細(xì)菌的培養(yǎng)基S型細(xì)菌的細(xì)胞提取物+混合蛋白酶(或RNA酶、酯酶)現(xiàn)象:培養(yǎng)基上有R型、S型
5、兩種細(xì)菌分析:分別用蛋白酶、RNA酶、酯酶處理后,細(xì)胞提取物仍然具有轉(zhuǎn)化活性。三、肺炎鏈球菌的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)(艾弗里和他的同事)第五組只長R型細(xì)菌有R型細(xì)菌的培養(yǎng)基S型細(xì)菌的細(xì)胞提取物+混合DNA酶現(xiàn)象:培養(yǎng)基上只有R型分析:用DNA酶處理后,細(xì)胞提取物失去轉(zhuǎn)化活性三、肺炎鏈球菌的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)(艾弗里和他的同事) 艾弗里及同事將加熱致死的S型菌破碎后,設(shè)法除去絕大部分糖類、蛋白質(zhì)和脂質(zhì),制成細(xì)胞提取物。實(shí)驗(yàn)思路:在S型細(xì)菌的提取物中,分別加酶去除某種物質(zhì),觀察能否使得R型細(xì)菌發(fā)生轉(zhuǎn)化。三、肺炎鏈球菌的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)(艾弗里和他的同事)實(shí)驗(yàn)結(jié)論:DNA是使R型細(xì)菌產(chǎn)生穩(wěn)定遺傳變化的物質(zhì)實(shí)驗(yàn)同時(shí)說明:
6、蛋白質(zhì)等物質(zhì)不是遺傳物質(zhì)三、肺炎鏈球菌的體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)(艾弗里和他的同事)已經(jīng)加熱殺死的S型細(xì)菌中,含有某種促使R型細(xì)菌轉(zhuǎn)化為S型細(xì)菌的活性物質(zhì)轉(zhuǎn)化因子格里菲思實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是什么?艾弗里實(shí)驗(yàn)的結(jié)論是什么?DNA是使R型細(xì)菌產(chǎn)生穩(wěn)定遺傳變化的物質(zhì),DNA是轉(zhuǎn)化因子。DNA是遺傳物質(zhì),蛋白質(zhì)等不是遺傳物質(zhì) 。總結(jié):肺炎鏈球菌的體內(nèi)和體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)精講點(diǎn)撥加法原理與減法原理“加法原理”和“減法原理”是在對(duì)照實(shí)驗(yàn)中,控制變量時(shí)可以采用的科學(xué)方法。減法原理:在對(duì)照實(shí)驗(yàn)中,與常態(tài)比較,人為去除某種影響因素稱為“減法原理”。加法原理:在對(duì)照實(shí)驗(yàn)中,與常態(tài)比較,人為施加某種影響因素稱為“加法原理”。在比較過氧化氫在
7、不同條件下的分解實(shí)驗(yàn),給予高溫、施加酶、Fe3+等條件,觀察實(shí)驗(yàn)結(jié)果在肺炎鏈球菌體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)中,每個(gè)實(shí)驗(yàn)組特異性地去除了一種物質(zhì),從而鑒定出使R型細(xì)菌產(chǎn)生穩(wěn)定遺傳變化的物質(zhì)。AB疑問:疑問: 是否有更好的實(shí)驗(yàn)材料,可以不用經(jīng)過人工提純DNA,就能單獨(dú)地去觀察DNA或蛋白質(zhì)的作用呢?赫爾希和蔡斯:實(shí)驗(yàn)材料T2噬菌體 噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)噬菌體的結(jié)構(gòu)模式圖一種專門寄生在大腸桿菌體內(nèi)的DNA病毒。頭部和尾部的外表是由蛋白質(zhì)構(gòu)成,頭部內(nèi)含有DNA。(一)實(shí)驗(yàn)材料:T2噬菌體 四、赫爾希和蔡斯的噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)(二)研究方法:放射性同位素標(biāo)記法 蛋白質(zhì)的組成元素:D N A 的組成元素:C、H、O、
8、N、SC、H、O、N、P 用35S標(biāo)記噬菌體的蛋白質(zhì)用32P標(biāo)記噬菌體的DNA 資料:在T2噬菌體的化學(xué)組分中,60%是蛋白質(zhì),40%是DNA。對(duì)蛋白質(zhì)和DNA的進(jìn)一步分析表明:S僅存在于蛋白質(zhì)分子中,P幾乎都存在于DNA分子中。 思考:標(biāo)記哪一種元素可以把DNA和蛋白質(zhì)分開?為什么?能不能同時(shí)用35S和32P標(biāo)記噬菌體呢?(二)研究方法:放射性同位素標(biāo)記法 在分別含有32P和35S的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)菌分別用上述細(xì)菌培養(yǎng)T2噬菌體,制備含32P的噬菌體和含35S的噬菌體如何標(biāo)記噬菌體呢?直接用含有放射性同位素的培養(yǎng)基來培養(yǎng)噬菌體可以嗎?1、先培養(yǎng)細(xì)菌2、再培養(yǎng)噬菌體標(biāo)記噬菌體的方法大腸桿菌含35
9、S的培養(yǎng)基 含35S的大腸桿菌大腸桿菌含32P的培養(yǎng)基 含32P的大腸桿菌第二步:標(biāo)記T2噬菌體噬菌體含35S的大腸桿菌 含35S的噬菌體噬菌體含32P的大腸桿菌 含32P的噬菌體第一步:標(biāo)記大腸桿菌第三步:已標(biāo)記T2噬菌體侵染未標(biāo)記的大腸桿菌分別用35S或32P的T2噬菌體侵染未標(biāo)記的大腸桿菌。第四步:保溫、攪拌離心培養(yǎng)液第五步:檢測上清液和沉淀物的放射性第六步:檢測子代噬菌體的放射性(三)實(shí)驗(yàn)過程攪拌的目的:使吸附在細(xì)菌上的噬菌體與細(xì)菌分離離心的目的:讓上清液中析出T2噬菌體顆粒,沉淀物中留下被侵染的大腸桿菌結(jié)果說明:侵染大腸桿菌時(shí)噬菌體的蛋白質(zhì)外殼留在細(xì)胞外結(jié)果說明:侵染大腸桿菌時(shí)噬菌體
10、的DNA進(jìn)入細(xì)菌的細(xì)胞中 在噬菌體中,親代和子代之間具有連續(xù)性的物質(zhì)是DNA,而不是蛋白質(zhì)。也就是說,子代噬菌體的各種性狀是通過親代的DNA遺傳給后代的,DNA才是噬菌體的遺傳物質(zhì)。噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)表明實(shí)驗(yàn)結(jié)論:DNA是遺傳物質(zhì),但不能證明蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)(四)實(shí)驗(yàn)結(jié)論侵入別的細(xì)菌吸附注入合成組裝(裂解)釋放注入釋放合成組裝吸附(五)噬菌體侵染細(xì)菌的動(dòng)態(tài)過程 噬菌體的蛋白質(zhì)并沒有進(jìn)入細(xì)菌內(nèi)部,進(jìn)入細(xì)菌內(nèi)部的是噬菌體的_ ,利用的是_的原料合成子代。大腸桿菌DNA當(dāng)噬菌體增殖到一定數(shù)量后,大腸桿菌裂解,釋放出大量的噬菌體??赡軘嚢璨怀浞?。有少量含35S的噬菌體蛋白質(zhì)外殼吸附在細(xì)菌表面,隨細(xì)
11、菌離心到沉淀物中。培養(yǎng)(保溫)時(shí)間過短,部分噬菌體還未侵染細(xì)菌;培養(yǎng)(保溫)時(shí)間過長,部分子代噬菌體已經(jīng)釋放。 DNA是遺傳物質(zhì)1928年 格里菲思 體內(nèi)轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)1944年 艾弗里體外轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)1952年 赫爾希、蔡斯噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)DNA是所有生物的遺傳物質(zhì)嗎? 煙草花葉病毒(TMV)是由RNA和蛋白質(zhì)組成的,在感染煙草時(shí),會(huì)出現(xiàn)致病斑。五、RNA是遺傳物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)證據(jù)只由蛋白質(zhì)和RNA構(gòu)成1.實(shí)驗(yàn)材料:煙草花葉病毒(一)RNA是遺傳物質(zhì)的實(shí)驗(yàn)證據(jù) 五、生物的遺傳物質(zhì)2.實(shí)驗(yàn)過程:RNA 蛋白質(zhì) 感染 不感染 煙草花葉病毒煙草 煙草 得花葉病不得花葉病結(jié)論:煙草花葉病毒的遺傳物質(zhì)是RNA。分離
12、 少數(shù)病毒的遺傳物質(zhì)是RNA。如:煙草花葉病毒、SARS病毒、流感病毒、艾滋病病毒(HIV)等。生物界細(xì)胞生物非細(xì)胞生物RNA病毒:艾滋病病毒、流感病毒、SARS病毒、煙草花葉病毒等DNA病毒:噬菌體、乙肝病毒等原核生物:藍(lán)細(xì)菌、其他細(xì)菌、放線菌、支原體、立克次氏體、衣原體等真核生物:植物、動(dòng)物、真菌、原生生物遺傳物質(zhì)是RNA遺傳物質(zhì)是DNA 核酸是一切生物的遺傳物質(zhì),核酸包括脫氧核糖核酸(DNA)和核糖核酸(RNA),絕大多數(shù)生物都是以DNA作為遺傳物質(zhì)的,因此DNA是主要的遺傳物質(zhì)。遺傳物質(zhì)具有的特點(diǎn)能自我復(fù)制(前后代保持一定的連續(xù)性)能夠指導(dǎo)蛋白質(zhì)的合成,從而控制生物的性狀和代謝的過程。
13、具有多樣性(能儲(chǔ)存大量的遺傳信息)分子結(jié)構(gòu)相對(duì)穩(wěn)定(特定情況下能產(chǎn)生可遺傳的變異)1.格里菲思用肺炎鏈球菌在小鼠身上進(jìn)行了著名的轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn),此實(shí)驗(yàn)結(jié)果:A.證明了DNA是遺傳物質(zhì) B.證明了RNA是遺傳物質(zhì)C.證明了蛋白質(zhì)是遺傳物質(zhì) D.沒有具體證明哪一種物質(zhì)是遺傳物質(zhì)練習(xí):2.艾弗里的肺炎鏈球菌轉(zhuǎn)化實(shí)驗(yàn)及赫爾希與蔡斯的噬菌體侵染細(xì)菌實(shí)驗(yàn)證明了:A.DNA是主要的遺傳物質(zhì) B.染色體是遺傳物質(zhì)的載體C.DNA是遺傳物質(zhì) D.RNA是遺傳物質(zhì)4.用噬菌體去感染含有大量3H的細(xì)菌,待細(xì)菌解體后,3H應(yīng): A.隨細(xì)菌的解體而消失 B.發(fā)現(xiàn)于噬菌體外殼和DNA中 C.僅發(fā)現(xiàn)于噬菌體的DNA中 D.僅發(fā)現(xiàn)于噬菌體的外殼中5、噬菌體侵染細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)中,子代噬菌體的蛋白質(zhì)外殼是:A、在噬菌體DNA的指導(dǎo)下,用細(xì)菌的物質(zhì)合成的B、在細(xì)菌DNA的指導(dǎo)下,用細(xì)菌的物質(zhì)合成的C、在噬菌體DNA的指導(dǎo)下,用噬菌體的
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