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文檔簡介
基因工程基本操作流程圖基因工程的基本操作程序主要包括四個步驟:目的基因的獲取基因表達(dá)載體的構(gòu)建將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞目的基因的檢測與鑒定基因文庫限制酶切一定大小范圍的DNADNA文庫基因組文庫目的基因的獲取其中在第一步目的基因獲取部分之前的內(nèi)容意在指出獲取目的基因的三種方法,即從基因文庫中獲取目的基因、利用PCR擴增目的基因、人工合成目的基因。但書中的圖不容易讓人看懂,教學(xué)中不妨對此圖這部分稍作改動(如)既可幫助學(xué)生梳理知識,而且有助于后面PCR擴增目的基因的學(xué)習(xí)?;蚬こ痰幕静僮鞑襟E人工合成從基因文庫中提取利用PCR技術(shù)擴增第一步目的基因的獲取PCR技術(shù)擴增人工合成載體(質(zhì)粒)DNA分子(含目的基因)匚同一種限制酶切割一帶有黏性末端切口第二步基因表達(dá)載體的構(gòu)建JDNA連接酶重組DNA(環(huán)狀重組質(zhì)粒)表達(dá)鮒弟基因表達(dá)載體的組成:復(fù)制原點+目的基因+啟動子+終止子+標(biāo)記基因抗換iff塔也第三步將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞第四步分子水平檢測目的基因的檢測與鑒定導(dǎo)入檢測:DNA分子雜交技術(shù),即使用放射性同位素標(biāo)記的含目的基因的DNA片段作探針檢測。表達(dá)檢測轉(zhuǎn)錄檢測:分子雜交法,翻譯檢測:抗原一抗體雜交法個體
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