甾體激素類藥物的基本結構和分析

1、甾體激素類藥物的基本結構和分析 第一節(jié) 基本結構與分類 一、分類 二、結構分析 甾體激素的基本骨架ABCD1. 腎上腺皮質激素 A2. 雄性激素和蛋白同化激素 3. 孕激素4. 雌激素 A環(huán)為苯環(huán)，C3位有酚羥基C3位有酚羥基 A環(huán)為苯環(huán)口服避孕藥第二節(jié) 鑒別試驗 一、化學鑒別法 1. 與強酸的呈色反應 母核反應常用與硫酸的呈色反應 醋酸潑尼松 （2005）【鑒別】（2）取本品約 5mg，加硫酸 1ml使溶解，放置 5分鐘，即顯橙色；將此溶液傾入 10ml水中，即變成黃色，漸漸變?yōu)樗{綠色。2. 官能團的反應 （1）酮基的呈色反應黃體酮 （2005）【鑒別】 取本品約，置小試管中，加異煙肼約1m

2、g與甲醇1ml溶解后，加稀鹽酸1滴，即顯黃色。（2）C17位 醇酮基的反應 還原性 腎上腺皮質激素+堿性酒石酸銅 Cu2O（紅色）醋酸潑尼松 （2005）【鑒別】（1） 取本品約1mg，加乙醇2ml使溶解，加10%氫氧化鈉溶液2滴與氯化三苯四氮唑試液1ml，即顯紅色。醋酸去氧皮質酮 （2005）【鑒別】 （1）取本品約5mg，加乙醇溶解后，加氨制硝酸銀試液，即生成黑色沉淀。倍他米松 （2005） 【鑒別】（1）取本品約10mg，加甲醇1ml，微熱溶解后，加熱的堿性灑石酸銅試液1ml，生成磚紅色沉淀。（4）酚羥基的呈色反應（3）甲酮基的呈色反應雌激素重氮苯磺酸紅色（5）炔基的沉淀反應白色炔銀（6

3、）鹵素的反應地塞米松磷酸鈉 （2005）【鑒別】（3）本品顯有機氟化物的鑒別反應（附錄）醋酸酯醋酸 乙酸乙酯（香氣）戊酸酯戊酸（臭氣）己酸酯己酸（臭氣）（7）酯的反應水解產(chǎn)物的反應醋酸地塞米松 （2005） 【鑒別】（2）取本品50mg，加乙醇制氫氧化鉀試液2ml，置水浴中加熱5分鐘，放冷，加硫酸溶液（12）2ml，緩緩煮沸1分鐘，即發(fā)生乙酸乙酯的香氣。己酸羥孕酮 （2000）【鑒別】（2）取本品約50mg，加醇制氫氧化鉀試液2ml，置水浴中加熱 5分鐘，加水3ml，蒸去乙醇，放冷，加硫酸溶液（110）2ml，置水浴中加熱，即發(fā)生己酸的特臭.（二）制備衍生物測定熔點（四）UV（五）IR（六）T

4、LC（七）HPLC 第三節(jié) 特殊雜質檢查 一、有關物質（其他甾體）的檢查 甾體激素類藥物多由其他甾體化合物經(jīng)結構改造而來，易引入與標示甾體激素藥物結構不同、生理活性不同的其他甾體化合物稱為“有關物質” ，包括原料、中間體、異構體、降解產(chǎn)物等1. HPLC （2005） 一般采用不加校正因子的主成分自身對照法 2. TLC （2000） 高低濃度對比法二、游離磷酸鹽的檢查 地塞米松磷酸鈉 分光光度法三、有機溶劑殘留量的檢查 GC 地塞米松磷酸鈉檢查甲醇和丙酮 以正丙醇為內標物質，規(guī)定含丙酮不得過5.0%，且不得出現(xiàn)甲醇峰。四、硒的檢查第四節(jié) 含量測定 一、HPLC 90%以上的本類藥物用此法 反

5、相高效液相色譜法，內標法或外標法定量二、紫外分光光度法 具有43酮基的腎上腺皮質激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素在240nm附近有最大吸收。 具有苯環(huán)的雌激素在280nm附近有最大吸收。 原料、注射劑用一定的溶劑溶解或稀釋后直接測定； 片劑用一定的溶劑提取、濾過，取續(xù)濾液測定。 若有“其他甾體”的干擾，可用色譜法（柱色譜和薄層色譜）分離后再行紫外法測定（2005） 醋酸潑尼松龍片 取本品20片，精密稱定，研細，精密稱取適量（約相當于醋酸潑尼松龍20mg），置100ml量瓶中，加無水乙醇約60ml，振搖15分鐘使醋酸潑尼松龍溶解，加無水乙醇至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5ml，置另一10

6、0ml量瓶中，再用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法（附錄A），在243nm的波長處測定吸光度，按C23H30O6的吸收系數(shù)為370計算，即得。三、四氮唑比色法 1. 原理 皮質激素C17-醇酮基具有還原性，在強堿性溶液中能將四氮唑鹽定量地還原為有色的產(chǎn)物。生成的顏色隨所用試劑和條件的不同而不同。 2. 常用的四氮唑鹽 （1）氯化三苯四氮唑（TTC）即紅四氮唑（RT） （2）藍四氮唑（BT）3. 測定方法 醋酸去氧皮質酮 （2005）【含量測定】取本品適量，精密稱定，加無醛乙醇溶解并定量稀釋制成每1ml中約含35mg的溶液，精密量取10ml，置25ml量瓶中，加氯化三苯四氮唑試液

7、2ml，在氮氣流下，迅速加入氫氧化四甲基銨試液2ml，通氮氣后，密塞，搖勻，于30水浴中放置1小時，迅速冷卻。用無醛乙醇稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法（附錄 A），在485nm的波長處分別測定吸光度；另取醋酸去氧皮質酮對照品適量，精密稱定，同法測定，計算，即得。4. 討論（1）基團的影響（2）溶劑和水分的影響 無醛無水乙醇作溶劑（3）堿的種類及加入順序的影響 先加四氮唑鹽溶液，后加氫氧化四甲基銨溶液（4）空氣中氧及光線的影響（5）溫度與時間的影響四、異煙肼比色法 1. 原理 具有43酮基的腎上腺皮質激素、雄性激素和蛋白同化激素、孕激素在酸性條件下與羰基試劑異煙肼縮合成異煙腙，在一定波

8、長下具有最大吸收 2. 測定方法倍他米松磷酸鈉 （2005）【含量測定】取本品適量（約相當于倍他米松20mg），精密稱定，置50ml量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻（必要時過濾），作為供試品溶液；另取倍他米松磷酸鈉對照品適量（約相當于倍他米松20mg），精密稱定，加甲醇溶解并稀釋制成每1ml中約含倍他米松0.4mg的溶液，作為對照品溶液。精密量取供試品溶液和對照品溶液各1ml，分別置25ml量瓶中，各精密加異煙肼溶液（異煙肼75mg，鹽酸，加甲醇溶解并稀釋至100ml）20ml，搖勻，置60水浴中保溫1小時，冷卻，加甲醇稀釋至刻度，搖勻，照紫外-可見分光光度法(附錄 A)，在420nm的波長處分別測定吸光度，計算，即得。3. 討論（1）溶劑的選擇 無水甲醇或無水乙醇（2）酸的種類 HCl、H2SO4、HAc均可，且酸與異煙肼的摩爾比為2:1時可獲得最大吸收。（3）水分、溫度、光線和氧的影響 水分使反應逆轉，溫度使反應加快，具塞玻管中反應，光線和氧不影響。（4）關于反應專屬性 在一定的反應條件下，只有C3-酮基起反應，故本法對4-3-酮甾體具有專屬性。五、Kober反應比色法 Kober反應是指雌激素與硫酸-乙醇反應呈色，在515nm附近有最大吸收?？捎糜诖萍に氐谋壬y定。 復方炔諾孕酮滴丸 （20