醫(yī)學(xué)專題血清α-淀粉酶活性測(cè)定(邁克)幻燈片

1、血清-淀粉酶（AMS或AMY）活性的測(cè)定Reagent for - Amylase Test一、原理二、測(cè)定方法三、參考值四、臨床意義五、注意事項(xiàng)六、方法學(xué)評(píng)價(jià)2021/7/20 星期二1一、原理：樣品中-淀粉酶（1，4-D-葡萄糖水解酶，又稱淀粉內(nèi)切酶，對(duì)1，4-糖苷鍵連接的葡萄糖有特異性。）催化淀粉分子及糖原中的-1，4葡萄糖苷鍵水解，產(chǎn)生葡萄糖、麥芽糖及含有-1，6糖苷鍵支鏈的糊精，在淀粉（已知濃度）充分的條件下，反應(yīng)后加入碘液與未被水解的淀粉結(jié)合成藍(lán)色復(fù)合物，其顏色的深淺與未經(jīng)酶促反應(yīng)的空白管比較，從而推算出淀粉酶的活力。注：1、生物界存在和兩種淀粉酶，但人體內(nèi)僅有-淀粉酶。 2、淀粉

2、酶分子量40000 50000,很易由腎排出。2021/7/20 星期二2二、測(cè)定步驟： 各管混勻， 660nm波長，以蒸餾水調(diào)零，測(cè)定各管吸光度值。 試 劑 測(cè)定（U） 空白（B） 樣 品 （ml） 0.02 蒸餾水 （ml） 0.02 試劑 R1（ml） 1.00 1.00 各管混勻，置37度水浴7.5分鐘。 試劑 R2（ml） 1.00 1.00 蒸餾水 （ml） 5.00 5.00 2021/7/20 星期二32、計(jì)算： 注：淀粉濃度 0.4g/L 樣品AMY活力（蘇氏單位）=樣品AMY活力（蘇氏單位)=2021/7/20 星期二4注解0.4淀粉濃度5.0 1單位定義消耗淀粉mg數(shù)15

3、 1單位定義反應(yīng)時(shí)間7.5 酶的實(shí)際作用時(shí)間100 1單位定義用血清0.02 樣品取量2021/7/20 星期二53、AMY活性單位定義：100ml血清中的淀粉酶在37，15分鐘水解5mg淀粉為1個(gè)單位。2021/7/20 星期二64、半自動(dòng)生化儀的使用測(cè)定法：終點(diǎn)法溫 度：37波 長：623nm吸 量：1000 l參考范圍：60180U線性范圍：0400U2021/7/20 星期二7三、參考值： 血清：60180U蘇氏單位尿液：100 1200U蘇氏單位2021/7/20 星期二8四、臨床意義： 淀粉酶主要由胰腺和唾液腺分泌，肺、肝、甲狀腺、脂肪等組織亦含有此酶。血清淀粉酶測(cè)定主要用于急性胰

4、腺炎的診斷。一般于發(fā)病后612h開始升高，1224h達(dá)峰值，25d恢復(fù)正常，因此血清淀粉酶活性顯著升高對(duì)急性胰腺炎的早期診斷價(jià)值較大。淀粉酶可通過腎小球?yàn)V過，尿淀粉酶于發(fā)病后1224h開始升高，持續(xù)時(shí)間長，下降比血清淀粉酶慢，故胰腺炎后期測(cè)尿淀粉酶更有價(jià)值。2021/7/20 星期二9 慢性胰腺炎、胰腺癌、急性闌尾炎、潰瘍性穿孔、腸梗阻、流行性腮腺炎、唾液腺化膿等血清淀粉酶均可升高。腎功能障礙時(shí)，血清淀粉酶升高，尿淀粉酶降低。各種肝病患者，血、尿淀粉酶同時(shí)降低。2021/7/20 星期二10五、注意事項(xiàng)：1、樣品為不溶血的血清、血漿或尿液（pH值應(yīng)調(diào)至7.0）樣品應(yīng)在低溫條件下運(yùn)輸保存，血清或血漿中淀粉酶28可穩(wěn)定30天，室溫可穩(wěn)定7天。2、如果樣品中AMY活力大于400蘇氏單位或測(cè)定管吸光度小于空白管吸光度一半時(shí)，應(yīng)將樣品稀釋后再進(jìn)行測(cè)定，測(cè)定結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。3、加入顯色劑及蒸餾水后，應(yīng)立即比色，否則可致結(jié)果偏高。使用血漿時(shí)應(yīng)選用肝素抗凝。4、如遇黃疸、溶血或乳糜標(biāo)本時(shí)應(yīng)作樣品空白。 2021/7/20 星期二11六、方法學(xué)評(píng)價(jià)1.淀粉遇碘呈藍(lán)色反應(yīng)屬有機(jī)化學(xué)的經(jīng)典型反應(yīng)，方法可靠，反應(yīng)特異性高。2.線性范圍：0400蘇式單位（U/L）3