農(nóng)藥登記殘留試驗課件

1、第五章農(nóng)藥登記殘留試驗2022/7/31第五章農(nóng)藥登記殘留試驗4.1 前言 農(nóng)藥是現(xiàn)有人類管理的所有具有潛在毒性的化合物中，被有意識地釋放到環(huán)境中以實現(xiàn)其價值的物質(zhì)。 通過使用農(nóng)藥，人類獲得了更多的農(nóng)業(yè)產(chǎn)出，減少了蚊蠅等家庭害蟲的危害，并在公共衛(wèi)生場所有效地控制了有害物的孳生，但獲得這些利益的同時也伴隨著對人類和環(huán)境的風險。 因此，目前世界上經(jīng)濟發(fā)達的國家都對農(nóng)藥實行了嚴格的管理，以盡量減少農(nóng)藥對人類及環(huán)境的副作用。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗各國在制定農(nóng)藥管理法規(guī)時，一般要考慮的立法要素包括：組織及管理、登記、最大殘留限量、進口管理、許可證制度、廣告、經(jīng)營活動記錄登記、違法與處罰、監(jiān)督與監(jiān)測、培訓

2、及約束條款。其中農(nóng)藥登記制度是農(nóng)藥管理的核心制度，其它各項立法要素都以農(nóng)藥登記為核心加以展開。生產(chǎn)（包括原藥生產(chǎn)、制劑加工和分裝）農(nóng)藥和進口農(nóng)藥，必須進行登記 。為保證法律法規(guī)的落實，各國首先要確定農(nóng)藥管理的機構(gòu)及管理框架，具體包括確定農(nóng)藥的主管部門、執(zhí)行機構(gòu)、咨詢技術委員會、監(jiān)督檢測體系等。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗 按農(nóng)藥登記的主管部門分類，目前世界上農(nóng)藥管理模式主要分為三種： 第一種是以美國為代表的環(huán)保部門主管模式； 第二種是以日本、德國等為代表的農(nóng)業(yè)部門主管模式； 第三種是以加拿大為代表的衛(wèi)生部門主管模式。這三種模式一方面反映了各國農(nóng)藥管理的側(cè)重點和出發(fā)點，另一方面也是基于各自國情經(jīng)過長期

3、歷史演變形成的。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗我國的農(nóng)藥登記制度起步于上世紀80年代初，參照國際通行的農(nóng)藥登記制度和相關標準，結(jié)合我國國情和農(nóng)藥工業(yè)發(fā)展現(xiàn)狀，歷經(jīng)30年的發(fā)展，初步建立了農(nóng)藥登記評價標準體系，為我國的農(nóng)藥管理工作步入規(guī)范軌道，奠定了很好的基礎。2008年1月8日農(nóng)業(yè)部又發(fā)布了農(nóng)藥登記資料規(guī)定，相對于2001年發(fā)布的農(nóng)藥登記資料要求，在農(nóng)藥產(chǎn)品化學、藥效、殘留、毒理和環(huán)境生態(tài)等方面有了很大的變化，執(zhí)行要求也更加嚴格。農(nóng)藥新登記規(guī)定的出臺不僅提高了農(nóng)藥登記的門檻，增強了評價農(nóng)藥的科學性，更重要的是預示著未來農(nóng)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展的方向。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗 農(nóng)藥產(chǎn)業(yè)發(fā)展趨勢：（1）從農(nóng)藥成分看，由

4、關注有效成分到涉及所有組分，有利于促進農(nóng)藥生產(chǎn)工藝的優(yōu)化。農(nóng)藥原藥中部分雜質(zhì)的藥害危害農(nóng)藥制劑中溶劑和表面活性劑的風險危害農(nóng)藥制劑中增效劑的風險危害（2）從農(nóng)藥作用效果看，由關注挽回產(chǎn)量損失延伸到農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全，這種變化有利于全方位評價藥效。（3）從農(nóng)藥作用對象看，由關注農(nóng)藥對靶標生物的效果延伸到對整個生態(tài)環(huán)境的影響，這種變化有利于提高農(nóng)藥生產(chǎn)者的環(huán)境責任。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗農(nóng)藥登記藥效、殘留、毒性、環(huán)境等試驗應由我國農(nóng)藥部認定的試驗單位完成。農(nóng)藥產(chǎn)品質(zhì)量檢測應由省級以上法定質(zhì)量檢測機構(gòu)完成。試驗或檢測驗單位應按相關的試驗準則、標準、技術規(guī)范進行，提供規(guī)范的試驗或檢測報告。第五章農(nóng)藥登記殘

5、留試驗 英國政府規(guī)定一個農(nóng)藥首先要通過安全性登記，才能進行藥效登記，只有被批準列入PSPS (農(nóng)藥安全預防條例)的農(nóng)藥品種，才可能被農(nóng)業(yè)、園藝、森林、貯糧等方面采用，并列入ACAS(農(nóng)用化學品核準條例)的農(nóng)藥品種名錄. 美國，近些年來已經(jīng)取消對農(nóng)藥產(chǎn)品藥效資料的審查，重點審查農(nóng)藥殘留和環(huán)境安全方面的資料，并投入大量資金進行農(nóng)藥殘留監(jiān)測，每年美國國會批準用于農(nóng)產(chǎn)品殘留監(jiān)測的經(jīng)費約9億美元。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗4.2 農(nóng)藥殘留田間試驗的一些基本概念農(nóng)藥殘留田間試驗定義：是為農(nóng)藥登記和制定農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥最大殘留限量標準或制定農(nóng)藥合理使用準則，提供殘留資料而設計進行的室外（田間或模擬）試驗。目的：根據(jù)

6、供試農(nóng)藥的實際使用情況，按照殘留試驗要求設計試驗，得到農(nóng)藥在農(nóng)作物、土壤、水中的消解動態(tài)和作物收獲時的最終殘留狀況。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗農(nóng)藥殘留動態(tài) 是指施藥后殘留農(nóng)藥逐步降解和消失的過程。 目的：了解施藥至收獲時農(nóng)藥殘留的消長，可以預測農(nóng)藥殘留行為，指導合理安全使用農(nóng)藥。 以殘留動態(tài)曲線來表征： 為了考察作物和土壤中的農(nóng)藥，隨著施藥后天數(shù)的增加而不斷降解直至消失的過程，在施藥后不同時間采樣測定其殘留量，以農(nóng)藥殘留量為縱坐標，施藥后的天數(shù)為橫坐標作圖，得到農(nóng)藥殘留動態(tài)曲線。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗 殘留動態(tài)曲線從曲線可以看出，一般農(nóng)藥消解有兩種情況：（1）迅速消解大多數(shù)易揮發(fā)、淋溶、光解的農(nóng)藥

7、消解快，如辛硫磷，殺螟硫磷。（2）緩慢消解階段不易揮發(fā)、降解，有一定脂溶性或內(nèi)吸滲透性的，消解緩慢，如殺蟲脒，DDT等。根據(jù)農(nóng)藥殘留動態(tài)，可以得到以下信息：安全間隔期，半衰期，殘效期（藥效期）。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗第五章農(nóng)藥登記殘留試驗農(nóng)藥殘留半衰期是指農(nóng)藥殘留分解消失到原始藥量的一半所需要的時間，通常從殘留動態(tài)曲線上，算出農(nóng)藥降解一半的天數(shù)，為半衰期。它是農(nóng)藥在自然界中穩(wěn)定性和持久性的標志，通常以農(nóng)藥在作物上和土壤中的半衰期來衡量它在環(huán)境中的持久性。它是與農(nóng)藥本身性質(zhì)有關外，還與外界條件有關，因此它只能限制性地代表某一特定條件下的數(shù)據(jù)。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗農(nóng)藥在土壤中的半衰期是評價農(nóng)藥對

8、環(huán)境污染的指標之一。農(nóng)藥在漬水土壤和非漬水土壤中的半衰期相差很大。半衰期的長短，不僅直接影響土壤中動植物和微生物的生長，還影響其從土壤中對大氣、水源及作物的污染，對后茬作物的藥害。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗農(nóng)藥在作物上的半衰期是農(nóng)藥在作物上殘效期和殘留期長短的指標。太短，會影響藥效，太長，會造成最終殘留。各種農(nóng)藥的持久性是有區(qū)別的，以有機磷為例：辛硫磷，DDV-低殘留農(nóng)藥，對硫磷-殘留期較長，毒性大，樂果-中等殘留內(nèi)吸磷-內(nèi)吸，劇毒（或慢性毒性），殘留期長，已在茶葉中禁用。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗 安全間隔期是指最后一次施藥至作物收獲時所允許的間隔天數(shù)，即收獲前禁止使用農(nóng)藥的日期。大于安全間隔期施藥

9、，收獲的農(nóng)產(chǎn)品中殘留量不會超過最大殘留限量，可以保證食用者的安全。通常，按照實際使用方法施藥，不同天數(shù)采樣測定，作出作物上的殘留動態(tài)曲線，以作物上的殘留量降至最大殘留限量所對應的天數(shù)，作為安全間隔期的參考值。這是新農(nóng)藥登記時必須提供的資料。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗 在制定安全間隔期時，必須參考農(nóng)藥的實際使用情況，如拌種劑，除草劑中的土壤處理劑，或苗后苗前處理劑等，使用農(nóng)藥的日期是固定的，就不再根據(jù)消解動態(tài)算出安全間隔期，而是測定收獲后作物中的最終殘留，其最終殘留量不超過最大殘留限量MRL即可第五章農(nóng)藥登記殘留試驗規(guī)范殘留試驗 supewised residue trial 指在良好農(nóng)業(yè)生產(chǎn)規(guī)范(

10、GAP)和良好實驗室規(guī)范(GLP)或相似條件下，為獲取推薦使用的農(nóng)藥在可食用(或飼用)初級農(nóng)產(chǎn)品和土壤中可能的最高殘留量，以及這些農(nóng)藥在農(nóng)產(chǎn)品、土壤(或水)中的消解動態(tài)而進行的試驗。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗第五章農(nóng)藥登記殘留試驗4.3 農(nóng)藥殘留田間試驗殘留試驗數(shù)據(jù)是按照風險分析原理制定農(nóng)藥殘留最大殘留限量(MRL)的三個基本依據(jù)之一(其余兩個分別是毒理學數(shù)據(jù)危害認定和危害特征描述和膳食攝入數(shù)據(jù)膳食暴露評估參數(shù)之一)。 因此對農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全和食品安全意義重大，因為多數(shù)發(fā)達國家要求農(nóng)藥登記的同時制定相應農(nóng)產(chǎn)品（食品）中最大殘留限量，因此殘留試驗數(shù)據(jù)也是農(nóng)藥登記必不可少的數(shù)據(jù)之一。第五章農(nóng)藥登記殘留試

11、驗 我國在上世紀70年代末、80年代初，根據(jù)當時FAO 推薦的規(guī)范殘留試驗要求，制定了我國的農(nóng)藥殘留試驗準則，又在2004年以部頒標準（NY/T 788-2004）的形式根據(jù)國際規(guī)范農(nóng)藥殘留試驗要求對原有試驗準則進行了修改，使我國的殘留試驗要求達到或接近國際及發(fā)達國家要求，為下一步按照GLP要求進行殘留試驗，打下了基礎。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗4.3.1 田間試驗設計 田間試驗設計是農(nóng)藥殘留試驗成功的基礎?？茖W的田間試驗設計可提供足夠量和具有充分代表性殘留檢測樣本。 殘留試驗背景資料調(diào)查 （1）試驗農(nóng)藥有效成分含量、中英文通用名、商品名、 制劑劑型； （2）試驗地點、供試作物品種、生育周期等。

12、（3）試驗農(nóng)藥的防治對象、使用時期和施藥方法等。 第五章農(nóng)藥登記殘留試驗 （4）試驗農(nóng)藥在供試作物上推薦的施用劑量、推薦施用次數(shù)、施藥間隔及安全間隔期。 （5）試驗農(nóng)藥的毒性實驗結(jié)果：LD50、ADI、MRL等。 （6）該農(nóng)藥的化學名稱、化學結(jié)構(gòu)式、分子量、物理性質(zhì)、化學性質(zhì)、在水和有機溶劑中的溶解度、穩(wěn)定性等。 （7）該農(nóng)藥有無需要同時檢測的有毒代謝物。 （8）該農(nóng)藥在相關作物及環(huán)境介質(zhì)（土壤、水）中殘留分析檢測方法。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗第五章農(nóng)藥登記殘留試驗試驗地點選擇具有代表性的、能覆蓋主要種植區(qū)、種植方式、土壤和氣候條件的試驗地點，進行兩年重復試驗。不同作物的農(nóng)藥殘留試驗地點數(shù)要求不

13、同。需要作三地試驗的有：水稻、小麥、甘藍、黃瓜、番茄（辣椒）、柑桔、梨（蘋果）、大豆、茶、花生。作一地試驗的：榴蓮、亞麻籽、可可、咖啡、調(diào)味品類、香草類等。其它作物一般需要作兩地試驗。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗試驗地點的多少取決于登記農(nóng)藥的應用范圍、作物布局以及耕作方式的一致性，不一定在每一類生態(tài)和氣候種植區(qū)設點試驗，但是，應該注意試驗取得的數(shù)據(jù)有足夠的代表性和避免未設試驗點區(qū)域可能出現(xiàn)更高的殘留量。不能少于兩個生態(tài)和氣候不同的種植區(qū)。試驗前應對試驗地點的土壤類型、前茬作物、農(nóng)藥使用歷史、氣候等情況做好調(diào)查和記載，應選擇作物長勢均勻、地勢平整的地塊。試驗地點前茬以及在試驗進行中均不得施用與供試農(nóng)藥

14、類型相同的農(nóng)藥， 以免干擾對試驗農(nóng)藥的分析測試。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗供試農(nóng)藥第五章農(nóng)藥登記殘留試驗下列農(nóng)藥一般不要求進行殘留試驗:(1)用于非食用作物的農(nóng)藥（2）低毒或微毒的種子處理劑，包括拌種劑、種衣劑、浸種劑等。（3）用于非耕地的農(nóng)藥（畜牧業(yè)草場除外）第五章農(nóng)藥登記殘留試驗供試作物原則上應在每種作物上都做殘留試驗，由于作物種類繁多，若對每種作物都做殘留試驗，則工作量太大，而且也沒必要。因此，一種劑型用于多種作物的農(nóng)藥產(chǎn)品，可在每類作物中擇12種作物進行試驗。試驗前應了解該作物的品種名稱、生育期和栽培、管理等有關情況。 第五章農(nóng)藥登記殘留試驗試驗小區(qū)試驗小區(qū)為提供足夠數(shù)量的殘留檢測樣本，應

15、設足夠大的試驗小區(qū)，以保證能多次重復采樣獲得有代表性的樣本。小區(qū)面積可根據(jù)作物不同而有所不同，如水稻不得小于 30 m2，蔬菜不得小于15 m2，果樹不得少于2株，每個處理設3個以上重復小區(qū)，小區(qū)之間設保護行或田梗，還必須設對照小區(qū)。 第五章農(nóng)藥登記殘留試驗試驗小區(qū)可以按照用藥量由低到高的順序排列，避免交叉污染。同時要注意灌溉田的流水方向和風向，澆水時不能串灌。試驗必須設對照小區(qū)，與處理區(qū)設有效的隔離帶，避免漂移、揮發(fā)和淋溶污染。當在保護地(溫室、大棚、倉庫)做熏蒸、氣霧、煙霧試驗時，不同劑量處理分別選不同溫室、大棚或倉庫處理。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗 田間試驗設計示意圖分區(qū)空白(CK)保護行土

16、壤消解動態(tài)保護行玉米秸稈消解動態(tài)保護行最終殘留高劑量區(qū)保護行最終殘留低劑量區(qū)每個小區(qū)面積（m2）3030303030施藥量（g 商品量/畝）375375375250施藥次數(shù)1111平行小區(qū)第五章農(nóng)藥登記殘留試驗4.3.2 最終殘留量試驗 施藥量或施藥濃度 一種農(nóng)藥產(chǎn)品經(jīng)兩年兩點（或三點）藥效試驗后，將提出防治某種作物病、蟲、草害的有效施藥量（或濃度），即推薦劑量。殘留試驗應設兩個以上施藥量（或濃度），原則上在不產(chǎn)生藥害的前提下，以藥效試驗的推薦劑量的高劑量作為殘留試驗的低劑量濃度,以其1.5倍的劑量作為殘留試驗的高劑量（濃度）。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗如某農(nóng)藥防治某種害蟲的推薦施藥量為27036

17、0 g ai/ha，則殘留試驗的施藥量應為360 g ai/ha和540 g ai/ha。再如某農(nóng)藥防治某病害的推薦施藥濃度為120240 mg/L，則殘留試驗的施藥濃度應為240 mg/L和360 mg/L。施藥量（或施藥濃度）應以農(nóng)藥有效成分計。對水稻、小麥、蔬菜等作物的施藥量以“g/ha”表示，對果樹、茶樹等的施藥量以“mg/L”濃度表示。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗 施藥次數(shù) 施藥次數(shù)原則上以推薦的防治次數(shù)和增加12次的次數(shù)作為殘留試驗的施藥次數(shù)，一般要求設兩種以上施藥次數(shù)。 有的土壤處理劑、種子處理劑（拌種劑）、除草劑或植物生長調(diào)節(jié)劑等，每季作物只施一次藥，殘留試驗的施藥次數(shù)可不增加。 一

18、般施藥時間和施藥間隔根據(jù)實際防治需要確定，有時也可人為設定。 第五章農(nóng)藥登記殘留試驗 采收間隔期 間隔期是與殘留量相關性最顯著的因素，也是制定安全間隔期的重要依據(jù)，因此，間隔期的確定必須科學、合理。由于農(nóng)作物品種繁多，病、蟲、草害發(fā)生和防治時期差異甚大，應根據(jù)農(nóng)作物病、蟲、草害防治的實際情況和農(nóng)產(chǎn)品采收適期確定間隔期。 有的農(nóng)產(chǎn)品需在鮮嫩時采摘，則間隔期應相應的短些，如黃瓜、西紅柿、茶葉等，間隔期應在1, 2, 3, 5, 7 d內(nèi)；有的農(nóng)作物如水稻、棉花、柑桔等，間隔期可適當長些，一般設7, 14, 21, 30 d，每個殘留試驗應設2個以上間隔期。 第五章農(nóng)藥登記殘留試驗4.3.3 消解動

19、態(tài)試驗消解動態(tài)試驗土壤、作物的消解動態(tài)消解動態(tài) 以最終殘留量試驗的高劑量作為消解動態(tài)試驗的施藥量。第一次采樣殘留量很低(低于最低檢測濃度的l0倍)時，根據(jù)分析方法的最低檢出濃度加大施藥量。 噴灑植株不能保證土壤均勻覆蓋而影響土壤采樣時，專門在土面或另選等面積專門小區(qū)均勻噴藥。除草劑等土壤處理農(nóng)藥則按照施藥要求進行。 可采用一次施藥多次采樣，施藥后分別于當天，1、3、7、14、21、30、45、60 d采樣。有的農(nóng)藥消解快，采樣間隔時間應以小時（h）計。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗原則上采樣次數(shù)不少于5次，最后一次的樣本中殘留量以消解率大于90為宜。如果第一次采樣殘留量很低（；2kg麥類大麥、小麥、燕

20、麥、黑麥、蕎麥等： 籽粒采12點，2kg旱糧類玉米、高粱、谷子等籽粒。鮮食玉米包括玉米粒和軸采12點，0.1m2/點；2kg塊根塊莖類甘薯、木薯、山藥、馬鈴薯等塊根、塊莖4-12個，2kg小雜糧類紅小豆、綠豆、豌豆、蠶豆等籽粒1kg第五章農(nóng)藥登記殘留試驗 采樣量(2)組別類別商 品采樣部位采樣量蔬菜白菜類白菜、青菜、小白菜、油菜莖葉4-12個，1kg甘藍類甘藍、青花菜、苤藍、芥藍、菜花莖葉12個；2kg綠葉類菠菜、莧菜、茴香、茼蒿、生菜、豌豆苗、蘿卜葉、甜菜葉、野苣、菊苣、蕹菜等莖葉12個；2kg根菜類蘿卜、胡蘿卜、芋頭、芥菜、榨菜頭、甜菜、等去掉頂端的膨大部分6-12個；2kg豆菜類蠶豆、豌

21、豆、扁豆、豇豆、荷蘭豆、菜豆、青豆等豆莢或籽粒2kg第五章農(nóng)藥登記殘留試驗 采樣量(3)組別類別商 品采樣部位采樣量水果梨果類蘋果、梨等果實(上、下、內(nèi)、外、向陽、向陰)12個；2kg核果類桃、李、杏、櫻桃、油桃等可食部位24個；1kg漿果類葡萄、獼猴桃、楊梅、黑梅等可食部位1kg柑橘類柑橘、柚子、柑子、橙子、檸檬等整個果實6-12個；2kg堅果類核桃、板栗、榛子、杏仁等可食部位1kg瓜果類甜瓜、絲瓜、香瓜、哈密瓜、白蘭瓜等整個果實4-8個皮可食類棗、柿子、枇杷、無花果等整個果實1kg其它西瓜、菠蘿、芒果、荔枝、龍眼、楊桃、香蕉、木瓜等整個果實4-12個；2kg第五章農(nóng)藥登記殘留試驗 采樣量(

22、4)組別類別商 品采樣部位采樣量經(jīng)濟作物棉花、花生、茶、大豆、煙草、甘蔗、向日葵、芝麻、可可、咖啡、草莓等整個籽實或可食部位1kg-2kg中草藥整個藥用部位1kg飼料作物豆科類蠶豆、花生、苜蓿、三葉草、豌豆、大豆等整個植株1kg-2kg禾本科類稻草、大麥秸、干草、玉米秸、高粱秸等整個植株5個；2kg香草類整個食用部位0.2kg調(diào)味品類整個食用部位0.5kg土壤015cm5-10個；1kg水多點取5L, 混勻后取12L第五章農(nóng)藥登記殘留試驗采樣量 （匯總）類別商 品采樣量糧食稻谷類、麥類、玉米、高粱、谷子等12 kg蔬菜白菜類、甘藍類、綠葉類、根菜類、豆菜類、瓜菜類等12 kg水果梨果類、漿果類

23、、柑橘類、堅果類、瓜果類等12 kg經(jīng)濟作物棉花、花生、茶、大豆、煙草、甘蔗、向日葵、芝麻等12 kg中草藥12 kg飼料作物12 kg香草類0.2 kg調(diào)味品類0.5 kg土壤12 kg水12 L第五章農(nóng)藥登記殘留試驗樣本的包裝與儲運樣本包裝和儲運 采集的樣本應該用特制的惰性包裝袋（盒）裝好，寫好標簽（包括內(nèi)外各一個）和編號（伴隨樣本各個階段，直至報告結(jié)果）。樣本（冷凍條件下）及有關樣本資料（樣本名稱、采樣時間、地點及注意事項等）應盡快運送到實驗室（一般在2436 h以內(nèi)），并不得使樣本變質(zhì)、受損、污染或使殘留量和水分損失。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗運到實驗室的樣本應在15溫度（最佳為35）下貯存并應盡快檢測（幾天之內(nèi)），如需貯存較長時間，則樣本必須在20條件下貯存，解凍后應立即測定，有些農(nóng)藥在貯存時可能會發(fā)生降解，需要在相同條件下做添加回收率試驗進行驗證。取冷凍樣本進行檢測時，應不使水和冰晶與樣本分離，必要時應重新勻漿。檢測后的樣本需保存一段時間，以供復檢。第五章農(nóng)藥登記殘留試驗 田間樣品制備注意事項 1. 田間樣品在采集后如無條件在現(xiàn)場附近處理，需盡快（8h內(nèi)）運回實驗室，立即制備成實驗室樣品冷凍保存。 2. 制備實驗室樣品時應戴一