常見藥理動物模型

1、、復(fù)制方法和應(yīng)用動物疾病模型的復(fù)制，是用人為的方法，使動物在一定的致病因素（物理的、化學(xué)的、生物的）作用下，造成動物組織、器官或全身一定損害，出現(xiàn)某些類似人類疾病的功能、代謝、形態(tài)結(jié)構(gòu)方面的變化或各種疾病，通過這種手段來研究人類疾病的發(fā)生、發(fā)展規(guī)律，為研究人類疾病的預(yù)防、治療（包括新藥物試用）提供理論依據(jù)。所以動物疾病模型的復(fù)制，在醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中占有十分重要的地位。目前我國生物醫(yī)學(xué)科學(xué)研究中，動物疾病模型主要用于三個方面：即實驗生物學(xué)、實驗病理學(xué)和實驗治療學(xué)（新藥篩選亦屬于實驗治療學(xué)范疇）。由于研究目的不同，對于疾病模型的要求也有所區(qū)別。如實驗病理學(xué)，它著重于研究用某種特定方法復(fù)制出某些疾病。

2、整個疾病復(fù)制過程，就是它的研究內(nèi)容，目的是通過疾病的復(fù)制去探討疾病的病因?qū)W和發(fā)病原。而實驗治療學(xué)則完全不同，疾病的復(fù)制僅是它研究的開始，因為它的主要目的是為了闡明在該病的發(fā)生發(fā)展過程中，某些治療措施或藥物的療效如何。誘發(fā)性動物模型的復(fù)制方法不外是用生物的、物理的、化學(xué)的和各種環(huán)境因子作用于動物而產(chǎn)生。生物學(xué)因素包括細(xì)菌、病毒、寄生蟲、細(xì)胞、生物毒素、激素等各種致病原，通過接種而使正常動物發(fā)生疾病。如接種細(xì)菌、病毒于敏感動物使其產(chǎn)生各種傳染病。目前已知的150余種人畜共患病提供了極有意義的傳染病材料。從流行病學(xué)、病理學(xué)或并發(fā)癥等不同角度研究，首先要充分了解動物與人在疾病易感性和臨床表現(xiàn)等方面的同

3、異處。例如輪狀病毒可引起嬰兒急性壞死性腸類，犬感染輪狀病毒后的表現(xiàn)只是亞臨床的。然而嚴(yán)重威脅幼犬的腸道病毒是細(xì)小病毒，而人對細(xì)小病毒則并不易感。物理因素是多方面的。例如在機(jī)械力作用下產(chǎn)生各種外傷性腦損傷、骨折等模型，氣壓變動復(fù)制高空病、潛水??；溫度改變產(chǎn)生各種燒傷和凍傷；放射線照射可復(fù)制各型放射病，引起免疫功能抑制或誘發(fā)Spragae-Dawley系大鼠乳腺癌；閃光刺激誘發(fā)癲癇模型；噪音刺激引起聽源性高血壓及改變行為記憶功能等。復(fù)制各種模型時必須嚴(yán)格考慮不同對象應(yīng)采用的不同的刺激強(qiáng)度、頻率和作用時間，即按設(shè)計要求摸索有關(guān)實驗條件。例如用擴(kuò)張的氣囊在顱內(nèi)加壓制作急性顱內(nèi)壓增高癥動物模型時，應(yīng)該按

4、不同壓力梯度通過幾小時逐步加壓，待腦的順應(yīng)性發(fā)生改變后才出現(xiàn)臨床“腦缺血-腦水腫”的惡性循環(huán)。盲目加壓會急速發(fā)生腦疝死亡，不可能復(fù)制出腦水腫對機(jī)體代償和失代償?shù)牟±砩磉^程，這樣的模型會喪失或缺乏臨床研究的價值?；瘜W(xué)因素可直接或間接（通過代謝產(chǎn)物）對機(jī)體產(chǎn)生有害作用。如用各種化學(xué)致癌劑誘發(fā)各種腫瘤；用各種化學(xué)毒物或毒氣誘發(fā)各種中毒性疾??；用強(qiáng)堿、強(qiáng)酸可致皮膚燒傷等。不同品種、不同年齡的動物也存在劑量、耐受性和副作用等差異。實驗者需要通過廣泛收集有關(guān)信息，在預(yù)實驗中摸索穩(wěn)定而有效的實驗條件。研究者可根據(jù)研究目的需要，選擇相應(yīng)的實驗方法，在健康的動物身上復(fù)制出所需要的疾病模型。誘發(fā)性疾病模型已知有

5、數(shù)千種，復(fù)制的方法也是多種多樣的，這里僅對一些常用的、經(jīng)典的人類疾病的動物模型復(fù)制方法加以簡介。二、腫瘤模型的復(fù)制方法復(fù)制動物腫瘤的方法很多，如將實驗動物用放射線照射或靜脈、局部注射放射性同位素；使用各種化學(xué)致癌劑（烷化劑、多環(huán)芳香烴類、芳香胺類、氨基偶氮染料、亞硝胺類）；使用植物毒素（如蘇鐵素、黃樟素等）；使用金屬（如鉻、鎳、砷、鎘等）；使用RNA和DNA腫瘤病毒；使用多種致癌性霉菌毒素（其中致癌作用最強(qiáng)者為黃曲霉素）等，均可誘發(fā)成各種腫瘤。誘發(fā)性腫瘤模型其數(shù)量在誘發(fā)性動物模型中占首位。一般是利用致癌物質(zhì)通過口服、注入、埋藏和涂抹等方式使動物發(fā)生腫瘤。能誘發(fā)動物腫瘤的病毒也有不少報導(dǎo)，例如小

6、鼠白血病病毒（MLV）、雞白血病病毒（ALV）和貓白血病病毒（FLV）分別能引起大小鼠，雞和貓白血病。Rous雞肉瘤病毒可使田鼠、雞、鴨、鵪鶉、猴、蛇等多種動物發(fā)生肉瘤。貓肉瘤肉毒（FSV）可使大鼠、貓、犬和猴發(fā)生肉瘤。人類腺病毒能誘發(fā)小鼠、田鼠肉瘤和淋巴瘤。一）誘發(fā)性腫瘤動物模型肝癌二乙基亞硝胺（DEN）誘發(fā)大白鼠肝癌：取體重250g左右的封閉群大白鼠，雌雄不拘。按性別分籠飼養(yǎng)。除給普通食物外，飼以致癌物，即用025%DEN水溶液灌胃，劑量為10mg/kg，每周一次，其余5天用0.025%DEN水溶液放入水瓶中，任其自由飲用。共約4個月可誘發(fā)成肝癌?；騿斡?.005%摻入飲水中口吸服8個月誘

7、發(fā)肝癌。4-2甲基氨基氮苯（DBA）誘發(fā)大鼠肝癌：用含006%DBA的飼料喂養(yǎng)大鼠，飼料中維生素B2不應(yīng)超過1.52mg/kg，46月就有大量的肝癌誘發(fā)成功。2-乙酰氨基酸（2AAF）誘發(fā)小鼠、狗、貓、雞、兔肝癌：給成年大鼠含003%2AAF標(biāo)準(zhǔn)飼料。每日每平均23mg2AAF（也可將2AAF混于油中灌喂），34月后有8090%動物產(chǎn)生肝腫瘤。二乙基亞硝胺誘發(fā)大鼠肝癌：用劑量為每日0.314mg/kg體重，混于飼料或飲水中給予，69個月后255/300大鼠發(fā)生了肝癌。亞胺基偶氮甲苯（OAAT）誘發(fā)小鼠肝癌：用1%OAAF苯溶液（約01ml含1mg）涂在動物的兩肩胛間皮膚上，隔日一次，每次23滴

8、，一般涂100次。實驗后78周即而出現(xiàn)第一個肝腫瘤,7個月以上可誘發(fā)小鼠肝腫瘤約55%?；蛴?.5mgOAAT溶于葵瓜子油中，給C3H小鼠皮下注射4次，每日間隔10天，也可誘發(fā)成肝癌。黃曲霉素誘發(fā)大鼠肝癌：每日飼料中含00010015ppm,混入飼料中喂6個月后，肝癌誘發(fā)率達(dá)80。胃癌甲基膽蒽誘發(fā)小鼠胃癌：取20g左右的小鼠，無菌手術(shù)下，在腺胃粘膜面穿掛含甲基膽蒽（MC）線結(jié)。含MC的線結(jié)是用普通細(xì)線，在一端打結(jié)后，將線結(jié)置于盛有MC小玻璃試管內(nèi)，在酒精燈上微微加溫，使MC液化滲入線結(jié)。MC濃度為0.050lg20-甲基膽蒽內(nèi)浸入1020根線。手術(shù)埋線后48個月可誘發(fā)成功胃癌。用不對稱亞硝胺，

9、劑量為0.25ml/kg體重，3個月后全部動物發(fā)生前胃乳頭狀癌，78個月后有85100%發(fā)生前胃癌。昆明種最敏感。A系次之，615系小鼠敏感性最差。此外還可用甲基亞硝基醋酸尿素給BD大鼠飲水中加2mg/kg體重，每周5次飲用，520天后全部大鼠均發(fā)生了腺胃癌。食管癌甲基芐基亞硝胺（MBNA）誘發(fā)大鼠食管癌：取體重100g以上的Wistar大鼠，任其食用含甲基芐基亞硝胺的飲水，并將MBNA摻入飼料中使每日攝入量達(dá)0751.5mg/kg體重。80100天可誘發(fā)成食管癌。也可用二烴黃樟素（Dihydrosafrole），它是一種制備啤酒的調(diào)味品，在大鼠飼料中加入百萬分之二千五百至一萬（2500100

10、00ppm）黃樟素，就能引起2075%的食管癌。用0.2%或0005%的甲基芐基亞硝胺水溶液，給動物經(jīng)口灌喂，每天一次，大鼠灌注劑量為1mg/kg體重，至第27天即發(fā)現(xiàn)一例食管乳頭狀瘤，154天發(fā)現(xiàn)第一例食管癌，11個月食管癌的發(fā)生率為53%。肺癌二乙基亞硝胺（DEN）誘發(fā)小鼠肺癌：小白鼠每周皮下注射1%DEN水溶液一次，每次劑量56mg/kg,DEN總劑量達(dá)到868mg，觀察時間為100天左右時，發(fā)癌率可達(dá)40%。而DEN總劑量達(dá)到1176mg，觀察時間為半年左右時；發(fā)癌率可達(dá)94%。烏拉坦誘發(fā)肺腺癌：小鼠（A系，111/2月齡）較大鼠敏感，每次每只腹腔注入10%烏拉坦生理鹽水液0.103m

11、l,間隔35日再注，共注23個月，每只小鼠用量約為100mg,注后3個月肺腺癌發(fā)生率為100%,而且多數(shù)為多發(fā)性，這種誘發(fā)瘤為良性。此外還可用氣管內(nèi)注入苯并芘、硫酸銨氣溶膠、甲基膽蒽等誘發(fā)肺癌。如猴氣管內(nèi)注入3，4苯并芘（苯并花為315mg與等量之Fe2O3混合液），每周一次，共10次，6只猴中有2只誘發(fā)肺的鱗狀上皮癌。亦有人用硫酸胺氣溶劑給100只大鼠吸入，13個月后所有大鼠都發(fā)生了肺腺癌。用0.2%明膠作懸浮劑將甲基膽蒽混合后給金地鼠氣管內(nèi)注入，每次01ml（含甲基膽蒽5mg）每周一次，共6次，53周后有62.5%動物發(fā)生了肺癌。鼻咽癌二甲基膽蒽（MC）誘發(fā)大鼠鼻咽癌：取直徑23mm的硬質(zhì)

12、塑米管，在酒精燈上小火拉成錐形，每段長約3.5cm，管內(nèi)填以結(jié)晶體MC。小管一端用火封閉，以防藥物外溢，尖端用針刺數(shù)孔，使MC能從小妃溢出。取體重120g左右的大白鼠，雌雄均可，乙醚麻醉后，由前鼻孔將上述含MC的塑料小管插入鼻腔，利用前鼻孔較小管粗端為小的特點，稍加用力，迫使小管全部進(jìn)入鼻腔內(nèi)，其尖部可達(dá)鼻咽腔。不需另加固定，即可使小管長期留于鼻腔內(nèi)。待到預(yù)定時間（半年以上），或動物自行死亡時，到其鼻咽部，10%福爾馬林固定，脫鈣后，石蠟包埋，進(jìn)行連續(xù)切片。發(fā)癌率可達(dá)60%以上。二乙基亞硝胺滴鼻法誘發(fā)鼻咽癌：取120g左右大白鼠，雌雄均可，乙醚麻醉后，用磨平針尖的8號針頭，從前鼻孔輕輕插入，針

13、尖可達(dá)鼻咽腔。經(jīng)注射器灌注用1%吐溫-80新配的33.3%DEN混懸液0.02m1（含DEN67mg）每周1次，共1520次，可誘發(fā)成鼻咽癌。6宮頸癌取雌性小白鼠，以附有0.1mgMC的棉紗線結(jié)在動物不麻醉的狀態(tài)下，借助于陰道擴(kuò)張器及磨純的彎針，將線穿入宮頸。經(jīng)右宮角背部穿出，使線結(jié)固定于宮頸口。線的另一端則固定于背部肌肉，縫合皮膚，掛線以后，同日開始連續(xù)注射青霉素23天。以防術(shù)后感染。至一定時間（半年左右）處死動物，宮頸組織用10%福爾馬林固定，石蠟包埋，連續(xù)切片。7結(jié)腸癌給四周齡的雄性大白鼠，皮下注射二甲基芐肼（Dimethlhydrazine,DMH）每周一次，連續(xù)21周，每次DMH21

14、mg/kg。最后一次給藥后14周，處死動物。降結(jié)腸部位用Bouin液固定，脫水，石蠟包埋，切片。所用之DMH先配成每100ml含400mg的母液，并加EDTA37mg,用氫氧化納（01N）液將pH調(diào)至6.5備用。（二）移植性腫瘤動物模型目前臨床所用的抗腫瘤藥中，大多數(shù)是經(jīng)動物移植性腫瘤試驗篩選而發(fā)現(xiàn)的。應(yīng)用動物移植性腫瘤篩選藥物的優(yōu)點是：使一群動物同時接種同樣量的瘤細(xì)胞，生長速率比較一致，個體差異較小，接種成活率近100%，對宿主的影響相類似，易于客觀判斷療效，可在同種或同品系動物中連續(xù)移植，長期保留供試驗用，試驗周期一般均較短，試驗條件易于控制等。因此目前抗腫瘤藥篩選大多數(shù)采用動物移植瘤作為

15、篩選模型。目前世界上保存的動物移植腫瘤約有400株，但篩選試驗常用者僅2030種。據(jù)1984年統(tǒng)計，我國在同系、同種動物中已建立各種動物和人的常見的瘤株64個。例如小鼠肺腺瘤（HP615）、小鼠子宮頸瘤27號（U27）、小鼠腦瘤22（B22）、小鼠淋巴細(xì)胞性血病（L615）、裸鼠人肝瘤移植瘤和人腦惡性膠質(zhì)細(xì)胞瘤（NCS1）等。動物腫瘤可通過移植傳代而培養(yǎng)出所需要的腫瘤細(xì)胞株。瘤株是一種組織學(xué)類型和生長特性已趨穩(wěn)定，并能在同系或同種動物中連續(xù)傳代的腫瘤細(xì)胞模型。腫瘤移植于健康動物，相當(dāng)于活體組織培養(yǎng)，可長期保存瘤種，供實驗所用。實驗中常用腹水瘤和實體瘤兩種方式進(jìn)行移植。對于會產(chǎn)生腹水的腫瘤，可將

16、其一定數(shù)量的細(xì)胞注入受體動物腹腔形成腹水瘤或產(chǎn)生腹水。實體瘤移植也是在無菌條件下，把實體瘤切成23mm小塊，植于受體動物皮下。自體式同系動物腫瘤植不產(chǎn)生排導(dǎo)現(xiàn)象。同種動物移植時可結(jié)合注射腎上腺皮質(zhì)激素、抗腫瘤藥物和適當(dāng)量的放射等方法，降低宿主免疫排斥反應(yīng)。異種動物腫瘤移植始于Leidy（1834年），難度較大。近50年來異體移植常用下列方法：接種于皮下或粘膜下，優(yōu)點是易觀察，但排斥作用大，效果欠佳。動物腫瘤移植于雞胚尿囊膜。特點是較易存活，但人類腫瘤無成功報導(dǎo)。人類腫瘤接種于大鼠、豚鼠、兔的眼前房。缺點是細(xì)胞不能傳代。移植于動物腦內(nèi)。腫瘤生長快，但難度大，不易觀察。1983年Bodgen等人用

17、無胸腺大鼠腎包膜下移植人體腫瘤篩選新藥，全部實驗僅需11天，且命中率高，這項工作為臨床病人的藥物篩選帶來了福音。60年代以來國外已建立可移植性人體腫瘤數(shù)百種，這些瘤株能防止由傳代伴隨的形成和功能的退化。1969年Rygaaid首次成功地將人類腫瘤移于無胸腺裸小鼠，這為異種動物腫瘤移植開辟了新局面。由于裸小鼠缺乏T淋巴細(xì)胞功能，所以是極為理想的腫瘤移植模型材料。三、心血系系疾病的動物模型（一）動脈粥樣硬代模型常選用兔、豬、大鼠、雞、鴿、猴和犬等動物。常用的復(fù)制方法有下面幾種（包括高血脂模型1高膽固醇、高脂肪飼料喂養(yǎng)法：是目前比較常用的方法，特點是死亡率低，可長期觀察，但費(fèi)時久。一般在家兔、鴿、雞

18、等，經(jīng)數(shù)周喂養(yǎng)就可產(chǎn)生明顯的高脂血癥，經(jīng)數(shù)月就能形成早期的動脈粥樣硬化病變。大白鼠、小白鼠及犬則較難形成，如果飼料中增加蛋黃、膽酸和豬油等，可用促進(jìn)作用。為了促進(jìn)病變的形成，在高脂飼料中還可加入甲基硫氧嘧啶、丙基硫氧嘧啶、甲亢平、苯丙胺、維生素D、煙堿或蔗糖等。具體復(fù)制方法：兔誘發(fā)模型：體重2kg左右，每天喂服膽固醇03g,4個月后肉眼可見主動脈粥樣硬化斑塊；若每天劑量增至05g,3個月后可出現(xiàn)斑塊；若增至每天lg,可縮為2個月。在飼料中加入15%蛋黃粉、0.5%膽固醇和5%豬油，經(jīng)3周后，將飼料中膽固醇減去，再喂3周,可使主動脈斑塊發(fā)生率達(dá)100%,血清膽固醇可長高至2000mg%。大白鼠誘

19、發(fā)模型：喂服14%膽固醇、10%豬油、0.2%甲基硫氧嘧啶、8689%基礎(chǔ)飼料，710天；或喂服10%蛋白黃粉、5%豬油、0.5%膽鹽、85%基礎(chǔ)飼料,7天后均可形成高膽固醇血癥。小白鼠誘發(fā)模型：雄性小白鼠飼以1%膽固醇及10%豬油的高脂飼料，7天后血清膽固醇即升為34315mg；若在飼料中再加入03%的膽酸，連飼7天，血清膽固醇可高達(dá)53036mg%。雞、鴿誘發(fā)模型：48周的萊克享雞，在飼料中加入12%膽固醇或15%的蛋黃粉，再加510%的豬油，經(jīng)過610周，血膽固醇升至10004000mg%，胸主動脈斑塊發(fā)生率達(dá)100%。鴿喂飼膽固醇3g/kg/天，加甲基硫氧嘧啶01g,可以產(chǎn)生較多動物斑

20、塊。免疫學(xué)方法：將大白鼠主動脈勻漿給兔注射，可引起血膽固醇、&脂蛋白及甘油三脂升高。給兔注射馬血清10ml/kg/次，共4次，每次間隔17天，動脈內(nèi)膜損傷率為88%，冠狀動脈亦有粥樣硬化的病變；同時給予高膽固醇飼料，病變更加明顯。兔喂飼含1%膽固醇的飲料，靜脈注射牛血清白蛋白250mg/kg，可加速高膽固醇飼料引起的動脈內(nèi)膜病變形成。注射兒茶酚胺類藥物法：給兔靜脈滴注去甲腎上腺素lmg/日，時間為30分鐘。一種方法是先點滴15分鐘，休息5分鐘后再滴15分鐘；另一方法是每次點滴5分鐘和休息5分鐘，反復(fù)6次。以上兩種方法持續(xù)兩周，均可引起主動脈病變，呈現(xiàn)血管壁中層彈性纖維拉長、劈裂或斷裂，病變中出

21、現(xiàn)壞死及鈣化。注入同型半胱氨酸法：給兔皮下注射同型半胱氨酸硫代內(nèi)脂(dl-homocysteinethiolactone)2025mg/kg/日(以5%葡萄糖溶液配成lmg/ml的濃度)，連續(xù)2025天，成年兔及幼兔均可出現(xiàn)動脈粥樣硬化的典型病變。冠狀動脈管腔變窄、動脈壁內(nèi)膜肌細(xì)胞增生、纖維組織增生、彈力纖維斷裂、管壁變厚、基質(zhì)中出現(xiàn)成堆的顆粒狀和纖維狀異染物質(zhì)。如在飼料中加入20%的膽固醇，再同時注射同型半胱氨酸硫代內(nèi)脂，則全部動物出現(xiàn)顯著的動脈粥樣硬化病變。注射表面活化劑法:給大白鼠腹腔注射TritonWR1339300mg/kg,9小時后使血清膽固醇升高34；20小時后雄性大白鼠血清膽固

22、醇仍為正常的34倍，而雌性大白鼠卻為6倍左右；用藥后24小時左右升脂作用達(dá)最高點，48小時左右恢復(fù)正常。其中以甘油三脂升高最強(qiáng)，其次是磷脂、游離脂肪酸及游離膽固醇，對膽固醇脂沒有影響。膽固醇一脂肪乳劑靜脈注射法：將膽固醇及豬油各3g在電磁加熱攪拌下完全溶解后加入吐溫-803g，攪勻，再緩緩加入丙二醇5ml和沸水的混合液，充分?jǐn)嚢枞榛钩?00ml,經(jīng)抽濾后顯微鏡下檢查，乳劑顆粒均勻，并小于78“m即可應(yīng)用。給兔耳緣靜脈注射5ml/kg,可見血漿膽固醇及甘油三酯立即升高?？偰懝檀忌咧琳５?倍，其中主要是游離膽固醇，游離膽固醇和總膽固醇的比值為90%。以后血漿總膽固醇逐漸降低，6小時時出現(xiàn)一

23、低峰，后略有回升。34天后游離膽固醇和總膽固醇的比值接近正常（40%左右），直到714天血漿膽固醇恢復(fù)正常。7幼乳大白鼠法：一般乳幼大白鼠的血清膽固醇高于或成年大白的23倍，這是由于乳汁中脂肪含量很高，而甲狀腺功能尚不健全的緣故。若用一般飼料取代乳汁喂養(yǎng)，則血清膽固醇很快就能降至正常成年大白鼠的水平。選用出生25天的乳幼大白鼠，雌雄兼用，體重3050g，在不脫離母鼠乳汁喂養(yǎng)的條件下，進(jìn)行實驗觀察藥物的降血膽固醇作用，與對照組比較效果。一般認(rèn)為這種高膽固醇血癥對甲狀腺素及其衍生物類藥物非常敏感，而對某些膽固醇生物合成抑制劑則不敏感。8其它方法：還有許多因素可誘發(fā)高脂血癥及動脈粥樣硬化癥。例如使動

24、物腦部缺血、電刺激中樞神經(jīng)系統(tǒng)、高度應(yīng)激狀態(tài)、鳥類應(yīng)用大劑量雌激素和暴露于一氧化碳環(huán)境、氣囊異管損傷動脈壁內(nèi)皮細(xì)胞各種高脂血癥、動脈粥樣硬化癥動物模型的特點：除田鼠和地鼠外，一般溫血動物只要用適當(dāng)?shù)姆椒?，都能形成動脈粥樣硬化的斑塊病變。兔是最早用以制造高脂血癥和動脈粥樣硬化癥模型的動物，至今仍然多被采用。它對外源性膽固醇的吸收率高，可達(dá)7595%，大白鼠僅為40%，對高血脂的清除能力低，靜脈注入膽固醇后脂血癥可持續(xù)34天，大鼠僅為12小時，狗介于兩者之間。只要給兔含膽固醇較高的飼料，不必附加其它因素，經(jīng)34月即可形成明顯的動脈粥樣硬化癥，而且與人體發(fā)生的病變相似，取血檢查也較方便。但是也有些缺

25、點，如必須使血清膽固醇達(dá)到很高的水平才能形成斑塊，而這時內(nèi)臟易于發(fā)生脂質(zhì)沉著，動物壽命短，低抗力差，容易繼發(fā)感染而死亡。再者，兔為草食動物，其酯代謝與人體的酯代謝差異較大；實驗發(fā)現(xiàn)其冠狀動物病變主要呈現(xiàn)在心臟的小動脈，而人主要發(fā)生在冠狀動脈的大分支。大白鼠應(yīng)用大白鼠建立高血脂及動脈粥樣硬化模型，有飼養(yǎng)方便、抵抗力強(qiáng)、食性與人相近的優(yōu)點。所形成的病理改變與人早期者相似，不易形成似人體的后期病變，較易形成血栓。正常大鼠的血清膽固醇平均值為92.67187mg%。單純在飼料中增加膽固醇，不易引起血清膽固醇升高，更不易發(fā)生動脈粥樣硬化癥，必須在飼料中同時加入膽酸以增加膽固醇的吸收，始能出現(xiàn)高膽固醇血癥

26、，如再加抗甲狀腺藥物；可使血清膽固醇進(jìn)一步升高。小白鼠用小白鼠制造實驗?zāi)Ｐ鸵灿休^容易飼養(yǎng)和節(jié)省藥品的優(yōu)點，但是取血不便，難作動態(tài)觀察，所以較少采用。雞雞為雜食動物，食物品種接近于人，僅在普通飼料中加入膽固醇，就可形成動脈粥樣硬化斑快。病變發(fā)生較快，在斑塊中有時伴有鈣化和形成潰瘍。鴿與雞相似，飼料簡單，在飼料中加入膽固醇即易產(chǎn)生主動脈粥樣硬化斑塊，并可發(fā)生心肌梗死。由于鴿的品種不同，動脈粥樣硬化斑塊的性質(zhì)可有很大差異，可能是個體之間脂肪酶的活性不同所致。猴猴與人的情況很相近，無論其正常血脂、動脈粥樣硬化病變的性質(zhì)和部位、臨床癥狀以及各種藥品的療效關(guān)系等，都與人體的非常相似。但是進(jìn)一步研究發(fā)現(xiàn)，其

27、不同的種屬對動脈粥樣硬化的敏感各種有所不同。一般認(rèn)為獼猴更為理想，給予高脂飲食13個月后，血清膽固醇水平即可達(dá)300600mg%，并同時發(fā)現(xiàn)動脈粥樣硬化，且可產(chǎn)生心肌梗死。動脈粥樣硬化病變的部位，不僅在主動脈，也呈現(xiàn)在冠狀動脈、腦動脈、腎動脈及股動脈等。豬豬可能是動脈粥樣硬化研究較理想的動物模型，因為某些品種的老齡豬在飼喂以人的殘羮剩飯后能產(chǎn)生動脈、冠狀動脈和腦血清粥樣硬化病變，與人的病變非常相似。單用高膽固醇、高脂肪飼料喂養(yǎng)，容易在相對較短的時間內(nèi)（918個月）產(chǎn)生實驗性動脈粥樣硬化。此外，進(jìn)行性的主動脈和冠狀動脈粥樣硬化可以用探針刺傷加上高膽固醇、高脂肪飼料即能很快產(chǎn)生。豬模型的其它優(yōu)點包

28、括解剖學(xué)和生理學(xué)與人類相似，動脈結(jié)構(gòu)相似，有若干確認(rèn)的品種可供利用，多胎多仔，雜食習(xí)性等，其體形大小亦足能供各種外科手術(shù)和臨床評價之用。豬也特別適合于研究應(yīng)激因素與動脈粥樣硬化的關(guān)系。豬模型的缺點是飼養(yǎng)要花一定代價，人工產(chǎn)生動脈粥樣硬化需要類脂質(zhì)代謝有一定改變，或動脈受到損傷的基礎(chǔ)。（二）高血壓模型急性實驗性高血壓模型常選用狗、貓、大白鼠、家兔和猴。復(fù)制的方法很多，如直接刺激中樞神經(jīng)系統(tǒng)，通過神經(jīng)反射、外源性兒茶酚胺類或其它體液加壓物質(zhì)注射等。這類模型造成的高血壓時間短，不適于長時間的研究。應(yīng)復(fù)制慢性實驗性高血壓模型。除遺傳性高血壓動物模型較能模擬人類高血壓病的自然過程外，其它各類慢性實驗性高

29、血壓動物模型（如神經(jīng)原型、腎型、內(nèi)分泌型和飲食型等），大多要經(jīng)過一定的手術(shù)、藥物或其他附加因素處理，與人類高血壓病的臨床不完全一致，但是對于篩選有效降壓藥仍然是十分重要的實驗手段。實驗中常用的動物為大白鼠和狗，猴來源不易，家兔血壓升高不夠顯著，故后兩種動物較少應(yīng)用。1聽源性高血壓采用大白鼠與家鼠雜交生的大灰鼠（比純種大白鼠較易誘發(fā)成功），4月齡，放入隔音室內(nèi)籠養(yǎng)，噪音刺激可由電鈴或揚(yáng)聲器發(fā)出，發(fā)音器是一個音頻振蕩器，連接一個20W高音揚(yáng)聲器。噪音刺激應(yīng)經(jīng)常在7001000周/秒中變換，噪音刺激每30秒一次，亦可每隔1分鐘刺激30秒?？呻S時變換毋須恒定，但噪音干擾須日夜不止，連續(xù)數(shù)月。噪音刺激連

30、續(xù)3個月后血壓普遍升高，大灰鼠正常平均收縮壓為1138mmHg，此時可升高到130140mmHg，有40%動物收縮壓可高達(dá)160mmHg。此種高血壓動物模型與人的高血壓病相類似，適用于降藥物的篩選。2實驗性腎動脈狹窄性高血壓將狗或家兔麻醉后，腹臥位，從脊柱旁1.52cm處開始，右側(cè)順肋骨緣，左側(cè)在離肋骨緣約兩指寬的地方作4cm長的皮膚切口，分離皮下組織和腰背筋膜，切開內(nèi)斜肌盤膜，推開背長肌，暴露腎并小心地鈍性分離出一段腎動脈，選用一定直徑的銀夾或銀環(huán)（68kg狗所用的環(huán)直徑為0.81.2mm，家兔用的環(huán)直徑為050.8mm）套在腎動脈上造成腎動脈狹窄。如一側(cè)腎動脈狹窄，則應(yīng)將另一側(cè)腎摘除，后一

31、手術(shù)在間隔1012天后進(jìn)行。手術(shù)后幾天，血壓開始升高，13月后血壓升達(dá)高峰，并可長期維持下去。例如家兔手術(shù)前血壓平均值為100mmHg，手術(shù)后2周升到125mmHg，1個月后升到135mmHg,2個月后可升達(dá)140194mmHg。國內(nèi)有主張從腹中線作切口，一次手術(shù)使兩側(cè)腎動脈狹窄。血壓升高速度和程度取決于腎動脈狹窄的程度，當(dāng)腎動脈過度狹窄時，會造成惡性高血壓，并使動脈迅速死亡。一般狹窄血管口經(jīng)的1/41/3為宜。此種腎型高血壓模型與臨床高血壓病的改變相同，對降壓藥效果也與臨床病人相等。3腎外包扎高血壓腎外異物包扎，可致腎周圍炎，在腎外形成一層纖維素性鞘膜，壓迫腎實質(zhì)，造成腎組織缺血，使腎素形成

32、增加，血壓上升。選用120150g大白鼠，麻醉后，皮膚消毒，從第10胸椎到第3腰椎處沿脊椎中線切開皮膚，在左側(cè)季助下152cm和距脊椎1cm處用小血管鉗分開肌肉，用兩脂從腹下部將腎臟自創(chuàng)口中擠出，小心地將腎臟與周圍組織剝離，將自制的雙層乳膠薄膜剪成“X”形，繞腎門將腎臟交叉包扎，然后在相對側(cè)切開，取出右腎，分離后切除，分別縫合肌肉和皮膚創(chuàng)口。皮下注射12萬單位青霉素G。術(shù)后可加飲1%氯化鈉溶液作為促進(jìn)因素，約經(jīng)20天，有70%以上的大白鼠出現(xiàn)高血壓。收縮壓一般可升高50%以上。（三）心肌缺血和心肌梗塞模型復(fù)制動物心肌缺血和心肌梗塞模型的方法有結(jié)扎冠狀動脈法，有的結(jié)扎左旋冠脈，但多數(shù)是結(jié)扎左前降

33、冠脈，鑒于結(jié)扎冠狀動脈主干死亡率高，故亦有使用多處結(jié)扎的方法，即同時結(jié)扎幾處的冠脈分支，以形成一個梗死區(qū)域。經(jīng)驗證明，結(jié)扎的冠狀動脈，因其分布的心肌范圍和該區(qū)內(nèi)是否有其他冠狀動脈，而決定著心肌梗塞的面積，結(jié)扎方法是建立很早而至今還普通使用的方法。此外，還有用油質(zhì)、石松子孢或汞等作彌散性冠狀動脈微栓塞或選擇性冠狀動脈梗塞的。前者大多是在早年使用的方法，近年來發(fā)明制造了塑料微粒手術(shù)，以其數(shù)量的多少和球體的大小，來決定不同范圍的梗塞區(qū)。后者則以某支冠狀動脈為目標(biāo)，通過導(dǎo)管術(shù)輸入顆粒樣或小球類異物，這種方法要求技術(shù)熟練，條件嚴(yán)格。還有通電造成冠狀動脈內(nèi)栓塞等方法。但這些方法因受多種條件限制，使用得還不

34、多。近年來為建立一種逐漸發(fā)生發(fā)展的心肌梗塞模型，較為廣泛地使用了一種遇水膨脹的纖維素環(huán)（Ameriod），這種纖維素環(huán)套在預(yù)期閉塞的冠狀動脈上，環(huán)外邊以金屬圈（如不銹鋼）固定起來，手術(shù)后兩周或更長的時間內(nèi)可將冠狀動脈逐漸閉塞。這種模型制造較易，動物生存率高。但即是使用這樣的方法，仍然缺乏人類的動脈粥樣硬化的病理學(xué)基礎(chǔ)。近來有報告指出，家豬可以喂飼高脂飲食形成冠狀動脈的粥樣硬化，引起心肌缺血，又可以通過改變飲食或治療使動脈粥樣硬化的斑塊消退。看來，這是值得注意探索的目標(biāo)。復(fù)制心肌梗塞模型所選用的動物，大多用哺乳動物，其中最常用的是犬。其他還有兔、小牛、豬、豚鼠、大鼠等。狗的體積大小適中，性情溫順

35、易于訓(xùn)練。但狗的冠狀血管結(jié)構(gòu)和人相比，有較大差異，尤其是犬冠狀動脈變異多，側(cè)支吻合豐富，室間隔動脈特別發(fā)達(dá)等，常使研究人員苦惱。近年報導(dǎo)，豬冠狀循環(huán)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)酷似人類，故提倡用家豬或小豬作心肌梗塞的實驗研究，但國內(nèi)尚未見到報告。其他小動脈兔、鼠等，體積過小，取材受限，故除特定條件以外使用的不多靈長類動物狒狒、猴子當(dāng)然有其他動物不可比擬的優(yōu)越性，但其材料難得，不易普通使用。國內(nèi)有關(guān)心肌缺血和心肌梗塞模型的復(fù)制方法：1電刺激法是近年建立的一種造成動物實驗性心肌缺血的較新方法。實驗一般用成年雄性家兔，麻醉后用定向儀插入兩支涂絕緣漆的不銹鋼針，以弱、強(qiáng)刺激（弱刺激為0816mA,強(qiáng)刺激為48mA）交替刺

36、激右側(cè)下丘腦背內(nèi)側(cè)核，每次刺激5分鐘，間隔13分鐘。2藥物法亦為近年來采用的一種方法。最常使用的造型藥物為4%異丙基腎上腺素，給大鼠皮下注射50mg/kg體重；或?qū)⑺幬锛尤?00ml鹽水中從家兔耳靜脈勻速（4小時）滴入，每公斤體重可分別給藥10、20、30mg，或直接將藥物注入腹腔均可造型。也可用麻醉犬靜脈給予麥角新鹼0.2mg/kg體重，造成冠狀動脈痙攣。3冠脈阻斷法結(jié)扎冠狀動脈是制作心肌梗塞模型的最常用方法。一般選用成年健康犬或家兔，麻醉后開胸，多結(jié)扎其冠狀動脈前降支阻斷心肌供血，引起病變；也有人采用閉胸式選擇性冠狀動脈插管法，即在熒光屏下將心導(dǎo)管由麻醉犬的頸動脈切口處插入，沿主動脈壁直抵

37、左竇底部，將其尖端送至左冠狀動脈內(nèi)約2cm深處，向?qū)Ч軆?nèi)注入120mg/kg體重的汞，形成急性心肌梗塞。亦有人用冠狀動脈周圍套線牽拉法使其不完全阻斷，以形成家兔急性缺血性瀕危心肌模型。為了更接近自然狀態(tài)下心肌缺血的變化，近來有的單位用清醒犬作急性缺血和梗塞模型。先將犬麻醉，然后分離冠狀動脈長約10毫米，套上冠狀動脈壓迫環(huán)，用注水壓迫阻斷冠狀血流，觀察犬在清醒狀態(tài)下的心肌缺血反應(yīng)與藥物效應(yīng)。此外，還有人用離體大鼠心臟冠脈結(jié)扎復(fù)制出超微結(jié)構(gòu)的心肌缺氧損傷模型。四）心律失常模型根據(jù)不同的實驗?zāi)康?，既可在整體動物身上復(fù)制心律失常，也可用離體心臟或心臟某部分組織塊體外灌流復(fù)制心律失常。常用的復(fù)制方法，有

38、下列幾種：1心房撲動和顫動性心律失常選用狗、貓等動物，麻醉后開胸，暴露心臟，在人工呼吸下進(jìn)行實驗?？捎酶哳l率電直接刺激心房壁，使每次刺激落心房肌復(fù)極時R或S波間隔；烏頭鹼溶液涂抹心房外面局部；擠壓動物上下腔靜脈間的部位，同時給予電刺激；竇房結(jié)動脈內(nèi)注入乙酰膽鹼或甲狀腺素制劑?；虿捎脛游镎w閉胸條件下，阻塞呼吸道或吸入低氧氣體。也可采用離體心房組織塊作實驗，將含有竇房結(jié)的哺乳動物的離體心房組織塊浸放于低鉀溶液內(nèi)。2心室心動過速和心室顫動性心律失常多選用狗、貓或兔、大鼠等整體心臟（開胸或閉胸）進(jìn)行實驗。常使用造型藥物為烏頭鹼、洋地黃及腎上腺素。一般使用烏頭鹼緩慢靜脈注射造型。劑量：家兔100150

39、pg/kg,大鼠3050mpg，小鼠5mpg。也可使用中毒劑量的洋地黃類藥物造型。還可使用高濃度的腎上腺素（豚鼠40pg/kg,貓、犬100pg/kg）快速靜注，可造成動物多源性早搏、短陣性室性心動過速等。這類模型可用于篩選抗心律失常藥物。其優(yōu)點為心律失常在幾分鐘自行消失，因此同一動物可反復(fù)多次進(jìn)行心律失常實驗，便于觀察抗心律失常藥物作用的持續(xù)時間，并可進(jìn)行自身對照。3房室傳導(dǎo)阻滯和房室交接區(qū)傳導(dǎo)常性心律失常多選用狗、貓，在麻醉開胸暴露心臟的情況下，于距犬心尖部152cm處的左室心肌內(nèi)注入熱生理鹽水（8090C）或95%酒精、25%硫酸1015ml（貓和兔注入47ml）,引起心肌大片的局部壞死

40、性心律失常。也可在狗的房室交接部（即在左心房下部、心房、下腔靜脈和前房室溝三者交匯點的前上方約05cm處），用注射針頭垂直刺入房間隔下部房室結(jié)區(qū)，緩緩注入95%或無水酒精25ml,造成核處組織壞死。還可采用豚鼠，自左心耳向左房內(nèi)注射腺苷5“g,注后1秒鐘左右，即出現(xiàn)典型的II度或II度以上的傳導(dǎo)阻滯，較嚴(yán)重時，房室完全停搏，停搏時間與劑量呈平行關(guān)系，心率和心律僅在數(shù)秒或十幾秒即可恢復(fù)。此模型重復(fù)性好，但傳導(dǎo)阻滯持續(xù)時間短，不易用其進(jìn)行藥物觀察，如果注射腺苷劑量大，則傳導(dǎo)阻滯不易復(fù)原。除豚鼠外，腺苷對其他動物一般不引起傳導(dǎo)阻滯。4竇房結(jié)心律失常用雄性家兔，將細(xì)鋼絲變成直徑約0.8cm的半環(huán)，纏繞

41、少許棉花。以40%甲醛浸潤后，把此環(huán)放在上腔靜脈根部與右心房交界處1分鐘，動物迅速出現(xiàn)心電圖改變，心率減慢50%左右，約68分鐘減至最低水平；P波多在12分鐘內(nèi)消失，形成交界性心律；在310分鐘內(nèi)發(fā)生ST段偏移（抬高、下降或先升后降）；在心電圖改變的同時，伴有動脈壓下降，在第8分鐘降至最低水平。此方法造成的病竇成功率高，持續(xù)時間長（可達(dá)5小時），重復(fù)性好，模型較穩(wěn)定，發(fā)病機(jī)制及心電圖表現(xiàn)與臨床相四、呼吸系統(tǒng)疾病動物模型（一）慢性支氣管肺炎模型常選用大鼠、豚鼠或猴吸入刺激性氣體（如二氧化硫、氯、氨水、煙霧等）復(fù)制人類慢性氣管炎?，F(xiàn)發(fā)現(xiàn)豬粘膜下腺體與人類相似，且經(jīng)常發(fā)生氣管炎及肺炎，故認(rèn)為是復(fù)制人

42、類慢性氣管炎較合適的動物。用去甲腎上腺素可以引起與人類相似的氣管腺體肥大。（二）肺氣腫模型給兔等動物氣管內(nèi)或靜脈內(nèi)注射一定量木瓜蛋白酶、菠羅蛋白酶（Bromelin）、敗血酶（Alcalas）、胰蛋白酶（Trypsin）、致熱溶解酶（Thermolysin）,以及由膿性痰和白細(xì)胞分離出來的蛋白溶解酶等，可復(fù)制成實驗性肺氣腫。以木瓜蛋白酶形成的實驗性肺氣腫病變明顯而且典型,或用瓜蛋白酶基礎(chǔ)上再加用氣管狹窄方法復(fù)制成肺氣腫和肺心病模型,其優(yōu)點是病因病變更接近于人。猴每天吸入一定深度的S02和煙霧（煙草絲50g，持續(xù)2.5小時），一年后，可出現(xiàn)不同程度的肺氣腫。這種模型比較符合人的臨床發(fā)病規(guī)律,有利

43、于進(jìn)行肺氣腫的病理生理及藥物治療研究。還可用1%三氯化鐵水溶液13ml，自兔耳靜脈注入，每周23次，可在短期內(nèi)造成肺心病模型。三）肺水模腫型用氧化氮吸入可造成大鼠和小鼠中毒性肺水腫，或用氣管內(nèi)注入50%葡萄糖液（家兔及狗分別為1及10ml）引起滲透性肺氣腫。麻醉下用3738C生理鹽水注入兔頸外靜脈或股靜脈使血液總量增加0.61倍（血液總量相當(dāng)體重1/12），可形成稀血性多血癥肺水腫。切斷豚鼠、家兔、大鼠頸部兩則迷走神經(jīng)可引起肺水腫。家兔（1.52kg）耳靜脈注入1：1000腎上腺素0.540.6毫克，可使動物發(fā)生肺水腫并在515分鐘死亡，肺系數(shù)自4.15g/kg增至6.312.5g/kg；5m

44、g腎上腺素肌注，8分鐘左右大鼠死亡，肺系數(shù)20g/kg，靜脈注入10%氯仿（兔01ml/kg,狗0.5ml/kg）也可引起急性肺水腫。腹腔注入6%氯化銨水溶液可引起大鼠（04ml/kg）、豚鼠（0.507ml/kg）肺水腫。（四）支氣管痙攣、哮喘模型常選用豚鼠復(fù)制急性過敏性支氣管痙攣。用生理鹽水配成1：10雞蛋白溶液作致敏抗原，給每只（250g體重）豚鼠腹腔內(nèi)注射05ml,致敏注射后1周，動物對抗原的敏感性逐漸升高，至34周時最高。此時再用1：3雞蛋白2ml加弗氏完全佐劑霧化（在霧化室內(nèi)），致敏動物在此霧室內(nèi)十幾秒鐘到數(shù)分鐘內(nèi)，就出現(xiàn)不安，呼吸加緊加快，然后逐漸減慢變?nèi)?，甚至出現(xiàn)周期性呼吸，直

45、到呼吸停止而死亡。如果動物致敏程度較輕或誘發(fā)時雞蛋白噴霧的濃度很快，則只發(fā)生一時性的支氣管痙攣，并不死亡。如改用組織胺噴霧，則不必予先致敏，就能引起豚鼠支氣管痙攣。組織胺用量依霧室大小而定，在83103容量時，1:1000組織胺的用量0.51ml。狗每周兩次暴露于犬弓蛔蟲（Toxocaracanis）、豬蛔蟲（Ascarissuum）或混合草籽浸出物的氣溶膠中可引起實驗性哮喘。給用10-8稀釋豬蛔蟲浸出物皮試陽性狗以豬蛔蟲氣溶膠吸入，也可引起哮喘。（五）實驗性矽肺模型常選用大鼠、家兔或狗、猴來復(fù)制模型。取一定量含游離SiO299%以上的DQ-12型石英粉，經(jīng)酸化處理后，選取尖粒95%在5“m以

46、下的那一段混懸液，烤干后準(zhǔn)確稱取需用量加生理水制成混懸液（滅菌），大鼠用50mg/ml，每只氣管內(nèi)注入1ml；家兔用120mg/ml，用塵量按120mg/kg體重計算，在暴露氣管后注入，均可復(fù)制成典型的矽肺模型。五、消化系統(tǒng)疾病動物模型（一）病毒性肝炎模型常用方法是注射乙型肝炎病人血清復(fù)制乙型肝炎模型。膽大部分實驗動物對甲型肝炎病毒不易感。我國已有報導(dǎo)紅面獼猴、恒河猴、人及野生樹鼩種毒后出現(xiàn)人甲型肝炎現(xiàn)象。近年來發(fā)現(xiàn)某些鴨肝炎病毒的特征與人肝炎病毒十分相似，故用鴨作為人肝炎模型也開始增多。二）免疫性肝炎模型慢性或遷延性肝炎患者體內(nèi)存在著抗肝細(xì)胞成分抗體。1959年國外有人用肝組織懸液加弗氏佐劑

47、免疫豚鼠，成功地誘發(fā)了肝細(xì)胞變性及壞死等病變。也有人報導(dǎo)肝膜蛋白（LSP）加佐劑分次注射產(chǎn)生動物免疫性肝炎模型。（三）胃、腸道潰瘍模型在動物身上復(fù)制胃、腸道潰瘍的方法較多，但所用的方法不同，引起的潰瘍病變也各有特點。常用的方法有：1應(yīng)激法以各種強(qiáng)烈的傷害性刺激（如強(qiáng)迫制動、饑餓、寒冷等），引起動物發(fā)生應(yīng)激性潰瘍。如把動物浸入冷水中或放在應(yīng)激箱中不斷地遭受電刺激，使之劇烈不安，一晝液即能引起胃粘膜出血及潰瘍。這種方法簡單，成功率達(dá)99%以上。2藥物法給動物投服或注射一定量的組織胺、胃泌素、腎上腺類固醇、水楊酸鹽、血清素、利血平、保泰松等可造成動物胃腸潰瘍。如給豚鼠小劑量的組織胺，連續(xù)數(shù)天，可引起胃、十二指腸、食道等發(fā)生潰瘍。又如可用利血平、血清緊張素、阿斯匹林等誘發(fā)大白鼠或小白鼠的胃潰瘍。3燒灼法用電極燒灼胃底部的胃壁，可造成象人的胃潰瘍病變；用濃醋酸給大鼠胃壁內(nèi)注射或涂抹于胃壁漿膜面上可造成慢性潰瘍。燒灼法復(fù)制胃、腸道潰瘍模型的優(yōu)點是方法簡便，潰瘍部位可由作者自己選擇。4結(jié)乳幽門法選用大鼠、小鼠或豚鼠，麻醉后，無菌技術(shù)下在劍突下由腹正