植物病原菌的接種

1、實驗五 植物病原物的接種一、實驗?zāi)康娜斯な共≡锱c寄主植物感病部位接觸，創(chuàng)造條件使病原物侵入 并誘致寄主發(fā)病叫接種，接種是證病過程的重要步驟，在研究寄生現(xiàn) 象發(fā)病規(guī)律，測定品種抗病性，藥劑防病效果時都需要接種。因此， 接種是植病工作者必須掌握的基本技術(shù)環(huán)節(jié)。植物病害人工接種方法，是根據(jù)病害的傳染方式和侵染途徑設(shè)計 的，植物病害的種類很多、其傳染方式和侵染途徑各異。因此接種方 法也不相同。本次實驗以玉米大斑病，小麥根腐病，小麥稈銹病，梨 褐腐病等為內(nèi)容學(xué)習(xí)常用的接種方法。二、內(nèi)容、材料和方法（一）拌土法（小麥根腐?。┌柰练ㄟm于土壤傳染的病害，方法是將消毒的土壤分別裝入兩個 小花盆中，其中一盆表層

2、覆以一厘米厚的菌土，菌土是用玉米砂培養(yǎng) 菌1份加消毒土 5份混合而成，另一盆不接種（不覆菌土）作為對照。 將經(jīng)0.1%升汞表面消毒3分鐘并用無菌水洗3次的小麥種子，分別 播種在兩個花盆內(nèi)，插上標(biāo)牌，注明接種日期，方法病害名稱及接種 人姓名，花盆放在室溫下，澆水保濕，遮陰管理，待幼苗出土展開葉 子后（大約一周），觀察并記載根腐病發(fā)生情況。（二）噴霧法（玉米大斑?。饬骷坝晁畟鞑サ牟『ΤＳ么朔ń臃N，將培養(yǎng)好的玉米大斑病的斜面 菌種一支，用移植鉤刮于裝有100毫升無菌水的三角瓶中，用力振蕩， 待孢子洗下后，以紗布過濾，并于濾液中加入0.1克中性肥皂，即成 孢子菌絲懸液，用衛(wèi)生噴霧器均勻噴布在麥苗上。

3、同時設(shè)一不噴菌液 而噴無菌水的作對照，用塑料罩保濕48小時，揭布后正常管理，7 天后作發(fā)病調(diào)查。（三）涂抹法（小麥稈銹病）這也是氣流傳播的病害常用的接種方法，用于禾本科銹病接種。 方法是用姆指沾銹菌夏孢子懸液自下向上輕輕涂欲接種的小麥葉片， 也可先用手指沾水摩擦葉片，使葉表有一層水膜，然后將夏孢子粉抹 在上面，以不涂抹孢子懸液或孢子粉的作為對照。塑料罩保濕48小 時后揭布，正常管理，7天后作發(fā)病調(diào)查。（四）創(chuàng)傷接種法（白菜軟腐病及梨褐腐?。﹦?chuàng)傷接種法是傷口侵入的弱寄生菌常用的接種方法。白菜軟腐?。喝∏谐蛇m當(dāng)大小的白菜幫兩塊、經(jīng)水洗，待水稍 干后，以10%漂白粉溶液作表面消毒，分放在兩個滅過菌的

4、上下鋪有 吸水紙的培養(yǎng)皿中，用酒精擦過的玻璃棒順著白菜幫打三排不穿透的 孔穴。將培養(yǎng)好的白菜軟腐病菌斜面菌種的菌苔以無菌水洗下作成菌 懸液。然后，先以滅過菌的獸用注射器吸取無菌水滴于菜幫的第一排 內(nèi)孔作為對照，再用該注射器吸菌液滴于第二、三排孔內(nèi)。注意無論 無菌水、還是菌液都不要滴的過多。以免流出孔穴，另一培養(yǎng)皿的菜 幫以同法處理作為重復(fù)。蓋好皿蓋，置于26 28C的溫箱中，24小 時后檢查發(fā)病情況。梨褐腐?。喝“桌嬉跃凭鹧姹砻嫦竞?，用熾熱的解剖刀， 在其上切成小手指粗的孔穴3 5個。取經(jīng)分離純化的梨褐腐病菌菌 落填抹在已切好的孔穴中，再復(fù)以飽含無菌水的脫脂棉或紗布，放在 密封的干燥器或標(biāo)

5、本瓶中，干燥器或標(biāo)本瓶底部裝些水，再將干燥器 或標(biāo)本瓶放于25C的溫箱中，以未接菌的作為對照，3天后作發(fā)病調(diào) 查。三、接種試驗的觀察和記載認(rèn)真觀察和記錄是做好接種試驗的重要環(huán)節(jié)，為了及時正確地分 析總結(jié)試驗結(jié)果，必須認(rèn)真觀察并做詳盡的記錄，如記錄接種時間， 接種植物、品種、接種方法、部位、接種用的病菌名稱（包括菌系和 生理小種）、來源、繁殖和培養(yǎng)方法（培養(yǎng)基、培養(yǎng)溫度、培養(yǎng)時間）、 接種體濃度、接種的方法和步驟及接種后的管理等。四、作業(yè)提交接種試驗報告一份（以一種病害接種結(jié)果為題材，試按試驗 的目的意義，試驗材料和方法、試驗結(jié)果及結(jié)果分析和討論等格式來 寫）。五、思考題植物接種常用的方法有哪些？舉例說明如何根據(jù)病害特點選擇 接種方法？附：玉米粉砂培養(yǎng)基玉米粉砂培養(yǎng)基，常用于繁殖