大腸桿菌在發(fā)酵乳中生長繁殖淺談+-+LQ

1、大腸桿菌在發(fā)酵型酸牛奶生長繁殖淺談?wù)罕疚囊园l(fā)酵乳作為基礎(chǔ)，其中添加一定濃度的以大腸桿菌為典型菌的大腸菌群，用以研究大腸桿菌在發(fā)酵乳中的生長情況。關(guān)鍵詞：大腸桿菌發(fā)酵型酸牛奶生長情況一引言：發(fā)酵型酸牛奶大致可以分為三個(gè)品類：第一類是滿足營養(yǎng)需求的基礎(chǔ)酸奶；第二類是滿足美味休閑的大果粒、谷物酸奶；第三類是健康功能酸奶，如通暢、免疫、兒童成長等。其中基礎(chǔ)酸奶的市場(chǎng)規(guī)模占60%以上，果粒（谷物）酸奶和功能性酸奶的市場(chǎng)規(guī)模相對(duì)較低。因大腸桿菌對(duì)產(chǎn)品存在著污染隱患，現(xiàn)階段沒有相關(guān)文獻(xiàn)說明大腸桿菌在發(fā)酵型酸牛奶中生長繁殖情況，為此，本文就大腸桿菌在發(fā)酵型酸牛奶生長情況進(jìn)行了評(píng)述。二術(shù)語和定義：1.大腸菌

2、群：在一定培養(yǎng)條件下能發(fā)酵乳糖、產(chǎn)酸產(chǎn)氣的需氧和兼性厭氧革蘭氏陰性無芽胞桿菌。2發(fā)酵乳fermentedmilk:以生牛（羊）乳或乳粉為原料，經(jīng)殺菌、發(fā)酵后制成的pH值降低的產(chǎn)品。大腸桿菌：廣泛存在于人和溫血?jiǎng)游锏哪c道中，能夠在44.5C發(fā)酵乳糖產(chǎn)酸產(chǎn)氣，IMViC（靛基質(zhì)、甲基紅、VP實(shí)驗(yàn)、檸檬酸鹽）生化實(shí)驗(yàn)為+或-+的革蘭氏陰性桿菌。以此作為糞便污染指標(biāo)來評(píng)價(jià)食品的衛(wèi)生狀況，推斷食品中腸道致病菌污染的可能性。三設(shè)備及試劑：溫箱:361度冰箱:2-5度恒溫水浴:461C4天平：感量O.Olg均質(zhì)器振蕩器無菌培養(yǎng)皿:直徑為90mm無菌吸管：lml（具0.01ml刻度）無菌錐形瓶:容量為500m

3、l10移液器：20-200U1培養(yǎng)基和試劑:結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂煌綠乳糖膽鹽肉湯無菌生理鹽水無菌1mol/lNaOH和1mol/lHCL四實(shí)驗(yàn)方法1收集發(fā)酵型酸牛奶，以大腸桿菌作為大腸菌群的典型菌落，其中添加10ml的復(fù)溶大腸桿菌（菌種編號(hào)為CCTCCAB91112）于樣品中；2進(jìn)行震蕩混勻，36C培養(yǎng)24小時(shí)后待檢；3每隔24小時(shí)進(jìn)行檢測(cè)1次大腸菌群，同時(shí)檢測(cè)樣品的酸度和PH值；具體操作步驟:稱取25g混勻樣品于25ml裝有玻璃珠的無菌生理鹽水中，用無菌1mol/lNaOH和1mol/lHCL調(diào)節(jié)PH在6.5-7.5之間，制成1:1稀釋液。取2份2ml稀釋樣品接種2個(gè)無菌平皿(1:1稀釋時(shí)，

4、每皿2ml等同于吸取原液1ml),同時(shí)，分別取2ml生理鹽水加入兩個(gè)無菌平皿作空白對(duì)照。及時(shí)將18-20ml冷至46C的結(jié)晶紫中性紅膽鹽瓊脂(VRBA)傾注于每個(gè)平皿中。小心選擇平皿，待培養(yǎng)基于樣品溶液充分混勻，凝固后，按照GB4789.32010食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品微生物學(xué)檢驗(yàn)大腸菌群計(jì)數(shù)第二法大腸菌群平板計(jì)數(shù)法再加3ml-4mlVRBA覆蓋平板表層，翻轉(zhuǎn)平板，置于36C1C培養(yǎng)18-24h。同時(shí)取待檢樣品若干檢測(cè)樣品的酸度和PH值。證實(shí)實(shí)驗(yàn)從VRBA平板上提取10個(gè)不同類型的典型和可疑菌落，分別移種于10個(gè)BGLB肉湯管內(nèi)，361C培養(yǎng)14-48h，觀察產(chǎn)氣情況，凡BGLB肉湯管產(chǎn)氣，即報(bào)

5、告為大腸菌群陽性。四.檢測(cè)結(jié)果及分析：1、檢測(cè)酸性樣品1-5#大腸菌群項(xiàng)目，同時(shí)檢測(cè)樣品的酸度和PH值，結(jié)果如下:天數(shù)樣品號(hào)大腸菌群結(jié)果(CFU/g)酸度(T)PH值第1天產(chǎn)品-119000093.53.97產(chǎn)品-220000093.63.99產(chǎn)品-3170000943.96產(chǎn)品-441000943.96產(chǎn)品-57700092.63.95第2天產(chǎn)品-12100091.93.95產(chǎn)品-21100092.63.95產(chǎn)品-31700092.73.95產(chǎn)品-450092.23.96產(chǎn)品-5100092.13.96第3天產(chǎn)品-1420088.03.98產(chǎn)品-2130089.43.95產(chǎn)品-3550088

6、.53.96產(chǎn)品-437089.53.95產(chǎn)品-578089.83.94第4天產(chǎn)品-146091.33.94產(chǎn)品-253091.93.95產(chǎn)品-3110090.23.92產(chǎn)品-46091.93.94產(chǎn)品-520092.33.93第5天產(chǎn)品-1092.53.94產(chǎn)品-22091.93.94產(chǎn)品-34091.63.94產(chǎn)品-41090.69.95產(chǎn)品-5091.83.96第6天產(chǎn)品-1792.63.96產(chǎn)品-211091.93.93產(chǎn)品-315092.73.95產(chǎn)品-4691.73.96產(chǎn)品-52592.33.94第7天產(chǎn)品-1292.33.88產(chǎn)品-25691.93.88產(chǎn)品-3110933.8

7、8產(chǎn)品-4393.13.86產(chǎn)品-5691.53.91第8天產(chǎn)品-1193.03.89產(chǎn)品-21791.03.88產(chǎn)品-35893.03.89產(chǎn)品-4192.43.88產(chǎn)品-5391.93.91第9天產(chǎn)品-1091.33.93產(chǎn)品-2391.23.92產(chǎn)品-33593.83.90產(chǎn)品-4093.03.91產(chǎn)品-5295.23.89第10天產(chǎn)品-1090.53.86產(chǎn)品-2292.53.84產(chǎn)品-3797.53.83產(chǎn)品-4091.53.83產(chǎn)品-5797.53.79第11天產(chǎn)品-1000產(chǎn)品-2091.03.93產(chǎn)品-3095.43.90產(chǎn)品-4000產(chǎn)品-5000注：1-5#樣品為友芝友桶裝酸牛奶表1：大腸菌群的檢測(cè)結(jié)果98969492908886848223689101457111001-2-3依據(jù)以上實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)可知：1、當(dāng)發(fā)酵乳中含有大腸菌群時(shí)，大腸菌群產(chǎn)酸，導(dǎo)致樣品中酸度升高，PH值降低。2、當(dāng)發(fā)酵乳中含