【微生物工程】_發(fā)酵工業(yè)培養(yǎng)基

1、第四章 發(fā)酵工業(yè)的培養(yǎng)基一、培養(yǎng)基的配制原那么、類型及應用概念二、培養(yǎng)基的設計與優(yōu)化三、培養(yǎng)基的滅菌一、培養(yǎng)基的配制原那么、類型及應用概念 培養(yǎng)基：按照微生物生長繁殖所需要的，用人工方法配制而成的適合于微生物生長繁殖或產生代謝產物的營養(yǎng)基質。用途：1.促進特定微生物的生長繁殖。2.用于微生物純種的別離、鑒定。3.制造微生物制品。實現(xiàn)有效控制微生物生長繁殖前提條件是： 合理配制培養(yǎng)基培養(yǎng)基應具有的條件：1.含有滿足微生物生長發(fā)育的水分、碳源、氮源、生長因子及根本的離子磷、硫、鈉、鈣、鎂、鉀、鐵及各種微量元素。2.具有適宜的酸堿度(pH)。3.具有一定的緩沖能力及一定的氧化復原電位和適宜的滲透壓。

2、 配制培養(yǎng)基的原那么 根據(jù)不同微生物的營養(yǎng)需要配制不同的培養(yǎng)基。 如：自養(yǎng)、異養(yǎng) 細菌 - 牛肉膏蛋白胨(普通肉湯)培養(yǎng)基； 放線菌 - 高氏1號合成培養(yǎng)基； 酵母菌 - 麥芽汁培養(yǎng)基，馬鈴薯蔗糖 霉菌- 查氏培養(yǎng)基，馬鈴薯蔗糖適宜1營養(yǎng)物的濃度 濃度大-抑制作用，如高糖，鹽； 濃度小-不能滿足微生物生長的需要。2營養(yǎng)物質配比-影響微生物生長繁殖和代謝產物積累。 碳氮比C/N=碳元素與氮元素 碳源過多-抑制作用； 碳源過少-菌種衰老和自溶 氮源過多菌體生長旺盛，積累代謝產物少。 氮源過少-菌體生長繁殖緩慢。 谷氨酸發(fā)酵： C/N=4:l時，菌體大量繁殖，谷氨酸積累少。 C/N=3:1時，菌體繁

3、殖受抑制，谷氨酸大量增加。 正常 :細菌：C:N=6:1 真菌：C:N=10:1 各類微生物生長的最適pH各不相同。 細 菌：7 放線菌： 酵母菌、霉菌： 生長和代謝-改變培養(yǎng)基pH。 維持pH值的恒定方式： 在培養(yǎng)基里加PH緩沖劑)或不溶性的碳酸鹽。磷酸二氫鉀(堿性)或磷酸氫二鉀(酸性)CaCO34.原料來源的選擇 微生物學實驗-便于觀察實驗現(xiàn)象 原料：選擇易加工，使用方便的原料。 碳源-試劑純葡萄糖、蔗糖、淀粉等。 氮源-蛋白胨、牛肉膏、酵母膏。 發(fā)酵生產 原料-廉價且易于獲得的原料 生產醬油：碳源:麩皮 氮源:豆粕。 甲烷發(fā)酵廢水、廢渣; 人畜糞便及禾草 常用的發(fā)酵工業(yè)原料：麩皮 、米糠

4、、玉米漿、酵母浸膏、酒糟、豆餅、花生餅等。培養(yǎng)基的種類及應用 (1)微生物種類不同，需要的營養(yǎng)物質不同。 (2)同一種微生物，培養(yǎng)或研究目的不同，配制的培養(yǎng)基也不同。按組成成分分：合成、天然、半合成培養(yǎng)基按物理狀態(tài)分：固體、半固體、液體培養(yǎng)基。按功能分：根底、選擇、加富、鑒別培養(yǎng)基。按照培養(yǎng)微生物的種類分：細菌、霉菌、酵母菌、放線菌培養(yǎng)基。一根據(jù)培養(yǎng)基成分 又稱限定性培養(yǎng)基，指由化學成分的營養(yǎng)物質營養(yǎng)物質的成分的化學性質和數(shù)量配制而成的培養(yǎng)基。優(yōu)點:化學成分精確、重復性強。缺點:配制過程復雜，微生物生長較慢，價格昂貴。應用：實驗室內，研究微生物營養(yǎng)、代謝、菌種選育、菌種鑒定、生物測定等定量要求

5、較高的研究。 又稱復雜培養(yǎng)基，采用動植物組織或微生物細胞或其提取物和粗消化產物制成的。 營養(yǎng)物質來源于天然物質。天然物質：牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、麥芽汁、玉米粉、馬鈴薯、牛奶和血清等。 蒸熟的馬鈴薯、豆芽汁、麥芽汁-霉菌、酵母菌 普通牛肉湯、酵母膏、牛肉膏、蛋白胨等-細菌。 優(yōu)點：配制方便，營養(yǎng)豐富，價格低廉。 缺點：成分不穩(wěn)定，營養(yǎng)成分難以控制，結果復重性差。 應用：生產上大規(guī)模培養(yǎng)菌種。 即有天然有機物，又有成分化學藥品的培養(yǎng)基。在天然培養(yǎng)基的根底上適當參加無機鹽類或在合成培養(yǎng)基的根底上添加某些有機物。 如馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基。馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基成分: 去皮馬鈴薯200克，葡萄糖20克，水100

6、0mL. 優(yōu)點：有效地滿足微生物對營養(yǎng)物質的要求，適合大多數(shù)微生物。 應用：生產上、實驗室二根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)分 在液體培養(yǎng)基中參加凝固劑2.0%的瓊脂，使液體培養(yǎng)基凝固呈固體狀態(tài)，或直接由天然的固體營養(yǎng)物質制成的培養(yǎng)基，如白酒、固體食醋生產。用途：別離、鑒定、活菌計數(shù)、菌種保藏等 。凝固劑：瓊脂、明膠和硅膠三種。凝固劑要求:不被微生物利用分解，生長溫度范圍為固體。凝固點溫度不能太低。瓊脂:96，45 無毒，滅菌不會破壞。透明及粘著力強。配制方便；廉價。 在液體培養(yǎng)基中參加少量凝固劑,使之呈柔軟的糨糊狀或直接將營養(yǎng)物質配制成半流體狀態(tài)的培養(yǎng)基。 凝固劑加量：0.2 % 0.7%的瓊脂。 應用

7、:觀察細菌的運動特征(有無鞭毛)、培養(yǎng)微好氧細菌，檢驗噬菌體。 把各種營養(yǎng)物質都溶解于水中，混合制成的液體狀態(tài)的培養(yǎng)基。 培養(yǎng)基中不加任何凝固劑。通過振蕩和攪拌增加通氣量。 特點：成分均勻，便于滅菌處理、運輸和監(jiān)測。 應用：微生物生理生化特性研究、大規(guī)模的工業(yè)生產啤酒、葡萄酒、乳制品生產。 三按照培養(yǎng)基的功能分 (1)根底培養(yǎng)基:含有一般微生物生長繁殖所需的根本營養(yǎng)物質的培養(yǎng)基。 用途:作為一些特殊培養(yǎng)基的根底成分。 細菌:牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基 霉菌:馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基 酵母菌:麥芽汁瓊脂培養(yǎng)基 (2)選擇培養(yǎng)基 在培養(yǎng)基中參加某些化學藥品以抑制不需要的微生物生長，而促進需要的微生物生長的培

8、養(yǎng)基。 化學藥品-抑菌劑和殺菌劑 常用染色劑結晶紫、亮綠、孟加拉紅或抗生素青霉素、鏈霉素. 別離革蘭氏陰性菌-加青霉素或結晶紫(抑制G+). 別離酵母菌和霉菌-加抗生素(青霉素、鏈霉素，抑制細菌和放線菌)。 用途:將所需要的微生物從混雜的微生物中別離出來。 (3)加富培養(yǎng)基 在根底培養(yǎng)基里專門參加待別離微生物特別需要的營養(yǎng)物質，而使待別離微生物到達選擇的目的。 如：血清、血液、動植物組織液、酵母浸膏等。用途：培養(yǎng)營養(yǎng)要求比較苛刻的異養(yǎng)微生物。富集或別離某種微生物。 纖維素-富集纖維素降解微生物 石蠟油-富集分解石油的微生物與選擇培養(yǎng)基區(qū)別： 加富培養(yǎng)基：增加所要別離的微生物數(shù)量，成為優(yōu)勢菌，逐

9、步淘汰其他微生物。 選擇培養(yǎng)基：抑制不需要微生物的生長，使所需要菌成為優(yōu)勢菌。 (4)鑒別培養(yǎng)基 培養(yǎng)基中加有指示劑，從而用肉眼就能使目的微生物或待別離微生物的菌落與其他微生物菌落區(qū)別開來。 常用的鑒別培養(yǎng)基：伊紅-美藍瓊脂培養(yǎng)基EMP成分：蛋白胨10克 乳糖5克 蔗糖5克 K2HPO42克 *伊紅克 美藍克 蒸餾水1000ml伊紅和美藍作用:抑菌某些細菌生長和鑒別染色，產酸指示劑?？捎糜趨^(qū)分大腸桿菌和沙門氏菌和志賀氏菌大腸桿菌：發(fā)酵乳糖產酸，使伊紅與美藍結合生成沉淀，呈現(xiàn)紫黑色菌落，經反射可看到綠色金屬光澤。沙門氏菌和志賀氏菌:不能發(fā)酵乳糖,形成無色菌落.一些鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基名稱加入化學物質

10、微生物代謝產物培養(yǎng)基特性變化主要用途酪素培養(yǎng)基酪素胞外蛋白酶蛋白水解圈鑒別產蛋白酶的菌種明膠培養(yǎng)基明膠胞外蛋白酶明膠液化鑒別產蛋白酶的菌種油脂培養(yǎng)基食用油、吐溫中性紅批示劑胞外脂肪酶由淡紅色變成深紅色鑒別產脂肪酶菌株淀粉培養(yǎng)基可溶性淀粉胞外淀粉酶淀粉水解圈鑒別產淀粉酶的菌種H2S試驗培養(yǎng)基醋酸鉛H2S產生黑色沉淀鑒別產H2S菌糖發(fā)酵培養(yǎng)基溴甲酚紫乳酸、醋酸由紫色變黃色鑒別腸道細菌伊紅美藍培養(yǎng)基伊紅、美藍酸帶金屬光澤深紫色菌落鑒別水中大腸菌群(四)按照培養(yǎng)微生物的種類分培養(yǎng)基按微生物的種類可分為四類：細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基和霉菌培養(yǎng)基。常用的細菌培養(yǎng)基-營養(yǎng)肉湯和營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基；

11、常用的放線菌培養(yǎng)基-高氏1號培養(yǎng)基；常用的酵母菌培養(yǎng)基-馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基和麥芽汁培養(yǎng)基；常用的霉菌培養(yǎng)基-馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基、豆芽汁葡萄糖或蔗糖瓊脂培養(yǎng)基和察氏培養(yǎng)基等。 培養(yǎng)基是微生物菌種生長繁殖和發(fā)酵的重要物質根底，也是微生物賴以生存的外界環(huán)境。在科學實驗和實際生產中，會遇到許多問題，有些培養(yǎng)基即是液體培養(yǎng)基，又是選擇培養(yǎng)基也可能是天然培養(yǎng)基，掌握不同類型的培養(yǎng)基特點，并將之靈活地應用于具體的實際工作之中。二、培養(yǎng)基的優(yōu)化在設計、優(yōu)化配方時，常常要對培養(yǎng)基的碳源、氮源、無機鹽等多種因子進行反復的優(yōu)化試驗，工作量極大，如分析11種培養(yǎng)基因子，每種有3個水平，那么需要進行311(即177147次

12、)實驗 。如果能借助正交試驗設計(orthogonal design)、響應面分析(response surface analysis, RSA)、均勻試驗設計(uniform design)、遺傳算法(genetic algorithm, GA)等行之有效的生物數(shù)學實驗方法，可以明顯提高工作效率。 三 培養(yǎng)基的滅菌在工業(yè)微生物培養(yǎng)過程中，只允許生產菌存在和生長繁殖，不允許其它微生物共存，因此，幾乎所有發(fā)酵過程，必須進行純種培養(yǎng)；整個發(fā)酵過程必須牢固樹立無菌觀念，強調無菌操作；除了設備應嚴格按規(guī)定保證沒有死角，沒有構成染菌可能的因素外，必須對培養(yǎng)基和生產環(huán)境進行嚴格的滅菌和消毒，防止雜菌和噬菌

13、體的污染。滅菌：利用物理和化學的方法殺滅或除去物料及設備中一切生命物質的過程。消毒：用物理或化學的方法殺死物料、容器、器具內外的病原微生物，一般只能殺死營養(yǎng)細胞而不能殺死芽胞。消毒不一定能到達滅菌的要求，而滅菌那么可到達消毒的目的。在發(fā)酵工業(yè)生產中，為了保證純種培養(yǎng)，在生產菌種接種培養(yǎng)前，要對培養(yǎng)基、空氣系統(tǒng)、消泡劑、流加物料、設備、管道等進行滅菌，還要對生產環(huán)境進行消毒，防止雜菌和噬菌體的大量繁殖。只有不受雜菌污染，發(fā)酵過程才能正常進行。一、滅菌的方法干熱滅菌法火焰滅菌法電磁波、射線滅菌法濕熱滅菌法主要是高壓蒸汽滅菌化學藥劑滅菌法過濾除菌法進行干熱滅菌時，微生物細胞發(fā)生氧化，微生物體內蛋白質

14、變性和電解質濃縮引起中毒等作用，氧化作用導致微生物死亡是主要依據(jù)。由于微生物對于熱的耐受力比對濕熱強得多，故干熱滅菌所需的溫度要高，時間要長，一般160170、1。實際應用時，對一些要求保持枯燥的實驗器具和材料可以采用干熱滅菌法。利用火焰直接殺死微生物的滅菌法稱為火焰滅菌法。該法方法簡單，滅菌徹底，但使用范圍有限，僅適用于接種針、玻璃棒、三角瓶口等的滅菌。利用電磁波、紫外線、X射線、射線或放射性物質產生的高能粒子進行滅菌，以紫外線最常用。紫外線對芽胞和營養(yǎng)細胞都能起作用，但細菌芽胞和霉菌孢子對紫外線的抵抗力強。紫外線的穿透力低，僅適用于外表滅菌和無菌室、培養(yǎng)室等空間的滅菌，對固體物料滅菌不徹底

15、，也不能用于液體物料的滅菌。250270nm之間殺菌效率高，以波長在260nm左右滅菌效率最高。除紫外線外，X射線和射線也可進行滅菌。一、滅菌的方法利用飽和蒸汽進行滅菌原理：水的沸點隨水蒸氣壓力的增加而上升，高壓情況下可獲得高溫的水蒸汽。借助蒸汽的高溫和蒸汽釋放的潛熱使微生物細胞中的蛋白質、酶和核酸分子內部的化學鍵，特別是氫鍵受到破壞，引起不可逆的變性，使微生物死亡從滅菌效果來看，由于蒸汽有很強的穿透能力，濕熱滅菌對耐熱芽胞桿菌來說，溫度升高10時，滅菌速度常數(shù)可增加810倍，對營養(yǎng)細胞更高。另外蒸汽冷凝為水時還要釋放出潛熱，因此溫度可進一步提高蒸汽來源方便，價格低廉，滅菌效果可靠濕熱滅菌法是

16、目前最常用的滅菌方法，一般的濕熱滅菌條件為121，30min某些化學藥劑能與微生物發(fā)生反響而具有殺菌的作用?；瘜W藥劑適用于生產車間環(huán)境的滅菌，接種操作前小型器具的滅菌等?；瘜W藥品的滅菌使用方法，根據(jù)滅菌對象的不同有浸泡、添加、擦拭、噴灑、氣態(tài)熏蒸等。藥劑殺菌原理使用濃度高錳酸鉀使蛋白質、氨基酸氧化從而使微生物死亡。0.13漂白粉次氯酸鈉在水溶液中分解為新生態(tài)氧和氯，使細菌受強烈氧化作用而導致死亡。1 5%酒精溶液使細胞脫水，引起蛋白質凝固變性。對營養(yǎng)細胞、病毒、霉菌孢子均有殺死作用。75新潔而滅表面活性劑類潔凈消毒劑，在水溶液中以陽離子形式與菌體表面結合，引起菌體外膜損傷和蛋白質變性。一般用于

17、器具和生產環(huán)境的消毒，不能與合成洗滌劑合用。0.25甲醛強還原劑，與氨基結合使蛋白質或酶變性。2份37甲醛溶液1份KMnO4；37甲醛溶液加熱過氧乙酸強氧化劑，廣譜、高效、速效，對營養(yǎng)細胞、細菌芽胞、真菌孢子和病毒都有殺滅作用。戊二酸在堿性條件下具有殺死芽胞的能力2酚類如石炭酸,使蛋白質變性,沉淀或使酶系統(tǒng)失活;酚能抑制和殺死大部分細菌的繁殖體.真菌,病毒對石炭酸不太敏感15二、濕熱滅菌的原理1. 微生物的熱阻 每一種微生物都有一定的最適生長溫度范圍，當微生物處于最低限溫度以下時，代謝作用幾乎停止而處于休眠狀態(tài)。當溫度超過最高限度時，微生物細胞中的原生質體和酶的根本成分蛋白質發(fā)生不可逆的變化，

18、即凝固變性，使微生物在很短時間內死亡。濕熱滅菌就是根據(jù)微生物的這種特性進行的一般無芽胞細菌，在60下經過10min即可全部殺死；芽胞細菌的芽胞在100下經過幾分鐘至數(shù)小時才能殺死；某些嗜熱菌能在120下耐受2030min。一般講，滅菌的徹底與否 以 能否殺死芽胞細菌為標準。二、濕熱滅菌的原理致死溫度：殺死微生物的最低溫度。致死時間：在致死溫度下，殺死全部微生物所需的時間。在致死溫度以上，溫度愈高，致死時間愈短。由于一般細菌、產芽胞細菌、微生物細胞和微生物孢子對熱的抵抗力不同，因此，它們的致死溫度和致死時間也有差異。微生物對熱的抵抗力常用“熱阻表示熱阻：微生物在某一特定條件下主要是溫度和加熱方式

19、下的致死時間。相對熱阻：某一微生物在某條件下的致死時間與另一微生物在相同條件下的致死時間的比值。微生物對濕熱的相對抵抗力微生物大腸桿菌細菌芽胞霉菌孢子病毒相對抵抗力1300000021015二、濕熱滅菌的原理2. 微生物的熱死規(guī)律對數(shù)殘留定律微生物熱死：指微生物受熱失活直到死亡，主要是由于微生物細胞內酶蛋白受熱凝固，喪失活力所致。在微生物受熱失活的過程中，微生物不斷被殺死，活菌數(shù)不斷被減少。微生物熱死速率可以用分子反響速率來表示，即微生物活體個數(shù)減少的速度與任一瞬間殘存的菌數(shù)成正比。d Nd t= -k NN培養(yǎng)基中殘留活菌數(shù)，個；t受熱時間，min；k反應速率常數(shù)，或比死亡速率常數(shù)，min-

20、1。反應速率常數(shù)k隨微生物種類和加熱溫度而變化。t=2.303klgN0Nt對數(shù)殘留定律N0開始滅菌時原菌數(shù)，個Nt經時間t后殘留菌數(shù)，個。二、濕熱滅菌的原理隨時間的延長，加熱滅菌后的殘存菌數(shù)呈對數(shù)減少，且溫度越高，死亡越快。通常必要的滅菌時間是110130，520min。芽胞對熱耐受力強，為此需要更高的溫度并維持更長的時間。對細菌芽胞來說，并不始終符合對數(shù)殘留規(guī)律，特別是在受熱后很短的時間內，培養(yǎng)液中油脂、糖類及一定濃度的蛋白質會增加微生物的耐熱性；高濃度鹽類、色素能削減其耐熱性。隨著滅菌條件的加強，培養(yǎng)基成分的熱變性加速，特別是維生素，因此培養(yǎng)液滅菌一般都采用高溫短時間加熱的方式，這樣可以

21、到達徹底滅菌和把營養(yǎng)成分的破壞減少到最低限度的目的。滅菌時間取決于污染的程度N0、滅菌的程度殘留菌數(shù)Nt和k值。一般考慮產芽胞細菌和細菌的芽胞之和作為計算依據(jù)。在設計時常采用Nt即1000次滅菌中有一次失敗的時機。反響速率常數(shù)k是微生物耐熱性的一種特征，它隨微生物的種類和滅菌溫度而異。在相同的溫度下，k值愈小，那么此微生物愈耐熱。同一種微生物在不同的滅菌溫度下，k值不同，滅菌溫度愈低，k值愈低。某些芽胞細菌的k值細菌名稱k值/min-1枯草芽胞桿菌3.82.6硬脂嗜熱芽胞桿菌FS15180.77硬脂嗜熱芽胞桿菌FS6172.9產氣梭狀芽胞桿菌PA36791.8在培養(yǎng)基滅菌的過程中，除微生物被殺

22、死外，還伴隨著營養(yǎng)成分的破壞，如糖液焦化變色、蛋白質變性、維生素失活、醛基和氨基反響、不飽和醛聚合、一些化合物發(fā)生水解等。因此，必須選擇一個既能到達滅菌的目的，又能使培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分破壞至最小的滅菌工藝條件。二、濕熱滅菌的原理3. 培養(yǎng)基滅菌溫度的選擇反應動力學方程阿倫尼烏斯方程dcdt=-kck=Ae-E/RT反應速率常數(shù)與溫度的關系c反響物濃度，mol/L；t反響時間，min；k化學反響常數(shù)隨溫度及反響類型而變，min-1。A頻率因子；E反響所需的活化能，J/mol；T絕對溫度，K。雜菌的死亡也屬于一級動力學方程，與上式類似。一般殺滅微生物營養(yǎng)細胞的E值約為2.091052.71105J/

23、mol；殺死微生物芽胞的E值約為4.48105J/mol；一般酶及維生素等營養(yǎng)成分分解的E值為8.361038.36104J/mol。由于滅菌時的活化能E大于培養(yǎng)基營養(yǎng)成分破壞的活化能E，因此，隨著溫度升高，滅菌速率常數(shù)增加的倍數(shù)培養(yǎng)基中營養(yǎng)成分分解的速率常數(shù)的增加倍數(shù)。即當滅菌溫度升高時，微生物殺滅速度提高，超過了培養(yǎng)基營養(yǎng)成分破壞的速度。據(jù)測定，每升高10，速率常數(shù)的增加倍數(shù)為Q10。在熱滅菌的過程中，同時發(fā)生微生物死亡和培養(yǎng)基成分破壞兩個過程。溫度能加速其過程進行的速度，當溫度升高時，微生物死亡的速度更快;因此可以采用較高的溫度，較短的滅菌時間，以減少培養(yǎng)基營養(yǎng)成分的破壞，這就是通常所說

24、的“高溫瞬時滅菌法。一般化學反響Q10為；殺滅芽胞的反響Q10為510；殺滅微生物細胞的反響Q10為35左右。滅菌溫度較高而時間較短，要比溫度較低時間較長效果好。對同樣的培養(yǎng)基進行126132、57min連續(xù)滅菌，其所得培養(yǎng)基質量要比采用120、30min的實罐滅菌好，可以得到較高的發(fā)酵水平；對同一類培養(yǎng)基進行120、20min的實罐滅菌，其所得培養(yǎng)基的發(fā)酵水平高于120、30min的對照，而同樣到達滅菌的要求。不同滅菌條件下培養(yǎng)基營養(yǎng)成分破壞情況溫度/滅菌時間/min營養(yǎng)成分破壞/%10040099.3110306711515501204271300.581400.0821500.0180，

25、進蒸氣口蒸氣閥關掉，出蒸氣口排氣閥關小。翻開空氣閥，蒸氣直接進罐，121，2030min。從80100上升很快，大于100后溫度上升很慢，到118時就開始計時，到計時25min時立即關掉蒸氣閥。關掉蒸氣閥后通入無菌空氣，使罐內一直保持正壓高于大氣壓，空氣不會倒灌入罐內。在夾套中立即加自來水冷卻，從下向上，使溫度盡快降到55左右，到3738時關掉水，也有緩沖性。因為有緩沖性，蒸氣會沖到121。在80以上沖入蒸氣不容易產生冷凝水，罐內體積不會增加很大，培養(yǎng)基不會被稀釋很大。過程：先蒸煮滅菌，但固體培養(yǎng)基呈粒狀、片狀或粉狀，流動性差，不易翻動，吸水加熱易成團，冷卻困難。針對這些特點設計的轉鼓式滅菌機常用于酒廠、醬油廠。三、培養(yǎng)基的滅菌1. 培養(yǎng)基濕熱滅菌方法（3）固體培養(yǎng)基滅菌培養(yǎng)基成分pH值培養(yǎng)基中的顆粒泡沫三、培養(yǎng)基的滅菌2. 影響培養(yǎng)基滅菌的因素影響培養(yǎng)基滅菌的因素除了所污染雜菌的種