第六章農(nóng)產(chǎn)品安全及監(jiān)測(cè)技術(shù)(共11頁)

1、第六章 農(nóng)產(chǎn)品安全(nqun)及監(jiān)測(cè)技術(shù)一、概述(i sh) 農(nóng)產(chǎn)品是人類生活的必需品，是人類生命活動(dòng)能源的來源。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展。人們對(duì)農(nóng)產(chǎn)品的品質(zhì)更加關(guān)注，因此，農(nóng)產(chǎn)品被測(cè)成分的范圍也逐漸擴(kuò)大。農(nóng)產(chǎn)品分析的目的包含兩方面。一方面是確切了解(lioji)營養(yǎng)成分，如維生素，蛋白質(zhì)，氨基酸和糖類；另一方面是對(duì)農(nóng)產(chǎn)品中有害成分進(jìn)行監(jiān)測(cè)，如黃曲霉毒素，農(nóng)藥殘余，多環(huán)芳烴及各類添加劑等。二. 食品樣品的前處理(一)樣品的制備 為了得到有代表性的均勻樣品，必須根據(jù)水分含量、物理性質(zhì)和不破壞待測(cè)組分等要求采集試樣。采集的試樣還須經(jīng)過粉碎、過篩、磨均、溶于溶液等步驟，進(jìn)行樣品制備.水分多的新鮮食品用研磨

2、方法混勻水分少的食品用粉碎方法混勻液體食品將其溶于水或用適當(dāng)溶劑使其成為溶液，以溶液作為試樣(二)樣品的前處理 常用的樣品前處理方法有溶劑萃取法，沉淀法、水蒸氣蒸餾法等. 1. 振蕩浸取法 將切碎的樣品加入適當(dāng)?shù)娜軇?，在振蕩器中振蕩提取或靜止放置一段時(shí)間，過濾出溶劑后，再重復(fù)提取一次或數(shù)次，合并提取液。這種方法，對(duì)于蔬菜、水果、小麥、谷物樣品以及其他生物材料樣品都可應(yīng)用。 2. 乙醚萃取法 用乙醚萃?。ㄒ部捎寐确?、石油醚、苯等）使脂溶性化合物與蛋白質(zhì)、碳水化合物及其他水溶性化合物分離。(1)脂溶性酸性化合物 用堿性水溶液萃取，移入水層。(2)脂溶性堿性化合物 用鹽酸萃取，移入水層。(3)脂溶性

3、中性化合物 若中性化合物不與堿發(fā)生作用，則可用堿使脂肪皂化，用乙醚萃取，使皂化產(chǎn)物與不皂化產(chǎn)物分離（例如維生素A和D）。用上述方法從脂肪中分離出來的各種脂溶性化合物和混合物，可根據(jù)需要用柱色譜等進(jìn)一步分離純化。3. 用乙醇將微量組分與主要組分分離小分子有機(jī)化合物、水溶性維生素、糖類、有機(jī)酸類、氨基酸、生物堿等不溶于石油醚，但溶于乙醇。用不同濃度的乙醇萃取?？蓪⑺鼈兣c高分子多糖類及蛋白質(zhì)分離。 常用方法 (1)在水浸液中加入蛋白質(zhì)沉淀劑，使每個(gè)蛋白質(zhì)沉淀除去 (2)再在上層澄清(chngqng)液中加入等體積乙醇，沉淀多糖類。得到的是酸性、中性、堿性、兩性水溶性化分物的混合物 (3)再用柱色譜法

4、等進(jìn)行分離純化。柱色譜分離純化的關(guān)鍵是要選用合適的填充材料，根據(jù)分析(fnx)對(duì)象，可選擇硅膠、氧化鋁、活性炭、離子交換劑和鍵合型固定相等作分離介質(zhì)。農(nóng)產(chǎn)品分析(fnx)中常用的固相抽提柱農(nóng)藥殘留的測(cè)定農(nóng)藥定義：用于預(yù)防消滅或控制危害農(nóng)業(yè)、林業(yè)的病蟲、草及其它有害生物以及有目的調(diào)節(jié)植物、昆蟲生長的化學(xué)合成或者來源于生物、其它天然物質(zhì)或者幾種物質(zhì)的混合物及其制劑。農(nóng)藥分類按來源分類 按化合物類型分類 按主要防治(fngzh)對(duì)象分類： 1、殺蟲劑（殺螨劑）2、殺菌劑3、除草劑4、植物(zhw)生長調(diào)節(jié)劑 5、其它(qt)（殺鼠劑、殺線蟲劑等）我國常用農(nóng)藥 A、有機(jī)磷類 滴滴畏、甲拌磷、樂果、對(duì)氧

5、磷、對(duì)硫磷、喹硫磷、伏殺硫磷、敵百蟲、氧化樂果、磷胺、 甲基嘧啶磷、馬拉硫磷、辛硫磷、亞胺硫磷、甲胺磷、地亞農(nóng)、甲基毒死蜱、毒死蜱、倍硫磷、殺撲磷、乙酰甲胺磷、巴胺磷、甲基對(duì)硫磷、殺螟硫磷、異柳磷、乙硫磷等 B、有機(jī)氯類 -666、-666、-666、-666、op DDE、pp-DDE、op DDD、pp-DDD、pp-DDT、op-DDT、異菌脲、五氯硝基苯、林丹、乙烯菌核利、三氯殺螨醇、功夫、氯硝胺、百菌清、粉銹寧、甲氰菊酯、氯菊酯、氰戊菊酯、溴氰菊酯等。 C、氨基甲酸酯類 涕滅威砜、涕滅威亞砜、滅多威、3-羥基呋喃丹、涕滅威、呋喃丹、甲萘威、葉蟬散、仲丁威、速滅威等4、我國出口食品中農(nóng)

6、藥超標(biāo)問題 1）、農(nóng)民濫用、亂用農(nóng)藥現(xiàn)象普遍存在，在蔬菜種植中經(jīng)常使用劇毒農(nóng)藥，有些地方將當(dāng)日噴施甲胺磷的蔬菜上市，造成食品蔬菜中毒事件。2）、90年代初，由于菜農(nóng)違規(guī)使用甲胺磷，在供港蔬菜中發(fā)生甲胺磷殘留量嚴(yán)重超標(biāo)事件，引發(fā)200多人食用后中毒事故，北京、上海、天津等地都相繼發(fā)生此類事件。3）、在1999年8月至2000年1月的6個(gè)月內(nèi)，美國食品和藥物管理局（FDA）以有害物質(zhì)超標(biāo)為由，扣留了634批從中國進(jìn)口的食品。4）、我國是世界上肉制品生產(chǎn)大國，但由于綠色品質(zhì)問題，歐盟自1996年以沒有建立完善的殘留監(jiān)控體系為由全面停止進(jìn)口我國禽肉；5）、在大米中分析(fnx)出馬拉硫磷和異丙威等農(nóng)藥

7、。6）、在花生(hu shn)中分析出丁酰肼等農(nóng)藥。二.農(nóng)藥殘留(cnli)分析技術(shù) 1、基本概念： 農(nóng)藥殘留（Pesticide Residue）:農(nóng)藥使用后殘存在生物體、農(nóng)副產(chǎn)品和環(huán)境中的微量農(nóng)藥原體、有毒代謝物、降解物和雜質(zhì)的總稱。以mg/kg, ug/kg, ng/kg表示。農(nóng)藥殘留分析意義：esticide Residue Analysis)對(duì)待測(cè)樣品中微量農(nóng)藥殘留進(jìn)行定性、定量分析 1）為新農(nóng)藥提供其在農(nóng)作物上的殘留動(dòng)態(tài)和最終殘留 2）制定農(nóng)藥最大殘留限量和合理使用準(zhǔn)則 3）評(píng)價(jià)在農(nóng)藥對(duì)農(nóng)畜產(chǎn)品和環(huán)境的安全性 4）為制定防治污染措施提供依據(jù)農(nóng)藥殘留分析的特點(diǎn)1）目的物種類多，結(jié)構(gòu)差

8、異大2）目的物含量低，樣品中目的物僅以u(píng)g, ng甚至pg、fg存在3）樣品種類多，干擾物成分各異4）方法要求靈敏、準(zhǔn)確、快速、簡便、成本低5）對(duì)樣品的前處理和儀器分析提出更高要求3.農(nóng)殘分析基本步驟 3.1 樣品的采集采樣-在大量產(chǎn)品（分析對(duì)象中）抽取有 一定代表性樣品，供分析化驗(yàn)用，這項(xiàng)工作叫采樣。 正確采樣的意義：盡管一系列檢驗(yàn)工作非常精密、準(zhǔn)確，但如果采取的樣品不足以代表全部物料的組成成分，則其檢驗(yàn)結(jié)果也將毫無價(jià)值，甚至得出錯(cuò)誤結(jié)論，造成重大經(jīng)濟(jì)損失以至誤傷人命，釀成大禍。 正確采樣的原則（1）采集的樣品要均勻、有代表性，能反映全部被檢食品的組成、質(zhì)量和衛(wèi)生狀況。（2）采樣方法要與分析

9、目的一致。（3）采樣過程要設(shè)法保持原有的理化(lhu)指標(biāo)，防止成分逸散（如水分、氣味、揮發(fā)性酸等）。（4）防止(fngzh)帶入雜質(zhì)或污染。（5）采樣方法要盡量簡單，處理裝置尺寸(ch cun)適當(dāng)。3.1 蔬菜樣品采集 塊根類和塊莖類蔬菜 采集塊根或塊莖，用毛刷和干布去除泥土及其他黏附物。樣本采集量至少為6個(gè)12個(gè)個(gè)體，且不少于3kg。代表種類有：馬鈴薯、蘿卜、胡蘿卜、蕪菁、甘薯、山藥、甜菜、塊根芹。 鱗莖類蔬菜 韭菜和大蔥：去除泥土、根和其他黏附物；鱗莖、干洋蔥頭和大蒜：去除根部和老皮。樣本采集量至少為12個(gè)24個(gè)個(gè)體，且不少于3kg。代表種類有：大蒜、洋蔥、韭菜、蔥。 葉類蔬菜 去掉明

10、顯腐爛和萎蔫部分的莖葉。菜花和花椰菜分析花序和莖。采集樣本量至少為4個(gè)12個(gè)個(gè)體，不少于3kg。代表種類：菠菜、甘藍(lán)、大白菜、萵苣、甜菜葉、花椰菜、蘿卜葉、菊苣。 莖菜類蔬菜 去掉明顯腐爛和萎蔫部分的可食莖、嫩芽。大黃：只取莖部。采集樣本量至少為12個(gè)個(gè)體，且不少于2kg。代表種類有：芹菜、朝鮮薊、菊苣、大黃等。豆菜類蔬菜 取豆莢或籽粒。采集樣本量鮮豆（莢）不少于2kg，干樣不少于1kg。代表種類有：蠶豆、菜豆、大豆、綠豆、豌豆、云豆、利馬豆。果菜類（果皮可食） 除去果梗后的整個(gè)果實(shí)。采集樣本量為6個(gè)12個(gè)個(gè)體，不少于3kg。代表種類有：黃瓜、胡椒、茄子、西葫蘆、西紅柿、黃秋葵。果菜類（果皮不

11、可食） 除去果梗后的整個(gè)果實(shí)，測(cè)定時(shí)果皮與果肉分別測(cè)定。采集樣本量為4個(gè)6個(gè)個(gè)體。代表種類：哈密瓜、南瓜、甜瓜、西瓜、冬瓜。食用菌類蔬菜 取整個(gè)子實(shí)體。至少12個(gè)個(gè)體，不少于1kg。代表種類有：香菇、草菇、口蘑、雙孢蘑菇、大肥菇、木耳等。3.2 樣品的制備樣品的制備：指對(duì)樣品的粉碎、混勻、縮分等過程。液體、漿體或懸浮液體搖勻，充分?jǐn)嚢??；ゲ幌嗳莸囊后w（如油與水的混合物）先分離，再分別取樣。固體樣品切細(xì)、粉碎(fn su)、搗碎、研磨等。 罐頭(gun tou)除核、去骨、去調(diào)味品、搗碎。3.3 提取-濃縮-純化(chn hu)-儀器檢測(cè) 提取：振蕩法、索氏提取法、勻漿搗碎法、超聲波提取法、微波

12、輔助提取法、超臨界液體萃取、加速溶劑萃取法 濃縮：旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、氮?dú)鉂饪s 純化：液液分配法、層析柱法、固相萃取法、薄層色譜法、磺化法； 三、典型農(nóng)殘留檢測(cè)方法 GC/MS農(nóng)用化學(xué)品同時(shí)檢測(cè)方法（農(nóng)產(chǎn)品）日本厚生勞動(dòng)省食品中農(nóng)用化學(xué)品殘留檢測(cè)方法農(nóng)藥種類和個(gè)數(shù)：有機(jī)磷、有機(jī)氯、氨基甲酸酯和擬除蟲菊酯類農(nóng)藥等共223種使用儀器：GC/MSLC/MS農(nóng)用(nn yn)化學(xué)品同時(shí)檢測(cè)方法（農(nóng)產(chǎn)品）：日本厚生(hu shn)勞動(dòng)省食品中農(nóng)用化學(xué)品殘留檢測(cè)方法 農(nóng)藥種類：殺蟲劑，殺菌劑和除草劑等共38種。使用儀器：LC/MS或LC/MS/MSLC/MS農(nóng)用(nn yn)化學(xué)品同時(shí)檢測(cè)方法（農(nóng)產(chǎn)品）：日本厚生

13、(hu shn)勞動(dòng)省食品中農(nóng)用化學(xué)品殘留檢測(cè)方法 農(nóng)藥種類：殺蟲劑，殺菌劑和除草劑等共24種。使用(shyng)儀器： LC/MS或LC/MS/MS NY/T 761-2008：蔬菜(shci)和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸(ji sun)酯類農(nóng)藥多殘留檢測(cè)方法 農(nóng)藥(nngyo)種類和個(gè)數(shù)：有機(jī)磷、有機(jī)氯、擬除蟲菊酯和氨基甲酸酯類農(nóng)藥等共104種使用儀器：GC、HPLC方法特點(diǎn)：1、乙腈作為提取溶劑的多殘留檢測(cè)方法 ；2、采用固相萃取代替?zhèn)鹘y(tǒng)的液一液萃取，用氮吹儀代替旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，大大簡化了樣品前處理步驟；3、采用雙柱（DB-1，DB-17）、雙檢測(cè)器（有機(jī)磷-火焰光度；有機(jī)氯

14、、菊酯-電子捕獲；氨基甲酸酯-C8、或C18柱，柱后衍生化，熒光）同時(shí)定性定量代替單柱，單檢測(cè)器分析；添加回收率及最低檢出限實(shí)驗(yàn)：1、104種農(nóng)藥在八種代表性的蔬菜、水果（番茄、菜豆、黃瓜、油菜、甘藍(lán)、韭菜、蘋果、柑桔）；2、3個(gè)濃度水平，每個(gè)濃度水平3個(gè)平行樣；3、遼寧、北京、云南、河北、廣西、山東、湖北7個(gè)農(nóng)業(yè)環(huán)境監(jiān)測(cè)站對(duì)該方法進(jìn)行了系統(tǒng)地方法驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) ；添加(tin ji)回收率及最低檢出限實(shí)驗(yàn)：1、105種農(nóng)藥在八種代表性的蔬菜、水果(shugu)（番茄、菜豆、黃瓜、油菜、甘藍(lán)、韭菜、蘋果、柑桔）；2、3個(gè)濃度(nngd)水平，每個(gè)濃度水平3個(gè)平行樣；3、遼寧、北京、云南、河北、廣西、

15、山東、湖北7個(gè)農(nóng)業(yè)環(huán)境監(jiān)測(cè)站對(duì)該方法進(jìn)行了系統(tǒng)地方法驗(yàn)證實(shí)驗(yàn) ；技術(shù)指標(biāo)：1、方法的添加回收率在70 %120 %之間，變異系數(shù)小于20 % ；2、方法檢出限在0.0001 mg/kg 0.3 mg/kg 之間 ；3、取得了近200000個(gè)數(shù)據(jù)。問題匯總：前處理、標(biāo)樣、儀器、數(shù)據(jù)處理導(dǎo)致的結(jié)果偏差。前處理凈化效果不夠理想：目標(biāo)峰被雜質(zhì)峰掩蓋標(biāo)樣的問題：甲胺磷和氧樂果由于標(biāo)樣響應(yīng)不好導(dǎo)致樣品檢測(cè)結(jié)果諞大儀器狀態(tài)不好基線漂移儀器狀態(tài)基線噪音過大：基線噪音偏大影響結(jié)果的準(zhǔn)確性積分偏差四、檢測(cè)過程應(yīng)注意的幾個(gè)問題 （一）農(nóng)藥理化性質(zhì)的影響：水溶性、揮發(fā)性、穩(wěn)定性、本底效應(yīng)、分離難度水溶性：甲胺磷 水中溶解度2kg/l、久效磷 水中溶解度1kg/kg、敵敵畏 水中溶解度10g/l、對(duì)硫磷 水中溶解度24mg/l、毒死蜱 水中溶解度2mg/l揮發(fā)性：飽和蒸氣壓越大，揮發(fā)性越大 毒死(d s)蜱 25蒸氣(zhn q)壓2.5mPa、對(duì)硫磷 20蒸氣(zhn q)壓5.