第04章 中藥制劑分析概論(14)

1、1第四章第四章2本章內(nèi)容本章內(nèi)容1、概述、概述2、中藥及其制劑的鑒別、中藥及其制劑的鑒別3、中藥及其制劑的檢查、中藥及其制劑的檢查4、中藥及其制劑的含量測(cè)定、中藥及其制劑的含量測(cè)定5、中藥及其制劑中各類化學(xué)成分的分析、中藥及其制劑中各類化學(xué)成分的分析6、各類中藥及其制劑分析、各類中藥及其制劑分析3一、定義一、定義 1 1、中藥：以中醫(yī)藥學(xué)理論體系的、中藥：以中醫(yī)藥學(xué)理論體系的術(shù)語(yǔ)表述其性能、功效和使用規(guī)律，并術(shù)語(yǔ)表述其性能、功效和使用規(guī)律，并且只有按中醫(yī)藥學(xué)理論指導(dǎo)其臨床應(yīng)用且只有按中醫(yī)藥學(xué)理論指導(dǎo)其臨床應(yīng)用的傳統(tǒng)藥物。的傳統(tǒng)藥物。一一 概述概述4 2 2、中藥制劑：、中藥制劑： 以中藥為原料

2、，按中醫(yī)藥學(xué)理論基以中藥為原料，按中醫(yī)藥學(xué)理論基礎(chǔ)配伍、組方，以一定制備工藝和方法礎(chǔ)配伍、組方，以一定制備工藝和方法制成一定劑型的藥物制劑。制成一定劑型的藥物制劑。 注意：中藥制劑必須是以中醫(yī)藥基注意：中藥制劑必須是以中醫(yī)藥基礎(chǔ)理論和用藥原則為指導(dǎo)制成的單方或礎(chǔ)理論和用藥原則為指導(dǎo)制成的單方或復(fù)方制劑。復(fù)方制劑。53 3、中藥及其制劑分析：、中藥及其制劑分析： 以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)，運(yùn)用現(xiàn)代分以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)，運(yùn)用現(xiàn)代分析理論和方法研究中藥及其制劑質(zhì)量的析理論和方法研究中藥及其制劑質(zhì)量的一門應(yīng)用學(xué)科。一門應(yīng)用學(xué)科。6二、中藥及其制劑分析的意義和任務(wù)二、中藥及其制劑分析的意義和任務(wù) 1、意義：中

3、藥發(fā)展的、意義：中藥發(fā)展的“瓶頸瓶頸”問問題之一，中國(guó)藥學(xué)事業(yè)發(fā)展的希望和突題之一，中國(guó)藥學(xué)事業(yè)發(fā)展的希望和突破口。破口。72 2、任務(wù)：、任務(wù)： 運(yùn)用現(xiàn)代分析手段和方法（包括物理運(yùn)用現(xiàn)代分析手段和方法（包括物理學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、和微生物學(xué)等），對(duì)學(xué)、化學(xué)、生物學(xué)、和微生物學(xué)等），對(duì)中藥制劑的各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行質(zhì)量分析。中藥制劑的各個(gè)環(huán)節(jié)進(jìn)行質(zhì)量分析。 保證中藥及其制劑的臨床使用中的安保證中藥及其制劑的臨床使用中的安全性和有效性。全性和有效性。8三、發(fā)展歷史三、發(fā)展歷史 戰(zhàn)國(guó)時(shí)期，中醫(yī)學(xué)第一部經(jīng)典著作戰(zhàn)國(guó)時(shí)期，中醫(yī)學(xué)第一部經(jīng)典著作“黃黃帝內(nèi)經(jīng)帝內(nèi)經(jīng)”，為中醫(yī)藥學(xué)奠定了理論基礎(chǔ)；，為中醫(yī)藥學(xué)奠定了理論

4、基礎(chǔ)； 漢代張仲景所著漢代張仲景所著“傷寒論傷寒論”“”“金匱要略金匱要略”，豐富和發(fā)展了中醫(yī)辨證論治的治療體系，豐富和發(fā)展了中醫(yī)辨證論治的治療體系，收載了許多有名的方劑，收載了許多有名的方劑， 晉代葛洪所著晉代葛洪所著“肘后備急方肘后備急方”最早提出最早提出成藥劑概念。成藥劑概念。 明代李時(shí)珍，著成明代李時(shí)珍，著成“本草綱目本草綱目”，全書，全書收載藥物收載藥物18921892種，方劑種，方劑1300013000余首，劑型近余首，劑型近4040種種。91.中藥市場(chǎng)混亂中藥市場(chǎng)混亂同物異名同物異名 同名異物同名異物（30多種，鱗毛蕨科、蹄蓋蕨科、多種，鱗毛蕨科、蹄蓋蕨科、 紫萁科、烏毛蕨科）紫

5、萁科、烏毛蕨科）貫眾貫眾四、四、中藥及其制劑分析的特點(diǎn)中藥及其制劑分析的特點(diǎn)102. 中藥材質(zhì)量的不穩(wěn)定性中藥材質(zhì)量的不穩(wěn)定性生長(zhǎng)環(huán)境、采收季節(jié)及部位差異生長(zhǎng)環(huán)境、采收季節(jié)及部位差異麻黃麻黃 東北東北西北（西北（-）麻黃堿含量）麻黃堿含量 （+）麻黃堿含量）麻黃堿含量GAP 中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范11不同部位人參皂苷的含量不同部位人參皂苷的含量 重量比重量比(%) 總皂苷含量總皂苷含量(%) 周皮周皮 6.9 2.60韌皮韌皮 46.6 3.04木質(zhì)部木質(zhì)部 46.5 0.31123.五倍子五倍子 鞣質(zhì)（鞣質(zhì)（70%）槐米槐米 蘆?。ㄌJ?。?0%）長(zhǎng)春花長(zhǎng)春花 長(zhǎng)春新堿（

6、百萬(wàn)分之一）長(zhǎng)春新堿（百萬(wàn)分之一）美登木美登木 美登木堿（千萬(wàn)分之一）美登木堿（千萬(wàn)分之一）各種有效成分在中藥中含量各種有效成分在中藥中含量相差懸殊相差懸殊134. 中藥藥效的發(fā)揮是多種成分中藥藥效的發(fā)揮是多種成分協(xié)同作用的結(jié)果，因此應(yīng)從整體協(xié)同作用的結(jié)果，因此應(yīng)從整體上來控制中藥的質(zhì)量。上來控制中藥的質(zhì)量。成分復(fù)雜，而且大多數(shù)中藥的成分復(fù)雜，而且大多數(shù)中藥的有效成分尚不十分清楚。有效成分尚不十分清楚。14鞣質(zhì)鞣質(zhì) 地榆（止血）地榆（止血） 其他（無(wú)藥效）其他（無(wú)藥效）有效有效 無(wú)效無(wú)效5. 同一成分在不同藥材中的藥理同一成分在不同藥材中的藥理作用不同作用不同156. 制劑工藝不同，有效成分的

7、量制劑工藝不同，有效成分的量也不同也不同16例例 三黃瀉心湯干浸膏三黃瀉心湯干浸膏有效成分與濃縮干燥方法的關(guān)系有效成分與濃縮干燥方法的關(guān)系(%) 常壓常壓 減壓減壓 逆浸透逆浸透 成分成分 濃縮濃縮 濃縮濃縮 噴霧噴霧大黃酸葡萄糖苷大黃酸葡萄糖苷 41.1 51.6 96.8小檗堿小檗堿 34.5 37.5 94.5黃連堿黃連堿 6.3 12.0 93.7黃岑苷黃岑苷 77.4 77.6 98.517丸、散、片、錠、合、酒、酊、丸、散、片、錠、合、酒、酊、膏、露、茶、栓、顆粒、糖漿等膏、露、茶、栓、顆粒、糖漿等7. 劑型繁多，輔料干擾大劑型繁多，輔料干擾大18 針對(duì)不同的劑型，采用相應(yīng)的針對(duì)不

8、同的劑型，采用相應(yīng)的方法進(jìn)行分離純化后測(cè)定方法進(jìn)行分離純化后測(cè)定蠟丸蠟丸 蜂蠟蜂蠟蜜丸蜜丸 蜂蜜蜂蜜糊劑糊劑 糯米粉、黃米粉糯米粉、黃米粉曲劑曲劑 發(fā)酵發(fā)酵膠劑膠劑 豆油、黃酒、冰糖豆油、黃酒、冰糖191 1、新的科學(xué)技術(shù)得到廣泛的應(yīng)用：、新的科學(xué)技術(shù)得到廣泛的應(yīng)用：DNADNA遺傳標(biāo)記技術(shù)遺傳標(biāo)記技術(shù) 、 人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò)人工神經(jīng)網(wǎng)絡(luò) 、 模模糊數(shù)學(xué)法等等。糊數(shù)學(xué)法等等。2 2、分離能力強(qiáng)、靈敏度高、穩(wěn)定性好的、分離能力強(qiáng)、靈敏度高、穩(wěn)定性好的現(xiàn)代化儀器的應(yīng)用：高效液相色譜、氣現(xiàn)代化儀器的應(yīng)用：高效液相色譜、氣相色譜、高效毛細(xì)管電泳等。相色譜、高效毛細(xì)管電泳等。3 3、新的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法的出現(xiàn)：中

9、藥指紋、新的質(zhì)量評(píng)價(jià)方法的出現(xiàn)：中藥指紋圖譜等。圖譜等。五、中藥及其制劑分析的發(fā)展趨勢(shì)五、中藥及其制劑分析的發(fā)展趨勢(shì)20六六 中藥制劑分析的一般程序中藥制劑分析的一般程序取樣取樣鑒別鑒別含量測(cè)定含量測(cè)定檢查檢查提取提取純化純化報(bào)告報(bào)告21一、取樣：一、取樣： 分析樣品首先是取樣，取樣必須具分析樣品首先是取樣，取樣必須具有科學(xué)性、真實(shí)性和代表性。有科學(xué)性、真實(shí)性和代表性。 基本原則：均勻合理，所取樣品基本原則：均勻合理，所取樣品具有代表性。具有代表性。22供試品溶液的制備供試品溶液的制備二、二、 中藥及其制劑成分復(fù)雜，大多需經(jīng)提取中藥及其制劑成分復(fù)雜，大多需經(jīng)提取分離后制成較純凈的供試品溶液，才

10、可進(jìn)行分離后制成較純凈的供試品溶液，才可進(jìn)行分析測(cè)定。分析測(cè)定。 目的：目的：1、排除雜質(zhì)的干擾、排除雜質(zhì)的干擾 2、保護(hù)儀器、保護(hù)儀器 原則：最大限度的保留被測(cè)成分，除去原則：最大限度的保留被測(cè)成分，除去干擾物質(zhì)，將被測(cè)成分濃縮至分析方法最小干擾物質(zhì)，將被測(cè)成分濃縮至分析方法最小檢測(cè)所需濃度。檢測(cè)所需濃度。 （一）提?。ㄒ唬┨崛?（二）純化（二）純化23（一）（一）提取方法提取方法1、萃取法萃取法 利用溶質(zhì)在兩種互不相利用溶質(zhì)在兩種互不相溶的溶劑中溶解度的不同，使溶的溶劑中溶解度的不同，使物質(zhì)從一種溶劑轉(zhuǎn)移到另一種物質(zhì)從一種溶劑轉(zhuǎn)移到另一種溶劑中，將測(cè)定組分提取出來溶劑中，將測(cè)定組分提取出來

11、的方法的方法24正丁醇正丁醇 用于皂苷類用于皂苷類醋酸乙酯醋酸乙酯 用于黃酮類用于黃酮類氯仿氯仿 用于生物堿類用于生物堿類乙醚、石油醚乙醚、石油醚 用于揮發(fā)油用于揮發(fā)油（1）萃取溶劑的選擇）萃取溶劑的選擇25（2）水相）水相pH的選擇的選擇酸性成分酸性成分 比其比其pKa低低12個(gè)個(gè)pH單位單位堿性成分堿性成分 比其比其pKa高高12個(gè)個(gè)pH單位單位26（3）儀器和提取次數(shù)）儀器和提取次數(shù)（4）酒劑和酊劑）酒劑和酊劑先揮去乙醇先揮去乙醇（5）防止和消除乳化）防止和消除乳化分液漏斗分液漏斗鑒別鑒別1次次含量測(cè)定含量測(cè)定 3 4次次272、冷浸法冷浸法 樣品置溶劑里，室溫下浸泡一樣品置溶劑里，室溫

12、下浸泡一段時(shí)間的提取方法段時(shí)間的提取方法適宜易溶出的組分適宜易溶出的組分適宜遇熱不穩(wěn)定的藥物適宜遇熱不穩(wěn)定的藥物 費(fèi)時(shí)費(fèi)時(shí)（8 24小時(shí)）小時(shí)）特點(diǎn)特點(diǎn)適用范圍適用范圍適宜植物性粉末適宜植物性粉末不宜動(dòng)物性粉末不宜動(dòng)物性粉末28親脂性親脂性 親水性親水性石油醚石油醚 苯苯 氯仿氯仿 乙醚乙醚 乙酸乙酯乙酸乙酯 丙酮丙酮 乙醇乙醇 甲醇甲醇 水水293、 回流提取法回流提取法 樣品置有機(jī)溶劑中加熱回流的樣品置有機(jī)溶劑中加熱回流的提取方法提取方法加快溶出速度，省時(shí)加快溶出速度，省時(shí)適宜受熱穩(wěn)定的藥物適宜受熱穩(wěn)定的藥物適宜較難溶出的組分適宜較難溶出的組分特點(diǎn)特點(diǎn)儀器儀器普通回流裝置普通回流裝置通過更

13、換溶劑，使提取更完全通過更換溶劑，使提取更完全30314、 連續(xù)回流提取法連續(xù)回流提取法 樣品置有機(jī)溶劑中加熱，蒸發(fā)樣品置有機(jī)溶劑中加熱，蒸發(fā)的溶劑經(jīng)冷凝流回樣品管的提取方的溶劑經(jīng)冷凝流回樣品管的提取方法法節(jié)省溶劑，提高提取效率節(jié)省溶劑，提高提取效率適宜受熱穩(wěn)定的藥物適宜受熱穩(wěn)定的藥物費(fèi)時(shí)費(fèi)時(shí)特點(diǎn)特點(diǎn)儀器儀器索氏提取器索氏提取器32335、 水蒸氣蒸餾法水蒸氣蒸餾法 適用于具揮發(fā)性的可隨水蒸氣適用于具揮發(fā)性的可隨水蒸氣蒸出的組分的測(cè)定蒸出的組分的測(cè)定麻黃堿、檳榔堿、丹皮酚、揮發(fā)油麻黃堿、檳榔堿、丹皮酚、揮發(fā)油346、 超聲提取法超聲提取法 超聲波振蕩器（超聲波清洗器）超聲波振蕩器（超聲波清洗器

14、） 簡(jiǎn)便簡(jiǎn)便 省時(shí)省時(shí) 提取率高提取率高 利用超聲波的助溶作用進(jìn)行提取利用超聲波的助溶作用進(jìn)行提取原理原理 超聲波在液體中以疏密相間的形式超聲波在液體中以疏密相間的形式向物體輻射，出現(xiàn)向物體輻射，出現(xiàn)“空化空化”現(xiàn)象（氣泡現(xiàn)象（氣泡的形成、產(chǎn)生及破裂現(xiàn)象），形成超過的形成、產(chǎn)生及破裂現(xiàn)象），形成超過1000個(gè)大氣壓的沖擊力個(gè)大氣壓的沖擊力35 （二）（二）純化方法純化方法1、萃取法萃取法 利用藥物與雜質(zhì)溶解性能利用藥物與雜質(zhì)溶解性能的不同進(jìn)行分離的不同進(jìn)行分離例例棄去棄去水層水層含生物堿樣品含生物堿樣品 H生物堿鹽生物堿鹽 游游離離生生物物堿堿氯氯仿仿氨水氨水H2O362 2、色譜法：、色譜法

15、： 常用的樣品純凈方法，包括：柱色常用的樣品純凈方法，包括：柱色譜、薄層色譜法、紙色譜法。譜、薄層色譜法、紙色譜法。37柱色譜法柱色譜法（1）保留測(cè)定組分在柱上，洗去雜）保留測(cè)定組分在柱上，洗去雜 質(zhì)，再用適當(dāng)溶劑洗下組分質(zhì)，再用適當(dāng)溶劑洗下組分（2）保留雜質(zhì)于柱上）保留雜質(zhì)于柱上常用固定相常用固定相硅膠硅膠氧化鋁氧化鋁大孔吸附樹脂大孔吸附樹脂38例如：人參皂苷類成分用大孔樹脂凈化，例如：人參皂苷類成分用大孔樹脂凈化，先用水洗去糖類等水溶性雜質(zhì)，再用先用水洗去糖類等水溶性雜質(zhì)，再用70%的乙醇洗脫皂苷類成分的乙醇洗脫皂苷類成分人參皂苷提取物人參皂苷提取物大孔樹脂大孔樹脂393 3、沉淀法：基于

16、某些試劑與被測(cè)成分、沉淀法：基于某些試劑與被測(cè)成分或成分生成沉淀，保留溶液或分離沉淀或成分生成沉淀，保留溶液或分離沉淀得到凈化的方法。得到凈化的方法。沉淀劑沉淀劑提取溶液提取溶液40三、鑒別：三、鑒別： 中藥及其制劑的定性鑒別是利用各中藥及其制劑的定性鑒別是利用各單味藥材的形態(tài)、組織學(xué)特征及所含化單味藥材的形態(tài)、組織學(xué)特征及所含化學(xué)成分的結(jié)構(gòu)特性、化學(xué)反應(yīng)、光譜特學(xué)成分的結(jié)構(gòu)特性、化學(xué)反應(yīng)、光譜特性、色譜特性及某些物理化學(xué)常數(shù)來鑒性、色譜特性及某些物理化學(xué)常數(shù)來鑒別中藥及其制劑的真?zhèn)渭按嬖谂c否的分別中藥及其制劑的真?zhèn)渭按嬖谂c否的分析方法。析方法。41四、檢查：四、檢查： （一）制劑通則檢查（不

17、同劑型）（一）制劑通則檢查（不同劑型） （二）一般雜質(zhì)檢查（水分、灰分等）（二）一般雜質(zhì)檢查（水分、灰分等） （三）特殊雜質(zhì)檢查（三）特殊雜質(zhì)檢查 （四）微生物限度檢查（四）微生物限度檢查42五、含量測(cè)定：五、含量測(cè)定： 是控制中藥及其制劑內(nèi)在質(zhì)量的重是控制中藥及其制劑內(nèi)在質(zhì)量的重要方法，測(cè)定對(duì)象應(yīng)該是起主要作用的要方法，測(cè)定對(duì)象應(yīng)該是起主要作用的有效成分或毒性成分，以保證臨床用藥有效成分或毒性成分，以保證臨床用藥的有效性和安全性。的有效性和安全性。43六、原始記錄和檢驗(yàn)報(bào)告六、原始記錄和檢驗(yàn)報(bào)告（一）原始記錄：真實(shí)、完整、清晰、具體（一）原始記錄：真實(shí)、完整、清晰、具體（二）檢驗(yàn)報(bào)告：固定格

18、式（二）檢驗(yàn)報(bào)告：固定格式44二、中藥及其制劑的鑒別二、中藥及其制劑的鑒別45常用的方法：常用的方法： 1、來源（原植物、原動(dòng)物和礦物）、來源（原植物、原動(dòng)物和礦物）鑒定鑒定 2、性狀鑒定、性狀鑒定 3、顯微鑒定、顯微鑒定 4、理化鑒定、理化鑒定46（一）來源鑒定（一）來源鑒定 來源鑒定就是應(yīng)用植（動(dòng)）物的分來源鑒定就是應(yīng)用植（動(dòng)）物的分類學(xué)知識(shí)，對(duì)中藥的來源進(jìn)行鑒定，確類學(xué)知識(shí)，對(duì)中藥的來源進(jìn)行鑒定，確定其正確的學(xué)名；應(yīng)用礦物學(xué)的基本知定其正確的學(xué)名；應(yīng)用礦物學(xué)的基本知識(shí)，確定礦物中藥的來源，以保證在應(yīng)識(shí)，確定礦物中藥的來源，以保證在應(yīng)用中品種準(zhǔn)確無(wú)誤。用中品種準(zhǔn)確無(wú)誤。47特點(diǎn)：特點(diǎn)：1、

19、中藥鑒定工作的基礎(chǔ)，也是中藥生產(chǎn)、中藥鑒定工作的基礎(chǔ)，也是中藥生產(chǎn)和利用的依據(jù)。和利用的依據(jù)。2、主要適用于帶花、果實(shí)、枝葉（或皮、主要適用于帶花、果實(shí)、枝葉（或皮毛、骨骼）、昆蟲和多數(shù)全草類等毛、骨骼）、昆蟲和多數(shù)全草類等中藥中藥材材的鑒定。的鑒定。3、本方法需要有牢固的植物形態(tài)學(xué)和分、本方法需要有牢固的植物形態(tài)學(xué)和分類學(xué)知識(shí)。類學(xué)知識(shí)。（經(jīng)驗(yàn)性）（經(jīng)驗(yàn)性）48（二）性狀鑒別（二）性狀鑒別 1、內(nèi)容：、內(nèi)容： 顏色、形態(tài)、形狀、氣、味等（制顏色、形態(tài)、形狀、氣、味等（制劑）。劑）。 2、各種劑型的性狀描述、各種劑型的性狀描述 丸劑、散劑、滴丸劑等丸劑、散劑、滴丸劑等 例如：牛黃解毒片例如：牛

20、黃解毒片“本品為素片或本品為素片或包衣片，素片或除去包衣的片心顯棕黃包衣片，素片或除去包衣的片心顯棕黃色；有冰片香氣，味微苦、辛。色；有冰片香氣，味微苦、辛。4950中國(guó)藥典（中國(guó)藥典（20102010年版）年版） 生曬山參：主根與根莖等長(zhǎng)或較短，生曬山參：主根與根莖等長(zhǎng)或較短，呈人字形、菱形、或圓柱形，長(zhǎng)呈人字形、菱形、或圓柱形，長(zhǎng)2 210cm.10cm.表面灰黃色表面灰黃色, ,具縱紋具縱紋, ,上端有緊密而深陷上端有緊密而深陷的環(huán)狀橫紋的環(huán)狀橫紋, ,支根多為支根多為2 2條條, ,清晰不亂清晰不亂, ,有有明顯的疣狀突起明顯的疣狀突起, ,習(xí)稱習(xí)稱“珍珠疙瘩珍珠疙瘩”. .51（三）

21、（三）顯微鑒別顯微鑒別 中藥的顯微鑒別是利用顯微鏡來觀中藥的顯微鑒別是利用顯微鏡來觀察中藥中的組織碎片、細(xì)胞或內(nèi)含物等察中藥中的組織碎片、細(xì)胞或內(nèi)含物等特征，對(duì)中藥及其制劑進(jìn)行鑒別。特征，對(duì)中藥及其制劑進(jìn)行鑒別。 521、鑒別對(duì)象：（藥材、鑒別對(duì)象：（藥材、含生藥粉制劑含生藥粉制劑）例如：丸劑、片劑、膠囊劑、散劑例如：丸劑、片劑、膠囊劑、散劑2、鑒別原則、鑒別原則（1 1）應(yīng)選有專屬性的特征進(jìn)行鑒別）應(yīng)選有專屬性的特征進(jìn)行鑒別（2 2）根據(jù)制劑工藝選擇相應(yīng)藥物特征進(jìn)行）根據(jù)制劑工藝選擇相應(yīng)藥物特征進(jìn)行 鑒別鑒別 例如：例如：牛黃解毒片牛黃解毒片 大黃特征大黃特征3 3、特點(diǎn)：、特點(diǎn)： 快速，簡(jiǎn)

22、便，覆蓋面大，需要經(jīng)驗(yàn)?？焖?，簡(jiǎn)便，覆蓋面大，需要經(jīng)驗(yàn)。534 4、制片方法：、制片方法：水合氯醛、甘油醋酸、水等水合氯醛、甘油醋酸、水等載玻片載玻片蓋玻片蓋玻片藥物粉末藥物粉末541、水牛角濃縮粉、水牛角濃縮粉2、麝香、麝香3、珍珠、珍珠4、朱砂、朱砂5、雄黃、雄黃6、黃連、黃連7、梔子、梔子8、郁金、郁金9、黃芩、黃芩安宮牛黃丸安宮牛黃丸555657理化鑒別理化鑒別（四）（四） 理化鑒別就是利用藥材及其制劑中理化鑒別就是利用藥材及其制劑中存在的某種成分的化學(xué)性質(zhì)和物理性質(zhì)，存在的某種成分的化學(xué)性質(zhì)和物理性質(zhì)，通過物理的、化學(xué)的、或物理化學(xué)的方通過物理的、化學(xué)的、或物理化學(xué)的方法來鑒定藥物的

23、真?zhèn)魏图兌纫约皟?nèi)在質(zhì)法來鑒定藥物的真?zhèn)魏图兌纫约皟?nèi)在質(zhì)量的方法。量的方法。 它經(jīng)常配合來源鑒定，性狀鑒定或它經(jīng)常配合來源鑒定，性狀鑒定或顯微鑒定綜合解決中藥鑒定問題。顯微鑒定綜合解決中藥鑒定問題。 58采用方法：采用方法： 1、一般化學(xué)反應(yīng)、一般化學(xué)反應(yīng) 2、升華法、升華法 3、光譜法、光譜法 4、色譜法、色譜法（薄層色譜法最為常用）（薄層色譜法最為常用）59（一）（一） 化學(xué)反應(yīng)法化學(xué)反應(yīng)法抗干擾能力差抗干擾能力差顯色、顯色、熒光、熒光 試試劑劑組組分分例例 二妙丸中蒼術(shù)的鑒別二妙丸中蒼術(shù)的鑒別褪色褪色醚層醚層樣品樣品乙醚乙醚 4KMnO蒼術(shù)酮蒼術(shù)酮蒼術(shù)炔蒼術(shù)炔原理：原理：60（二）升華法：

24、（二）升華法：升華法升華法 鑒別中藥及其制劑中某些具有升華鑒別中藥及其制劑中某些具有升華性質(zhì)的化學(xué)成分性質(zhì)的化學(xué)成分 （游離香豆素、蒽醌類（游離香豆素、蒽醌類及其它）。例：大黃游離蒽醌、冰片、及其它）。例：大黃游離蒽醌、冰片、牡丹酚、咖啡堿等牡丹酚、咖啡堿等中國(guó)藥典（中國(guó)藥典（2010年版）：年版）： 牛黃解毒片：取本品牛黃解毒片：取本品1片，研細(xì)，進(jìn)片，研細(xì)，進(jìn)行微量升華，所得白色升華物（冰片），行微量升華，所得白色升華物（冰片），加新制加新制1%香草醛的濃硫酸液香草醛的濃硫酸液1-2滴，液滴，液滴邊緣顯玫瑰紅色滴邊緣顯玫瑰紅色61（三）（三）光譜法光譜法1 1、熒光法、熒光法（紫外光、日光

25、下產(chǎn)生熒光的性質(zhì)）（紫外光、日光下產(chǎn)生熒光的性質(zhì)） 黃連：黃連：金黃色金黃色 大黃：大黃：深棕色深棕色 秦皮：秦皮：天藍(lán)色天藍(lán)色2 2、紫外、紫外- -可見分光光度法可見分光光度法（成分復(fù)雜、專屬（成分復(fù)雜、專屬性差、應(yīng)用較少）性差、應(yīng)用較少）3 3、紅外分光光度法、紅外分光光度法（此方面的應(yīng)用只是處于（此方面的應(yīng)用只是處于研究階段）研究階段）62（四）（四）色譜法色譜法TLCTLC法法應(yīng)用最多應(yīng)用最多 （R Rf f、顏色、熒光）、顏色、熒光）GCGC法法適用于含揮發(fā)性成分適用于含揮發(fā)性成分 的藥物的藥物 HPLCHPLC法法常與含量測(cè)定同時(shí)進(jìn)行常與含量測(cè)定同時(shí)進(jìn)行63薄層色譜法：薄層色譜法

26、： 將適宜的將適宜的吸附劑或載體吸附劑或載體涂布于玻璃涂布于玻璃板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。板、塑料或鋁基片上，成一均勻薄層。 在鑒定時(shí)，可取樣品及對(duì)照品（化在鑒定時(shí)，可取樣品及對(duì)照品（化學(xué)成分單體、粗提物或標(biāo)準(zhǔn)藥材）按同學(xué)成分單體、粗提物或標(biāo)準(zhǔn)藥材）按同樣的方法，在相同條件下進(jìn)行薄層展開樣的方法，在相同條件下進(jìn)行薄層展開和顯色，比較二者所得層析圖譜是否相和顯色，比較二者所得層析圖譜是否相同。同。64（1）、吸附劑）、吸附劑薄層板的選擇薄層板的選擇 硅膠硅膠G G板（可加板（可加0.3% -0.5% CMC-Na0.3% -0.5% CMC-Na） 多用多用 氧化鋁板氧化鋁板 常用于生物

27、堿類藥物常用于生物堿類藥物 聚酰胺板聚酰胺板 常用于黃酮類及酚類藥物常用于黃酮類及酚類藥物纖維素板纖維素板 常用于氨基酸類藥物常用于氨基酸類藥物 65（2）、操作方法：）、操作方法：1、薄層板的制備：、薄層板的制備：1份吸附劑（硅膠份吸附劑（硅膠G）+3份水份水 糊狀物糊狀物 涂布器涂布器 涂布（均勻）涂布（均勻） 晾干，晾干，110C活化活化30分鐘分鐘2、樣品液與對(duì)照品（對(duì)照藥材）液的制備、樣品液與對(duì)照品（對(duì)照藥材）液的制備3、點(diǎn)樣、展開、點(diǎn)樣、展開4、檢測(cè)：斑點(diǎn)顯色方法、檢測(cè)：斑點(diǎn)顯色方法A本身有色本身有色B紫外燈紫外燈觀察熒光觀察熒光C噴顯色劑噴顯色劑66 點(diǎn)樣點(diǎn)樣毛毛 細(xì)管細(xì)管樣品樣

28、品對(duì)照品或?qū)φ账幉膶?duì)照品或?qū)φ账幉?-1.5cm點(diǎn)樣方法：點(diǎn)樣方法：1.5-2cm67展開方法：展開方法：7-9 cm68（3 3）對(duì)照物的選擇：）對(duì)照物的選擇： 對(duì)照品對(duì)照法：用已知中藥及其制劑的對(duì)照品對(duì)照法：用已知中藥及其制劑的某一有效成分或特征性成分對(duì)照品制成對(duì)某一有效成分或特征性成分對(duì)照品制成對(duì)照液，與樣品在同一條件下層析，比較在照液，與樣品在同一條件下層析，比較在相同位置上有無(wú)同一顏色（或熒光）的斑相同位置上有無(wú)同一顏色（或熒光）的斑點(diǎn)。點(diǎn)。對(duì)照品對(duì)照品例如：例如：延胡索延胡索 延胡索乙素延胡索乙素（鎮(zhèn)痛）（鎮(zhèn)痛）黃連黃連 小檗堿（抗小檗堿（抗菌消炎）菌消炎）691. 定義：定義：

29、中藥材或中藥制劑經(jīng)適當(dāng)處中藥材或中藥制劑經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段，得理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標(biāo)定該中藥材或中藥制到的能夠標(biāo)定該中藥材或中藥制劑特性的共有峰的圖譜劑特性的共有峰的圖譜（四）中藥鑒別新技術(shù)中藥指（四）中藥鑒別新技術(shù)中藥指 紋圖譜紋圖譜702. 色譜指紋圖譜的基本屬性色譜指紋圖譜的基本屬性713. 指紋圖譜的應(yīng)用指紋圖譜的應(yīng)用72IIIIII訶訶 子子小訶子小訶子大訶子大訶子絨毛訶子絨毛訶子73雅蓮云蓮味蓮味蓮雅蓮雅蓮云蓮云蓮74不同產(chǎn)地高良姜的氣相指紋圖譜不同產(chǎn)地高良姜的氣相指紋圖譜75三、中藥及其制劑的雜質(zhì)檢查三、中藥及其制劑的雜質(zhì)檢查 1 1、制劑通則檢查、

30、制劑通則檢查 2 2、一般雜質(zhì)檢查、一般雜質(zhì)檢查 3 3、特殊雜質(zhì)檢查、特殊雜質(zhì)檢查 4 4、微生物檢查、微生物檢查76雜質(zhì)檢查雜質(zhì)檢查水分水分總灰分和酸不溶性灰分總灰分和酸不溶性灰分重金屬重金屬砷鹽砷鹽殘留農(nóng)藥殘留農(nóng)藥 主要項(xiàng)目主要項(xiàng)目77雜質(zhì)來源及檢查意義雜質(zhì)來源及檢查意義水分水分 結(jié)塊、霉變或有效成分水解結(jié)塊、霉變或有效成分水解灰分灰分 控制藥物本身及泥土、沙石控制藥物本身及泥土、沙石 等無(wú)機(jī)雜質(zhì)等無(wú)機(jī)雜質(zhì)砷鹽砷鹽 劇毒，常由除草劑、殺蟲劑劇毒，常由除草劑、殺蟲劑 或化肥引入或化肥引入重金屬重金屬 環(huán)境污染和使用農(nóng)藥引入環(huán)境污染和使用農(nóng)藥引入 殘留農(nóng)藥殘留農(nóng)藥 有毒有毒781 1、烘干法

31、、烘干法（不含或少含揮發(fā)性成分）（不含或少含揮發(fā)性成分）2 2、甲苯法、甲苯法 （含揮發(fā)性成分）（含揮發(fā)性成分）3 3、減壓干燥法、減壓干燥法（含揮發(fā)性成分貴重藥）（含揮發(fā)性成分貴重藥）4 4、GCGC法法（中國(guó)藥典（中國(guó)藥典 20002000年版）年版）（一）（一）水分測(cè)定法水分測(cè)定法79注意事項(xiàng)：注意事項(xiàng)： 1、測(cè)定、測(cè)定用的樣品，一般用的樣品，一般先破碎成直徑不先破碎成直徑不超過超過3mm顆粒或顆粒或碎片。碎片。 2、甲苯、甲苯法中，甲苯事先法中，甲苯事先需用水飽和以后需用水飽和以后再用。再用。樣品、樣品、甲苯甲苯水分測(cè)定管水分測(cè)定管80（二）（二）總灰分和酸不溶性灰分的測(cè)定總灰分和酸不

32、溶性灰分的測(cè)定 中藥經(jīng)粉碎后加熱，高溫?zé)胱浦粱一兴幗?jīng)粉碎后加熱，高溫?zé)胱浦粱一瑒t其細(xì)胞組織及其內(nèi)含物成為灰燼而殘留，則其細(xì)胞組織及其內(nèi)含物成為灰燼而殘留，由此所得灰分為由此所得灰分為“生理灰分生理灰分”- -總灰分總灰分 中藥經(jīng)高溫?zé)胱坪蟮玫降目偦曳旨欲}酸中藥經(jīng)高溫?zé)胱坪蟮玫降目偦曳旨欲}酸處理，得到不溶于鹽酸的灰分處理，得到不溶于鹽酸的灰分酸不溶性酸不溶性灰分（更能反映泥土砂石的雜質(zhì)的量）灰分（更能反映泥土砂石的雜質(zhì)的量）81總灰分的測(cè)定總灰分的測(cè)定 灰灰化化恒恒重重炭炭化化供供試試品品已已恒恒重重坩坩堝堝600500 酸不溶性灰分的測(cè)定酸不溶性灰分的測(cè)定 炭炭化化灰灰化化過過濾濾總總灰

33、灰分分已已恒恒重重坩坩堝堝HCld82WHO規(guī)定植物藥規(guī)定植物藥鉛鉛10ppm鎘鎘0.3ppm干法破壞干法破壞濕法破壞濕法破壞硫代乙酰胺法硫代乙酰胺法（三）（三）重金屬的測(cè)定重金屬的測(cè)定實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯實(shí)驗(yàn)條件下能與硫代乙酰胺或硫化鈉作用顯色的金屬雜質(zhì)色的金屬雜質(zhì)83（四）（四） 殘留農(nóng)藥的測(cè)定（殘留農(nóng)藥的測(cè)定（GC法）法）1、 有機(jī)磷農(nóng)藥有機(jī)磷農(nóng)藥2、 有機(jī)氯農(nóng)藥有機(jī)氯農(nóng)藥3、擬除蟲菊酯類擬除蟲菊酯類84四、中藥及其制劑的含量測(cè)定四、中藥及其制劑的含量測(cè)定85 中國(guó)藥典中藥制劑含量測(cè)定所占比例中國(guó)藥典中藥制劑含量測(cè)定所占比例 版本版本 % 1977 1.48 1985

34、5.31 1990 8.73 1995 12.81 2000 62.09 （HPLC 36% TLCS 24% GC 3%)86測(cè)定項(xiàng)目的選定原則測(cè)定項(xiàng)目的選定原則1 首選君藥及貴重藥、劇毒藥建立首選君藥及貴重藥、劇毒藥建立 含量測(cè)定方法含量測(cè)定方法2 其次考慮臣藥及其他味藥其次考慮臣藥及其他味藥3 有效成分明確的，可選有效成分有效成分明確的，可選有效成分4 成分類別清楚的，可測(cè)某一類總成分類別清楚的，可測(cè)某一類總 成分的含量成分的含量875 檢測(cè)成分應(yīng)歸屬某單一藥味檢測(cè)成分應(yīng)歸屬某單一藥味6 檢測(cè)成分應(yīng)與中醫(yī)用藥的功能主檢測(cè)成分應(yīng)與中醫(yī)用藥的功能主 治相近治相近7 確無(wú)法含量測(cè)定的，可測(cè)定浸

35、出確無(wú)法含量測(cè)定的，可測(cè)定浸出 物含量物含量化學(xué)分析法化學(xué)分析法色譜法色譜法常用定量方法常用定量方法 分光光度法分光光度法88（一）（一）化學(xué)分析法化學(xué)分析法重量分析法（揮發(fā)法、萃取法、沉淀法）重量分析法（揮發(fā)法、萃取法、沉淀法） 容量分析法（生物堿、有機(jī)酸類成分）容量分析法（生物堿、有機(jī)酸類成分）特點(diǎn)特點(diǎn) A A、準(zhǔn)確度、精密度高、準(zhǔn)確度、精密度高 B B、抗干擾能力差、抗干擾能力差昆昆明明山山海海棠棠片片 HCl殘?jiān)鼩堅(jiān)鼮V液濾液樣品樣品乙醇乙醇 OHNH23乙醚乙醚恒重恒重稱重稱重 例例總生物堿的測(cè)定總生物堿的測(cè)定89（二）（二）分光光度法分光光度法UV法法 比色法比色法特點(diǎn)特點(diǎn) A、靈敏

36、度高、靈敏度高 B、簡(jiǎn)便、快速、簡(jiǎn)便、快速 C、精密度稍低、精密度稍低 D、干擾多、干擾多 90 比色法含量測(cè)定方法的計(jì)算（利用比爾比色法含量測(cè)定方法的計(jì)算（利用比爾-朗伯原理）朗伯原理） 取水楊酸鈉對(duì)照品用適量溶劑配成取水楊酸鈉對(duì)照品用適量溶劑配成10g/ml的對(duì)照液。另的對(duì)照液。另取水楊酸鈉取水楊酸鈉60mg，用適當(dāng)溶劑配成，用適當(dāng)溶劑配成100ml供試品溶液。在供試品溶液。在320nm波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，對(duì)照液為波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度，對(duì)照液為0.510，供試液為，供試液為0.483，計(jì)算該藥百分含量？計(jì)算該藥百分含量？91蘆丁蘆丁nm,max359299266259 黃芩苷黃芩苷nm,max3

37、14271240 小檗堿小檗堿 nm,max360350345 丹皮酚丹皮酚nmmax274 92（三）（三）TLCS法法 測(cè)定薄層板上斑點(diǎn)對(duì)單色光的吸測(cè)定薄層板上斑點(diǎn)對(duì)單色光的吸收或反射的強(qiáng)度而進(jìn)行定量的方法收或反射的強(qiáng)度而進(jìn)行定量的方法特點(diǎn)特點(diǎn) A、分離效果好、分離效果好 B、適用于無(wú)法用、適用于無(wú)法用UV、HPLC 法測(cè)定的組分法測(cè)定的組分 C、準(zhǔn)確度、精密度低于、準(zhǔn)確度、精密度低于HPLC931、 選擇測(cè)定條件選擇測(cè)定條件（1）薄層色譜條件）薄層色譜條件 分離好分離好 不拖尾不拖尾（2）檢測(cè)方法）檢測(cè)方法吸收測(cè)定法吸收測(cè)定法熒光測(cè)定法熒光測(cè)定法反射法反射法透射法透射法（3）掃描方式）掃

38、描方式 單波長(zhǎng)單波長(zhǎng)雙波長(zhǎng)雙波長(zhǎng)線性掃描法線性掃描法鋸齒掃描法鋸齒掃描法外標(biāo)法外標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法94（1）薄層板）薄層板 均勻、平整均勻、平整2、 注意事項(xiàng)注意事項(xiàng)（2）點(diǎn)樣量）點(diǎn)樣量 準(zhǔn)確準(zhǔn)確（4）顯色劑）顯色劑 均勻、適當(dāng)均勻、適當(dāng)（5）保護(hù)斑點(diǎn)）保護(hù)斑點(diǎn) 用相同大小潔凈玻璃用相同大小潔凈玻璃蓋住薄層板，并用透明膠紙封住邊緣，蓋住薄層板，并用透明膠紙封住邊緣，以起固定和隔絕空氣作用以起固定和隔絕空氣作用（3）斑點(diǎn)）斑點(diǎn) 應(yīng)完全分離，不拖尾應(yīng)完全分離，不拖尾95（四）（四）HPLC法法 在中藥及其制劑分析中，在中藥及其制劑分析中，HPLCHPLC法已經(jīng)法已經(jīng)廣泛應(yīng)用于藥物中有效成分或生理活性

39、物廣泛應(yīng)用于藥物中有效成分或生理活性物質(zhì)的含量測(cè)定，是最常用的定量分析方法質(zhì)的含量測(cè)定，是最常用的定量分析方法96色色譜譜泵泵及及控控制制器器數(shù)數(shù)據(jù)據(jù)處處理理及及控控制制進(jìn)進(jìn)樣樣器器色色譜譜柱柱檢檢測(cè)測(cè)器器W a te rs 4 8 697一、實(shí)驗(yàn)條件的選擇：一、實(shí)驗(yàn)條件的選擇：1、色譜柱的選擇：、色譜柱的選擇： C18反相柱（反相柱（ ODS柱）、柱）、C8反相柱、正相分配色譜柱反相柱、正相分配色譜柱(氨基柱等）。氨基柱等）。2、流動(dòng)相的選擇：反相鍵合相為例、流動(dòng)相的選擇：反相鍵合相為例（1）部分含水溶劑：以水為基礎(chǔ)溶劑，再加入一定量可）部分含水溶劑：以水為基礎(chǔ)溶劑，再加入一定量可與水互溶的

40、有機(jī)極性調(diào)節(jié)劑（如甲醇、乙腈等）。甲醇與水互溶的有機(jī)極性調(diào)節(jié)劑（如甲醇、乙腈等）。甲醇-水、乙腈水、乙腈-水系統(tǒng)。適用于中等極性、弱極性的藥物。水系統(tǒng)。適用于中等極性、弱極性的藥物。（2）緩沖溶液：適用于可溶于水并具可解離特性的藥物）緩沖溶液：適用于可溶于水并具可解離特性的藥物（弱酸、弱堿、蛋白質(zhì)、肽類等）。常用緩沖液：磷酸（弱酸、弱堿、蛋白質(zhì)、肽類等）。常用緩沖液：磷酸鹽、醋酸鹽等。鹽、醋酸鹽等。（3）非水溶劑：用于非極性物質(zhì)）非水溶劑：用于非極性物質(zhì)。983、洗脫方式：、洗脫方式：（1）等度洗脫：在同一分析周期內(nèi)流動(dòng)相的）等度洗脫：在同一分析周期內(nèi)流動(dòng)相的組成保持恒定。適用于組分?jǐn)?shù)較少、性

41、質(zhì)差別組成保持恒定。適用于組分?jǐn)?shù)較少、性質(zhì)差別不大的樣品。不大的樣品。（2）梯度洗脫：在同一分析周期內(nèi)程序控制）梯度洗脫：在同一分析周期內(nèi)程序控制流動(dòng)相的組成（溶劑極性、流動(dòng)相的組成（溶劑極性、pH值等）值等） 適用于組分?jǐn)?shù)多、性質(zhì)差別大的復(fù)雜混合適用于組分?jǐn)?shù)多、性質(zhì)差別大的復(fù)雜混合物樣品。物樣品。994、檢測(cè)器：、檢測(cè)器：（1）紫外檢測(cè)器（）紫外檢測(cè)器（UV）：應(yīng)用最普遍）：應(yīng)用最普遍。 靈敏度高、噪音低、線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)。只能用于靈敏度高、噪音低、線性范圍寬等優(yōu)點(diǎn)。只能用于檢測(cè)有紫外吸收的藥物。檢測(cè)有紫外吸收的藥物。 可變波長(zhǎng)型可變波長(zhǎng)型 、二極管陣列檢測(cè)器（色譜、紫外光、二極管陣列檢測(cè)器

42、（色譜、紫外光譜圖）譜圖）（2）蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（）蒸發(fā)光散射檢測(cè)器（ELSD）：通用型檢測(cè)器。）：通用型檢測(cè)器。 主要用于糖類、生物堿類、三萜類、甾提類等揮主要用于糖類、生物堿類、三萜類、甾提類等揮發(fā)性低的物質(zhì)。靈敏度稍低，流動(dòng)相中不能含緩沖鹽。發(fā)性低的物質(zhì)。靈敏度稍低，流動(dòng)相中不能含緩沖鹽。（3）示差折光檢測(cè)器（）示差折光檢測(cè)器（RID）：通用型，利用組分與）：通用型，利用組分與流動(dòng)相折射率之差進(jìn)行檢測(cè)。（用于糖類物質(zhì)）流動(dòng)相折射率之差進(jìn)行檢測(cè)。（用于糖類物質(zhì)）100二、二、HPLC常用色譜法：常用色譜法： 鍵合相色譜法：化學(xué)鍵合相為固定相的色譜法，由鍵合相色譜法：化學(xué)鍵合相為固定相的色譜

43、法，由液液-液分配色譜發(fā)展而來，分離機(jī)制以分配作用為主。液分配色譜發(fā)展而來，分離機(jī)制以分配作用為主。（1）反相鍵合相色譜：非極性鍵合相，根據(jù)鍵合基團(tuán)的）反相鍵合相色譜：非極性鍵合相，根據(jù)鍵合基團(tuán)的不同：不同：18烷基鍵合相（烷基鍵合相（ODS或或C18）應(yīng)用最廣）應(yīng)用最廣 常用流動(dòng)相：甲醇常用流動(dòng)相：甲醇-水系統(tǒng)水系統(tǒng)（2）正相鍵合相色譜：極性鍵合相。）正相鍵合相色譜：極性鍵合相。 氰基（氰基（-CN）：雙鍵異構(gòu)體或雙鍵不等的環(huán)狀化合）：雙鍵異構(gòu)體或雙鍵不等的環(huán)狀化合物物 氨基（氨基（-NH2）：糖類專用色譜柱）：糖類專用色譜柱常用流動(dòng)相：正己烷加適量極性調(diào)整劑。常用流動(dòng)相：正己烷加適量極性調(diào)

44、整劑。101五、中藥制劑中各類化學(xué)成分分析五、中藥制劑中各類化學(xué)成分分析102生物堿類藥物的分析生物堿類藥物的分析 一、生物堿（一、生物堿（Alkaloids） 生物堿是生物體內(nèi)含氮有機(jī)化合生物堿是生物體內(nèi)含氮有機(jī)化合物的總稱（氨基酸、蛋白質(zhì)和物的總稱（氨基酸、蛋白質(zhì)和B族維族維生素除外）生素除外）103典型藥物的結(jié)構(gòu) 小檗堿 OH-+NOOCH3OCH3OpKb=2.5104麻黃堿 CCCH3OH NHCH3HHpKb=4.42105阿托品 NCH3OCOCHCH2OHpKb=4.35106NNNNCH3CH3OO 茶堿H107二、生物堿類的理化性質(zhì)二、生物堿類的理化性質(zhì)（一）物理性質(zhì)（一）

45、物理性質(zhì)：1.形態(tài)形態(tài)為結(jié)晶固體，少為粉末；有熔點(diǎn)。為結(jié)晶固體，少為粉末；有熔點(diǎn)。 少數(shù)常溫下少數(shù)常溫下液體（多不含氧，若含多成多酯鍵液體（多不含氧，若含多成多酯鍵）2.顏色顏色多為無(wú)色或白色，少數(shù)有色（共軛結(jié)構(gòu)、助多為無(wú)色或白色，少數(shù)有色（共軛結(jié)構(gòu)、助色團(tuán)存在）。色團(tuán)存在）。3.揮發(fā)性、升華性揮發(fā)性、升華性多無(wú)，少數(shù)具有。多無(wú)，少數(shù)具有。例：麻黃堿：揮發(fā)性；例：麻黃堿：揮發(fā)性； 咖啡因：升華性咖啡因：升華性4.旋光性旋光性多為左旋光性。多為左旋光性。 多數(shù)左旋體呈顯著生理活性多數(shù)左旋體呈顯著生理活性1086.溶解度溶解度 (1)游離堿游離堿*酸、堿均為1%。 類別 極性 溶解性 H2O CH

46、Cl3 H+ OH-非酚性 較弱 脂溶性 + + 季銨堿 強(qiáng) 水溶性 + + + 氮氧化物 半極性 中等水溶 + + +氯仿、乙醚、乙醇、丙酮、苯等氯仿、乙醚、乙醇、丙酮、苯等109(2)成鹽成鹽Alk 多易溶于水，不溶或難溶有機(jī)溶劑。多易溶于水，不溶或難溶有機(jī)溶劑。 含氧酸鹽的水溶性往往較大。含氧酸鹽的水溶性往往較大。 與大分子有機(jī)酸所形成的鹽水溶性差與大分子有機(jī)酸所形成的鹽水溶性差 與小分子有機(jī)酸或無(wú)機(jī)酸成鹽水溶性較好。與小分子有機(jī)酸或無(wú)機(jī)酸成鹽水溶性較好。110（二）化學(xué)性質(zhì)：（二）化學(xué)性質(zhì)：1、堿性、堿性N:N:H+ H+生物堿生物堿鹽111H+生物堿 + 生物堿沉淀試劑2 2、沉淀反

47、應(yīng)：、沉淀反應(yīng)：常用的生物堿沉淀試劑為：常用的生物堿沉淀試劑為： 1. 重金屬鹽類，如重金屬鹽類，如K2HgI4、KBiI4、I2KI、二氯化汞等；二氯化汞等； 2. 大分子酸類，如磷鉬酸、硅鎢酸等。大分子酸類，如磷鉬酸、硅鎢酸等。用途： 鑒別試管、TLC或PPC顯色劑； 提取分離檢查是否提取完全。1123、顯色反應(yīng)、顯色反應(yīng)（一）雙縮脲反應(yīng)（一）雙縮脲反應(yīng) 側(cè)鏈具有氨基醇結(jié)構(gòu)側(cè)鏈具有氨基醇結(jié)構(gòu) 水層 蘭色醚層 紫紅色乙醚紫堇色OH-CuSO4+鹽酸麻黃堿鹽酸偽麻黃堿麻黃堿 CCCH3OH NHCH3HH113（二）Vitali反應(yīng) 托烷生物堿托烷生物堿 硫酸阿托品+發(fā)煙HNO3黃色醇制KOH

48、深紫色氫溴酸山莨菪堿阿托品 NCH3OCOCHCH2OH114三、生物堿類的定性鑒別三、生物堿類的定性鑒別（一）一般理化鑒別：主要應(yīng)用沉淀反應(yīng)的化（一）一般理化鑒別：主要應(yīng)用沉淀反應(yīng)的化學(xué)性質(zhì)。學(xué)性質(zhì)。 沉淀試劑：沉淀試劑：K2HgI4、KBiI4、I2KI 條條 件：酸性條水溶液件：酸性條水溶液 注注 意：蛋白質(zhì)、多肽和鞣質(zhì)干擾。意：蛋白質(zhì)、多肽和鞣質(zhì)干擾。例：馬錢子散中生物堿成分的鑒別例：馬錢子散中生物堿成分的鑒別 主要組成：馬錢子、地龍主要組成：馬錢子、地龍鑒別：取馬錢子散鑒別：取馬錢子散1 1克，加濃氨試液數(shù)滴及氯克，加濃氨試液數(shù)滴及氯仿仿1010毫升，浸泡數(shù)小時(shí)，濾過，蒸干，殘?jiān)雍?/p>

49、升，浸泡數(shù)小時(shí)，濾過，蒸干，殘?jiān)? 1毫升稀鹽酸溶解，加碘化鉍鉀毫升稀鹽酸溶解，加碘化鉍鉀1-21-2滴，生成黃滴，生成黃棕色沉淀。棕色沉淀。115（二）、色譜鑒別：（二）、色譜鑒別： 1、薄層色譜法、薄層色譜法 2、紙色譜法、紙色譜法 3、高效液相色譜法、高效液相色譜法116 常用吸附劑常用吸附劑： （1 1）氧化鋁）氧化鋁 （2）硅膠 硅膠為吸附劑：弱游離生物堿能順利遷移，強(qiáng)生硅膠為吸附劑：弱游離生物堿能順利遷移，強(qiáng)生物堿形成鹽類吸附太牢，造成嚴(yán)重拖尾或物堿形成鹽類吸附太牢，造成嚴(yán)重拖尾或Rf 值小。值小。 解決方法：在展開劑中加少量的堿性試劑，如氨、解決方法：在展開劑中加少量的堿性試劑

50、，如氨、二乙胺、有機(jī)脂烴胺類二乙胺、有機(jī)脂烴胺類 顯色方法：常用顯色劑顯色方法：常用顯色劑-改良碘化鉍鉀試劑相改良碘化鉍鉀試劑相應(yīng)斑點(diǎn)顯橘紅色。應(yīng)斑點(diǎn)顯橘紅色。117四、含量測(cè)定四、含量測(cè)定（一）總生物堿的含量測(cè)定（一）總生物堿的含量測(cè)定1、化學(xué)分析法、化學(xué)分析法2、分光光度法、分光光度法（二）單體生物堿的含量測(cè)定（二）單體生物堿的含量測(cè)定高效液相色譜法高效液相色譜法118生物堿的提取與純化：生物堿的提取與純化：（一）原理與方法 生物堿鹽類可溶解于水，不溶于有機(jī)溶劑游離生物堿不溶于水，易溶于有機(jī)溶劑依據(jù)性質(zhì)119中和法測(cè)定有機(jī)層（B）水層有機(jī)溶劑OH-sol過濾sol(BH+)稀酸或H2O游離

51、生物堿或生物堿鹽類1. 堿化2. 有機(jī)溶劑提取120容量分析測(cè)定容量分析測(cè)定 ： 終點(diǎn)酸滴定液滴定）（中性乙醇）殘?jiān)?，蒸干）有機(jī)層（BsolBB（1）直接滴定法直接滴定法 用于堿性較強(qiáng)的生物堿用于堿性較強(qiáng)的生物堿 121（2 2）剩余滴定法）剩余滴定法 用于堿性較弱的生物堿用于堿性較弱的生物堿 終點(diǎn)堿滴定液滴定）（定量過量的酸標(biāo)準(zhǔn)溶液）殘?jiān)?，蒸干）有機(jī)層（HBHsolBB1221. 堿化試劑 最常用氨水最常用氨水 2. 提取溶劑 （1）提取溶劑選擇的原則）提取溶劑選擇的原則（2）常用的提取溶劑）常用的提取溶劑 最常用氯仿最常用氯仿（二）測(cè)定條件的選擇（二）測(cè)定條件的選擇123（3）提取溶劑

52、的用量及提取次數(shù)）提取溶劑的用量及提取次數(shù) 通常應(yīng)提取通常應(yīng)提取4次，第一次用量至次，第一次用量至少應(yīng)為水液體積的一半，以后幾次應(yīng)少應(yīng)為水液體積的一半，以后幾次應(yīng)各為第一次的一半各為第一次的一半 124 3. 提取終點(diǎn)的確定 用合適的沉淀反用合適的沉淀反應(yīng)確定應(yīng)確定4. 指示劑的選擇：溴酚藍(lán)、甲基紅酚酞等 5. 乳化的預(yù)防和消除乳化的預(yù)防和消除125 儀器簡(jiǎn)單、試劑常用，但操作繁儀器簡(jiǎn)單、試劑常用，但操作繁瑣、費(fèi)時(shí)、精密度差、準(zhǔn)確度差，主瑣、費(fèi)時(shí)、精密度差、準(zhǔn)確度差，主要用于制劑分析要用于制劑分析（三）特點(diǎn)（三）特點(diǎn)1262、分光光度法：、分光光度法： （單波長(zhǎng)光度法）（單波長(zhǎng)光度法）（1）直

53、接測(cè)定法：）直接測(cè)定法：不經(jīng)過化學(xué)反應(yīng)，利用生物堿不經(jīng)過化學(xué)反應(yīng)，利用生物堿物質(zhì)自身的光吸收直接進(jìn)行比色測(cè)定的方法。物質(zhì)自身的光吸收直接進(jìn)行比色測(cè)定的方法。（一般（一般用于藥味較少、干擾不大的中藥制劑中總生物堿的含用于藥味較少、干擾不大的中藥制劑中總生物堿的含量測(cè)定）。量測(cè)定）。例：中國(guó)藥典（例：中國(guó)藥典（2010版）中左金丸的生物堿含量測(cè)定版）中左金丸的生物堿含量測(cè)定 取本品約取本品約1g，精密稱定，置索氏提取器，鹽酸，精密稱定，置索氏提取器，鹽酸-甲醇（甲醇（1:100）適量，適量，加熱回流提取至提取液無(wú)色，提取液移至加熱回流提取至提取液無(wú)色，提取液移至50ml量瓶中，用量瓶中，用鹽酸鹽酸

54、-甲醇適量稀釋至刻度，搖勻，照柱色譜法，精密量取甲醇適量稀釋至刻度，搖勻，照柱色譜法，精密量取5ml，上上AL2O3柱柱,乙醇乙醇25ml洗脫，收集洗液置洗脫，收集洗液置50ml量瓶中，乙醇稀釋至量瓶中，乙醇稀釋至刻度，精密吸取刻度，精密吸取2ml置置50ml量瓶中，加量瓶中，加0.05mol/L硫酸溶液稀釋至硫酸溶液稀釋至刻度，搖勻?？潭?，搖勻。UV345nm測(cè)定測(cè)定A。本品含總生物堿按鹽酸小檗堿計(jì)。本品含總生物堿按鹽酸小檗堿計(jì)不得少于不得少于1.7%。 127（2）離子對(duì)萃取比色法：）離子對(duì)萃取比色法： （用于中藥制劑中（用于中藥制劑中微量生物堿類成分的含量測(cè)定）微量生物堿類成分的含量測(cè)定

55、） 原理：在一定的原理：在一定的pH介質(zhì)中，有機(jī)堿與介質(zhì)中，有機(jī)堿與一些酸性染料或磺酸類、酸類的陰離子，一些酸性染料或磺酸類、酸類的陰離子，定量的結(jié)合成為有色離子對(duì)（配合物），定量的結(jié)合成為有色離子對(duì)（配合物），此離子對(duì)可定量地溶于某些有機(jī)溶劑，然此離子對(duì)可定量地溶于某些有機(jī)溶劑，然后在一定波長(zhǎng)下測(cè)定有機(jī)溶劑的或經(jīng)堿化后在一定波長(zhǎng)下測(cè)定有機(jī)溶劑的或經(jīng)堿化后釋放出的染料的吸收度，按分光光度法后釋放出的染料的吸收度，按分光光度法計(jì)算有機(jī)堿的含量。計(jì)算有機(jī)堿的含量。1286、各類中藥制劑分析、各類中藥制劑分析129中藥制劑的分類中藥制劑的分類中國(guó)藥典（中國(guó)藥典（2000年版）一部（二十六種）年版）一

56、部（二十六種）丸劑丸劑 膠劑膠劑 膏藥膏藥 顆粒劑顆粒劑 滴眼劑滴眼劑散劑散劑 合劑合劑 露劑露劑 糖漿劑糖漿劑 軟膏劑軟膏劑片劑片劑 酒劑酒劑 茶劑茶劑 滴丸劑滴丸劑 注射劑注射劑錠劑錠劑 酊劑酊劑 搽劑搽劑 膠囊劑膠囊劑 滴鼻劑滴鼻劑栓劑栓劑 巴布膏劑巴布膏劑 橡膠膏劑橡膠膏劑 氣霧劑噴霧劑氣霧劑噴霧劑 煎膏劑（膏滋）煎膏劑（膏滋）流浸膏劑與浸膏劑流浸膏劑與浸膏劑130（一）（一）液體制劑液體制劑用藥材提取物制備的液體制劑用藥材提取物制備的液體制劑合劑、糖漿劑、酒劑、茶劑、酊劑合劑、糖漿劑、酒劑、茶劑、酊劑 滴鼻劑、滴眼劑、露劑、搽劑等滴鼻劑、滴眼劑、露劑、搽劑等（無(wú)植物組織與細(xì)胞，故無(wú)顯

57、微鑒別）（無(wú)植物組織與細(xì)胞，故無(wú)顯微鑒別）1311、 合劑與口服液合劑與口服液（單劑量合劑也可稱為（單劑量合劑也可稱為“口服液口服液”）pH 裝量裝量相對(duì)密度相對(duì)密度微生物限度微生物限度一般檢查項(xiàng)目一般檢查項(xiàng)目 合劑系指藥材用水或其他溶劑，合劑系指藥材用水或其他溶劑，采用適宜方法提取，經(jīng)濃縮制成的內(nèi)采用適宜方法提取，經(jīng)濃縮制成的內(nèi)服液體制劑服液體制劑1322、 酒劑與酊劑酒劑與酊劑酒劑酒劑酊劑酊劑含乙醇量（含乙醇量（GC）甲醇量檢查（甲醇量檢查（GC）總固體總固體裝量裝量微生物限度微生物限度一般檢查項(xiàng)目一般檢查項(xiàng)目藥材用蒸餾酒提取制成的澄清液藥材用蒸餾酒提取制成的澄清液體制劑體制劑藥物用規(guī)定濃

58、度的乙醇提取或溶藥物用規(guī)定濃度的乙醇提取或溶解而制成的澄清液體制劑解而制成的澄清液體制劑133（二）（二）半固體制劑半固體制劑軟膏軟膏裝量裝量微生物限度微生物限度檢查項(xiàng)目檢查項(xiàng)目常用基質(zhì)常用基質(zhì) 油脂性、水溶性油脂性、水溶性 乳劑型（乳膏劑）乳劑型（乳膏劑）藥物、藥材細(xì)粉、藥材提取藥物、藥材細(xì)粉、藥材提取物與適量基質(zhì)混合制成的半物與適量基質(zhì)混合制成的半固體外用制劑固體外用制劑134 藥材提取液的濃縮液藥材提取液的濃縮液（三）（三）半流體制劑半流體制劑煎膏劑煎膏劑(膏滋膏滋)流浸膏劑與浸膏劑（半流體或固體）流浸膏劑與浸膏劑（半流體或固體）（無(wú)植物組織與細(xì)胞，故無(wú)顯微鑒別）（無(wú)植物組織與細(xì)胞，故無(wú)

59、顯微鑒別）135藥材用水煎煮、去渣濃縮后，加煉藥材用水煎煮、去渣濃縮后，加煉蜜或糖制成的半流體制劑蜜或糖制成的半流體制劑1、 煎膏劑煎膏劑(膏滋膏滋) 相對(duì)密度相對(duì)密度不溶物不溶物 裝量裝量微生物限度微生物限度檢查項(xiàng)目檢查項(xiàng)目應(yīng)無(wú)焦臭、異味，無(wú)糖結(jié)晶析出應(yīng)無(wú)焦臭、異味，無(wú)糖結(jié)晶析出1362、流浸膏劑與浸膏劑（半流浸膏劑與浸膏劑（半/固）固）藥材用適宜的溶劑提取，蒸去部分藥材用適宜的溶劑提取，蒸去部分或全部溶劑，調(diào)整濃度至規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)或全部溶劑，調(diào)整濃度至規(guī)定標(biāo)準(zhǔn)而制成的制劑而制成的制劑裝量裝量微生物限度微生物限度檢查項(xiàng)目檢查項(xiàng)目1ml流流 浸膏浸膏 1g 原藥材原藥材1g 浸膏浸膏 2 5g 原藥

60、材原藥材137（四）（四）固體制劑固體制劑 藥材提取物、藥材粉末加賦藥材提取物、藥材粉末加賦形劑、制備而成形劑、制備而成丸劑、膠劑、顆粒劑、散劑、片劑、丸劑、膠劑、顆粒劑、散劑、片劑、膠囊劑、錠劑、膠劑、茶劑、栓劑膠囊劑、錠劑、膠劑、茶劑、栓劑（有植物組織與細(xì)胞，可做顯微鑒別）（有植物組織與細(xì)胞，可做顯微鑒別）1381、 丸劑丸劑 指藥材細(xì)粉或藥材提取物加適宜的指藥材細(xì)粉或藥材提取物加適宜的黏合劑或其他輔料制成球形或類球形制黏合劑或其他輔料制成球形或類球形制劑，分為蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、劑，分為蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、濃縮丸、蠟丸、微丸等濃縮丸、蠟丸、微丸等檢查項(xiàng)目檢查項(xiàng)目水分、重量差異