激活劑及抑制劑對(duì)酶活性的影響(修)

1、一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康囊弧?shí)驗(yàn)?zāi)康?1. 1.掌握激活劑及抑制劑對(duì)酶掌握激活劑及抑制劑對(duì)酶活性影響的原理。活性影響的原理。 2. 2.熟悉實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及操作步驟。熟悉實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及操作步驟。 3. 3.了解溫度對(duì)酶活性的影響。了解溫度對(duì)酶活性的影響。 二、實(shí)驗(yàn)原理二、實(shí)驗(yàn)原理 ( (一一) )激活劑對(duì)酶活性影響的原理激活劑對(duì)酶活性影響的原理 使酶由無(wú)活性變?yōu)橛谢钚曰蚴故姑赣蔁o(wú)活性變?yōu)橛谢钚曰蚴姑富钚栽黾拥奈镔|(zhì)稱(chēng)為酶的激活劑。酶活性增加的物質(zhì)稱(chēng)為酶的激活劑。 激活劑是指無(wú)機(jī)離子，如金屬離子激活劑是指無(wú)機(jī)離子，如金屬離子Mg2+ +、Zn2+2+ 、酸根離子、酸根離子 Cl- 、 PO43- 和小分子有機(jī)物膽汁酸鹽

2、、和小分子有機(jī)物膽汁酸鹽、VC等。等。激活劑激活劑必需激活劑必需激活劑非必需激活劑非必需激活劑如：己糖激酶必需如：己糖激酶必需由由Mg2+ +激活激活 如：如：Cl- -是唾是唾 液淀粉酶的激活劑液淀粉酶的激活劑淀粉淀粉加碘呈色加碘呈色紫糊精紫糊精紅糊精紅糊精無(wú)色糊精無(wú)色糊精麥芽糖麥芽糖紫色紫色淀粉酶催化淀粉逐步水解淀粉酶催化淀粉逐步水解藍(lán)色藍(lán)色紅色紅色無(wú)色無(wú)色無(wú)色無(wú)色還原糖還原糖加激活劑加激活劑Cl- ( (1NaCl) )( (二二) )抑制劑對(duì)酶活性影響的原理抑制劑對(duì)酶活性影響的原理 能夠有選擇地使酶的活性降低能夠有選擇地使酶的活性降低或喪失，但不能使酶蛋白變性的物或喪失，但不能使酶蛋白

3、變性的物質(zhì)稱(chēng)為酶的抑制劑。質(zhì)稱(chēng)為酶的抑制劑。 抑制劑多與酶活性必需基團(tuán)結(jié)抑制劑多與酶活性必需基團(tuán)結(jié)合，直接或間接的影響酶的活性中心，合，直接或間接的影響酶的活性中心，從而抑制酶的活性。從而抑制酶的活性。 根據(jù)抑制劑與酶結(jié)合的緊密程根據(jù)抑制劑與酶結(jié)合的緊密程度不同，又分可逆性抑制和不可逆抑度不同，又分可逆性抑制和不可逆抑制劑。制劑。抑制劑抑制劑可逆性抑制劑可逆性抑制劑不可逆性抑制劑不可逆性抑制劑 抑制劑通過(guò)非共價(jià)鍵或酶抑制劑通過(guò)非共價(jià)鍵或酶- -底物底物復(fù)合物可逆性結(jié)合，使酶活性降低復(fù)合物可逆性結(jié)合，使酶活性降低或喪失。采用透析或超濾等物理方或喪失。采用透析或超濾等物理方法將抑制劑除去，恢復(fù)酶活

4、性。法將抑制劑除去，恢復(fù)酶活性。 抑制劑通常與酶活性中心上的必需基團(tuán)形成共抑制劑通常與酶活性中心上的必需基團(tuán)形成共價(jià)鍵，使酶失去活性。不能用透析、超濾等方法價(jià)鍵，使酶失去活性。不能用透析、超濾等方法將其除去，只能靠某藥物才能解除，恢復(fù)酶活性。將其除去，只能靠某藥物才能解除，恢復(fù)酶活性。重金屬離子重金屬離子Cu2+對(duì)唾液淀粉酶有抑制作用對(duì)唾液淀粉酶有抑制作用 1. Cl-對(duì)唾液淀粉酶具有激活作用。對(duì)唾液淀粉酶具有激活作用。 2.重金屬離子，例如重金屬離子，例如Cu2+對(duì)唾液淀對(duì)唾液淀粉酶有抑制作用，粉酶有抑制作用， 很多藥物是酶的抑制劑，通過(guò)對(duì)很多藥物是酶的抑制劑，通過(guò)對(duì)病原體內(nèi)某些酶的抑制作用

5、或改變體病原體內(nèi)某些酶的抑制作用或改變體內(nèi)某些酶的活性而發(fā)揮其治療功效，內(nèi)某些酶的活性而發(fā)揮其治療功效，了解酶的抑制作用是闡明藥物作用機(jī)了解酶的抑制作用是闡明藥物作用機(jī)制和設(shè)計(jì)研究新藥的重要途徑。制和設(shè)計(jì)研究新藥的重要途徑。激活劑及抑制劑對(duì)酶活性影響的意激活劑及抑制劑對(duì)酶活性影響的意義義 三、實(shí)驗(yàn)儀器與試劑三、實(shí)驗(yàn)儀器與試劑 1.1.儀器儀器 燒杯、試管、點(diǎn)滴板、滴管、燒杯、試管、點(diǎn)滴板、滴管、漏斗、刻度吸量管、洗耳球、水浴漏斗、刻度吸量管、洗耳球、水浴箱等。箱等。 2. 2.試劑試劑 1淀粉淀粉液、液、 1 NaCl溶液、溶液、1CuSO4溶液、溶液、 1NaSO4溶液、溶液、稀碘液、唾液。

6、稀碘液、唾液。四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及操作步驟四、實(shí)驗(yàn)內(nèi)容及操作步驟 1. 1.收集唾液收集唾液 用用少量少量（約（約35ml）冷冷水水漱口約漱口約1min，收集唾液，收集唾液至漏斗中，過(guò)濾，備用。至漏斗中，過(guò)濾，備用。 2.2.加樣加樣試劑（試劑（ ml ）試管試管1試管試管2試管試管3試管試管4蒸餾水蒸餾水1 ml2 ml1 ml1 ml1%NaCl1 ml1%CuSO41 ml1%淀粉淀粉1 ml1 ml1 ml1 ml1%Na2SO41 ml唾液唾液2 滴滴2 滴滴2 滴滴2 滴滴加碘現(xiàn)象加碘現(xiàn)象觀(guān)察、記錄實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。觀(guān)察、記錄實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象。 3. 3. 振蕩混勻，同時(shí)置于振蕩混勻，同時(shí)置于3737水

7、浴中，每水浴中，每2min2min取出一滴，在點(diǎn)滴取出一滴，在點(diǎn)滴板上做碘的呈色反應(yīng)。板上做碘的呈色反應(yīng)。 當(dāng)點(diǎn)滴板上有一孔呈現(xiàn)無(wú)色當(dāng)點(diǎn)滴板上有一孔呈現(xiàn)無(wú)色時(shí)，取出水浴中的時(shí)，取出水浴中的4 4支試管，各管支試管，各管加碘液加碘液1 13 3滴，搖勻。滴，搖勻。 觀(guān)察觀(guān)察4 4支試管的顏色，比較反應(yīng)支試管的顏色，比較反應(yīng)速度。速度。 五、注意事項(xiàng)五、注意事項(xiàng) 1.1.刻度吸量管不能交叉使用，否則污刻度吸量管不能交叉使用，否則污染試劑，影響反應(yīng)現(xiàn)象。染試劑，影響反應(yīng)現(xiàn)象。 2.2.實(shí)驗(yàn)所用試管沖洗干凈；編號(hào)實(shí)驗(yàn)所用試管沖洗干凈；編號(hào)1 1、2 2、3 3、4 4的燒杯及滴管取淀粉水解液時(shí)不能交的

8、燒杯及滴管取淀粉水解液時(shí)不能交叉使用，否則污染試劑，影響反應(yīng)現(xiàn)象。叉使用，否則污染試劑，影響反應(yīng)現(xiàn)象。 3. 3. 做完做完實(shí)驗(yàn)實(shí)驗(yàn)所有試劑擺放好，取淀粉所有試劑擺放好，取淀粉的刻度吸量管沖洗干凈，桌面擦干凈，登的刻度吸量管沖洗干凈，桌面擦干凈，登記簽名。記簽名。 4.4.值日生聽(tīng)老師安排，認(rèn)真打掃，經(jīng)值日生聽(tīng)老師安排，認(rèn)真打掃，經(jīng)老師批準(zhǔn)才能離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室。老師批準(zhǔn)才能離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室。六、思考題六、思考題 1. 1.什么是激活劑和抑制什么是激活劑和抑制劑？本實(shí)驗(yàn)中的激活劑和抑制劑？本實(shí)驗(yàn)中的激活劑和抑制劑分別是什么？劑分別是什么？ 2.2.四支試管中加入四支試管中加入1Na2SO4的目的是什么？的目

9、的是什么？ 下次實(shí)驗(yàn)：下次實(shí)驗(yàn)： P76頁(yè)頁(yè) 血糖測(cè)定血糖測(cè)定實(shí)驗(yàn)報(bào)告明天交，請(qǐng)組長(zhǎng)負(fù)起責(zé)實(shí)驗(yàn)報(bào)告明天交，請(qǐng)組長(zhǎng)負(fù)起責(zé)任。謝謝同學(xué)們配合！任。謝謝同學(xué)們配合！實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象分析實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象分析 試管試管1 1遇碘呈無(wú)色，證明遇碘呈無(wú)色，證明Cl- -離子對(duì)唾液淀粉酶有激活離子對(duì)唾液淀粉酶有激活作用。作用。 試管試管2 2遇碘呈紅色，證明唾液淀粉酶也能催化淀粉水遇碘呈紅色，證明唾液淀粉酶也能催化淀粉水解，但比加入激活劑解，但比加入激活劑Cl- -離子水解慢。離子水解慢。 試管試管3 3遇碘呈藍(lán)色，證明遇碘呈藍(lán)色，證明Cu2+2+離子對(duì)唾液淀粉酶有抑離子對(duì)唾液淀粉酶有抑制作用，使酶活性喪失，淀粉不能水解。制作用，使酶活性喪失，淀粉不能水解。 試管試管4 4遇碘呈紫色，唾液淀粉酶催化淀粉水解比試管遇碘呈紫色，唾液淀粉酶催化淀粉水解比試管2 2更慢，證明更慢，證明Na+ 、 SO42-離子對(duì)唾液淀粉酶的催化活性離子對(duì)唾液淀粉酶的催化活性有干擾；同時(shí)也證明了有干