抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)PPT學(xué)習(xí)教案

1、會計(jì)學(xué)1抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)抗原抗體反應(yīng)的特點(diǎn)第1頁/共26頁第2頁/共26頁第3頁/共26頁抗原和抗體的結(jié)合是互補(bǔ)性的特異性結(jié)合抗原和抗體的結(jié)合是互補(bǔ)性的特異性結(jié)合不形成牢固的共價(jià)鍵，通過非共價(jià)鍵結(jié)合不形成牢固的共價(jià)鍵，通過非共價(jià)鍵結(jié)合這種弱的結(jié)合力涉及幾種分子間的作用力這種弱的結(jié)合力涉及幾種分子間的作用力 * *1 1靜電引力靜電引力 * *2 2范德華引力范德華引力 * *3 3氫鍵結(jié)合力氫鍵結(jié)合力 * *4 4疏水作用力疏水作用力第4頁/共26頁 （electrostatic forceselectrostatic forces） （coulombic forcescoulombic f

2、orces） 概念：概念：抗原和抗體分子帶有相反電荷的抗原和抗體分子帶有相反電荷的 氨基和羧基基團(tuán)之間相互的引力氨基和羧基基團(tuán)之間相互的引力。 引力的大小與兩個(gè)相互作用基團(tuán)間的距引力的大小與兩個(gè)相互作用基團(tuán)間的距 離的平方成反比；平均鍵能約為離的平方成反比；平均鍵能約為 20.9kJ/mo120.9kJ/mo1。第5頁/共26頁概念：概念：抗原和抗體相互接近時(shí)，由于分子的抗原和抗體相互接近時(shí)，由于分子的 極化作用而出現(xiàn)的引力。極化作用而出現(xiàn)的引力。 結(jié)合力的大小與兩個(gè)相互作用基團(tuán)的極化程結(jié)合力的大小與兩個(gè)相互作用基團(tuán)的極化程 度的乘積成正比、與它們之間距離的度的乘積成正比、與它們之間距離的7

3、7次方次方 成反比，鍵能約為成反比，鍵能約為4.24.212.5kJ12.5kJmolmol。 這種引力的能量小于靜電引力。這種引力的能量小于靜電引力。 具有特異性。具有特異性。第6頁/共26頁 概念：概念：供氫體上的氫原子與受氫體原子供氫體上的氫原子與受氫體原子 間的引力。間的引力。 供氫體：供氫體：羧基、氨基和羥基羧基、氨基和羥基 受氫體：受氫體：羧基氧、羧基碳和肽鍵氧等羧基氧、羧基碳和肽鍵氧等 能的大小取決于能的大小取決于氫鍵氫鍵的方向：的方向：氫鍵具有高度氫鍵具有高度 的方向性。的方向性。 氫鍵結(jié)合力與供氫體和受氫體之間距離的氫鍵結(jié)合力與供氫體和受氫體之間距離的6 6次次 方成反比，鍵

4、能約方成反比，鍵能約20.9kJ/mol20.9kJ/mol。第7頁/共26頁 概念：概念：兩個(gè)疏水基團(tuán)在水溶液中相互接觸時(shí)，兩個(gè)疏水基團(tuán)在水溶液中相互接觸時(shí)， 由于對水分子排斥而趨向聚集的力。由于對水分子排斥而趨向聚集的力。 抗原決定簇與抗體上的結(jié)合點(diǎn)靠近，互相間抗原決定簇與抗體上的結(jié)合點(diǎn)靠近，互相間 正、負(fù)極性消失，親水層立即失去。正、負(fù)極性消失，親水層立即失去。 此力在抗原抗體反應(yīng)中的結(jié)合是很重要的。此力在抗原抗體反應(yīng)中的結(jié)合是很重要的。 提供的作用力最大，約占總結(jié)合力的提供的作用力最大，約占總結(jié)合力的5050。第8頁/共26頁抗原抗原抗體抗體氫鍵結(jié)合力氫鍵結(jié)合力 O ON NO ON

5、NH HH H靜電引靜電引力力- - -+ + +范得華范得華力力- -+ + +- -+ +- - -+ +疏水作用力疏水作用力排斥的水排斥的水第9頁/共26頁* * 親和性親和性 是抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合點(diǎn)與對是抗體分子上一個(gè)抗原結(jié)合點(diǎn)與對 應(yīng)的抗原決定簇之間的相適應(yīng)性而存在著的應(yīng)的抗原決定簇之間的相適應(yīng)性而存在著的 引力，這是抗原與抗體之間固有的結(jié)合力。引力，這是抗原與抗體之間固有的結(jié)合力。* * 親和力親和力（avidity)avidity) 是指反應(yīng)系統(tǒng)中復(fù)雜抗是指反應(yīng)系統(tǒng)中復(fù)雜抗 原與相應(yīng)抗體之間的結(jié)合能力。原與相應(yīng)抗體之間的結(jié)合能力。 親和力與親和性、抗體的結(jié)合價(jià)和抗原的有親和力

6、與親和性、抗體的結(jié)合價(jià)和抗原的有 效決定簇?cái)?shù)目相關(guān)。效決定簇?cái)?shù)目相關(guān)。 親和力越大，抗原抗體結(jié)合越牢固。親和力越大，抗原抗體結(jié)合越牢固。第10頁/共26頁游離抗體濃度游離抗原濃度抗原抗體復(fù)合物濃度親和常數(shù)親和常數(shù)K=K= K K值大的抗體與抗原牢固結(jié)合，不易值大的抗體與抗原牢固結(jié)合，不易 解離，說明該抗體有高親和力。解離，說明該抗體有高親和力?？贵w與抗原結(jié)合是可逆的反應(yīng)，在平衡時(shí)其抗體與抗原結(jié)合是可逆的反應(yīng)，在平衡時(shí)其第11頁/共26頁 血清學(xué)反應(yīng)條件下，抗原抗體均帶負(fù)電荷，血清學(xué)反應(yīng)條件下，抗原抗體均帶負(fù)電荷， 使極化的水分子在其周圍形成水化層，成為使極化的水分子在其周圍形成水化層，成為 親

7、水膠體。親水膠體。 當(dāng)抗原與抗體結(jié)合后，表面電荷減少，水化當(dāng)抗原與抗體結(jié)合后，表面電荷減少，水化 層變薄；而且由于抗原抗體復(fù)合物形成后，層變??；而且由于抗原抗體復(fù)合物形成后， 與水接觸的表面積減少，由親水膠體轉(zhuǎn)化為與水接觸的表面積減少，由親水膠體轉(zhuǎn)化為 疏水膠體。疏水膠體。 在電解質(zhì)作用下，各疏水膠體之間靠攏，形在電解質(zhì)作用下，各疏水膠體之間靠攏，形 成可見的抗原抗體復(fù)合物。成可見的抗原抗體復(fù)合物。第12頁/共26頁親水膠體親水膠體疏水膠體疏水膠體轉(zhuǎn)化轉(zhuǎn)化NaClNaCl可見反應(yīng)可見反應(yīng)第13頁/共26頁* *1.1.特異性特異性 * *2.2.比例性比例性 * *3.3.可逆性可逆性 第14

8、頁/共26頁* *概念：概念：抗原分子，只能與由它刺激所產(chǎn)生的抗抗原分子，只能與由它刺激所產(chǎn)生的抗 體結(jié)合而起反應(yīng)的專一性能。體結(jié)合而起反應(yīng)的專一性能。* *決定因素：決定因素：由抗原決定簇和抗體分子超變區(qū)之由抗原決定簇和抗體分子超變區(qū)之 間空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性決定的。間空間結(jié)構(gòu)的互補(bǔ)性決定的。 抗體分子抗體分子N N端可變區(qū)形成端可變區(qū)形成3nm3nm1.5nm1.5nm0.7nm0.7nm的槽溝，的槽溝，只有與其空間結(jié)構(gòu)互補(bǔ)的抗原決定簇才能如楔狀嵌入。只有與其空間結(jié)構(gòu)互補(bǔ)的抗原決定簇才能如楔狀嵌入。* *交叉反應(yīng)交叉反應(yīng)(cross reaction) (cross reaction) 兩種不

9、同的抗原兩種不同的抗原 物質(zhì)具有部分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原決定簇，物質(zhì)具有部分相同或類似結(jié)構(gòu)的抗原決定簇， 則可與彼此相應(yīng)的抗體反應(yīng)。則可與彼此相應(yīng)的抗體反應(yīng)。第15頁/共26頁第16頁/共26頁* *最適比最適比(optimal ratio)(optimal ratio)或等價(jià)點(diǎn)或等價(jià)點(diǎn)(equivzlence(equivzlence point) point) 最迅速出現(xiàn)沉淀時(shí)的抗原抗體的濃度最迅速出現(xiàn)沉淀時(shí)的抗原抗體的濃度 比或量比。比或量比。 等價(jià)帶等價(jià)帶(equivalencezone)(equivalencezone)抗原與抗體分子比抗原與抗體分子比 例合適的范圍。例合適的范圍。 帶

10、現(xiàn)象：帶現(xiàn)象：AgAg與與AbAb比例不適而不出現(xiàn)可見反應(yīng)。比例不適而不出現(xiàn)可見反應(yīng)。* * 前帶前帶(prozone) (prozone) 抗體過量時(shí)?？贵w過量時(shí)。* * 后帶后帶 (postzone)(postzone) 抗原過量時(shí)?？乖^量時(shí)。第17頁/共26頁抗體過量抗體過量比例合適比例合適抗原的量抗原的量抗原過量抗原過量抗體沉淀的量抗體沉淀的量前帶前帶等價(jià)帶等價(jià)帶后帶后帶第18頁/共26頁概念：概念：是指抗原與抗體結(jié)合成復(fù)合物后，在是指抗原與抗體結(jié)合成復(fù)合物后，在 一定條件下可解離為游離抗原與抗體的特性。一定條件下可解離為游離抗原與抗體的特性。 解離后抗原抗體仍保持原有特性。解離后抗

11、原抗體仍保持原有特性。 一定條件：低一定條件：低pHpH、高濃度鹽等。、高濃度鹽等。 常用于解離抗原抗體復(fù)合物的物質(zhì)有：常用于解離抗原抗體復(fù)合物的物質(zhì)有： 3mol/L3mol/L硫氰化鉀、硫氰化鉀、pH2.4 0.1mol/LpH2.4 0.1mol/L甘氨酸、甘氨酸、 7mol/L7mol/L尿素等。尿素等。第19頁/共26頁抗體抗體混有混有SPAgSPAg抗體抗體- -SPAgSPAg抗體抗體- -SPAgSPAg分離劑分離劑一、抗原抗體結(jié)一、抗原抗體結(jié)合合二、分離抗體二、分離抗體抗體抗體第20頁/共26頁第21頁/共26頁第22頁/共26頁1.1.沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng)2.2.凝集反應(yīng)凝集反

12、應(yīng)3.3.補(bǔ)體參與的反應(yīng)補(bǔ)體參與的反應(yīng)4.4.中和反應(yīng)中和反應(yīng)5.5.免疫標(biāo)記免疫標(biāo)記第23頁/共26頁 抗原抗體反應(yīng)的基本類抗原抗體反應(yīng)的基本類 型型 表表反應(yīng)類型反應(yīng)類型 實(shí)驗(yàn)技術(shù)實(shí)驗(yàn)技術(shù) 檢測方法檢測方法 敏感度敏感度沉淀反應(yīng)沉淀反應(yīng) 液相沉淀試驗(yàn)液相沉淀試驗(yàn) 觀察沉淀、檢測濁度觀察沉淀、檢測濁度 + +，+ 瓊脂凝膠擴(kuò)散瓊脂凝膠擴(kuò)散 觀察掃描沉淀線或環(huán)觀察掃描沉淀線或環(huán) + + 凝膠電泳技術(shù)凝膠電泳技術(shù) 或峰或弧或峰或弧 +補(bǔ)體參與反應(yīng)補(bǔ)體參與反應(yīng) 補(bǔ)體溶血試驗(yàn)補(bǔ)體溶血試驗(yàn) 以裸眼或光電比色儀以裸眼或光電比色儀 + 補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn) 觀察測定溶血現(xiàn)象觀察測定溶血現(xiàn)象 +免疫標(biāo)記技術(shù)免疫標(biāo)記技術(shù) 熒光免疫技術(shù)熒光免疫技術(shù) 檢測熒光現(xiàn)象檢測熒光現(xiàn)象 + 放射免疫技術(shù)放射免疫技術(shù) 檢測放射性檢測放射性 + 酶標(biāo)免疫技術(shù)酶標(biāo)免疫技術(shù) 檢測酶底物顯色檢測酶底物顯色 + 發(fā)光免疫技術(shù)發(fā)光免疫技術(shù) 測定發(fā)光強(qiáng)度測定發(fā)光強(qiáng)度 + 生物素生物素- -親合素技術(shù)親合素技術(shù) 結(jié)合其它標(biāo)記技術(shù)結(jié)合其它標(biāo)記技術(shù) + 金標(biāo)免疫技術(shù)金標(biāo)免疫技術(shù) 檢測金顆粒沉淀檢測金顆粒沉淀 +凝集反應(yīng)凝集反應(yīng) 直接凝集試驗(yàn)直接凝集試驗(yàn) 用裸眼、放大鏡或顯用裸眼