醫(yī)院干化學(xué)應(yīng)用專題講座

1、干化學(xué)應(yīng)用實(shí)驗(yàn)室專員房圣亞主要內(nèi)容干化學(xué)原理V350分析儀的日常保養(yǎng)常見(jiàn)應(yīng)用問(wèn)題解析美國(guó)強(qiáng)生公司是世界上最大的、最具綜合性的醫(yī)療保健品制造商，為消費(fèi)者、制藥業(yè)和醫(yī)療器材及診斷市場(chǎng)提供全面的專業(yè)化效勞。2021年銷售額到達(dá)675億美元，在全世界的醫(yī)療保健產(chǎn)品生產(chǎn)企業(yè)中名列第一。全球雇員超過(guò)12萬(wàn)。公司總部位于美國(guó)新澤西州，擁有多于250家子公司，為57個(gè)國(guó)家的市場(chǎng)提供產(chǎn)品和專業(yè)化效勞。產(chǎn)品覆蓋制藥、醫(yī)療器材和保健品。在外科縫線、OTC藥品、醫(yī)療器械及診斷領(lǐng)域居于國(guó)際領(lǐng)先地位。2021年在?財(cái)富?全球最受景仰的公司評(píng)選中，名列第三。全球僅有的五家AAA信用級(jí)工業(yè)公司之一。強(qiáng)生公司3強(qiáng)生OCD主要產(chǎn)

2、品 平安輸血 血型分析 血液篩查 實(shí)驗(yàn)室診斷 臨床生化 臨床免疫 實(shí)驗(yàn)室自動(dòng)化* ValuMetrix實(shí)驗(yàn)室管理咨詢效勞* Veridex腫瘤分子診斷* 注冊(cè)中MicroSlide 多涂層薄膜干片技術(shù)擴(kuò)散層擴(kuò)散層試劑層試劑層指示劑層指示劑層支持層支持層標(biāo)本MicroSlide多涂層薄膜干片技術(shù)：將所需試劑預(yù)固相在多層薄膜和郵票大小的透明支持基墊之上。當(dāng)血漿，血清，尿液或腦脊液與這些已含化學(xué)物質(zhì)的干式薄膜接觸時(shí)發(fā)生反響并對(duì)反響信號(hào)進(jìn)行測(cè)量。干片分類CM/RTPMIR干片鈉鉀氯地高辛苯巴比妥卡馬西平苯妥因C反響蛋白膽固醇 甘油三酯總蛋白 白蛋白高密度酯蛋白 脂肪酶尿蛋白 腦脊液蛋白谷丙轉(zhuǎn)氨酶 谷氨

3、酸轉(zhuǎn)移酶堿性磷酸酶 r谷氨酰轉(zhuǎn)酞酶乳酸脫氫酶 肌酸激酶肌酸激酶同工酶 尿素氮肌酐 尿酸 乳酸 鐵、總鐵結(jié)合力磷 鋰淀粉酶膽堿脂酶總膽紅素結(jié)合/非結(jié)合膽紅素血氨乙醇水楊酸茶堿醋氨酚鎂二氧化碳比色/速率法干片免疫速率法干片電極法干片 指示劑層 支持層擴(kuò)散層試劑層比色/速率法干片通過(guò)測(cè)定干片顏色變化來(lái)確定化合物濃度 指示劑層 支持層 多孔結(jié)構(gòu)，允許標(biāo)本通過(guò) 均勻分布標(biāo)本 過(guò)濾大分子蛋白質(zhì)，脂肪等 去除干擾物質(zhì)溶血，黃疸等 提供反射測(cè)定的背景擴(kuò)散層試劑層擴(kuò)散層比色/速率法干片結(jié)構(gòu)試劑層 擴(kuò)散層 試劑層指示劑層 支持層 包含檢測(cè)反響所需的酶，緩沖液，催化劑等 多層試劑，控制反響順序比色/速率法干片結(jié)構(gòu)葡

4、萄糖干片指示劑層 擴(kuò)散層 試劑層 指示劑層 支持層試劑層產(chǎn)物與指示劑層中的染料結(jié)合時(shí)，形成有色復(fù)合物，其與分析物濃度成正比。比色/速率法干片結(jié)構(gòu)支持層 擴(kuò)散層 試劑層 指示劑層 支持層 提供反響支持基墊 允許光路自由通過(guò)比色/速率法干片結(jié)構(gòu)反射光的測(cè)定干擾物質(zhì)反光背景成色層生成純潔的反射光光源濾光片接收器比色/速率法干片功能演示濕化學(xué) ： 采用透射光度法 遵循朗勃比爾定律干化學(xué) ： 采用反射光度法 遵循Williams Clapper定律吸光度濃度反射光濃度透射與反射接收器接收器透射 與 反射光線經(jīng)過(guò)干擾物質(zhì) 光線不經(jīng)過(guò)干擾物質(zhì) 受影響 不受影響尿酸其他的優(yōu)異抗干擾能力 MicroSlide多

5、層涂膜技術(shù)可以針對(duì)不同檢測(cè)工程使用加以不同成份的薄膜以到達(dá)最正確的檢測(cè)結(jié)果某些干片中有清道夫?qū)尤缒蛩嵩噭┤コS他命C 和鎂干片去除鈣的干擾 某些干片試劑層下有半透膜層如尿素氮：去除藥物干擾半透膜尿素氮 競(jìng)爭(zhēng)性與非競(jìng)爭(zhēng)性免疫速率反響模式 需要液體反響底物 地高辛、苯妥因、苯巴比妥、CRP、 卡馬西平免疫速率法干片電極法干片 離子選擇電極技術(shù) 直接法測(cè)定兩電極間電勢(shì)不同 鉀，鈉，氯18鹽橋S2S1S3S4aIar離子載體膜M+ ClAgCl Ag離子載體膜M+ ClAgClAgaIarVV干片常規(guī)濃度液體(參比液)待測(cè)液體(標(biāo)本)離子選擇電極(ISE)鹽橋ar電極法干片19干片在接觸點(diǎn)被穿透測(cè)量電

6、壓讀數(shù)通過(guò)電壓讀數(shù)計(jì)算出分析物的濃度旗艦測(cè)試工程 K，Na，Cl 直接離子選擇電極20Aqueous Solution (Serum)水相(血清)Non-aqueous solution(Lipids, Proteins)非水相(血脂,蛋白質(zhì))以間接法檢測(cè)的容量以直接法檢測(cè)的容量間接法無(wú)法對(duì)血脂和蛋白質(zhì)進(jìn)行校正.21組成成分 原始體積水相9.3 ul非水相 0.7 ul總樣本體積 10.0 ul按照血清中, 非水相占有的體積約為7 %計(jì)算標(biāo)本電解質(zhì)排斥效應(yīng)22組成成分 原始體積稀釋液 990.0 ul水相 9.3 ul非水相 0.7 ul總樣本體積 1000.0 ul稀釋后的正常人標(biāo)本(100

7、倍稀釋)稀釋比率 = 最終體積 / 原始體積總的血清稀釋比率 = 1000 / 10 = 100 倍水相稀釋比率 = (990 + 9.3) / 9.3 = 107.45 倍電解質(zhì)排斥效應(yīng)23正常人標(biāo)本Na=140K = 4.0稀釋 1:100檢測(cè)計(jì)算Na= 140K = 4.0結(jié)果Na = 130.3K = 3.72單位：mmol/LNa = 140 /107.45100 = 130.3 mmol/LK = 4/107.45100 = 3.72 mmol/L直接離子選擇電極法檢測(cè)間接離子選擇電極法結(jié)果電解質(zhì)排斥效應(yīng)蛋白質(zhì)增高脫水巨球蛋白血癥多發(fā)性骨髓瘤高球蛋白血癥肉芽腫病某些膠原病血脂增高甲

8、狀腺機(jī)能減退腎病綜合癥糖原過(guò)多癥糖尿病急性胰腺炎直接法 vs. 間接法 ISE疾病狀態(tài)對(duì)標(biāo)本的影響血漿蛋白影響血漿蛋白為局部水溶性，故高濃度的蛋白會(huì)造成與血脂類似地影響 4 8 12 160.800.901.00檢測(cè)結(jié)果總蛋白直接電極法間接電極法 干式生化系統(tǒng)的抗干擾性黃疸20018016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000加入膽紅素 BILIRUBIN ( mg/dL)( 最終結(jié)果 /原始結(jié)果)= 結(jié)果離散度 %*CREAASTPHOS# LDH #ALKPCaPROTECO2#MgCHOLGLUALT*TRIG

9、*NA*CL*UREA*CK*AMYL*ALB*URCA*FEDxxxxx Dxxxxxxx 某濕生化系統(tǒng)文件來(lái)源于：?INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments?- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000BILIRUBIN ADDED

10、( mg/dL)結(jié)果離散度%PROT*ALB*ALKP*AMYL*AST*ECO2*CA*CHOL*CREAT*GLU*K*LDH*Mg*NA*CL*URCA*UREA*TRIG*CK200VITROS 350 干式生化系統(tǒng)的抗干擾性黃疸文件來(lái)源于：?INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments?- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.2001801601401

11、2010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000加入 脂肪 ( INTRALIPID Added mg/dL)結(jié)果離散度%*BILIURCAPHOSGLUPROTMgCHOLALBCaCREAALKPAST#ALT*UREA*CK*CL*K*GGT*NA*CO2# LDH 109% AT 750 MG/DLCxxxxx 某濕生化系統(tǒng) 干式生化系統(tǒng)的抗干擾性脂血文件來(lái)源于：?INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments?- e

12、dit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D. 干式生化系統(tǒng)的抗干擾性脂血18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000LIPEMIA ( INTRALIPID Added mg/dL)結(jié)果離散度%*ALB*ALKP*ALT*AMYL*AST*BICARB*BIL*CAL*CK*CL*CHOL*CREAT*GLU*K*LDH*Mg*Na*PHOS*PROT*URCA*UREAVITROS 350200文件來(lái)

13、源于：?INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments?- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.200 18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700 800 900 1000加入 血紅素 (as hemoglobin mg/dL)結(jié)果離散度%Hxxxxx xxx 某濕生化系統(tǒng)T.BILICPKMgALBPHO

14、SUATRIGALTTPALKPGGTAMYL*CL*GLU*CHOL*GLOB*CREAT*D.BILI*BUN*CO2*NA*CA 干式生化系統(tǒng)的抗干擾性 溶血文件來(lái)源于：?INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments?- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D., Ph.D Starla J. Glick, M.D.18016014012010080604020100 200 300 400 500 600 700

15、 800 900 1000HEMOLYSATE ADDED (as hemoglobin mg/dL)結(jié)果離散度%*ALKP*AMYL*ECO2*CAL*CK*CL*CREAT*NA*URCA*UREABILIPHOSPROTALBTRIG GLU CHOLMg200VITROS 750強(qiáng)生干式生化系統(tǒng)的抗干擾性溶血文件來(lái)源于：?INTERFEROGRAPHS -Users guide to interferences in clinical chemistry instruments?- edit by Melvin R. Glick Ph.D Kenneth W. Ryder, M.D.,

16、 Ph.D Starla J. Glick, M.D.主要內(nèi)容干化學(xué)原理V350分析儀的日常保養(yǎng)常見(jiàn)應(yīng)用問(wèn)題解析每日保養(yǎng)需要做的保養(yǎng):清空:廢稀釋杯和廢吸頭箱空試劑盒箱廢干片箱檢查: 加樣架是否臟了有無(wú)損壞補(bǔ)充:稀釋杯,吸頭試劑參比液,稀釋液,免疫沖洗液質(zhì)控: 做所有機(jī)上工程的質(zhì)控每日保養(yǎng)清潔加樣架和通道每日保養(yǎng)更換各種輔助試劑:選擇相應(yīng)的子程序儀器自動(dòng)準(zhǔn)備放入新的輔助試劑參比液,洗液都是記數(shù)為300滴稀釋液是2-10ML每周保養(yǎng)需要做的保養(yǎng):清潔:加樣架平臺(tái),加樣架運(yùn)動(dòng)軌道吸頭停止位加樣位的樣品杯限位器觸摸屏和鍵盤(pán)檢查:加樣臂的運(yùn)動(dòng)路徑主控計(jì)算機(jī)的空氣濾網(wǎng)每周保養(yǎng)加樣架平臺(tái)加樣架運(yùn)動(dòng)軌道吸頭

17、停止位加樣位的樣品杯限位器每周保養(yǎng)加樣臂的運(yùn)動(dòng)路徑每周保養(yǎng)空氣濾網(wǎng)必要的保養(yǎng)應(yīng)做的保養(yǎng):須更換的:保濕劑,枯燥劑 反射光度計(jì)的燈泡清潔: 廢干片通道 推片尺和干片通道需做的: 用黑白參考片做的光 路校正測(cè)試必要的保養(yǎng)必要的保養(yǎng)進(jìn)入Diagnostic-setup/adjust-Reflectometer Iris調(diào)整燈電壓(至8V以下)必要的保養(yǎng)用黑白參考片做的光路校正測(cè)試Diagnostic-setup/adjust-Correction Factor輸入黑白參考片的反射系數(shù)按提示將參考片放入孵育盤(pán)更新生成的校正系數(shù)主要內(nèi)容干化學(xué)原理V350分析儀的日常保養(yǎng)常見(jiàn)應(yīng)用問(wèn)題解析45肌酐為什么有時(shí)

18、候肌酐不出結(jié)果，報(bào)DP,稀釋后結(jié)果反而不高？常見(jiàn)應(yīng)用問(wèn)題解析-肌酐反響原理兩點(diǎn)速率法：滴加樣本后，干片進(jìn)行孵育。反響初期樣本重的內(nèi)源性肌酸被氧化，所產(chǎn)生的反射信號(hào)值在兩個(gè)時(shí)間點(diǎn)測(cè)定，測(cè)定的反射強(qiáng)度差值與樣本中的肌酐 (CREA) 濃度成正比。46常見(jiàn)應(yīng)用問(wèn)題解析-肌酐干擾物質(zhì)血清和血漿 肌酸：肌酐 (CREA) 濃度為 133 mol/L 時(shí)，大于 707 mol/L的肌酸濃度將會(huì)顯示“DP代碼因?yàn)樘岣吆芏嗟募∷釢舛瓤赡芤疬^(guò)度的背景密度。 對(duì)于沒(méi)有顯示錯(cuò)誤代碼的樣本，肌酸引起的殘留偏差將小于 13.3 mol/L。 肌酐 (CREA) 濃度為 1237 mol/L時(shí)，大于 88 mol/L 的肌酸濃度將會(huì)顯示“DP代碼。 對(duì)于沒(méi)有顯示錯(cuò)誤代碼的樣本，肌酸引起的殘留偏差將小于 2%。47肌酐 常見(jiàn)應(yīng)用問(wèn)題解析-肌酐處理方法稀釋樣本如果肌酐濃度超出系統(tǒng)可報(bào)告范圍，或者分析儀顯示“DP代碼指示高背景密度，通常是因?yàn)榧∷釢舛壬咚拢敲窗慈缦虏襟E操作：手工樣本稀釋1. 使用 VITROS 7% 牛血清白蛋白溶液稀釋樣本；2. 重新分析；3. 結(jié)果乘以稀釋因子，獲得原始樣本中肌酐濃度的估計(jì)值。48CK/C