有毒化學(xué)物質(zhì)檢驗(yàn)

1、動(dòng)物性食品中有毒化學(xué)物質(zhì)檢驗(yàn)有毒化學(xué)物質(zhì)種類o農(nóng)藥o獸藥o生物毒素o重（類）金屬o添加劑o環(huán)境化學(xué)物檢驗(yàn)的基本程序檢驗(yàn)的基本程序o樣品的采集o樣品的前處理o樣品分析（方法的選擇及評(píng)價(jià)）o數(shù)據(jù)分析一、取樣程序一、取樣程序 采樣原則采樣原則：樣品對(duì)總體應(yīng)有充分的代表性：樣品對(duì)總體應(yīng)有充分的代表性 總體總體（population)population)：具有相同屬性的被：具有相同屬性的被檢驗(yàn)的食品的總和檢驗(yàn)的食品的總和 樣品樣品（sample)sample)：從總體中抽出的作為總：從總體中抽出的作為總體的代表參加檢驗(yàn)的一部分食品體的代表參加檢驗(yàn)的一部分食品 1、取樣類型（方法）、取樣類型（方法） 選

2、擇性取樣選擇性取樣：（有目的地）（有目的地） 當(dāng)觀察到不能令人滿意的狀況并想據(jù)當(dāng)觀察到不能令人滿意的狀況并想據(jù)之為物證時(shí)；或是為實(shí)驗(yàn)室分析提供懷疑之為物證時(shí)；或是為實(shí)驗(yàn)室分析提供懷疑有摻雜的或缺陷的一個(gè)單位食品時(shí)。有摻雜的或缺陷的一個(gè)單位食品時(shí)?？陀^性取樣（客觀性取樣（隨機(jī)取樣）：隨機(jī)取樣）：能真實(shí)地反映總體質(zhì)量，保持客觀性。能真實(shí)地反映總體質(zhì)量，保持客觀性。子樣子樣( (小樣小樣):):來(lái)自于總體來(lái)自于總體, ,能夠代表總體能夠代表總體 性質(zhì)和質(zhì)量的一部分或最小包性質(zhì)和質(zhì)量的一部分或最小包 裝單位。裝單位。原始樣品原始樣品：質(zhì)量相同的能夠代表該批食：質(zhì)量相同的能夠代表該批食 品的小樣品的小樣

3、, ,混合在一起混合在一起( (或均質(zhì)或均質(zhì)后后) )稱為原始樣品稱為原始樣品 平均樣品平均樣品：按按“四分法四分法”縮分后的樣品，一縮分后的樣品，一般不少于全部檢驗(yàn)項(xiàng)目用量的四倍。一份般不少于全部檢驗(yàn)項(xiàng)目用量的四倍。一份為檢驗(yàn)樣品，一份保留樣品，一份復(fù)驗(yàn)樣為檢驗(yàn)樣品，一份保留樣品，一份復(fù)驗(yàn)樣品。品。留留棄棄四分法：四分法：混勻的粉體或固體顆粒鋪平后成大混勻的粉體或固體顆粒鋪平后成大致的正方形致的正方形(圓），然后劃對(duì)角線，取對(duì)角圓），然后劃對(duì)角線，取對(duì)角的兩份。的兩份。2、取樣注意事項(xiàng)、取樣注意事項(xiàng) （1 1）須有代表性）須有代表性（2 2）應(yīng)弄清基本情況）應(yīng)弄清基本情況貨主、來(lái)源、種類、批

4、貨主、來(lái)源、種類、批次、生產(chǎn)日期、總量、次、生產(chǎn)日期、總量、包裝堆積形式、運(yùn)輸情包裝堆積形式、運(yùn)輸情況、貯存條件況、貯存條件（3 3）子樣原始樣品平均樣品子樣原始樣品平均樣品分析留樣分析留樣縮分縮分（4 4）一切采樣工具均清潔、干燥、無(wú)異味。）一切采樣工具均清潔、干燥、無(wú)異味。微生物檢查時(shí)應(yīng)無(wú)菌取樣。微生物檢查時(shí)應(yīng)無(wú)菌取樣。 檢驗(yàn)?zāi)承╉?xiàng)目時(shí)，還應(yīng)注意特殊要求。檢驗(yàn)?zāi)承╉?xiàng)目時(shí)，還應(yīng)注意特殊要求。如黃曲霉毒素檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)避免陽(yáng)光、紫外如黃曲霉毒素檢驗(yàn)時(shí)，應(yīng)避免陽(yáng)光、紫外線的照射；鉛測(cè)定時(shí)，應(yīng)先對(duì)容器去鉛處線的照射；鉛測(cè)定時(shí)，應(yīng)先對(duì)容器去鉛處理等。理等。盛放容器？盛放容器？ 干燥潔凈密閉的干燥潔凈密閉

5、的玻璃、聚乙烯瓶玻璃、聚乙烯瓶/袋袋（5 5）采樣后貼上標(biāo)簽。）采樣后貼上標(biāo)簽。 封口，以防調(diào)換、污染、降解。封口，以防調(diào)換、污染、降解。 速送實(shí)驗(yàn)室保存速送實(shí)驗(yàn)室保存( (不及時(shí)檢測(cè)須冷藏不及時(shí)檢測(cè)須冷藏/ /冷凍冷凍) )。 采樣后到檢驗(yàn)時(shí)，樣品不能發(fā)生明顯的特采樣后到檢驗(yàn)時(shí)，樣品不能發(fā)生明顯的特性改變。性改變。樣品名、編號(hào)、批號(hào)、樣品名、編號(hào)、批號(hào)、取樣日期地點(diǎn)、取樣人取樣日期地點(diǎn)、取樣人3、樣品采集方法、樣品采集方法采樣工具：采樣工具： 依據(jù)食品的形態(tài)如液體、固體顆粒依據(jù)食品的形態(tài)如液體、固體顆粒或粉狀等采用不同的采樣工具或粉狀等采用不同的采樣工具 o固體顆?；蚍垠w混勻后采用三層（上、

6、中、固體顆粒或粉體混勻后采用三層（上、中、下）五點(diǎn)（周圍四點(diǎn)和中心）法采樣下）五點(diǎn)（周圍四點(diǎn)和中心）法采樣o 袋裝樣品按區(qū)分點(diǎn)進(jìn)行抽樣，采用四分法袋裝樣品按區(qū)分點(diǎn)進(jìn)行抽樣，采用四分法縮分縮分 o 包裝堆垛的產(chǎn)品，采用包裝堆垛的產(chǎn)品，采用“五點(diǎn)法五點(diǎn)法”采樣采樣五點(diǎn)法采集五點(diǎn)法采集u新鮮肉類、水產(chǎn)品新鮮肉類、水產(chǎn)品 從同一批不同個(gè)體取子樣，多個(gè)子樣混勻后即從同一批不同個(gè)體取子樣，多個(gè)子樣混勻后即為原始樣品，子樣量較多時(shí)，可縮分為為原始樣品，子樣量較多時(shí)，可縮分為原始樣品。原始樣品。 豬肉：大腿內(nèi)側(cè)肌或背最長(zhǎng)肌，肥瘦分開。豬肉：大腿內(nèi)側(cè)肌或背最長(zhǎng)肌，肥瘦分開。 魚：較大者可按頭、中、尾分別取樣混合

7、；魚：較大者可按頭、中、尾分別取樣混合；較小者，將整條（或同批多條）可食較小者，將整條（或同批多條）可食用部分全部混合。用部分全部混合。u包裝成箱產(chǎn)品包裝成箱產(chǎn)品 所采樣品應(yīng)能代表產(chǎn)品貨層或產(chǎn)品堆垛的所采樣品應(yīng)能代表產(chǎn)品貨層或產(chǎn)品堆垛的每一層、全部各層和層中各部分。每一層、全部各層和層中各部分。 采集的子樣數(shù)一般為數(shù)量的平方根。采集的子樣數(shù)一般為數(shù)量的平方根。 采用采用“回填法回填法”抽樣。抽樣。u液體、半固體食品液體、半固體食品 先行充分混勻后再采樣，使用特別的采樣器先行充分混勻后再采樣，使用特別的采樣器或用虹吸法分層、分點(diǎn)取樣，然后再進(jìn)行有效或用虹吸法分層、分點(diǎn)取樣，然后再進(jìn)行有效的混合。

8、的混合。 u無(wú)菌取樣無(wú)菌取樣 無(wú)菌取樣只能使用經(jīng)過(guò)消毒的器械和容器。無(wú)菌取樣只能使用經(jīng)過(guò)消毒的器械和容器。 需要切割樣品時(shí)，應(yīng)盡量使用不銹鋼器具，需要切割樣品時(shí)，應(yīng)盡量使用不銹鋼器具，便于消毒。便于消毒。無(wú)菌取樣無(wú)菌取樣 進(jìn)行微生物檢驗(yàn)，無(wú)菌取樣時(shí)還應(yīng)同時(shí)做進(jìn)行微生物檢驗(yàn)，無(wú)菌取樣時(shí)還應(yīng)同時(shí)做容器開啟對(duì)照和封閉對(duì)照。容器開啟對(duì)照和封閉對(duì)照。 封閉對(duì)照封閉對(duì)照：提交一個(gè)封閉的消毒樣品容器，以提交一個(gè)封閉的消毒樣品容器，以 顯示盛放樣品的容器是經(jīng)過(guò)殺菌的，顯示盛放樣品的容器是經(jīng)過(guò)殺菌的， 與樣品中發(fā)現(xiàn)的微生物沒有關(guān)系。與樣品中發(fā)現(xiàn)的微生物沒有關(guān)系。開啟對(duì)照開啟對(duì)照：在取樣點(diǎn)，使無(wú)菌容器暴露在空氣在

9、取樣點(diǎn)，使無(wú)菌容器暴露在空氣 中的時(shí)間與取樣時(shí)相同。以了解取中的時(shí)間與取樣時(shí)相同。以了解取 樣地點(diǎn)空氣中細(xì)菌存在的情況。樣地點(diǎn)空氣中細(xì)菌存在的情況。4、采樣數(shù)及量u采集的子樣數(shù)采集的子樣數(shù) 一般不少于一般不少于 n n 的平方根。的平方根。u原始樣品量原始樣品量 全部分析所需量的四倍。全部分析所需量的四倍。5、樣品保存 防止污染；防止腐敗變質(zhì)防止污染；防止腐敗變質(zhì) ； 穩(wěn)定水分；固定待測(cè)成分。穩(wěn)定水分；固定待測(cè)成分。 凈：保證采樣工具及器皿的清潔干凈凈：保證采樣工具及器皿的清潔干凈密：穩(wěn)定水分，防止揮發(fā)成分的損失，避免引密：穩(wěn)定水分，防止揮發(fā)成分的損失，避免引入污染物入污染物 冷：冷藏運(yùn)輸與保

10、存，降低化學(xué)反應(yīng)速度、酶冷：冷藏運(yùn)輸與保存，降低化學(xué)反應(yīng)速度、酶活性和微生物生長(zhǎng)活性和微生物生長(zhǎng) 快：采樣后應(yīng)盡快進(jìn)行分析，避免變化快：采樣后應(yīng)盡快進(jìn)行分析，避免變化二、食品樣品的前處理 1、食品樣品的常規(guī)處理、食品樣品的常規(guī)處理 2、食品樣品的無(wú)機(jī)化處理、食品樣品的無(wú)機(jī)化處理 wet digeation 3、殘留物的提取、分離、濃縮、殘留物的提取、分離、濃縮1、食品樣品的常規(guī)處理、食品樣品的常規(guī)處理o除去非食用部分除去非食用部分 o除去機(jī)械雜質(zhì)除去機(jī)械雜質(zhì)o 均質(zhì)（勻）化處理均質(zhì)（勻）化處理（1）濕法消化法（）濕法消化法（wet digeation)（2）干灰化法（dry ashing)3、

11、殘留物的提取、分離和濃縮、殘留物的提取、分離和濃縮（1 1）提取分離方法）提取分離方法 液液萃取液液萃取 SPESPE（solid phase extraction)/solid phase extraction)/固相微萃取固相微萃取 微波輔助萃取微波輔助萃取(microwave-assisted extraction)(microwave-assisted extraction) MSPDE(matrix solid phase dispertion MSPDE(matrix solid phase dispertion extraction) extraction)基質(zhì)固相分散萃取基質(zhì)固

12、相分散萃取超臨界流體萃取超臨界流體萃取(super critical fluid (super critical fluid extraction, SFE) extraction, SFE)SPE（solid phase extraction)o微量樣品處理技術(shù)，主要用于樣品的分離、純化和微量樣品處理技術(shù)，主要用于樣品的分離、純化和濃縮。濃縮。o能避免液能避免液- -液萃取所帶來(lái)比如液萃取所帶來(lái)比如不完全的相分離、較不完全的相分離、較低的定量分析回收率低的定量分析回收率、產(chǎn)生大量的有機(jī)廢液、產(chǎn)生大量的有機(jī)廢液o采用高效、高選擇性的固定相，提取效率好，容易采用高效、高選擇性的固定相，提取效率好

13、，容易達(dá)到達(dá)到定量萃取定量萃取，快速快速和和自動(dòng)化自動(dòng)化，具有能顯著，具有能顯著減少溶減少溶劑用量劑用量，消除某些干擾雜質(zhì)等優(yōu)點(diǎn)。消除某些干擾雜質(zhì)等優(yōu)點(diǎn)。 （2 2）濃縮方法：）濃縮方法： N N2 2吹干濃縮吹干濃縮-氮吹儀氮吹儀 負(fù)壓加熱蒸發(fā)濃縮負(fù)壓加熱蒸發(fā)濃縮-旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 KDKD濃縮器濃縮器 色譜柱吸附濃縮色譜柱吸附濃縮旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀K-D濃縮器三、常用檢驗(yàn)方法三、常用檢驗(yàn)方法感觀檢驗(yàn)感觀檢驗(yàn)o以人的感覺為依據(jù)，憑人的眼耳鼻舌身等以人的感覺為依據(jù)，憑人的眼耳鼻舌身等感覺器官對(duì)食品的質(zhì)量進(jìn)行檢驗(yàn)（視覺檢感覺器官對(duì)食品的質(zhì)量進(jìn)行檢驗(yàn)（視覺檢查、聽覺檢查、嗅覺檢查、味覺檢查、觸查、聽覺

14、檢查、嗅覺檢查、味覺檢查、觸覺檢查）按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進(jìn)行，對(duì)覺檢查）按國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的方法進(jìn)行，對(duì)檢驗(yàn)人員和環(huán)境有嚴(yán)格的要求檢驗(yàn)人員和環(huán)境有嚴(yán)格的要求微生物檢驗(yàn)微生物檢驗(yàn)o是指利用某些微生物在有一定的化學(xué)是指利用某些微生物在有一定的化學(xué)物質(zhì)存在時(shí)，其生長(zhǎng)受到抑制或產(chǎn)生物質(zhì)存在時(shí)，其生長(zhǎng)受到抑制或產(chǎn)生一定的物質(zhì)，根據(jù)生長(zhǎng)受抑制的程度一定的物質(zhì)，根據(jù)生長(zhǎng)受抑制的程度或特殊性質(zhì)可以判斷此種化學(xué)物質(zhì)的或特殊性質(zhì)可以判斷此種化學(xué)物質(zhì)的量。量。 物理化學(xué)方法檢驗(yàn)物理化學(xué)方法檢驗(yàn) 是利用物質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)來(lái)進(jìn)是利用物質(zhì)的物理化學(xué)性質(zhì)來(lái)進(jìn)行分析的方法。行分析的方法。 物理法物理法 如比重、粘度、旋光測(cè)定如比

15、重、粘度、旋光測(cè)定 化學(xué)法化學(xué)法 如滴定分析、重量分析如滴定分析、重量分析儀器分析方法儀器分析方法光譜法光譜法：可見：可見紫外、熒光、原子吸收法、紫外、熒光、原子吸收法、 電位分析法等電位分析法等色譜法色譜法：氣相色譜法、高效液相色譜法、：氣相色譜法、高效液相色譜法、 凝膠色譜法、薄層色譜法等凝膠色譜法、薄層色譜法等波譜法波譜法：質(zhì)譜分析法、核磁共振分析法等：質(zhì)譜分析法、核磁共振分析法等 聯(lián)用技術(shù)聯(lián)用技術(shù)：GC-MSGC-MS，HPLC-MSHPLC-MS免疫分析方法免疫分析方法 是利用是利用抗原抗體抗原抗體的特異結(jié)合來(lái)分析的方法。的特異結(jié)合來(lái)分析的方法。 放射免疫分析（放射免疫分析（RIAR

16、IA） 酶聯(lián)免疫測(cè)定法（酶聯(lián)免疫測(cè)定法（ELISAELISA） 熒光免疫測(cè)定法（熒光免疫測(cè)定法（FIAFIA） 免疫親和色譜法（免疫親和色譜法（immuno-affinity immuno-affinity chromatogrphychromatogrphy，IAC IAC ） 免疫分析方法免疫分析方法 熒光偏振免疫測(cè)定法（熒光偏振免疫測(cè)定法（fluorescence fluorescence polarization immunoassaypolarization immunoassay，F(xiàn)PIAFPIA 膠體金免疫測(cè)定法（膠體金免疫測(cè)定法（colloidal gold colloidal

17、 gold immunoassayimmunoassay，CGIACGIA） 酶聯(lián)傳感器分析法酶聯(lián)傳感器分析法 四、檢測(cè)結(jié)果及檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)四、檢測(cè)結(jié)果及檢驗(yàn)方法的評(píng)價(jià)1 1、誤差的表示、誤差的表示o準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度o精密度精密度 相對(duì)平均偏差相對(duì)平均偏差 = = 標(biāo)準(zhǔn)差標(biāo)準(zhǔn)差 相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSDRSD）/ /變異系數(shù)變異系數(shù)CV CV 相對(duì)相差相對(duì)相差% % %100|XnXXi1)(2nXXS%100XSRSD100)(|22121XXXX2 2、分析方法的評(píng)價(jià)、分析方法的評(píng)價(jià) 評(píng)價(jià)指標(biāo)：評(píng)價(jià)指標(biāo)：準(zhǔn)確度準(zhǔn)確度：回收率、標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍、相關(guān)：回收率、標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍、相關(guān)系數(shù)

18、系數(shù)靈敏度靈敏度：檢測(cè)限、定量限：檢測(cè)限、定量限精密度精密度：重復(fù)性（批內(nèi)批間精密度）：重復(fù)性（批內(nèi)批間精密度）重現(xiàn)性重現(xiàn)性 （1）回收率（加樣回收率）回收率（加樣回收率） 回收率回收率= 加入標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)量得值樣品本底值加入標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)后樣品測(cè)一般要求平均回收率在一般要求平均回收率在80%80%以上，變化范以上，變化范圍在圍在70%70%110%110%。 回收率偏低回收率偏低表明方法的表明方法的準(zhǔn)確度、靈敏度較準(zhǔn)確度、靈敏度較差差回收率高低與添加的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的濃度有關(guān)?；厥章矢叩团c添加的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)的濃度有關(guān)。（2）標(biāo)準(zhǔn)曲線標(biāo)準(zhǔn)曲線 繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線 建立回歸方程建立回歸方程 ：y = a + bx y = a + bx 線性（形）范圍線性（形）范圍 相關(guān)系數(shù)相關(guān)系數(shù) r r r0.9 3 3、檢測(cè)限與定量限、檢測(cè)限與定量限(1) (1) 檢測(cè)限檢測(cè)限(Limit of Detection ,LOD (Limit of Detection ,LOD ） 在在LODLOD水平，定量可靠性水平，定量可靠性( (如精密度、回收率等如精密度、回收率等) )不作要求。不作要求。 殘留檢測(cè)方法的殘留檢測(cè)方法的LOD0.1MRL LOD0.1MRL (2) (2) 定量限（定量限（Limit of Quantition ,LOQLimit