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文檔簡介
1、動物科學學院獸醫(yī)臨床診斷學實驗指導書主性馮杰編寫適用專業(yè):動物醫(yī)學貴州大學二OO七年八月、乙刖百獸醫(yī)臨床診斷學的基本內(nèi)容涉及獸醫(yī)臨床檢查的基本方法、基本知識、基本理論和臨床操作技能;還介紹了實驗室常用檢驗項目、檢驗方法及其診斷意義,以及獸醫(yī)X線檢查、B超檢查和獸醫(yī)心電圖檢查的基本知識等。通過學習,讓學生熟練掌握臨床檢查的基本方法,并運用于臨床一般檢查和系統(tǒng)檢查,最終達到初步的臨診分析能力,對動物常見疾病能夠作出診斷和處置。獸醫(yī)臨床診斷學是一門實踐性很強的課程。為了使學生不僅在理論上學好本門課的基本知識,而且能確實掌握有關的基本技能和操作技術,并能應用于臨診實際,以保證教學質(zhì)量,必須在動物保定、
2、投藥、一般檢查、系統(tǒng)檢查、血常規(guī)檢查等方面加強實踐動手操作能力。實驗項目-動物的接近與保定,要求學生掌握動物通用保定方法,確保臨診過程中人畜安全。實驗項目-動物投藥、注射及穿刺,要求學生熟練掌握動物投藥、注射及穿刺技術。實驗項目-一般檢查,要求學生熟練掌握一般檢查的內(nèi)容及其臨床意義。實驗項目-循環(huán)系統(tǒng)檢查、呼吸系統(tǒng)檢查、消化系統(tǒng)檢查,要求學生熟練掌握系統(tǒng)檢查的內(nèi)容及其臨床意義。實驗項目-血液的采集、抗凝及血常規(guī)檢查,要求學生了解血常規(guī)檢查的內(nèi)容及程序。實驗項目-現(xiàn)場病例診療分析,主要考查學生綜合運用知識的能力和分析能力。其中血液的采集、抗凝及血常規(guī)檢查和現(xiàn)場病例診療分析為綜合性實驗項目。本指導
3、書適用于動物醫(yī)學本科專業(yè)的學生。在實驗項目的編排上,做到循序漸進、由淺入深,重點突出培養(yǎng)學生的操作動手能力和綜合運用知識的能力。精選目錄1 .實驗一:動物的接近與保定??,2 .實驗二:動物投藥、注射及穿刺?3 .實驗三:一般檢查?4 .實驗四:循環(huán)系統(tǒng)檢查??5 .實驗五:呼吸系統(tǒng)檢查??3?.實驗六:消化系統(tǒng)檢查??5?7 .實驗七:血液的采集、抗凝及血常規(guī)檢查?8 .實驗八:現(xiàn)場病例診療分析??附:實驗報告的基本內(nèi)容及要求??貴州大學實驗報告??精選實驗一:動物的接近與保定實驗學時:2實驗類型:操作實驗要求:必修一、實驗目的通過本實驗的學習,使學生熟悉接近動物的原則,掌握通用動物保定方法
4、,為今后的臨診工作奠定基礎。二、實驗內(nèi)容動物接近;動物保定。三、實驗原理、方法和手段本實驗為操作性,方法及手段詳見實驗步驟。四、實驗組織運行要求根據(jù)本實驗的特點、要求和具體條件,采用以學生自主訓練為主的開放模式組織教學。五、實驗條件成年黃牛兩頭、保定繩、診療室等。六、實驗步驟(以黃牛為例)1 .黃牛接近(1)接近黃牛前,應向飼養(yǎng)員了解其性情,有無咬、踢、抵等惡癖,然后以溫和聲音打招呼,再從其側方慢慢接近。(2)接近后,用手撫摸黃牛頸側待其安靜后,再行檢查。(3)檢查時,應將一手放于黃牛適當部位(如肩部、懿結節(jié)),一旦黃牛劇烈騷動抵抗時,即可作為支點向對側推動并迅速離開。2 .黃牛保定(1)鉗鼻
5、保定法。用鼻鉗子鉗壓鼻中隔,或用拇指和中指捏住鼻中隔,向后上方提舉保持之。對穿有鼻環(huán)的牛,牽拉鼻環(huán)繩即可。(2)捆角保定法。用一根繩拴在雙側牛角根部,并用此繩將牛頭固定于立柱或樹干上。精選(3)柱欄保定法??捎枚鶛凇⑺闹鶛?、五柱欄、六柱欄保定。(4)雙環(huán)套倒牛法。用12-15米長的圓繩1條,一端拴在牛角根部,另端由頸背側引向后方,經(jīng)肩胛后方及雕結節(jié)前方時,分別繞背胸及腰腹部各作一環(huán)套,再引繩向后。兩環(huán)套之繩交叉點均在倒臥對則。隨后,由2人固定牛頭并向倒臥側按壓,3人向后牽拉倒繩,牛因繩套壓迫,胸腹肌緊縮,后肢屈曲而自行倒臥。(5)提肢倒牛法。用7-8米長的圓繩一條,折成一長一短的雙疊,在折疊
6、部做豬蹄扣,套在倒臥側前肢掌部。先將短繩穿過胸下,從對側經(jīng)背部返回交1人固定。再將長繩引向后方,在雕結節(jié)之前繞腰腹部作一環(huán)套,并繼續(xù)引向后方,交1人固定。放倒時,拉緊前方短繩,提舉倒臥側前肢;再將后方繩環(huán)經(jīng)臀部移至脛部,收緊并向后方牽拉,使繩緊縛后肢,牛即先坐下而后臥倒。倒臥后的保定應根據(jù)需要進行。短時間保定且牛體不大時,可令一助手坐在后肢后方的地上,牢固地抓住上側后肢并用力向后拉,腳抵于另一后肢的跑關節(jié)上,用力向前蹬,另一助手緊抓前肢并牢固地使其屈曲,同時用一膝抵住患畜頸部。需長時間保定時,可將兩前肢用繩捆在一起,向前伸直,固定;同樣,兩后肢捆好后,向后拉直固定;另人固定頭部。七、思考題牛五
7、柱欄保定如何操作?適合于哪些檢查或手術?八、實驗報告要求學生作好實驗預習、實驗記錄和實驗報告。在正式實驗前先作實驗預習,并以書面形式交于實驗指導老師,檢查可行后方能作正式實驗。實驗過程中對實驗相關內(nèi)容及步驟作詳細記錄。實驗完畢后填寫實驗報告,交由指導教師批閱。九、其它說明條件具備時可增加其他動物的保定內(nèi)容。精選實驗二:動物投藥、注射及穿刺實驗學時:2實驗類型:操作實驗要求:必修一、實驗目的通過本實驗的學習,使學生熟練掌握動物投藥法、注射法及穿刺技術,為今后的臨診工作奠定基礎。二、實驗內(nèi)容投藥法;注射法;穿刺術。三、實驗原理、方法和手段本實驗為操作性實驗,方法及手段詳見實驗步驟。四、實驗組織運行
8、要求根據(jù)本實驗的特點、要求和具體條件,采用以學生自主訓練為主的開放模式組織教學。五、實驗條件診療室、黃牛兩頭、保定繩、穿刺針、注射器、輸液器、胃導管、長頸橡膠瓶、5%rn酊棉球、75刷精棉球及生理鹽水等。六、實驗步驟(以黃牛為例)(一)長頸橡膠灌藥法:主要用于少量的水劑藥物或將粉劑、研碎的片劑、加適量的水而制成的溶液、混懸液、糊劑、中藥及其煎劑、片劑、丸劑、舔劑等,經(jīng)口灌給病畜。1牛站立保定,一手握角根,另手握鼻中隔,或裝著鼻鉗子,使頭稍高抬固定。2術者站在斜前方,左手食、中指從牛的一側口角處伸入口腔,并輕壓舌頭,右手持盛滿藥液的灌藥瓶,自另側口角伸入舌背部抬高瓶底,并輕輕振抖,如用橡膠瓶時可
9、壓擠瓶體,促進藥液流出,在配合吞咽動作中繼續(xù)灌服,直至灌完。注意不要連續(xù)灌注,以免誤咽。(二)片劑、丸劑、舐劑投藥法:術者用一手從一側口角伸入拇指頂上顆打開口腔,另手持藥片、藥丸或用竹片刮取舔劑,自另側口角送入舌根部,同時抽出另手使其閉口,并用右手掌托其下頜骨,使頭稍高抬,待其自行咽下。(三)經(jīng)鼻胃導管投藥法:精選1動物保定,固定牛頭。2術者站于牛頭稍右前方,用左手無名指與小指伸入左側上鼻翼的副鼻腔、中指、食指伸入鼻腔,與鼻腔外側的拇指固定內(nèi)側的鼻翼。3右手持胃管將前端通過左手拇指與食指之間沿鼻中隔徐徐插入胃管,并加以固定,防止病畜騷動時胃等滑出。4當胃管抵達咽部后,隨病畜咽下動作將胃管插入食
10、道。有時可能拒絕不咽,推送困難,此時不要勉強推送,應稍?;蜉p輕抽動胃管,誘發(fā)吞咽動作,順勢將胃管插入食道。5判定胃管正確插入食道后,再將胃管前端推送頸部到下處。連接漏斗,先投少量清水,證明無誤后,即可投藥。也可連接投藥唧筒,將藥液壓送入胃內(nèi)。6投藥之后,再投以少量清水,沖凈胃等內(nèi)殘留的藥液,然后徐徐抽出胃管。用完的胃管放在煤酚皂溶液中浸泡消毒、備用。7注意事項(1)插入或抽動胃管時要小心、緩慢,不宜粗暴。(2)當病畜呼吸極度困難,或有鼻炎、咽炎、喉炎、高溫時,禁用胃管給藥。(3)當證實胃管插入食道深部后,方可進行投藥。如投藥后引起咳嗽、氣喘,應立即停止。(4)藥物誤投入肺的表現(xiàn)及其搶救措施(四
11、)皮下注射法:將藥物注射于皮下組織內(nèi),經(jīng)毛細血管、淋巴管吸收,一般經(jīng)5-10分鐘呈現(xiàn)效果。凡是易溶解無強烈刺激性的藥品及菌苗、疫苗等均可作皮下注射。1部位:牛在頸側或肩胛后方的胸側。2方法:局部剪毛消毒后,用左手的拇指和中指捏起皮膚,食指壓其頂點,使其形成三角凹窩。右手持注射器,迅速將什頭刺入凹窩中心的皮膚內(nèi),深2厘米左右。放開皮膚,抽動活塞不見回血時,注入藥液。藥液多時,應分點注射。注射完畢拔出針頭,局部涂以碘酊。(五)肌肉注射法:肌肉內(nèi)血管豐富,注射后藥液吸收較快,僅次于靜脈注射;又因感覺神經(jīng)比皮下少故引起疼痛較輕,臨床上應用較多。1部位:臀部和頸側。2方法:剪毛消毒后,將針頭先刺入肌肉內(nèi)
12、,再接連吸好藥液的注射器,抽拔活塞確認無回血后,注入藥液。先接好針頭一次操作也可。注射時,不要將針頭全刺入肌肉內(nèi),以免折斷時不易取出。精選(六)靜脈注射法:將藥液直接注于靜脈管內(nèi),隨著血流很快分布到全身,奏效迅速,但排除較快,作用時間短。1部位:在頸靜脈溝上1/3與中1/3交界處進行頸靜脈注射。2方法:剪毛消毒后,以左手指壓在頸靜脈溝下1/3處,在上方靜脈怒張后,用16#垂直刺入上1/3與中1/3交界處靜脈,見到回血后,將針頭順血管走向推進1厘米,將藥液徐徐注入。注射完畢,左手拿酒精棉球壓緊針孔,右手迅速拔出針頭。為了防止針孔溢血,繼續(xù)緊壓局部片刻,最后涂以碘酊。(七)瘤胃穿刺法:可作為急性瘤
13、胃膨脹時的一種急救措施,以免造成窒息或瘤胃破裂。有時為采取瘤胃內(nèi)容物,或向瘤胃內(nèi)注藥,也需實施本手術。1部位:在左朕窩部,由雕結節(jié)、腰椎橫突和最后肋骨三者之間所構成的等距離點處。當瘤胃膨脹時,取其膨脹部頂點。2方法:剪毛消毒后,先切1厘米長的皮膚切口,將套管針對準右側肘頭,迅速刺入深約10-20厘米。用酒精棉球圍繞并固定套管,抽出內(nèi)針,以紗布塊堵住管口進行間歇放氣。套管針堵塞時,可插入內(nèi)針疏通或稍擺動套管。排氣后可向瘤胃內(nèi)注入防腐止酵劑。完畢插入內(nèi)針,用力壓迫腹壁、慢慢拔針、切口涂碘酊,并用火棉膠覆蓋。緊急情況下,無套管針時,可就地取材,切開皮膚后用竹管、放血針頭等迅速穿刺排氣,先救命后再采取
14、抗感染措施。七、思考題1牛頸靜脈注射的操作要點是什么?2胃管投藥時,如何判斷胃管進入食道?八、實驗報告要求學生作好實驗預習、實驗記錄和實驗報告。在正式實驗前先作實驗預習,并以書面形式交于實驗指導老師,檢查可行后方能作正式實驗。實驗過程中對實驗相關內(nèi)容及步驟作詳細記錄。實驗完畢后填寫實驗報告,交由指導教師批閱。精選實驗三:一般檢查實驗學時:2實驗類型:操作實驗要求:必修一、實驗目的通過本實驗的學習,使學生熟練掌握般檢查的內(nèi)容和方法,為判斷病情的大體情況和進一步檢查奠定基礎。二、實驗內(nèi)容整體狀態(tài)觀察;皮膚和被毛檢查;可視粘檢查;淺在淋巴結檢查;T、P、R檢查。三、實驗原理、方法和手段本實驗為操作性
15、實驗,方法及手段詳見實驗步驟。四、實驗組織運行要求根據(jù)本實驗的特點、要求和具體條件,采用以學生自主訓練為主的開放模式組織教學。五、實驗條件診療室、黃牛兩頭、保定繩、體溫計、聽診器等。六、實驗步驟(以黃牛為例)(一)整體狀態(tài)觀察1精神狀態(tài):觀察病畜神態(tài)、根據(jù)其耳的活動,眼的表情及各種反應、舉動而判斷。分為抑制狀態(tài)和興奮狀態(tài)。2營養(yǎng):根據(jù)肌肉的豐滿度、皮下脂肪的蓄積量及被毛的情況而定。分為營養(yǎng)良好和營養(yǎng)不良。3發(fā)育:根據(jù)骨骼發(fā)育程度及軀體大小而定。如體長、體高、體重、胸圍、管圍等。4軀體結構:注意頭、頸、軀干、四肢及關節(jié)的形態(tài)和比例。5姿勢(二)被毛和皮膚檢查1鼻鏡:健康牛鼻鏡有少許水珠,觸之有涼
16、感。病理情況常為干燥、增溫和龜裂等。示熱性病和前胃疾病。治療過程由干轉濕,為病情好轉征兆。2被毛:清潔、光澤及脫落情況。精選3皮膚顏色:主要檢查白色皮膚的動物。4皮膚溫度:正常時牛鼻鏡冰涼、角根有溫感。分為全身性皮溫升高、局限性皮溫升高、全身性皮溫降低、局限性皮溫降低(該部水腫或外周神經(jīng)麻痹)。5皮膚濕度:通過視診和觸診。6皮膚彈性:牛有最后肋骨后部。7皮下組織:浮腫、氣腫、血腫、膿腫、淋巴外滲、疝、腫瘤。(三)可視粘膜檢查(以眼結合膜為例)檢查有無腫脹、外傷、分泌物及顏色。檢查鞏膜可扭轉牛頭,檢查結膜則大拇指撥開下眼瞼。水牛較深,黃牛較淺。(四)淺在淋巴結檢查頜下、肩前淋、膝裘及乳房上淋巴結
17、等。(五)體溫檢查:直腸溫。黃牛體溫范圍:37.539.5°C。(六)呼吸數(shù)檢查:黃牛1025次/次。(七)脈搏數(shù)檢查:檢查尾動脈,距尾根10厘米腹面。黃牛4080次/分。七、思考題病理情況下眼結膜檢查有哪些顏色變化?八、實驗報告要求學生作好實驗預習、實驗記錄和實驗報告。在正式實驗前先作實驗預習,并以書面形式交于實驗指導老師,檢查可行后方能作正式實驗。實驗過程中對實驗相關內(nèi)容及步驟作詳細記錄。實驗完畢后填寫實驗報告,交由指導教師批閱。精選實驗四:循環(huán)系統(tǒng)檢查實驗學時:2實驗類型:操作、驗證實驗要求:必修一、實驗目的通過本實驗的學習,使學生熟練掌握心血管系統(tǒng)檢查的內(nèi)容及方法,為心血管系
18、統(tǒng)疾病及全身疾病的檢查奠定基礎。二、實驗內(nèi)容心搏動視診和觸診;心臟叩診;心臟聽診;血管檢查。三、實驗原理、方法和手段本實驗為操作性和驗證性實驗,方法及手段詳見實驗步驟。四、實驗組織運行要求根據(jù)本實驗的特點、要求和具體條件,采用以學生自主訓練為主的開放模式組織教學。五、實驗條件診療室、黃牛兩頭、保定繩、聽診器等。六、實驗步驟(以黃牛為例)(一)心搏動視診和觸診1黃牛站立保定,左前肢前跨,充分露心區(qū)。2檢查者于黃牛左側,觀察左側肘后心區(qū)被毛及胸壁振動情況。3觸診時用右手搭于髻甲部,左手貼于左肘后方心區(qū)。(二)心臟叩診1黃牛站立保定,左前肢前跨,充分露心區(qū)。2肩胛骨垂直向下至心區(qū)進行叩診,標記清濁音
19、過渡點;往后上45度叩診,同樣標記清濁音區(qū)過渡點,兩點弧線連接,即為心濁音區(qū)后上界。(三)心臟聽診1黃牛站立保定,左前肢前跨,充分露心區(qū)。2左第四、第三肋間,右第四肋骨。黃牛心音較馬清晰,水牛心音模糊,犬心音清亮。3聽心率、強度、分裂、雜音及心率不齊等。精選(四)動脈血管檢查。牛為尾動脈。(五)靜脈血管檢查(以牛頸靜脈為例)。頸靜脈波動超過下三分之一時,多為病態(tài)。有陽性、陰性和偽性之分。七、思考題心臟異常聽診音有哪些?頸靜脈波動有哪幾種?八、實驗報告要求學生作好實驗預習、實驗記錄和實驗報告。在正式實驗前先作實驗預習,并以書面形式交于實驗指導老師,檢查可行后方能作正式實驗。實驗過程中對實驗相關內(nèi)
20、容及步驟作詳細記錄。實驗完畢后填寫實驗報告,交由指導教師批閱。精選實驗五:呼吸系統(tǒng)檢查實驗學時:2實驗類型:操作、驗證實驗要求:必修一、實驗目的通過本實驗的學習,使學生熟練掌握呼吸系統(tǒng)檢查的內(nèi)容及方法,為呼吸系統(tǒng)疾病及全身疾病的檢查奠定基礎。二、實驗內(nèi)容呼吸次數(shù)、呼吸式、上呼吸道、鼻液、咳嗽及胸廓檢查等。三、實驗原理、方法和手段本實驗為操作性和驗證性實驗,方法及手段詳見實驗步驟。四、實驗組織運行要求根據(jù)本實驗的特點、要求和具體條件,采用以學生自主訓練為主的開放模式組織教學。五、實驗條件診療室、黃牛兩頭、保定繩、叩診槌及叩診板、聽診器等。六、實驗步驟(以黃牛為例)(一)呼吸次數(shù)的測定:在一般檢查
21、已講。(二)呼吸式觀察:健康者通常呈胸腹式呼吸,深度、間隔時間均勻。病情況為胸式呼吸和腹式呼吸。(三)鼻液檢查:為呼吸道及肺臟病理性產(chǎn)物(健康水牛除外)。檢查其是否為單側或雙側、數(shù)量、性質(zhì)及混雜物。(四)咳嗽檢查:聽取咳嗽聲音、性質(zhì)及咳嗽反應。人工誘咳法:站立,一手置于其髻甲部,另手握住擠壓喉頭及第一、二氣管環(huán)。也可用捂鼻法。正??梢鹨恢炼暱人?,如呈頻繁咳嗽,常為喉、氣管的敏感反應。(五)胸部視診、觸診和叩診1視診:觀察胸廓外形,對稱性及局部變化。2觸診:通過觸摸,判斷胸壁敏感性、有無浮腫、氣腫,以及肋骨有無變形或骨折。3叩診:用槌板叩診法。由前往后,由上而下,每隔3-4厘米叩診。叩診區(qū)后
22、下界為雕結節(jié)精選水平線與第11肋骨交點及肩關節(jié)水平線與第8肋骨交點的圓弧連線,終于第4肋。前界為肩胛骨后角向下所著垂線。上界為肩胛骨后角引向骼結節(jié)的連線與第11肋的線段。(六)胸部聽診。用聽診器,在上述肺區(qū)每隔3-4厘米聽診。聽不清晰,可作運動或捂鼻放開后聽診。牛較強,可聽到“夫夫”音。有時可聽到羅音、胸膜摩擦音(吸氣末和呼氣初,示纖維素性胸膜炎。)。七、思考題胸部異常呼吸音有哪些?鼻液和咳嗽檢查包括哪些內(nèi)容?八、實驗報告要求學生作好實驗預習、實驗記錄和實驗報告。在正式實驗前先作實驗預習,并以書面形式交于實驗指導老師,檢查可行后方能作正式實驗。實驗過程中對實驗相關內(nèi)容及步驟作詳細記錄。實驗完畢
23、后填寫實驗報告,交由指導教師批閱。精選實驗六:消化系統(tǒng)檢查實驗學時:2實驗類型:操作、驗證實驗要求:必修一、實驗目的通過本實驗的學習,使學生熟練掌握消化系統(tǒng)檢查的內(nèi)容及方法,為消化系統(tǒng)疾病及全身疾病的檢查奠定基礎。二、實驗內(nèi)容飲食欲、口腔、咽、食管、腹部、直腸、排糞動物、糞便檢查等。三、實驗原理、方法和手段本實驗為操作性和驗證性實驗,方法及手段詳見實驗步驟。四、實驗組織運行要求根據(jù)本實驗的特點、要求和具體條件,采用以學生自主訓練為主的開放模式組織教學。五、實驗條件診療室、黃牛兩頭、保定繩、叩診槌及叩診板、聽診器等。六、實驗步驟(以黃牛為例)(一)采食狀況檢查1采食和飲水。牛用舌卷食草飼料。2反
24、芻和曖氣。時間、次數(shù)。采食后一小日至半小時反芻,每次反芻持續(xù)20-60分鐘,每個食團再咀嚼40-60次,每晝夜4-8次。每小時曖氣15-30次。3嘔吐。牛少嘔吐,嘔吐則不安、呻吟,腹肌劇烈收縮。(二)口腔檢查。檢查者握捏牛鼻及中隔,強行上提,另手從口角伸入拉出舌頭。濕度、溫度、顏色、舌苔、完整性及牙齒情況。(三)咽的檢查。主要通過視診和觸診。結核、腮腺炎和放射線菌。(四)食管檢查。主要通過視診和觸診。(五)腹部視診、觸診和叩診1大小、形狀;敏感性及緊張度。2瘤胃檢查。上部叩診呈曦音,觸診呈面團樣硬度,聽診隨每次蠕動波可出現(xiàn)逐漸增強后又精選3厘米范圍。逐漸減弱的沙沙音、吹風樣或遠雷音,第分鐘2-
25、3次。3瓣胃檢查。右側第7-9肋間肩關節(jié)水平線水平線上下4真胃及腸管。真胃在右側第9-11肋間、沿肋弓下。真胃如腸音,似流水聲或含嗽音。腸音短而稀少。(六)肝臟。右側肋弓下深部觸診。(七)排糞動作及糞便檢查(八)直腸檢查七、思考題直腸檢查的適應癥是什么?排糞動作及糞便的感觀檢查包括哪些內(nèi)容?八、實驗報告要求學生作好實驗預習、實驗記錄和實驗報告。在正式實驗前先作實驗預習,并以書面形式交于實驗指導老師,檢查可行后方能作正式實驗。實驗過程中對實驗相關內(nèi)容及步驟作詳細記錄。實驗完畢后填寫實驗報告,交由指導教師批閱。精選實驗七:血液的采集、抗凝及血常規(guī)檢查實驗學時:2實驗類型:綜合實驗要求:必修一、實驗
26、目的通過本實驗的學習,使學生了解血常規(guī)檢查的內(nèi)容及方法,為全身疾病的檢查奠定基礎。二、實驗內(nèi)容血液采集、抗凝、血常規(guī)檢查檢查。三、實驗原理、方法和手段本實驗為綜合性實驗,原理、方法及手段詳見實驗步驟。四、實驗組織運行要求根據(jù)本實驗的特點、要求和具體條件,采用以學生自主訓練為主的開放模式組織教學。五、實驗條件1實驗動物:牛、豬、犬不限。2實驗藥品:5%典酊、75刷精、抗凝劑及相關藥劑。3實驗器械:繃帶、采血針、藥棉、計數(shù)器、血細胞自動分析儀等。六、實驗步驟(一)血液采集。裝在小試管或帶橡皮塞的抗生素小瓶中。若分離血清,則不必加抗凝劑。(二)血液抗凝1EDTA二鈉。奪取血游離鈣豐螯合物而起抗凝作用
27、。配成10%§液,第2滴可對5毫升血液起抗作用。對血細胞形態(tài)影響小,可防止血小板聚集,在室溫下數(shù)小時內(nèi),對血紅蛋白、血小板讀數(shù)計數(shù)及血片染色均無不良影響。2草酸鉀。奪取血游離鈣形成不溶解的草酸鈣而起抗凝作用。配成10稀液,取0.1毫升于試管中烘干,可抗凝5毫升血液。優(yōu)點是抗凝作用強,缺點是能使紅細胞體積縮小6%故不宜于PCV1定。3雙草酸鹽合劑。草酸鉀0.8克,草酸鏤1.2克,加蒸儲水至100毫升,取此液0.5毫升于試管烘干,可抗凝5毫升血液。草酸鏤可使紅細胞腫脹,抵消草酸鉀缺點。4檸檬酸鈉:與血游離鈣結合成松散檸檬酸鈣。配成3.8%溶液,取此液0.5毫升可抗凝5毫精選升血液.用于血
28、沉及輸血時的抗凝劑,不宜于血液化學檢查。5肝素??鼓饔?。配成1%溶液,取此液0.1毫升可抗凝5毫升血液。不宜作纖維蛋白原的測定。(三)血沉測定。紅細胞沉降速度或稱血沉,是指將抗凝血裝入特制玻璃管中,在一定時間內(nèi),觀察下降的毫米數(shù)。1原理:紅細胞表面、白蛋白帶負電荷,球蛋白、纖維蛋白帶正電荷。電荷多少對血沉起著主要起決定作用。2方法:有魏氏法、涅氏法、溫氏法、潘氏法、傾斜法和微量等。獸醫(yī)臨床常用魏氏法、涅氏法。報告宜標明是哪種方法。(1)魏氏法。魏氏管200刻度,全長30厘米,帶刻度處20厘米。3.8%檸檬酸溶液1毫升與4毫升血液混合。吸上述抗凝血至血沉管,到0刻度為準。室溫靜置在15、30
29、、45和60分四個時段觀察紅細胞沉降毫米數(shù)。(2)涅氏法。涅氏管加10%EDTA嫡,再加血至0刻度處,混合。室溫靜置,于15、30、45和60分四個時段觀察紅細胞沉降數(shù)值。3意義。(1)血沉加快。貧血、發(fā)熱病、感染性疾病、化膿、組織損傷、白蛋白丟失、風濕。(2)血沉減慢。脫水。(四)紅細胞壓積(packedcellvolume)測定。1溫氏管,長110mm分為10個大刻度,100個小刻度;長15cm充液長針頭;水平電動離心機。2用充液長針取10%EDT啦凝血于溫氏管10刻度,以3000rpm離心30分鐘。3讀取紅細胞柱高度。一般值在30%-40炊間。(五)血紅蛋白(hemoglobin)測定1
30、沙利氏比色法。(1)原理。血液與鹽酸作用后,變?yōu)楹稚母哞F血紅蛋白,與標準色柱相比,求出每百毫升血中蛋白克數(shù)。(2)器材和試劑。沙利氏血蛋白計,0.1mol/L或1%鹽酸。(3)方法。在沙氏比色管加0.1mol/L或1%鹽酸至刻度10或20處。用沙氏吸管吸血至20精選刻度處,加到鹽酸液,反復沖洗混勻,靜置10分鐘,緩緩加入蒸儲水,直至與標準色柱相同為止。液體凹面讀數(shù),即為血紅蛋白克數(shù)。一般100毫升血液含9-12克血紅蛋白。2光電比色法。3試紙法。(六)紅細胞計數(shù)1原理。血液按倍比稀釋,計數(shù)一定容積內(nèi)紅細胞數(shù)并換算成每微升或立方毫米內(nèi)的數(shù)目。計數(shù)板也可用于白細胞和血小板計數(shù)。兩個計數(shù)室,每個計
31、數(shù)室9個大方格,大方格邊長1mm四角大方格又分為16個中方格,用白細胞計數(shù)。中央大方格用于紅細胞計數(shù),由25個中方格組成,每個中方格又由16個小方格組成。計對角線5個中方格即80個方格內(nèi)紅細胞即可(或東西南北中五個中方格)。2器材及試劑。計數(shù)板、血蓋片、沙利氏吸血管或紅細胞稀釋管、生理鹽水或赫姆氏液。3方法。(1)試管稀釋法。5ml吸管吸取紅細胞稀釋液3.98ml于試管。沙氏吸血管吸取全血樣品至20刻度處,與上述稀釋液混勻,再用毛細吸管吸取放于計數(shù)板計數(shù)。(2)紅細胞吸管稀釋法。紅細胞吸管吸全血至刻度0.5處,再吸稀釋液至刻度101處,食、拇指堵住上下端,混勻后先棄數(shù)滴,靜置幾分鐘后計數(shù)。(3
32、)先低倍鏡,后高倍鏡,數(shù)左不數(shù)右,數(shù)上不數(shù)下。五個中方格,一個中方格含16個小方格,共計80個小方格。(4)呈圓形、淡黃色、發(fā)亮。(5)每立方毫米紅細胞數(shù)公式:5X.200.10=10000X(七)白細胞計數(shù)1原理。一定量的血液用冰醋酸稀釋后,可將紅細胞破壞,然后在計數(shù)室內(nèi)計數(shù)一定容積的白細胞數(shù),再推算出每毫升血液內(nèi)的白細胞數(shù)。2器材和試劑。血細胞計數(shù)板,沙利氏吸血管,0.5或1ml刻度吸管,小試管,顯微鏡,白細胞稀釋液等。3方法(1)試管稀釋法:1ml吸管吸取白細胞稀釋液0.38ml于試管。沙氏吸血管吸取全血樣品至20刻度處,與上述稀釋液混勻,再用毛細吸管吸取放于計數(shù)板計數(shù)。(2)白細胞吸管
33、稀釋法:白細胞吸管吸全血至刻度0.5處,再吸稀釋液至刻度11處,食、拇指堵住上的下端,混勻后先棄數(shù)滴,靜置幾分鐘后計數(shù)。精選(3)用低倍鏡計數(shù)四角大方格的白細胞,用公式計算每立方毫米的白細胞數(shù)。公為10.20.X4=50X(10為體積倍數(shù),20為稀釋倍數(shù),X4為每角白細胞數(shù))。4意義。(1)增多。大多細菌感染,組織急性炎癥,注射血清疫苗,大出血,急性溶血。(2)減少。病毒性感染,如豬瘟、流感、馬傳貧;再障、嚴重感染、高度衰竭、內(nèi)毒素性休克、應用氯霉素。(八)白細胞分類計數(shù)1血片制作。(1)潔凈脫脂兩玻片,一載一推。(2)耳尖血一滴于玻片一端。(3)推片于血滴前,向后輕拖血滴擴散,再向前30度推
34、成均勻血膜,自然干燥。2血片染色。(1)染液配制。瑞染粉0.1克,甲醇60毫升。(2)緩液配制。1%磷酸二氫鈉30.01%磷酸氫二鈉20.0蒸儲水加至1000.0(3)染色過程蠟筆血膜兩端劃線,放于支持架上。加染液1-2分鐘,再加緩沖液,3-5分鐘后,水或蒸儲水沖洗。自然干燥后鏡檢。3鏡檢計數(shù)。(1)先低倍后油鏡。按一定方向曲折移動分類計數(shù),總數(shù)不低于100個。(2)嗜堿性白細胞特點。圓形或橢圓形,胞漿中呈深紫色較小的顆粒。(3)嗜酸性白細胞特點。圓形或橢圓形,胞漿中有較大的呈鮮紅色的顆粒。(4)嗜中性白細胞特點。圓形或橢圓形,胞漿中有圓形或橢圓形,呈淡玫瑰色的小顆粒。根據(jù)細胞核形態(tài)分為髓細胞
35、、幼稚型、桿狀型和分葉型核細胞。(5)淋巴細胞特點。圓形,核呈深藍紫色、圓形、致密、常偏位。胞漿呈天藍色。(6)大單核細胞,大,呈不正、多邊、多角形,胞漿呈煙灰色、較暗,核呈紫褐色、近似橢圓或不正形。精選4臨床意義。白細胞數(shù)在生理或病理情況下均可發(fā)生改變,由于外周血中細胞的組成主要是中性粒細胞和淋巴細胞,尤其是中性粒細胞數(shù)量最多,約占白細胞的50%故在大多情況下,白細胞的增多或減少,主要受中性粒細胞的影響。因此,白細胞增多或減少通常與中性粒細胞的增多或減少有著密切關系和相同意義。各類白細胞變化的臨床意義分述如下。(1)中性粒細胞。各種粒細胞均起源于骨髓多能干細胞.粒細胞具有較強的運動能力、吞噬
36、活性和復雜的殺菌系統(tǒng),憑借其滲透性、變形性、趨化性及吞噬功能等生理特性而捕捉、殺滅組織中、體腔內(nèi)或血液中的病原體,對機體有重要的保護作用。當病原微生物侵入機體引起局部炎癥時,中性粒細胞通過變形運動,從血管內(nèi)皮細胞間游出,趨向炎癥區(qū),將入侵的病原體或壞死細胞吞噬,并通過細胞內(nèi)溶酶體釋放的蛋白水解酶將其消化,防止病原微生物在體內(nèi)的擴散。中性粒細胞增多。見于急性感染或炎癥,如化膿性胸膜炎、化膿性腹膜炎、創(chuàng)傷性心包炎、肺膿腫、胃腸炎、肺炎、子宮炎、乳房炎等,某些傳染病如炭疸、豬丹毒等,某些慢性傳染病如鼻疽、結核,以及大手術后、外傷、酸中毒前期、燙傷等。核左移伴有白細胞總數(shù)增高,稱為再生性左移,表示機體
37、的反應性強,骨髓造血功能旺盛,能釋放大量粒細胞至外周血,常見于感染,尤其是化膿菌引起的急性感染,也可見于急性中毒、急性溶血、急性失血等。僅核左移對病性的嚴重程度和機體的反應能力的估計具有一定價值。如白細胞總數(shù)和中性粒細胞百分數(shù)略增高,并核左移,表示感染程度較輕、機體抵抗力強;但核左移而白細胞總數(shù)不增高,甚至減少者,稱為退行性左移。在再生障礙性貧血等病理狀態(tài)下,表示骨髓造血功能減低,粒細胞成熟受阻,嚴重感染如敗血癥時可出現(xiàn)這一現(xiàn)象,表示機體反應性低下,骨髓釋放粒細胞功能受抑制。核右移主要見于重度的貧血和應用抗代謝藥物治療后及感染的恢復期,但在疾病進展期出現(xiàn)中性粒細胞核右移變化,則提示預后不良。中
38、性粒細胞減少。白細胞總數(shù)減少時其主要是中性粒細胞減少,引起中性粒細胞減少的病因很多,主要見于病毒感染性疾病、再生障礙性貧血、缺鐵性貧血、骨髓轉移癌、放射線、放射性核素,化學藥品等均可引起。(2)嗜酸性粒細胞。嗜酸性粒細胞亦具有吞噬作用和變形運動,因細胞內(nèi)顆粒不含有溶菌酶、吞噬細胞素,而含較多的過氧化物酶和堿性蛋白,故殺菌力遠不如中性粒細胞。它能吞噬抗原抗體復合物。對組胺、抗原抗體復合物、肥大細胞釋放的嗜酸粒細胞趨化因子等多種物質(zhì)有趨化性,并分泌組胺酶滅活組胺,減輕某些過敏反應。當寄生蟲病或某些過敏癥時,組織中肥大細胞增多,血中組胺濃度升高,刺激骨髓釋放或生成嗜酸性粒細胞能力加強,導精選致血液中
39、嗜酸性粒細胞增多;若用腎上腺皮質(zhì)激素進行治療、過敏反應消失時,嗜酸性粒細胞也減少。嗜酸性粒細胞增多。主要見于變態(tài)反應性疾病(如過敏反應)、寄生蟲病(如肝片吸蟲、球蟲、旋毛蟲病等)、皮膚病(如濕疹、疥癬等)以及注射血清之后和某些惡性腫瘤等。嗜酸性粒細胞減少。見于毒血癥、尿毒癥、嚴重創(chuàng)傷、中毒、饑餓及過勞等。大手術后,嗜酸性粒細胞常常消失,幾天后又常常急劇增多,臨床癥狀也見好轉。在長期應用腎上腺皮質(zhì)激素后也可出現(xiàn)嗜酸性粒細胞減少。(3)嗜堿性粒細胞是一種少見的粒細胞,其生理功能中突出的特點是參與超敏反應。嗜堿性粒細胞的增多與減少,此種情況比較少見,在外周血中本來不易見到,故其減少無臨床意義。(4)
40、淋巴細胞源于骨髓適血干細胞,其數(shù)量較多,約占白細胞總數(shù)的四分之一。淋巴細胞不是一種終未細胞,而是一種不活躍的處于靜止期的細胞。它具有與抗原起特異反應的能力,是重要的免疫活性細胞。淋巴細胞因發(fā)育和成熟途徑不同,可分為胸腺依賴淋巴細胞和骨髓依賴細胞兩種類型,即T淋巴細胞和B淋巴細胞,它們之間又有效應細胞和記憶細胞之分。淋巴細胞增多。見于某些感染性疾病,主要是病毒感染如豬瘟、流行性感冒,也可見于某些細菌感染如結核桿菌、布氏桿菌以及血抱子蟲病等。淋巴細胞減少。當嗜中性白細胞絕對值增多,伴隨減少的常常是淋巴細胞,說明機體與病原處于激烈斗爭階段,以后淋巴細胞由少逐漸增多,常為預后良好的象征。(5)單核細胞
41、。誘導免疫反應。通過吞飲或吞噬可溶性抗原和顆粒性抗原,在溶體酶的作用下將抗原分解,然后通過遞質(zhì)、將抗原提供給淋巴細胞,以激活淋巴細胞在特異性免疫中起重要作用。吞噬和殺滅某些病原體。吞噬紅細胞和消除損傷組織及死亡的細胞。主要處理衰老的或異常的紅細胞以及清理炎癥反應場所。抗腫瘤活性。實驗證明激活的巨噬細胞在體外對腫瘤細胞的生長有抑制作用,也有殺滅腫瘤細胞的能力。對白細胞生成的調(diào)節(jié)。單核細胞和吞噬細胞可產(chǎn)生集落刺激因子,在單核細胞和中性粒細胞生成中可能起反饋性調(diào)節(jié)作用。單核細胞增多,見于某些原蟲性疾病如焦蟲病、錐蟲病,某些慢性細菌性疾病如結核、布氏桿菌病以及某些病毒性疾病如馬傳染性貧血等。精選單核細胞減少,主要見于急性傳染病的初期和各種疫病的垂危期。七、思考題紅細胞常規(guī)檢查包括哪些內(nèi)容?八、實
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