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文檔簡介
1、實驗三實驗三 細胞形態(tài)多樣性及細胞計數(shù)細胞形態(tài)多樣性及細胞計數(shù) 一一. . 實驗原理實驗原理 應(yīng)用顯微鏡的成像原理,并借助血細胞計數(shù)板,計算單位體積的細胞應(yīng)用顯微鏡的成像原理,并借助血細胞計數(shù)板,計算單位體積的細胞或微小生物的數(shù)量。或微小生物的數(shù)量。二二. .試劑與器械試劑與器械 器材器材 : :光學(xué)顯微鏡、血細胞計數(shù)板。光學(xué)顯微鏡、血細胞計數(shù)板。三實驗步驟三實驗步驟取血細胞計數(shù)板,加蓋玻片蓋住兩邊的小槽。取血細胞計數(shù)板,加蓋玻片蓋住兩邊的小槽。充液:用小滴管將一小滴稀釋血液滴在蓋玻片邊緣的玻片上,使稀充液:用小滴管將一小滴稀釋血液滴在蓋玻片邊緣的玻片上,使稀釋血液借毛細管現(xiàn)象自動滲透入計數(shù)室
2、中。如滴入過多,溢出并流釋血液借毛細管現(xiàn)象自動滲透入計數(shù)室中。如滴入過多,溢出并流入兩側(cè)槽內(nèi),使蓋玻片浮起,體積改變,會影響計數(shù)結(jié)果,需用濾入兩側(cè)槽內(nèi),使蓋玻片浮起,體積改變,會影響計數(shù)結(jié)果,需用濾紙把多余的溶液吸出,以槽內(nèi)沒有溶液為宜。如滴入溶液過少,經(jīng)紙把多余的溶液吸出,以槽內(nèi)沒有溶液為宜。如滴入溶液過少,經(jīng)多次充液,易產(chǎn)生氣泡,應(yīng)洗凈計數(shù)室,干燥后重做多次充液,易產(chǎn)生氣泡,應(yīng)洗凈計數(shù)室,干燥后重做。1.1. 計數(shù):充液后靜止計數(shù):充液后靜止1-21-2分鐘,待紅細胞下沉后,方可進行計數(shù)。計數(shù)分鐘,待紅細胞下沉后,方可進行計數(shù)。計數(shù)四角及中央共四角及中央共5 5個中方格內(nèi)的個中方格內(nèi)的20
3、20個小方格中所有紅細胞數(shù),計數(shù)時為個小方格中所有紅細胞數(shù),計數(shù)時為了防止重復(fù)和遺漏,應(yīng)按一定的順序,先自左向右數(shù)到最后一格,了防止重復(fù)和遺漏,應(yīng)按一定的順序,先自左向右數(shù)到最后一格,下一行格子則自右向左,再下一行又自左向右,即呈下一行格子則自右向左,再下一行又自左向右,即呈S S形計數(shù)。對于形計數(shù)。對于分布在刻線上的紅細胞,依照分布在刻線上的紅細胞,依照“數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右數(shù)上不數(shù)下,數(shù)左不數(shù)右“的原則的原則進行計數(shù)。計數(shù)時,如發(fā)現(xiàn)各中方格的紅細胞數(shù)目相差進行計數(shù)。計數(shù)時,如發(fā)現(xiàn)各中方格的紅細胞數(shù)目相差2020個以上,個以上,表示血細胞分布不均勻,必須重新計數(shù)。表示血細胞分布不均勻,必須重新計數(shù)。4. 4. 求出細胞分布平均數(shù)求出細胞分布平均數(shù)= d= d0 0 + d + d1 1+d+d1010 / 20 / 20 細胞密度細胞密度 = =細胞分布平均數(shù)細胞分布平均數(shù)稀釋倍數(shù)稀釋倍數(shù)4000/mm4000/mm3 3四四. . 注意事項注意事項 防止液體滴入過多,否則溢出并流入兩側(cè)槽內(nèi),會使蓋防止液體滴入過多,否則溢出并流入兩側(cè)槽內(nèi),會使蓋玻片浮起,體積改變,會影響計數(shù)結(jié)果玻片浮起,體積改變,會影響計數(shù)結(jié)果。五五. . 實驗結(jié)果實驗結(jié)果 細胞密度應(yīng)在細胞密度應(yīng)在10107 7左右。左右。六六. . 思考題思考題 1.1.計算每立方毫米兔血中紅細胞的數(shù)
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