潔凈區(qū)間空氣消毒效果及周期驗證

1、目錄1概述12驗證目的13驗證范圍14驗證方案制定的依據(jù)15驗證人員職責(zé)分工16驗證儀器設(shè)備26.1 驗證所需儀器設(shè)備儀表26.2 儀器儀表校驗記錄確認(rèn)27驗證材料27.1 材料的選取27.2 材料的用量27.3 材料的主要用途27.4 材料的確認(rèn)28驗證方法28.1 熏蒸消毒方法28.2 熏蒸參數(shù)38.3 熏蒸時間周期38.4 生物指示劑試驗方法38.5 物體表面菌試驗方法48.6 沉降菌試驗方法49驗證環(huán)境49.1 無菌實驗室檢測環(huán)境確認(rèn)49.2 潔凈車間環(huán)境確認(rèn)59.3 潔凈車間的清潔510驗證檢測510.1 生物指示劑檢測510.2 物體表面菌檢測510.3 沉降菌檢測510.4 驗證

2、標(biāo)準(zhǔn)611驗證結(jié)果的綜合評價612再驗證周期6目錄附件1人員資格確認(rèn)表附件2計量器具確認(rèn)記錄附件3潔凈車間空氣消毒劑的確認(rèn)記錄附件4潔凈車間空氣消毒劑的確認(rèn)記錄附件5潔凈車間熏蒸消毒方法確認(rèn)記錄附件6消毒試驗方法確認(rèn)記錄附件7檢測環(huán)境確認(rèn)報告附件8生物指示劑檢測記錄附件9潔凈車間消毒后物體表面菌檢測記錄附件10潔凈室消毒30天后物體表面菌檢測記錄附件11潔凈車間消毒后沉降菌檢測記錄附件12潔凈車間消毒后30天沉降菌檢測記錄附件13驗證結(jié)果附件14驗證結(jié)果分析及評價附件15驗證結(jié)論附件16驗證報告附件17驗證證書I8天臺縣雙星醫(yī)療器械廠編號SX/YZ6.4-06潔凈室（區(qū)）空氣消毒效果及周期再驗

3、證版本2013驗證方策頁數(shù)第1頁共6頁1概述甲醛是常用的消毒劑，其35%勺水溶液或乙醇溶液能破壞細(xì)菌繁殖體及許多芽抱、真菌和病毒，使其蛋白質(zhì)、酶類變性。甲醛熏蒸消毒法是潔凈廠房消毒滅菌的常用方法，當(dāng)相對濕度在65姒上、溫度在2440c時，甲醛的消毒效果最好。每立方米空間用3440刈醛液10ml,加熱熏蒸，密閉一定時間后，通風(fēng)，置換室內(nèi)空氣中的甲醛。2驗證目的為確認(rèn)熏蒸消毒法能夠?qū)崈羰遥▍^(qū)）空氣進(jìn)行有效的消毒，選擇最安全合理的熏蒸時間和空氣消毒周期，制定特制訂本驗證方案，進(jìn)行驗證。3驗證范圍適用于本廠潔凈室（區(qū)）的空氣消毒效果及周期的驗證。4驗證方案制定的依據(jù)GB15980-1995一次性使用

4、醫(yī)療用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)YY0033-200O無菌醫(yī)療器具生產(chǎn)管理規(guī)范GBT16294-2010醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法5驗證人員職責(zé)分工小組職務(wù)崗位職責(zé)組長質(zhì)管科長1 .負(fù)責(zé)驗證方案的審批。2 .負(fù)責(zé)驗證的協(xié)調(diào)工作，以保證本驗證方案規(guī)定項目的順利實施。3 .負(fù)責(zé)驗證數(shù)據(jù)及結(jié)果的審核。4 .負(fù)責(zé)驗證報告的審批。5 .負(fù)責(zé)發(fā)放驗證證書。6 .負(fù)責(zé)再驗證周期的確認(rèn)。組員生技科長1 .負(fù)責(zé)潔凈廠房的清潔。2 .負(fù)責(zé)熏蒸消毒前物料的轉(zhuǎn)移或密封。3 .負(fù)責(zé)熏蒸消毒的實施。4 .負(fù)責(zé)驗證所需儀器。組員辦公室1.負(fù)貝對人貝資質(zhì)的確認(rèn)。組員專職檢驗員1 .負(fù)責(zé)驗證所需的試劑、試液等的準(zhǔn)備。2 .負(fù)責(zé)儀器、

5、儀表、量具等的校正。3 .負(fù)責(zé)取樣及樣品的檢驗。4 .負(fù)責(zé)擬訂再驗證周期。確認(rèn)結(jié)果記錄于附錄1人員資格確認(rèn)記錄j2也I6天臺縣雙星醫(yī)療器械廠編號SX/YZ6.4-06潔凈室（區(qū)）空氣消毒效果及周期再驗證版本2013驗證方策頁數(shù)第2頁共6頁6驗證儀器設(shè)備6.1 驗證所需儀器設(shè)備儀表溫控儀（干燥箱）SX-JQ-007溫控儀（細(xì)菌培養(yǎng)箱）SX-JQ-009電子天平SX-JS-001手提式壓力蒸汽滅菌器（壓力表）SX-JQ-004塵埃粒子計數(shù)器SX-JS-011溫濕度表SX-JQ-010溫濕度表SX-JQ-012微壓表SX-JQ-0276.2 儀器儀表校驗記錄確認(rèn)。確認(rèn)結(jié)果記錄于附錄2計量器具確認(rèn)記錄

6、7驗證材料7.1 消毒材料的選取熏蒸材料選取：甲醛溶液與高鈕酸鉀生物指示劑挑戰(zhàn)性試驗：黑色枯草變種芽抱桿菌7.2 材料的用量：甲醛（40%10毫升/立方米、高鈕酸鉀5克/立方米計算用量生物指示劑：注擠吹車間、中轉(zhuǎn)庫、組裝車間遠(yuǎn)離風(fēng)口處各兩組。7.3 材料的主要用途：甲醛（40%:對細(xì)菌、病毒、霉菌、芽抱有強(qiáng)大的殺滅作用。生物指示劑：驗證對耐受菌種的殺滅作用。7.4 材料的確認(rèn)：應(yīng)對消毒品種的合格供方、產(chǎn)品牌號等進(jìn)行確認(rèn)，見附件3潔凈車間消毒劑確認(rèn)記錄。8驗證方法8.1 熏蒸消毒方法1 .根據(jù)潔凈區(qū)待消毒區(qū)域的空間容積，計算消毒劑用量并準(zhǔn)確稱量。2 .關(guān)閉潔凈室與外界聯(lián)系的全部門和傳遞窗，并確認(rèn)

7、潔凈室調(diào)配室人員全部撤離，停止空氣凈化系統(tǒng)運(yùn)轉(zhuǎn)。22I8天臺縣雙星醫(yī)療器械廠編號SX/YZ6.4-06潔凈室（區(qū)）空氣消毒效果及周期再驗證版本2013驗證方策頁數(shù)第3頁共6頁3 .熏蒸前對檢查潔凈室關(guān)鍵房間的溫濕度，應(yīng)達(dá)到甲醛消毒的最佳條件。4 .先將甲醛倒入容器中，后加入高鈕酸鉀，人立即離開。5 .對房間進(jìn)行熏蒸消毒。啟動空調(diào)機(jī)，使甲醛氣體循環(huán)約30分鐘，關(guān)閉空調(diào)機(jī)，熏蒸試驗時間為10小時。6 .啟動空調(diào)機(jī)，25%t水加入組合風(fēng)柜排風(fēng)口內(nèi)不銹鋼容器中，總用量為12.5L/次，打開送排風(fēng)系統(tǒng)排風(fēng)中和12小時。記錄見附件4潔凈車間熏蒸消毒方法確認(rèn)記錄。8.2熏蒸參數(shù)版本驗證參數(shù)2011版驗證20

8、13版再驗證熏蒸時間810小時810小時（選取10小時為例）消毒周期30天30天藥品計量甲醛（35%-40%15ml/m3高鈕酸鉀7.5g/m3甲醛（35%-40%15ml/m3高鈕酸鉀7.5g/m3枯草黑色變種芽抱生物指示劑七組（一組陽性對照）溫濕度相對濕度在65犯上、溫度在2440c相對濕度在65犯上、溫度在2440c8.3熏蒸時間與周期:本次再驗證選取熏蒸10小時并通風(fēng)12小時后；下個消毒周期30分鐘前的2種情況下進(jìn)行生物指示劑試驗（只做消毒后）、物體表面菌和沉降菌檢測，對消毒效果及周期進(jìn)行再驗證。8.4 生物指示劑試驗方法：在消毒前將枯草黑色變種芽胞生物指示劑放入注擠吹塑車間、中轉(zhuǎn)庫、

9、組裝車間遠(yuǎn)離風(fēng)口各兩處。在消毒結(jié)束，新風(fēng)循環(huán)12小時后，檢驗人員將菌片放入培養(yǎng)液中（培養(yǎng)液浸透菌片）。然后置37c48小時培養(yǎng)，另取一支未經(jīng)消毒的指示劑作陽性對照。8.5 物體表面菌試驗方法：J2也天臺縣雙星醫(yī)療器械廠編號SX/YZ6.4-06潔凈室（區(qū)）空氣消毒效果及周期再驗證版本2013驗證方策頁數(shù)第4頁共6頁在達(dá)到設(shè)定的熏蒸消毒時間（10小時），通風(fēng)12小時后分別對潔凈室（區(qū)）的各種表面進(jìn)行取樣、培養(yǎng)，檢測是否有菌生長。8.5.1 取樣點(diǎn)：分別包括設(shè)備、操作臺、墻壁、地面等的開放表面與死角、縫隙處。8.5.2 準(zhǔn)備：滅菌的生理鹽水、滅菌的1ml刻度吸管、滅菌的平皿及普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、無

10、菌的棉簽、試管、酒精燈。8.5.3 取樣方法：將內(nèi)徑為5cmx5cm的滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，用浸有滅菌生理鹽水的棉拭子，在規(guī)格板內(nèi)涂抹10次（往返計為1次），將棉拭子放入10mL滅菌生理鹽水的采樣管中。8.5.4 陰性對照的確認(rèn)將本次未用完的，稀釋液、棉拭子、培養(yǎng)基等分別設(shè)陰性對照，按規(guī)定方法進(jìn)行接種并培養(yǎng)。8.6 沉降菌試驗方法：在達(dá)到設(shè)定的熏蒸消毒時間（10小時），通風(fēng)12小時候?qū)⒅苽浜玫臓I養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平皿按潔凈室（區(qū)）沉降菌日常監(jiān)測布點(diǎn)圖放置，打開培養(yǎng)皿蓋，暴露30分鐘后，蓋好皿蓋倒置裝入密封裝置后轉(zhuǎn)至培養(yǎng)室，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，在3035c中培養(yǎng)48小時。8.6.1 準(zhǔn)

11、備：滅菌的平皿及普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、酒精燈、恒溫培養(yǎng)箱、高壓滅菌鍋。8.6.2 取樣方法測試方法采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)規(guī)定時間內(nèi)，在適宜的生長條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈室（區(qū)）的潔凈度是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求。8.7 試驗方法確認(rèn)對生物指示劑消毒方法、物體表面菌試驗方法、沉降菌試驗方法進(jìn)行確認(rèn)，見附錄5消毒試驗方法確認(rèn)記錄9驗證環(huán)境饕天臺縣雙星醫(yī)療器械廠編號SX/YZ6.4-06潔凈室（區(qū)）空氣消毒效果及周期再驗證版本2013驗證方策頁數(shù)第5頁共6頁9.1無菌實驗室檢測環(huán)境確認(rèn)檢查

12、并確認(rèn)無菌實驗室檢測環(huán)境應(yīng)符合YY0033-2000標(biāo)準(zhǔn)的相應(yīng)的潔凈要求。見附件6無菌實驗室檢測環(huán)境確認(rèn)記錄。9.2 潔凈車間環(huán)境確認(rèn)檢查并確認(rèn)潔凈車間環(huán)境應(yīng)符合YY0033-2000標(biāo)準(zhǔn)的相應(yīng)的潔凈要求。見附件見附件6無菌實驗室檢測環(huán)境確認(rèn)記錄。9.3 潔凈車間的清潔熏蒸消毒前，將凈化車間內(nèi)物料轉(zhuǎn)移或密封，進(jìn)行清潔，減少藥物對產(chǎn)品的污染，見附件6無菌實驗室檢測環(huán)境確認(rèn)記錄。10驗證檢測10.1 生物指示劑檢測：經(jīng)48小時培養(yǎng)后，若培養(yǎng)液變渾濁，顏色由紅色變黃判為陽性。培養(yǎng)液澄清，顏色不變?yōu)殛幮?，繼續(xù)培養(yǎng)至七天。見附錄7生物指示劑檢測記錄10.2 物體表面菌檢測：將每個采樣管振打80次，混勻，

13、10倍遞減稀釋，對每個稀釋度（取3個稀釋度），分別用滅菌的刻度吸管取1ml將浸出液放于滅菌的培養(yǎng)皿（每個稀釋度2個平皿），并注入20ml的40-45C的普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，待凝固后，在30-35C下倒置培養(yǎng)24小時，觀察結(jié)果，取菌落數(shù)為30-300的平板計算，求出平均菌落數(shù)。2平均菌數(shù)X稀釋倍數(shù)結(jié)果計算：菌數(shù)/cm=二2米樣面積（cm）見附錄8-1潔凈車間消毒后物體表面菌檢測記錄；8-2潔凈室消毒30天后物體表面菌檢測記錄。10.3沉降菌檢測：10.3.1 沉降菌測試前，被測試潔凈室（或潔凈區(qū)）溫、濕度須達(dá)到規(guī)定的要求，靜壓差、換氣次數(shù)、空氣流速必須控制在規(guī)定值內(nèi)。10.3.2 平皿進(jìn)入被測房

14、間前要先滅菌，采樣時使用規(guī)定為90m由15mn©養(yǎng)皿；由微生物檢測員按培養(yǎng)基配制的要求配制營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，培養(yǎng)基于121c濕熱滅菌30分鐘，冷卻j2也I6天臺縣雙星醫(yī)療器械廠編號SX/YZ6.4-06潔凈室（區(qū)）空氣消毒效果及周期再驗證版本2013驗證方策頁數(shù)第6頁共6頁至45c后灌注培養(yǎng)皿內(nèi)，培養(yǎng)24h觀察是否無菌；檢查每個培養(yǎng)皿的質(zhì)量，培養(yǎng)基及培養(yǎng)皿有變質(zhì)、破損或污染的不能使用，將帶培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿密封轉(zhuǎn)至監(jiān)測區(qū)域（密封裝置應(yīng)進(jìn)行消毒）。10.3.3 進(jìn)入潔凈室（區(qū)）監(jiān)測時，采樣者必須穿戴與被測潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，操作人員將制備好的營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基按采樣點(diǎn)布點(diǎn)（沉降菌采樣點(diǎn)分布圖）

15、位置離地0.81.5m處放置，打開培養(yǎng)皿蓋，暴露30分鐘，檢測人員及時填寫記錄，記錄房間溫濕度，壓差及測試狀10.3.4 蓋好皿蓋倒置裝入密封裝置后轉(zhuǎn)至培養(yǎng)室，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，在3035c中培養(yǎng)48小時，并用3只培養(yǎng)皿作對照。10.3.5 用肉眼直接觀察平皿計數(shù)，若平板上有2個或2個以上的菌落重疊，可分辨時仍以2個或2個以上菌落計數(shù)；由于細(xì)菌種類繁多，差別甚大，計數(shù)時一般用透射光于培養(yǎng)皿背面或下面仔細(xì)觀察，不要漏計培養(yǎng)皿邊緣生長的菌落，并須注意細(xì)菌菌落或培養(yǎng)基沉淀物的區(qū)別，必要時用顯微鏡鑒別。10.3.6 結(jié)果計算計算平均菌落數(shù)=（M1+M2+Mr）/n,式中M1:1號培養(yǎng)皿菌落數(shù)

16、，M22號培養(yǎng)皿菌落數(shù)，n：培養(yǎng)皿數(shù)。見附錄9-1潔凈車間消毒后沉降菌檢測記錄；9-2潔凈車間消毒后30天沉降菌檢測記錄。10.4驗證標(biāo)準(zhǔn)A生物指示劑培養(yǎng)七天后仍無菌生長為消毒合格。B物體表面細(xì)菌總數(shù)020cfu/cm2。C沉降菌：百級操作臺：沉降菌01個/皿。一萬級區(qū)域：沉降菌03個/皿。十萬級區(qū)域：沉降菌010個/皿。三十萬級區(qū)域：沉降菌015個/皿。見附錄10驗證結(jié)果11驗證結(jié)果的綜合評價對工位器具清洗消毒效果及周期驗證的結(jié)果進(jìn)行分析與綜合評價，詳見附錄12驗證結(jié)果的分析及評價、驗證結(jié)論附錄13驗證報告、附錄14驗證證書。12再驗證周期12.1 當(dāng)更換消毒劑時應(yīng)進(jìn)行再驗證。12.2 當(dāng)沉

17、降菌和物體表面菌超過標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定要求時應(yīng)進(jìn)行再驗證。天臺縣雙星醫(yī)療器械廠人員資格確認(rèn)表NO.001驗證目的：確認(rèn)參加驗證的人員具備正確從事驗證活動的資格驗證要求：1、至少有兩人經(jīng)培訓(xùn)合格的驗證人員。2、參與驗證的人員與培訓(xùn)記錄或相關(guān)證書相符。驗證依據(jù)：YY0033-2000無菌醫(yī)疔器具生產(chǎn)管理規(guī)范.驗證（操作）人員姓名:人員專業(yè)：，操作人員，檢驗人員，文件管理，計量器具管理驗證項目：確認(rèn)記錄1、1、2、文件管理口合格口不合格計量器具管理口合格口不合格檢驗員資質(zhì)口合格口不合格驗證方法：1 .檢查相關(guān)文件是否完整。2 .檢查相關(guān)計量器具是否符合要求。3 .檢查檢測人員的培訓(xùn)記錄或證書不合格描述：無驗證

18、結(jié)論：口合格口不合格日期：年月日日期:驗證人:審核結(jié)論：口合格口不合格審核人:天臺縣雙星醫(yī)療器械廠計量器具確認(rèn)記錄儀器、儀表名稱編號檢定日期后效期校驗結(jié)果溫控儀（干燥箱）SX-JQ-0072010年11月16日1年合格溫控儀（細(xì)菌培養(yǎng)箱）SX-JQ-0092010年11月16日1年合格電子天平SX-JS-0012010年11月16日1年合格手提式壓力蒸汽滅菌器（壓力表）SX-JQ-0042010年12月13日1年合格塵埃粒子計數(shù)器SX-JS-0112010年10月29日1年合格溫濕度表SX-JQ-0102010年12月02日1年合格溫濕度表SX-JQ-0122010年03月17日1年合格微壓米

19、SX-JQ-0272010年11月29日1年合格結(jié)果評價確認(rèn)人：年月日附件3-1:天臺縣雙星醫(yī)療器械廠潔凈車間空氣消毒劑的確認(rèn)記錄廳P確認(rèn)名稱檢查結(jié)果結(jié)論1消毒劑名稱甲醛符合規(guī)定2杭州富強(qiáng)化工儀器有限公司符合規(guī)定3牌號和為符合規(guī)定4主要成分及含量分析純符合規(guī)定5用途熏烝、涓母符合規(guī)定6使用方法重基八、八、符合規(guī)定結(jié)果評價確認(rèn)人:附件3-2天臺縣雙星醫(yī)療器械廠潔凈車間空氣消毒劑的確認(rèn)記錄廳P確認(rèn)名稱檢查結(jié)果結(jié)論1消毒劑名稱高鈕酸鉀符合規(guī)定2杭州富強(qiáng)化工儀器有限公司符合規(guī)定4主要成分及含量99.5%符合規(guī)定結(jié)果評價確認(rèn)人:附件4天臺縣雙星醫(yī)療器械廠潔凈車間熏蒸消毒方法確認(rèn)記錄熏蒸消毒方法與確認(rèn)（確

20、認(rèn)結(jié)果打勾或者填寫）1.根據(jù)潔凈區(qū)待消毒區(qū)域的空間容積，計算消毒劑用量并準(zhǔn)確稱量。確認(rèn)記錄：待消毒空間體積;高銳酸鉀重量;甲醛溶液體積;2.關(guān)閉潔凈室與外界聯(lián)系的全部門和傳遞窗，并確認(rèn)潔凈室調(diào)配室人員全部撤離，停止空氣凈化系統(tǒng)運(yùn)轉(zhuǎn)。確認(rèn)記錄：門窗關(guān)閉口人員撤離口空氣凈化系統(tǒng)停止運(yùn)轉(zhuǎn)口2.熏蒸前對檢查潔凈室關(guān)鍵房間的溫濕度，應(yīng)達(dá)到甲醛消毒的最佳條件。確認(rèn)記錄：溫度;濕度。3.先將甲醛倒入容器中，后加入高鈕酸鉀，人立即離開。確認(rèn)記錄：操作順序與方法口4.對房間進(jìn)行熏蒸消毒。啟動空調(diào)機(jī)，使甲醛氣體循環(huán)約30分鐘，關(guān)閉空調(diào)機(jī)，熏蒸試驗時間為10小時。確認(rèn)記錄：（1）啟動空調(diào)機(jī)，循環(huán)氣體30分鐘口開啟時

21、間：（2）關(guān)閉空調(diào)機(jī)，熏蒸10小時口關(guān)閉時間：5.啟動空調(diào)機(jī)，25%t水加入組合風(fēng)柜排風(fēng)口內(nèi)不銹鋼容器中，總用量為12.5L/次，打開送排風(fēng)系統(tǒng)排風(fēng)中和12小時。確認(rèn)記錄：（1）啟動空調(diào)機(jī)，排風(fēng)口不銹鋼容器中加25%t水，用量12.51/次口（2）打開送排風(fēng)系統(tǒng)排風(fēng)中和12小時口開啟時間：確認(rèn)結(jié)果評價：操作人：年月日確認(rèn)人：年月日生物指示劑試驗方法確認(rèn)：1 .采樣方法：在消毒前將枯草黑色變種芽胞生物指示劑放入注擠吹塑車間、中轉(zhuǎn)庫、組裝車間遠(yuǎn)離風(fēng)口各兩處，在消毒結(jié)束，新風(fēng)循環(huán)12小時后，檢驗人員將菌片放入培養(yǎng)液中（培養(yǎng)液浸透菌片）。然后置37c48小時培養(yǎng)2 .陰性對照確認(rèn)物體表面菌試驗方法確認(rèn)

22、:在達(dá)到設(shè)定的熏蒸消毒時間（10小時），通風(fēng)12小時候分別對潔凈室（區(qū)）的各種表面進(jìn)行取樣、培養(yǎng)，檢測是否有菌生長。1取樣點(diǎn)：分別包括設(shè)備、操作臺、墻壁、地面等的開放表面與死角、縫隙處。2準(zhǔn)備：滅菌的生理鹽水、滅菌的1ml刻度吸管、滅菌的平皿及普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、無菌的棉簽、試管、酒精燈。3取樣方法：將內(nèi)徑為5cmx5cm的滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，用浸有滅菌生理鹽水的棉拭子，在規(guī)格板內(nèi)涂抹10次（往返計為1次），將棉拭子放入10mL滅菌生理鹽水的采樣管中。4陰性對照的確認(rèn)將本次未用完的，稀釋液、棉拭子、培養(yǎng)基等分別設(shè)陰性對照，按規(guī)定方法進(jìn)行接種并培養(yǎng)。沉降菌試驗方法：在達(dá)到設(shè)定的熏蒸消毒

23、時間（10小時），通風(fēng)12小時候?qū)⒅苽浜玫臓I養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基平皿按潔凈室（區(qū)）沉降菌日常監(jiān)測布點(diǎn)圖放置，打開培養(yǎng)皿蓋，暴露30分鐘后，蓋好皿蓋倒置裝入密封裝置后轉(zhuǎn)至培養(yǎng)室，將培養(yǎng)皿倒置于恒溫培養(yǎng)箱內(nèi)，在3035c中培養(yǎng)48小時。1準(zhǔn)備：滅菌的平皿及普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基、酒精燈、恒溫培養(yǎng)箱、高壓滅菌鍋。2取樣方法：測試方法采用沉降法，即通過自然沉降原理收集在空氣中的生物粒子于培養(yǎng)基平皿，經(jīng)規(guī)定時間內(nèi)，在適宜的生長條件下讓其繁殖到可見的菌落進(jìn)行計數(shù)，以平板培養(yǎng)皿中的菌落數(shù)來判定潔凈環(huán)境內(nèi)活微生物數(shù)，并以此來評定潔凈室（區(qū)）的潔凈度是否符合標(biāo)準(zhǔn)要求。方案確認(rèn)：方案符合GB15980-1995一次性使用醫(yī)療

24、用品衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)YY0033-2000無菌醫(yī)療器具生產(chǎn)管理規(guī)范GBT16294-2010醫(yī)藥工業(yè)潔凈室（區(qū)）沉降菌的測試方法確認(rèn)人：清場記錄：熏蒸消毒前，將凈化車間內(nèi)物料轉(zhuǎn)移或密封，進(jìn)行清潔天臺縣雙星醫(yī)療器械廠檢測環(huán)境確認(rèn)報告確認(rèn)項目檢測結(jié)果確認(rèn)結(jié)論室百級操作臺潔凈車間溫度符合口不符合口濕度符合口不符合口壓差符合口不符合口沉降菌符合口不符合口換氣次數(shù)符合口不符合口風(fēng)速符合口不符合口塵埃粒子符合口不符合口符合口不符合口確認(rèn)結(jié)果評價:確認(rèn)者：確認(rèn)日期:附件7:天臺縣雙星醫(yī)療器械廠生物指示劑檢測記錄NO:檢測日期檢驗依據(jù)報告日期GB15980-1995、YY0033-2000檢測區(qū)域1 .操作步驟：在消

25、毒前將枯草黑色變種芽胞生物指示劑放入注擠吹塑車間、中轉(zhuǎn)庫、組裝車間遠(yuǎn)離風(fēng)口各兩處。在消毒結(jié)束，新風(fēng)循環(huán)12小時后，檢驗人員將菌片放入培養(yǎng)液中（培養(yǎng)液浸透菌片）。然后置37C48小時培養(yǎng)，另取一支未經(jīng)消毒的指示劑作陽性對照。2 .檢驗方法：經(jīng)48小時培養(yǎng)后，若培養(yǎng)液變渾濁，顏色由紅色變黃判為陽性。培養(yǎng)液澄清，顏色不變?yōu)殛幮裕^續(xù)培養(yǎng)至七天3 .驗證標(biāo)準(zhǔn)：生物指示劑培養(yǎng)七天后仍無菌生長為消毒合格。名稱生物指示劑陰性對照48小時3天4天5天6天7天48小時7天注擠吹塑車間中轉(zhuǎn)庫組裝車問備注：有菌生長用“+”表示，無菌生長用“-”表示。檢驗人:確認(rèn)人:天臺縣雙星醫(yī)療器械廠潔凈車間消毒后物體表面菌檢測記

26、錄NO:檢測日期報告日期檢驗依據(jù)GB15980-1995、YY0033-2000檢測區(qū)域1 .米樣方法：將內(nèi)徑為5cmx5cm的滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，用浸有滅菌生理鹽水的棉拭子，在規(guī)格板內(nèi)涂抹10次(往返計為1次)，將棉拭子放入10mL滅菌生理鹽水的米樣管中。2 .陰性對照的確認(rèn)將本次未用完的，稀釋液、棉拭子、培養(yǎng)基等分別設(shè)陰性對照，按上述的方法進(jìn)行接種并培芥井記錄。3 .檢驗方法：將每個采樣管振打80次，混勻，10倍遞減稀釋，對每個稀釋度(取3個稀釋度)，分別用火菌的刻度吸營取1ml將浸出液放于火菌的培養(yǎng)皿(每個稀釋度2個平皿)，并注入20ml的40-45C的普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，待凝

27、固后，在30-35C下倒置培養(yǎng)24小時，觀察結(jié)果，取菌落數(shù)為30-300的平板計算，求出平均菌落數(shù)。7.2.3.7結(jié)果計算：菌數(shù)/cm2=平均菌數(shù)*稀釋倍數(shù)采樣面積(cmf)稀釋度樣品含菌量陰性對照地面菌墻面菌工作臺面菌設(shè)備表向菌稀釋液棉拭子基1:1每皿含菌量(cfu/25cm2)平均菌數(shù)(cfu/cm2)1:10每皿含菌量(cfu/25cm2)平均菌數(shù)(cfu/cm2)1:100每皿含菌量(cfu/25cm2)平均菌數(shù)(cfu/cm2)備注：有菌生長用“+”表示，無菌生長用“-”表示。檢驗人：年月日確認(rèn)人：年月日天臺縣雙星醫(yī)療器械廠潔凈室消毒30天后物體表面菌檢測記錄NO:檢測日期報告日期檢

28、驗依據(jù)GB15980-1995、YY0033-2000檢測區(qū)域1 .米樣方法：將內(nèi)徑為5cmx5cm的滅菌規(guī)格板，放在被檢物體表面，用浸有滅菌生理鹽水的棉拭子，在規(guī)格板內(nèi)涂抹10次(往返計為1次)，將棉拭子放入10mL滅菌生理鹽水的米樣管中。2 .陰性對照的確認(rèn)將本次未用完的，稀釋液、棉拭子、培養(yǎng)基等分別設(shè)陰性對照，按上述的方法進(jìn)行接種并培芥井記錄。3 .檢驗方法：將每個采樣管振打80次，混勻，10倍遞減稀釋，對每個稀釋度(取3個稀釋度)，分別用滅菌的刻度吸管取1ml將浸出液放于滅菌的培養(yǎng)皿(每個稀釋度2個平皿)，并注入20ml的40-45C的普通營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基，待凝固后，在30-35C下倒置

29、培養(yǎng)24小時，觀察結(jié)果，取菌落數(shù)為30-300的平板計算，求出平均菌落數(shù)。7.2.3.7結(jié)果計算：菌數(shù)/cm2=平均菌數(shù)x稀釋倍數(shù)采樣面積(cmf)稀釋度樣品含菌量陰性對照地面菌墻面菌工作臺面菌設(shè)備表向菌稀釋液棉拭子基1:1每皿含菌量(cfu/25cm2)平均菌數(shù)(cfu/cm2)1:10每皿含菌量(cfu/25cm2)平均菌數(shù)(cfu/cm2)1:100每皿含菌量(cfu/25cm2)平均菌數(shù)(cfu/cm2)備注：有菌生長用“+”表示，無菌生長用“-”表示。檢驗人：年月日確認(rèn)人：年月日檢測區(qū)域凈化級別采樣點(diǎn)數(shù)測試狀態(tài)環(huán)境溫度C相對濕度%培養(yǎng)基批號培養(yǎng)溫度檢驗依據(jù)YY0033-2000檢測日

30、期采樣點(diǎn)編號B1B2C1C2D1D2E1E2F1F2G1G2土口喬皿編R12345678910111248h菌落數(shù)采樣點(diǎn)編號H1H2I1I2J1J2J3K1K2K3K4K5土口喬皿編R13141516171819202122232448h菌落數(shù)采樣點(diǎn)編號K6L1L2L3對照皿編號土口喬皿編R2526272812348h菌落數(shù)檢測結(jié)果檢測設(shè)備：99cm平皿。評定標(biāo)準(zhǔn)：十萬級010個/皿，三十萬級015個/皿。檢測方法：按GB/T16294-2010標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。檢測人：復(fù)核人:日期:日期:檢測區(qū)域凈化級別采樣點(diǎn)數(shù)測試狀態(tài)環(huán)境溫度C相對濕度%培養(yǎng)基批號培養(yǎng)溫度檢驗依據(jù)YY0033-2000檢測日期采樣

31、點(diǎn)編號B1B2C1C2D1D2E1E2F1F2G1G2土口喬皿編R12345678910111248h菌落數(shù)采樣點(diǎn)編號H1H2I1I2J1J2J3K1K2K3K4K5土口喬皿編R13141516171819202122232448h菌落數(shù)采樣點(diǎn)編號K6L1L2L3對照皿編號土口喬皿編R2526272812348h菌落數(shù)檢測結(jié)果檢測設(shè)備：99cm平皿。評定標(biāo)準(zhǔn)：十萬級010個/皿，三十萬級015個/皿。檢測方法：按GB/T16294-2010標(biāo)準(zhǔn)執(zhí)行。檢測人：復(fù)核人:日期:日期:附錄10天臺縣雙星醫(yī)療器械廠驗證結(jié)果驗證項目要求再驗證情況結(jié)論所需文件符合要求符合要求符合規(guī)定儀表、檢測儀器檢定符合檢定要求符合檢定要求實驗室檢測環(huán)境符合設(shè)計和使用耍求符合設(shè)計和使用耍求檢測人員資質(zhì)符合規(guī)定符合規(guī)定潔凈室（區(qū)）空氣消毒劑的確認(rèn)記錄符合規(guī)定符合規(guī)定潔凈室（區(qū)）消毒前、消毒7小時、消毒8小時、消毒10小時、消毒后第4天、消毒后第9天、消毒后第13天、消毒后第17天、消毒后第21天、消毒后第26天、消毒后第33大物體表面菌和沉降菌報告和檢測記錄符合規(guī)定符合規(guī)定確認(rèn)結(jié)果的綜合評價：通過一系列的驗證試驗，提供足夠的數(shù)據(jù)，以證明所采用的熏蒸消毒法