急性有心衰竭動(dòng)物模型設(shè)計(jì)文檔

1、機(jī)能實(shí)驗(yàn)學(xué)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)大綱實(shí)驗(yàn)名稱：急性右心衰竭動(dòng)物模型設(shè)計(jì)課題來(lái)源：自選設(shè)計(jì)班級(jí)：2008級(jí)臨床本科7班設(shè)計(jì)人員：王超設(shè)計(jì)日期：2011年3月25日指導(dǎo)老師：榮成成都醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)技術(shù)教研室2011年制一、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的目的與意義，國(guó)內(nèi)外現(xiàn)狀，存在的問題，解決問題的思路。目的與意義：(1)通過實(shí)驗(yàn)了解急性腎功能衰竭對(duì)人類各生命器官功能的危害。(2)通過急性腎功能衰竭各項(xiàng)指標(biāo)的測(cè)定，指導(dǎo)臨床工作。(3)讓人們了解更多的關(guān)于急性腎功能衰竭的知識(shí)國(guó)內(nèi)外現(xiàn)狀右心衰竭(acuteright-sidedheartfailure)表示主要表現(xiàn)為體循環(huán)淤血為主的綜合征沒來(lái)主要是右心室搏出功能障礙見于肺心病三尖瓣或肺動(dòng)脈

2、瓣的疾病并常繼發(fā)于左心衰竭此時(shí)心輸出量減少體循環(huán)淤血靜脈壓增高常伴有下肢水腫嚴(yán)重正常時(shí)可發(fā)生全身性水腫。急性右心衰竭在臨床較為常見，其病因是急性右心室梗死、急性肺動(dòng)脈栓塞，肺循環(huán)的維持需要正常的左心室功能，右心室的輔助泵作用使血液通過肺循環(huán)到達(dá)左心室，以維持較低的中心靜脈壓與體循環(huán)靜脈回流。肺小動(dòng)脈栓塞使肺動(dòng)脈壓急劇升高，右心室排血受阻，發(fā)生右心室擴(kuò)張與衰竭。而右心室梗死時(shí)，其收縮力急性降低，產(chǎn)生右心室衰竭。當(dāng)右心衰竭時(shí)，可導(dǎo)致左心室心排血量下降，發(fā)生低血壓或休克，同時(shí)使肺循環(huán)阻力增加，產(chǎn)生體循環(huán)臟器淤血。存在的問題：由于急性右心功能不全具有其獨(dú)特的特點(diǎn)，在臨床處理上與左心功能不全有明顯差異，

3、所以早期臨床診斷和正確處理右心衰有著重要的意義。所以我們應(yīng)該找出更便和測(cè)定的解決方案。解決問題的思路：由耳緣靜脈緩慢注入栓塞劑，經(jīng)靜脈回流至肺臟，并栓塞在肺循環(huán)內(nèi)，引起肺動(dòng)脈高壓，即右心室后負(fù)荷增加。如再輸入大量生理鹽水，使回心血量大大增加，則在右心室后負(fù)荷增加的基礎(chǔ)上，又增加了前負(fù)荷，右心負(fù)荷過重，導(dǎo)致急性右心衰竭，其癥狀越來(lái)越重，甚至出現(xiàn)腹水，直至動(dòng)物死亡。觀察復(fù)制過程中機(jī)體出現(xiàn)的表現(xiàn)，理解其發(fā)生機(jī)制。5.參考文獻(xiàn)：1朱文霞急性右心衰的診斷和治療中外健康文摘2010年第19期2急性右側(cè)心力衰竭火罐網(wǎng).3 徐叔云主編.藥理實(shí)驗(yàn)方法學(xué)M.第二版.北京：人民衛(wèi)生出版社，1991.1784中國(guó)醫(yī)藥

4、雜志2006第8卷第4期雙月刊269-2715梅愛敏急性右心衰實(shí)驗(yàn)2010年5月出版編碼ISRCCN-CM22-10-0033-0/V-R二、實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)方案(實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)目標(biāo)，擬解決的主要問題，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)計(jì)，實(shí)驗(yàn)專業(yè)設(shè)計(jì)，實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)設(shè)計(jì)，實(shí)驗(yàn)方法設(shè)計(jì)，可行性分析預(yù)期結(jié)果，實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)工作時(shí)間安排)。(一)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)的目標(biāo)和擬解決的主要問題：掌握急性右心衰竭模型的制備方法。觀察復(fù)制過程中機(jī)體出現(xiàn)的表現(xiàn)，理解其發(fā)生機(jī)制。此實(shí)驗(yàn)是通過增加右心室前后負(fù)荷，造成家兔急性右心衰后，觀察各項(xiàng)病理指標(biāo)和變化，根據(jù)變化情況，思考起發(fā)病機(jī)制，再聯(lián)系臨床，以解決實(shí)際問題，最終對(duì)治療急性右心衰有一定幫助。(二)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)1、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

5、設(shè)計(jì)我們選用家兔作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，有以下幾點(diǎn)理由：1、家兔易得到，容易飼養(yǎng)，在科研工作中被廣泛利用。2.家兔易于得到，能大量選取體重相近的以減少實(shí)驗(yàn)誤差2、實(shí)驗(yàn)專業(yè)設(shè)計(jì)選用家兔作為實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，注射栓塞劑和大量生理鹽水來(lái)觀察實(shí)驗(yàn)前后各項(xiàng)家兔的生理指標(biāo)來(lái)確定模型是否復(fù)制成功3、實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)統(tǒng)計(jì)設(shè)計(jì)中應(yīng)始終貫徹隨機(jī)、對(duì)照、重復(fù)三大原則。(1)隨機(jī)：取家兔20只，將20只家兔按體重編號(hào)，從隨機(jī)數(shù)字表中查取隨機(jī)數(shù)字，依次抄錄于家兔編號(hào)下。預(yù)先規(guī)定，遇單數(shù)將兔分入A組，遇雙數(shù)分入B組。得結(jié)果如下：動(dòng)物編號(hào)：1234567891011121314151617181920隨機(jī)數(shù)字：191213841516701

6、115141836109217所屬組別：ABABBABABAAABBABBABA將1、3、6、8、10、11、12、15、18、20號(hào)動(dòng)物分入A組，將2、4、5、7、9、11、13、14、16、17、19號(hào)動(dòng)物分入B組。(2)對(duì)照：本組實(shí)驗(yàn)做了空白對(duì)照和實(shí)驗(yàn)對(duì)照，在前面的專業(yè)設(shè)計(jì)里已經(jīng)提及。(3)重復(fù)：本實(shí)驗(yàn)采用20只家兔作相同的實(shí)驗(yàn)，具有一定的重復(fù)性。(4)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)收集：本實(shí)驗(yàn)收集了家兔在正常和夾閉腎動(dòng)脈后各項(xiàng)生理指標(biāo)來(lái)判斷腎衰竭模型是否復(fù)制成功表1-1注射栓塞劑前心率血壓呼吸A1A2A10表1-2注射栓塞劑(至明顯血壓上升)心率血壓呼吸B1B2B10帶血壓或中心靜脈壓又恢復(fù)到原對(duì)照水平在緩

7、慢注射液體石蠟表1-3注射栓塞劑(至血壓輕度下降)5EwB1B2B10待呼吸，血壓穩(wěn)定后表1-4注射生理鹽水心率血壓呼吸B1B2B10(5)統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)分析：本實(shí)驗(yàn)采用計(jì)量資料來(lái)測(cè)定各種指標(biāo)的數(shù)值，所有數(shù)據(jù)均采用平均數(shù)堀準(zhǔn)差(正山)表示，A,B兩組間實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)比較行完全隨機(jī)單因素方差分析，組間兩比較行q檢驗(yàn).(1)平均數(shù)公式：x=x1+x2+xn/n=2xi/nx=均數(shù)2=總和n=變量值的個(gè)數(shù)(標(biāo)準(zhǔn)差)：a=sqr(S(xi-u)A2/n)a:總體標(biāo)準(zhǔn)差xi:觀測(cè)數(shù)的各個(gè)變量u:總體均數(shù)四組間實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)比較行完全隨機(jī)單因素方差分析，如各組肺系數(shù)總體均值的比較，其方法如下：(1)建立檢驗(yàn)假設(shè)H0:&qu

8、ot;1="2(A.B兩組間的各項(xiàng)生理指標(biāo)相同)。2H1:、不等或不全相等，a=0.05。(2)計(jì)算統(tǒng)計(jì)量利用統(tǒng)計(jì)學(xué)專業(yè)軟件SPSS做One-wayANOVA。(3)查t值表，確定P值，得出結(jié)論4、實(shí)驗(yàn)方法設(shè)計(jì)實(shí)驗(yàn)技術(shù)路線心率血壓呼吸的變化輸入生理鹽水心率血壓呼吸的變化5.實(shí)驗(yàn)步驟：1 .實(shí)驗(yàn)裝置的準(zhǔn)備輸液裝置：排氣。二道生理記錄儀參考參數(shù)：血壓：靈敏度612kPa/cm;走紙速度1mm/s,基線為零；呼吸：靈敏度2mV/cm,時(shí)間常數(shù)DC,濾波30Hz,直流，基線中線。2 .稱兔體重，從耳緣靜脈注入20%烏拉坦5ml/kg麻醉，仰臥位固定于兔手術(shù)床上。3 .剪去頸部兔毛，作正中切口

9、，鈍性分離頸部組織至氣管，作左側(cè)頸總動(dòng)脈插管（連接血壓換能器）與氣管插管（連接呼吸換能裝置）。4 .經(jīng)右側(cè)頸外靜脈插入插管至右心房或右心房口（57cm左右），先使插管與輸液瓶相通，緩慢輸液，保持靜脈插管通暢。如用多導(dǎo)生理記錄儀（或計(jì)算機(jī)實(shí)時(shí)分析系統(tǒng)）觀察記錄實(shí)驗(yàn)結(jié)果，可把右側(cè)頸外靜脈插管插入右心室（710cm左右），插管的同時(shí)開動(dòng)多導(dǎo)生理記錄儀描記右心室的壓力曲線以觀察是否已插入右心室，此兔從耳緣靜脈處輸液。5 .觀察記錄下述各項(xiàng)生理指標(biāo)：心率、心音強(qiáng)度、肺部聽診（有無(wú)異常呼吸音）、動(dòng)脈血壓、中心靜脈壓*或右心室內(nèi)壓（包括收縮與舒張期壓力）、循環(huán)時(shí)間*。6 .用2ml注射器吸取液體石蠟，按0.

10、5ml/Kg由耳緣靜脈緩慢注射，同時(shí)密切觀察中心靜脈壓（或右心室內(nèi)壓）及血壓的變化。如前者升高或后者下降則終止注射。7 .重復(fù)測(cè)量上述各項(xiàng)指標(biāo)。8 .待血壓、呼吸穩(wěn)定后，以60滴/min的速度輸入生理鹽水，直至血壓降到8kPa9 .觀測(cè)并記錄上述指標(biāo)的變化。10 .待動(dòng)物死亡后，剖開胸、腹腔（注意不要損傷臟器與大血管），觀察有無(wú)胸水、腹水、腸系膜血管充盈與臟器水腫。6技術(shù)路線：注射栓塞劑一血壓或中心靜脈壓明顯上升一血壓和中心靜脈壓恢復(fù)正常后一注射栓塞劑一待呼吸，血壓穩(wěn)定后一輸入生理鹽水（5-10ml/kg）一急性右心衰竭7 .可行行分析：本實(shí)驗(yàn)動(dòng)物來(lái)源方便。急性右心衰竭動(dòng)物的復(fù)制流程易于操作。

11、實(shí)驗(yàn)器材和藥品普遍，實(shí)驗(yàn)室能提供充足的條件。所需資金不多，防止了實(shí)驗(yàn)過程中資金不足足帶來(lái)的問題。8 .預(yù)期結(jié)果：術(shù)后的兔子血壓降低，呼吸減弱，心率減慢，各項(xiàng)癥狀明顯易于測(cè)定。9 .時(shí)間安排，見表1-5表1-5時(shí)間安排表iw工作安排1-10min麻醉、固定、備皮10-50min氣管、靜脈，動(dòng)脈插管50-70min觀察各項(xiàng)正常生理指標(biāo)70-90min復(fù)制急莊右心衰模型90-130min觀察各項(xiàng)生理指標(biāo)的變化130-140min完成實(shí)驗(yàn)、整理實(shí)驗(yàn)室三、完成時(shí)間的條件：實(shí)驗(yàn)器械，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物，實(shí)驗(yàn)藥品。實(shí)驗(yàn)設(shè)備：兔手術(shù)臺(tái)、哺乳類手術(shù)器械一套、中心靜脈壓測(cè)定裝置、呼吸描記裝置、心室插管、聽診器、注射器（1m

12、l、2ml、5ml、20ml）、輸液瓶、膠管、螺旋夾、二道生理記錄儀與電刺激器（或計(jì)算機(jī)實(shí)時(shí)分析系統(tǒng)）。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：家兔（20只）實(shí)驗(yàn)藥品：20%烏拉坦、生理鹽水、液體石蠟、25%尼可剎米、0.5%肝素生理鹽水。蘭亭序永和九年，歲在癸丑，暮春之初，會(huì)于會(huì)稽山陰之蘭亭，修禊事也。群賢畢至，少長(zhǎng)咸集。此地有崇山峻嶺，茂林修竹;又有清流激湍，映帶左右，引以為流觴曲水，列坐其次。雖無(wú)絲竹管弦之盛，一觴一詠，亦足以暢敘幽情。是日也，天朗氣清，惠風(fēng)和暢，仰觀宇宙之大，俯察品類之盛，所以游目騁懷，足以極視聽之娛，信可樂也。夫人之相與，俯仰一世，或取諸懷抱，晤言一室之內(nèi)；或因寄所托，放浪形骸之外。雖取舍萬(wàn)殊，靜躁不同，當(dāng)其欣于所