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1、王媛媛yywangdgmai堂提問每人2-3個問題；權(quán)重：30%總結(jié)報告PPT，5人一組，10分鐘；權(quán)重：30%實驗報告權(quán)重：40%要求：標(biāo)準的論文格式：中、英文標(biāo)題和摘要；前言；材料與方法；結(jié)果；討論；參考文獻。PPT：照片、視頻展示個性，潮！Day 0: 準備實驗材料Day 1: GFP表達質(zhì)粒的提取；Top 10感受態(tài)細胞的制備；GFP表達質(zhì)粒轉(zhuǎn)化Top 10。Day 2: GFP表達菌株擴大培養(yǎng)；GFP的誘導(dǎo)表達。Day 3: 表達菌株的收集、破碎；硫酸銨沉淀所用濃度的確定；硫酸銨沉淀GFP；疏水層析。Day 4: 離子交換層析；透析；凝膠過濾層析。Day 5

2、: SDS-PAGE；染色；脫色，觀察結(jié)果。記得帶照相機 ！鳴謝：生命學(xué)院生物科學(xué)104班鄒兵 周嘉 趙瑯李運彰 汪源原核：E.coli真核：Yeast Insect mammalsVector: pET series, pGEX series, gateway series,pMAL, pTWIN I, pETDuet, et. al.BL21(DE3), BL21(DE3, pLysS), Origami, Rosetta, Rosetta-gamiTop10, HB101, C41/C43能否用BL21(DE3)表達pGLO？能否用Top10表達pET32a？OD600=0.6-0.8，加入誘導(dǎo)劑；OD600=1.2-1.4，收獲菌體；誘導(dǎo)劑用量 IPTG: 0.2mM; 0.5mM; 1mM誘導(dǎo)溫度 20；25/28 ；37 如何留樣能在一張SDS-PAGE膠圖中(10-12 wells)體現(xiàn)誘導(dǎo)的效果、(NH4)2SO4

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