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文檔簡介
1、整理ppt1實驗1-1免疫血清制備及效價測定整理ppt2實 驗 目 的 和 要 求1、學(xué)習(xí)抗血清的制備方法;2、掌握抗血清的收集和保存方法;3、掌握免疫血清效價的測定方法。整理ppt3實 驗 原 理 制備免疫血清的基本方法是將抗原注入動物體內(nèi),由動物體內(nèi)特異的B淋巴細(xì)胞增殖分化成漿細(xì)胞產(chǎn)生抗體。由于抗原分子(完全抗原)具有多種抗原決定簇,每一種抗原決定簇可以激活具有相應(yīng)抗原決定簇受體的B淋巴細(xì)胞系產(chǎn)生針對該決定簇的抗體,因此用抗原免疫動物獲得的免疫血清一般為多克隆抗體(polyclonal antibody)。 制備的免疫血清的質(zhì)量(特異性、親和力及效價高低)受多種因素的影響,主要包括抗原的性
2、質(zhì)、免疫動物的種類及狀態(tài)、免疫劑量、免疫途徑及免疫方案(免疫次數(shù)、間隔時間以及免疫佐劑的使用等等)。因此要獲得高質(zhì)量的免疫血清需先通過預(yù)實驗摸索確定最佳免疫方案。 測定免疫血清中抗體效價的方法很多,如凝集反應(yīng)、沉淀反應(yīng)、溶血反應(yīng)、ELISA分析等均可用于對抗體效價的測定。 本次實驗將采用溶血實驗測定所獲免疫血清的效價。整理ppt4 抗原的兩種特性:免疫原性與抗原性 免疫原性的本質(zhì)異物性 與機(jī)體親緣關(guān)系越遠(yuǎn),組織結(jié)構(gòu)的差異越大,異物性越強(qiáng)。整理ppt5整理ppt6實驗材料 1. 40% SRBC2. 18-22g的BALB/C系小白鼠3. 無菌1ml 注射器4. 抗凝劑(枸櫞酸鈉或肝素)5. 新
3、鮮豚鼠血清(作為補體用)6. 小試管等整理ppt7實 驗 內(nèi) 容1、免疫動物 初次免疫小鼠為腹腔注射40%綿羊紅細(xì)胞(SRBC)0.2ml,以后分別于第4天、第7天和第10天時間,以相同免疫劑量、相同免疫途徑加強(qiáng)免疫。整理ppt8整理ppt9小鼠腹腔注射 小鼠腹腔注射可以用1ml的注射器,配合4號針頭。 2. 腹腔注射時右手持注射器,左手的小指和無名指抓住小鼠的尾巴,另外三個手指抓住小鼠的頸部,使小鼠的頭部向下。這樣腹腔中的器官就會自然倒向胸部,防止注射器刺入時損傷大腸、小腸等器官。進(jìn)針的動作要輕柔,防止刺傷腹部器官。3. 尤其是對于體重較小的小鼠,腹腔注射時針頭可以在腹部皮下穿行一小段距離,最好是從腹部一側(cè)進(jìn)
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