生物選修一讀記背知識整理(2016版)

1、葛洲壩中學(xué)高二年級生物學(xué)案選修一生物技術(shù)實踐讀記背學(xué)習(xí)綱要 班級： 姓名： 專題一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)高中生課題一 果酒和果醋的制作高中生1、發(fā)酵：通過微生物技術(shù)的培養(yǎng)來生產(chǎn)大量代謝產(chǎn)物的過程。高中生物選修2、有氧發(fā)酵：醋酸發(fā)酵 谷氨酸發(fā)酵 ·無氧發(fā)酵：酒精發(fā)酵 乳酸發(fā)酵 高中生物選修3、酵母菌是異養(yǎng)兼性厭氧型微生物真菌 ·酵母菌的生殖方式：出芽生殖(主要) 孢子生殖（有性生殖）4、在有氧條件下，酵母菌進(jìn)行有氧呼吸，大量繁殖 C6H12O66O26H2O6CO212H2O能量5、在無氧條件下，酵母菌能進(jìn)行酒精發(fā)酵。 C6H12O62C2H

2、5OH2CO2高能量6、20左右最適宜酵母菌繁殖 酒精發(fā)酵時一般將溫度控制在18-25 高中生7、在葡萄酒自然發(fā)酵的過程中,起主要作用的是附著在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在發(fā)酵過程中,隨著酒精濃度的提高,紅葡萄皮的色素也進(jìn)入發(fā)酵液,使葡萄酒呈現(xiàn)深紅色.在缺氧 呈酸性的發(fā)酵液中，酵母菌可以生長繁殖，而絕大多數(shù)其他微生物都因無法適應(yīng)這一環(huán)境而受到制約。高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點8、醋酸菌是單細(xì)胞細(xì)菌(原核生物),代謝類型是異養(yǎng)需氧型,生殖方式為二分裂，最適溫度3035中生物選修9、當(dāng)氧氣、糖源都充足時，醋酸菌將葡萄汁中的糖分解成醋酸；當(dāng)缺少糖源時，醋酸菌將乙醇變?yōu)橐胰?，再將乙醛變?yōu)榇姿帷?方

3、程式： C2H5OHO2CH3COOHH2O高中生10、實驗流程：挑選葡萄沖洗榨汁酒精發(fā)酵果酒（醋酸發(fā)酵果醋）高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識11、酒精檢驗：果汁發(fā)酵后是否有酒精產(chǎn)生，可以用重鉻酸鉀來檢驗。在酸性條件下，重鉻酸鉀與酒精反應(yīng)呈現(xiàn)灰綠色。先在試管中加入發(fā)酵液2L，再滴入物質(zhì)的量濃度為3mol/L的H2SO43滴，振蕩混勻，最后滴加常溫下飽和的重鉻酸鉀溶液3滴，振蕩試管，觀察顏色高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)高中生物選修一12、充氣口是在醋酸發(fā)酵時連接充氣泵進(jìn)行充氣用的；排氣口是在酒精發(fā)酵時用來排出二氧化碳的；出料口是用來取樣的。排氣口要通過一個長而彎曲的膠管與瓶身相連接，其目的

4、是防止空氣中微生物的污染。開口向下的目的是有利于二氧化碳的排出。使用該裝置制酒時，應(yīng)該關(guān)閉充氣口；制醋時，應(yīng)該充 氣口連接氣泵，輸入氧氣。高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)高中生物選修一生物技術(shù)實踐 知識點總結(jié)專題一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題一 果酒和果醋的制作1、發(fā)酵課題二 腐乳的制作高中生物1、多種微生物參與了豆腐的發(fā)酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉。毛霉是一種絲狀真菌，有多個細(xì)胞核。有發(fā)達(dá)的白色菌絲，分為匍匐菌絲（在基內(nèi)）和直立菌絲（在基外）。代謝類型是異養(yǎng)需氧型。生殖方式是孢子生殖。（無性生殖）2、原理：毛霉等微生物產(chǎn)生的蛋白酶能將豆腐中的蛋白質(zhì)分解成小分子的肽和

5、氨基酸；脂肪酶可將脂肪水解為甘油和脂肪酸。高中生物選修3、實驗流程：讓豆腐上長出毛霉加鹽腌制加鹵湯裝瓶密封腌制高中生物選修一生4、釀造腐乳的主要生產(chǎn)工序是將豆腐進(jìn)行前期發(fā)酵和后期發(fā)酵。前期發(fā)酵的主要作用：1.創(chuàng)造條件讓毛霉生長。2.使毛酶形成菌膜包住豆腐使腐乳成型痕彌移后期發(fā)酵主要是酶與微生物協(xié)同參與生化反應(yīng)的過程。通過各種輔料與酶的緩解作用，生成腐乳的香氣5、將豆腐切成3cm×3cm×1cm的若干塊。所用豆腐的含水量為70左右，水分過多則腐乳不易成形。6·毛霉的生長：條件：將豆腐塊平放在籠屜內(nèi)，將籠屜中的控制在1518，并保持一定的濕度。高中來源：1.來自空氣中

6、的毛霉孢子，2. 直接接種優(yōu)良毛霉菌種高中時間：5天高中生物選修生物7·加鹽腌制：將長滿毛霉的豆腐塊分層整齊地擺放在瓶中，同時逐層加鹽，隨著層數(shù)的加高而增加鹽量，接近瓶口表面的鹽要鋪厚一些。加鹽腌制的時間約為8天左右。高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)高中生物選修8·用鹽腌制時，注意控制鹽的用量：鹽的濃度過低，不足以抑制微生物的生長，可能導(dǎo)致豆腐腐敗變質(zhì)；鹽的濃度過高會影響腐乳的口味高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)高中生物選修一生物技術(shù)實踐 知識點總結(jié)專題一999·食鹽的作用：1.抑制微生物的生長，避免腐敗變質(zhì)2.析出水分，使豆腐變硬，在后期制作過程中不易酥

7、爛3.調(diào)味作用，給腐乳以必要的咸味4.浸提毛酶菌絲上的蛋白酶。高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)高中生物選10·配制鹵湯：鹵湯直接關(guān)系到腐乳的色、香、味。鹵湯是由酒及各種香辛料配制而成的。鹵湯中酒的含量一般控制在12%左右。高中11·酒的作用：1.防止雜菌污染以防腐2.與有機(jī)酸結(jié)合形成酯，賦予腐乳風(fēng)味3.酒精含量的高低與腐乳后期發(fā)酵時間的長短有很大關(guān)系，酒精含量越高，對蛋白酶的抑制作用也越大，使腐乳成熟期延長；酒精含量過低，蛋白酶的活性高，加快蛋白質(zhì)的水解，雜菌繁殖快，豆腐易腐敗，難以成塊。高1212·香辛料的作用：1.調(diào)味作用2.殺菌防腐作用3.參與并促進(jìn)發(fā)酵

8、過程高中生1313·防止雜菌污染：用來腌制腐乳的玻璃瓶，洗刷干凈后要用沸水消毒。裝瓶時，操作要迅速小心。整齊地擺放好豆腐、加入鹵湯后，要用膠條將瓶口密封。封瓶時，最好將瓶口通過酒精燈的火焰，防止瓶口被污染。 課題三 制作泡菜高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)高中生物選修一生物技術(shù)實踐 知識點總結(jié)專題一 傳統(tǒng)發(fā)酵酸發(fā)酵 ·無氧發(fā)酵：酒精發(fā)酵 乳酸發(fā)酵 3、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌 ·拉動1·制作泡菜所用微生物是乳酸菌 ，其代謝類型是異養(yǎng)厭氧型。在無氧條件下，將糖分解為乳酸 。分裂方式是二分裂。反應(yīng)式為：C6H12O62C3H6O3+能量 含抗生素牛

9、奶不能生產(chǎn)酸奶的原因是抗生素殺死乳酸菌。常見的乳酸菌有乳酸鏈球菌和乳酸桿菌。乳酸桿菌常用于生產(chǎn)酸奶。2·亞硝酸鹽為白色粉末，易溶于水，在食品生產(chǎn)中用作食品添加劑。亞硝酸鹽含量發(fā)酵時間（d）3、膳食中的亞硝酸鹽一般不會危害人體健康，國家規(guī)定肉制品中不超過30mg/kg，醬腌菜中不超過20mg/kg，嬰兒奶粉中不超過2mg/kg。亞硝酸鹽被吸收后隨尿液排出體外，但在適宜pH 、溫度和一定微生物作用下形成致癌物質(zhì)亞硝胺。高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)高中生物選修一生物技術(shù)實踐 知識點總結(jié)專題一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題一 果酒和果醋的制作1、發(fā)酵：通過微生物技術(shù)的培養(yǎng)來生產(chǎn)大量代謝產(chǎn)物

10、的過程。2、有氧發(fā)酵：醋酸發(fā)酵 谷氨酸發(fā)酵 ·無氧發(fā)酵：酒精發(fā)酵 乳酸發(fā)酵 3、酵母菌是兼性厭氧菌型微生物真菌 ·拉動甜族掖凡冬箍聳達(dá)腫醫(yī)即扎傈跺械司坎附佐滑剎鈕哥售膜勿厚研預(yù)爵碧窺流障鬼癬肩虱梭襪加歌埋慘鋸均橋舶獻(xiàn)然斜褲鋒叛楓靴穢茄痕彌移翟4·一般在腌制10天后亞硝酸鹽含量開始降低，故在10-20天之后食用最好高。中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)5測定亞硝酸鹽含量的原理是在鹽酸酸化條件下，亞硝酸鹽與對氨基苯磺酸發(fā)生重氮化反應(yīng)后，與 N-1-萘基乙二胺鹽酸鹽結(jié)合形成玫瑰紅色，與已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)顯色液目測比較，估算泡菜中亞硝酸鹽含量。高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點

11、總結(jié)高中生物選修一生物技術(shù)實踐 知識點總結(jié)專題一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用課題一 果酒和果醋的制作1、發(fā)酵：通過微生物 專題二 微生物的培養(yǎng)與應(yīng)用高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)高中生物選修一生物技術(shù)實踐 知識點總結(jié)專題一 傳統(tǒng)發(fā)酵課題一 微生物的實驗室培養(yǎng)高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)高中生物選修一生物技術(shù)1·培養(yǎng)基：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配制出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)，是進(jìn)行微生物培養(yǎng)的物質(zhì)基礎(chǔ)。2·培養(yǎng)基按照物理性質(zhì)可分為液體培養(yǎng)基 半固體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基。在液體培養(yǎng)基中加入凝固劑瓊脂（是從紅藻中提取的一種多糖，在配制培養(yǎng)基中用作凝固劑,熔點是98，

12、凝固點是44）后，制成瓊脂固體培養(yǎng)基。微生物在固體培養(yǎng)基表面生長，可以形成肉眼可見的菌落。根據(jù)菌落的特征可以判斷是哪一種菌。液體培養(yǎng)基應(yīng)用于工業(yè)或生活生產(chǎn)，固體培養(yǎng)基應(yīng)用于微生物的分離和鑒定，半固體培養(yǎng)基則常用于觀察微生物的運動及菌種保藏等。3·按照成分培養(yǎng)基可分為人工合成培養(yǎng)基和天然培養(yǎng)基。合成培養(yǎng)基是用成分已知的化學(xué)物質(zhì)配制而成，其中成分的種類比例明確，常用于微生物的分離鑒定。天然培養(yǎng)基是用化學(xué)成分不明的天然物質(zhì)配制而成，常用于實際工業(yè)生產(chǎn)。高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)高中生物選修一生物技術(shù)實踐 知識點總結(jié)專題一 傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)用4·按照培養(yǎng)基的用途，可將培養(yǎng)

13、基分為選擇培養(yǎng)基和鑒定培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基是指在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物生長，促進(jìn)所需要的微生物的生長。鑒別培養(yǎng)基是根據(jù)微生物的特點，在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品配制而成的，用以鑒別不同類別的微生物。高中生物選修一生物技術(shù)實踐知5·培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括 水 、 無機(jī)鹽 、 碳源 、 氮源 、生長因子等。高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總6·碳源：能為微生物的代謝提供碳元素的物質(zhì)。如CO2、NaHCO3等無機(jī)碳源；糖類、石油、花生粉餅等有機(jī)碳源。異養(yǎng)微生物只能利用有機(jī)碳源。單質(zhì)碳不能作為碳源。7·氮源：能為微生物的代謝提供氮元素的物質(zhì)。如N

14、2、NH3、NO3-、NH4+（無機(jī)氮源）蛋白質(zhì)、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨（有機(jī)氮源）等。只有固氮微生物才能利用N2。NH3既可以作為硝化細(xì)菌的氮源也可以做其能源8·培養(yǎng)基還要滿足微生物生長對PH、特殊營養(yǎng)物質(zhì)以及氧氣的要求。例如，培養(yǎng)乳酸桿菌時需要在培養(yǎng)基中添加維生素，培養(yǎng)霉菌時須將培養(yǎng)基的pH調(diào)至酸性，培養(yǎng)細(xì)菌是需要將pH調(diào)至中性或微堿性，培養(yǎng)厭氧型微生物是則需要提供無氧的條件高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點9·無菌技術(shù)·獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是防止外來雜菌的入侵，要注意以下幾個方面：高中生物選修一生物技術(shù)0 實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進(jìn)行清潔和消毒

15、。高中 將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌。高中生物選為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行。高中生物物實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。高無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還能有效避免操作者自身被微生物感染。10·消毒與滅菌的區(qū)別高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總結(jié)高中生物選修一生物技術(shù)實踐 知識點總結(jié)專題消毒指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部一部分對人體有害的微生物（不包括芽孢和孢子）。消毒方法常用煮沸消毒法，巴氏消毒法（對于一些不耐高溫的液體）還有化學(xué)藥劑（如酒精、氯氣、石

16、炭酸等）消毒、紫外線消毒。滅菌則是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所有的微生物，包括芽孢和孢子。滅菌方法有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌。11、滅菌方法：接種環(huán)、接種針、試管口等使用灼燒滅菌法；高中生物選玻璃器皿、金屬用具等使用干熱滅菌法，所用器械是干熱滅菌箱 ；培養(yǎng)基、無菌水等使用高壓蒸汽滅菌法，所用器械是高壓蒸汽滅菌鍋 。高中生比較項理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強(qiáng)烈全部微生物能12、 制作牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基高（1）方法步驟：計算稱量溶化調(diào)PH、分裝、封口滅菌倒平板。（2）倒平板操作的步驟：將滅過菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌

17、面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞。高中生右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過火焰。用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基（約1020mL）倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。等待平板冷卻凝固，大約需510min。然后，將平板倒過來放置，使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。13·倒平板操作的討論高中（1）培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50左右時， 可以用手觸摸盛有培養(yǎng)基的錐形瓶，感覺錐形瓶的溫度下降到剛剛不燙手時，就可以進(jìn)行倒平板了。（2）為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？通過灼燒滅菌，防止瓶口的微生物污染培養(yǎng)基。高中生物（3）平板冷凝后，為什么要將平板倒置？

18、答：平板冷凝后，皿蓋上會凝結(jié)水珠，凝固后的培養(yǎng)基表面的濕度也比較高，將平板倒置，可以防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基，避免劃線接種和菌落的培養(yǎng)困難。還可以避免使培養(yǎng)基表面的水分過分地?fù)]發(fā)。生產(chǎn)大量代謝（4）在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？高答：空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。高14.純化大腸桿菌高中生物選修一（1）微生物接種的方法最常用的是平板劃線法和稀釋涂布平板法。（2）平板劃線法是通過接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作。將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在數(shù)次劃線后

19、培養(yǎng)，可以分離到由一個細(xì)胞繁殖而來的肉眼可見的子細(xì)胞群體，這就是標(biāo)準(zhǔn)菌落。（3）稀釋涂布平板法是將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進(jìn)行培養(yǎng)。分為系列稀釋操作和涂布平板操作兩步。（4）用平板劃線法和稀釋涂布平板法接種的目的是：使聚集在一起的微生物分散成單個細(xì)胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落，以便于純化菌種。高（5）平板劃線法操作步驟：將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)燒紅。在火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞。將試管口通過火焰。將已冷卻的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液。將試管通過火焰，并塞上棉塞。左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平

20、板內(nèi)，劃三至五條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)皿。灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的末端開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。將平板倒置放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。15·平板劃線操作的討論高中生物選修一生（1） 為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需灼燒接種環(huán)嗎？為什么？酵高答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加

21、，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細(xì)菌污染環(huán)境和感染操作者。高中生物（2） 在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進(jìn)行劃線？高：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。、（3）在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？高中生物選修一生物技術(shù)實踐知答：劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。高中生物選修技術(shù)的應(yīng)用課題一 果酒和（6）涂布平板操作的步驟：將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中。取少量菌液，滴加到

22、培養(yǎng)基表面。高將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃，待酒精燃盡后，冷卻810s。用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。16、菌種的保存高中生物選修（1）對于頻繁使用的菌種，可以采用臨時保藏的方法。臨時保藏方法：將菌種接種到試管的固體斜面培養(yǎng)基上，在合適的溫度下培養(yǎng)。當(dāng)菌落長成后，將試管放4的冰箱中保藏。以后每36個月，都要重新將菌種從舊的培養(yǎng)基上轉(zhuǎn)移到新鮮的培養(yǎng)基上。缺點：這種方法保存的時間不長，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。（2）對于需要長期保存的菌種，可以采用甘油管藏的方法。高中生物在3mL的甘油瓶中，裝入1mL甘油后滅菌。將1mL培養(yǎng)的菌液轉(zhuǎn)移到甘油瓶中，與甘油充分混勻后，放在20的冷凍箱中保

23、存。疑難解答高中生（1）生物的營養(yǎng)高中生物選修一生物吸收營養(yǎng)是指生物攝取、利用營養(yǎng)物質(zhì)的過程。營養(yǎng)物質(zhì)是指維持機(jī)體生命活動，保證發(fā)育、生殖所需的外源物質(zhì)。人及動物的營養(yǎng)物質(zhì)：水、無機(jī)鹽、糖類、脂質(zhì)、蛋白質(zhì)、維生素六類。高中生物植物的營養(yǎng)物質(zhì)：礦質(zhì)元素、水、二氧化碳等三類。微生物的營養(yǎng)物質(zhì)：水、無機(jī)鹽、碳源、氮源及特殊營養(yǎng)物質(zhì)五類。高（2）確定培養(yǎng)基制作是否合格的方法高中生物選修一生物將未接種的培養(yǎng)基在恒溫箱中保溫12天，無菌落生長，說明培養(yǎng)基的制備是成功的，否則需要重新制備。高中生 課題二 土壤中分解尿素的細(xì)菌的分離與計數(shù)高中生物選修一1、尿素 是一種重要的農(nóng)業(yè)氮肥，尿素并不能直接被農(nóng)作物吸收

24、。只有當(dāng)土壤中的細(xì)菌將尿素分解成氨之后，才能被植物利用。土壤中的細(xì)菌之所以能分解尿素，是因為他們能合成脲酶高中，尿素被分解的方程式是： 。 尿素最初是從人的尿液中發(fā)現(xiàn)的高中生物2、篩選菌株高修一生物（1）實驗室中微生物的篩選應(yīng)用的原理高中生物選修一生人為提供有利于目的菌株生長的條件（包括營養(yǎng)、溫度、pH等），同時抑制或阻止其他微生物生長。高中生物選修一生物技術(shù)實踐知（2）選擇性培養(yǎng)基高，在微生物學(xué)中，將允許特定種類的微生物生長，同時抑制或阻止其他種類微生物生長的培養(yǎng)基，稱作選擇培養(yǎng)基。高中生物選修一生物技痕彌（3）配制選擇培養(yǎng)基的依據(jù)高中生物選修一生物根據(jù)選擇培養(yǎng)的菌種的生理代謝特點加入某種物

25、質(zhì)以達(dá)到選擇的目的。例如，培養(yǎng)基中不加入有機(jī)物可以選擇培養(yǎng)自養(yǎng)微生物；培養(yǎng)基中不加入氮元素，可以選擇培養(yǎng)能固氮的微生物；加入高濃度的食鹽可選擇培養(yǎng)金黃色葡萄球菌等。3.統(tǒng)計菌落數(shù)目高中（1）測定微生物數(shù)量的常用方法有稀釋涂布平板法和顯微鏡直接計數(shù)。（2）稀釋涂布平板法統(tǒng)計樣品中活菌的數(shù)目的原理高中生當(dāng)樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌。通過統(tǒng)計平板上的菌落數(shù)，就能推測出樣品中大約含有多少活細(xì)菌。為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般設(shè)置35個平板，選擇菌落數(shù)在30300的平板進(jìn)行計數(shù)，并取平均值。統(tǒng)計的菌落數(shù)往往比活菌的實際數(shù)目低，因此，統(tǒng)計結(jié)果一般用菌落數(shù)而不是活菌

26、數(shù)來表示。4.設(shè)置對照高生物選修設(shè)置對照的主要目的是排除實驗組中非測試因素對實驗結(jié)果的影響，提高實驗結(jié)果的可信度。對照實驗是指除了被測試的條件以外，其他條件都相同的實驗，其作用是比照試驗組，排除任何其他可能原因的干擾，證明確實是所測試的條件引起相應(yīng)的結(jié)果。5.實驗設(shè)計高實驗設(shè)計包括實驗方案，所需儀器、材料、用具和藥品，具體的實施步驟以及時間安排等的綜合考慮和安排。（1）土壤取樣：同其他生物環(huán)境相比，土壤中的微生物，數(shù)量最大，種類最多。在富含有機(jī)質(zhì)的土壤表層，有更多的微生物生長。從富含有機(jī)物、潮濕、pH7的土壤中取樣。鏟去表層土，在距地表約38cm的土壤層取樣。（2）樣品的稀釋：樣品的稀釋程度將

27、直接影響平板上生長的菌落數(shù)目。在實際操作中，通常選用一定稀釋范圍的樣品液進(jìn)行培養(yǎng)，以保證獲得菌落數(shù)在30300之間、適于計數(shù)的平板。測定土壤中細(xì)菌的數(shù)量，一般選用104 105 106高中生測定放線菌的數(shù)量，一般選用103 104 105高中生測定真菌的數(shù)量，一般選用102 103 104高中生物選微生物的培養(yǎng)與觀察高中生 （3）不同種類的微生物，往往需要不同的培養(yǎng)溫度和培養(yǎng)時間。細(xì)菌3037 12天放線菌2528 57天 霉菌2528 34天高中生每隔24小時統(tǒng)計一次菌落數(shù)目，選取菌落數(shù)目穩(wěn)定時的記錄作為結(jié)果，這樣可以防止因培養(yǎng)時間不足而導(dǎo)致遺漏菌落的數(shù)目。一般來說，在一定的培養(yǎng)條件下（相同

28、的培養(yǎng)基、溫度及培養(yǎng)時間），同種微生物表現(xiàn)出穩(wěn)定的菌落特征。形狀、大小、隆起程度、顏色6、疑難解答高中（1）如何從平板上的菌落數(shù)推測出每克樣品中的菌落數(shù)？高中生統(tǒng)計某一稀釋度下平板上的菌落數(shù)，最好能統(tǒng)計3個平板，計算出平板菌落數(shù)的平均值高中生，物每克樣品中的菌落數(shù)=（C/V）*M 其中，C代表某一稀釋度下平板上生長的平均菌落數(shù)，V代表涂布平板時所用的稀釋液的體積（ml），M代表稀釋倍數(shù)高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點總 課題三 分解纖維素的微生物的分離高中生物選修一生物技術(shù)1、 1、纖維素，一種由葡萄糖首尾相連而成的高分子化合物，是地球上含量最豐富的多糖類物質(zhì)。高中生物選修2、纖維素與纖維素酶

29、高中（1）棉花是自然界中纖維素含量最高的天然產(chǎn)物，木材、作物秸稈等也富含纖維素。（2）纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少包括三種組分，即C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖。纖維素最終被水解成葡萄糖，為微生物的生長提供營養(yǎng)。高中3、纖維素分解菌的篩選高中生物（1）篩選方法：剛果紅染色法。能夠通過顏色反應(yīng)直接對微生物進(jìn)行篩選。（2）剛果紅染色法篩選纖維素分解菌的原理高剛果紅是一種染料，它可以與像纖維素這樣的多糖物質(zhì)形成紅色復(fù)合物，但并不和水解后的纖維二糖和葡萄糖發(fā)生這種反應(yīng)。當(dāng)我們在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅時，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維

30、素形成紅色復(fù)合物。當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅纖維素的復(fù)合物就無法形成，培養(yǎng)基中會出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈。這樣，我們就可以通過是否產(chǎn)生透明圈來篩選纖維素分解菌。高中生物選修一生4、分離分解纖維素的微生物的實驗流程高中生土壤取樣選擇培養(yǎng)（此步是否需要，應(yīng)根據(jù)樣品中目的菌株數(shù)量的多少來確定）梯度稀釋將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上挑選產(chǎn)生透明圈的菌落高中生物選修一（1）土壤采集 選擇富含纖維素的環(huán)境。（2）剛果紅染色法分離纖維素分解菌的步驟 倒平板操作、制備菌懸液、涂布平板高中生物選（3）剛果紅染色法種類一種是先培養(yǎng)微生物，再加入剛果紅進(jìn)行顏色反應(yīng)，另一種是在倒平板時就加入剛果

31、紅5、課題延伸高中生物對分解纖維素的微生物進(jìn)行了初步的篩選后，只是分離純化的第一步，為確定得到的是纖維素分解菌，還需要進(jìn)行發(fā)酵產(chǎn)纖維素酶的實驗，纖維素酶的發(fā)酵方法有液體發(fā)酵和固體發(fā)酵兩種。纖維素酶的測定方法，一般是對纖維素酶分解濾紙等纖維素后所產(chǎn)生的葡萄糖進(jìn)行定量的測定。高中生物選修一生物技術(shù)實踐知識點6、疑難解答高（1）為什么要在富含纖維素的環(huán)境中尋找纖維素分解菌？高由于生物與環(huán)境的相互依存關(guān)系，在富含纖維素的環(huán)境中，纖維素分解菌的含量相對提高，因此從這種土樣中獲得目的微生物的幾率要高于普通環(huán)境。（2）將濾紙埋在土壤中有什么作用？你認(rèn)為濾紙應(yīng)該埋進(jìn)土壤多深？高中將濾紙埋在土壤中能使纖維素分解

32、菌相對聚集，實際上是人工設(shè)置纖維素分解菌生存的適宜環(huán)境。一般應(yīng)將紙埋于深約10cm左右腐殖土壤中。（3）兩種剛果紅染色法的比較高中生物選修一生物技術(shù)鋒叛楓靴穢茄痕彌移翟方法一是傳統(tǒng)的方法，缺點是操作繁瑣，加入剛果紅溶液會使菌落之間發(fā)生混雜；其優(yōu)點是這樣顯示出的顏色反應(yīng)基本上是纖維素分解菌的作用。方法二的優(yōu)點是操作簡便，不存在菌落混雜問題，缺點是由于纖維素和瓊脂、土豆汁中都含有淀粉類物質(zhì)，可以使能夠產(chǎn)生淀粉酶的微生物出現(xiàn)假陽性反應(yīng)。但這種只產(chǎn)生淀粉酶的微生物產(chǎn)生的透明圈較為模糊，因為培養(yǎng)基中纖維素占主要地位，因此可以與纖維素酶產(chǎn)生的透明圈相區(qū)分。方法二的另一缺點是：有些微生物具有降解色素的能力，

33、它們在長時間培養(yǎng)過程中會降解剛果紅形成明顯的透明圈，與纖維素分解菌不易區(qū)分。（4）為什么選擇培養(yǎng)能夠“濃縮”所需的微生物？ 在選擇培養(yǎng)的條件下，可以使那些能夠適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物得到迅速繁殖，而那些不適應(yīng)這種營養(yǎng)條件的微生物的繁殖被抑制，因此可以起到“濃縮”的作用。移專題三 植物的組織培養(yǎng)技術(shù) 課題一 菊花的組織培養(yǎng)1、細(xì)胞分化：在生物個體發(fā)育過程中，細(xì)胞在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上出現(xiàn)穩(wěn)定性差異的過程。其實質(zhì)是 基因的選擇性表達(dá) ，即同種生物體內(nèi)各個不同的體細(xì)胞中所含的 DNA 相同 RNA 不同。2、愈傷組織是通過 脫分化 形成的，其細(xì)胞排列 疏松無規(guī)則 ，高度 液泡化 ，呈 無定形 狀態(tài)

34、的 薄壁 細(xì)胞3、植物組織培養(yǎng)的過程： 離體植物組織或細(xì)胞 脫分化 愈傷組織 再分化 叢芽 叢根植物體 ，運用的原理是細(xì)胞的全能性，即每個體細(xì)胞里含有 發(fā)育成完整植株所必需的全部 基因。4、植物組織培養(yǎng)技術(shù)的應(yīng)用有：實現(xiàn)優(yōu)良品種的快速繁殖；培育脫毒作物；制作人工種子；培育作物新品種以及細(xì)胞產(chǎn)物的工廠化生產(chǎn)等。影響植物組織培養(yǎng)的條件：材料：植物的種類、材料的 年齡 和 保存時間長短 等都會影響實驗結(jié)果。菊花組織培養(yǎng)一般選擇 未開花植株的莖上部新萌發(fā)的側(cè)枝 作材料。一般來說，容易進(jìn)行無性繁殖的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)。選取生長旺盛嫩枝進(jìn)行組培的是嫩枝生理狀態(tài)好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。營養(yǎng)：常用的培養(yǎng)

35、基是 MS 培養(yǎng)基，其中含有的大量元素是 N、P、K、Ca、Mg 、S ，微量元素是 B、Mn、Cu、Fe、Mo、I、Co ，有機(jī)物是 甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖 等。激素：在培養(yǎng)基中需要添加 生長素 和 細(xì)胞分裂素 等植物激素，其 濃度 、 使用順序 、 用量的比例 等都影響結(jié)果。5、啟動細(xì)胞分裂、分化的關(guān)鍵性激素是 生長素、 細(xì)胞分裂素 。 分裂素等植物激素，其濃度、使用的先后順序、用量的比例等都影響結(jié)果。使用順序?qū)嶒灲Y(jié)果先生長素，后細(xì)胞分裂素有利于分裂但不分化先細(xì)胞分裂素，后生長素細(xì)胞既分裂也分化同時使用分化頻率提高生長素 細(xì)胞分裂素比值與結(jié)果比值高時促根分化，抑芽形成比值低時促芽

36、分化，抑根形成比值適中促進(jìn)愈傷組織生長 +6、環(huán)境條件： PH 、 溫度 、光等環(huán)境條件。菊花組培所需PH為 5.8 ，溫度為 18-22 ，光照條件為每日用日光燈照射 12h 。7、配制培養(yǎng)基：應(yīng)加入的物質(zhì)有瓊脂、蔗糖、大量元素、微量元素、有機(jī)物和植物激素的母液，并用蒸餾水定容到1000毫升。8、在菊花組織培養(yǎng)中，可以不添加植物激素，原因是菊花莖段組織培養(yǎng)比較容易。MS培養(yǎng)基的滅菌方式：高壓蒸汽滅菌。9、MS培養(yǎng)基中各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用是什么？與肉湯培養(yǎng)基相比，MS培養(yǎng)基有哪些特點？大量元素和微量元素提供植物細(xì)胞所必需的無機(jī)鹽；蔗糖提供碳源，維持細(xì)胞滲透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離

37、體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求。微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營養(yǎng)為主，MS培養(yǎng)基則需提供大量無機(jī)營養(yǎng)。10、外植體的消毒： 外植體菊花莖段用流水沖洗后可加少許洗衣粉，用軟刷輕輕刷洗，刷洗后在流水下沖洗20min左右。用無菌吸水紙吸干外植體表面的水分，放入體積分?jǐn)?shù)為70%的酒精中搖動23次，持續(xù)67s，立即將外植體取出，在無菌水中清洗。取出后仍用無菌吸水紙吸干外植體表面水分，放入質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%的氯化汞溶液中12min。取出后，在無菌水中至少清洗3次，漂洗消毒液。注意：對外植體進(jìn)行表面消毒時，就要考慮藥劑的消毒效果，又要考慮植物的耐受能力。11、 接種：接種過程中插入外植體時

38、形態(tài)學(xué)上端朝上，每個錐形瓶接種78個外植體。外植體接種與細(xì)菌接種相似，操作步驟相同，而且都要求無菌操作。專題二 月季的花藥培養(yǎng)1、被子植物的雄蕊通常包含花絲、花藥兩部分?；ㄋ帪槟覡罱Y(jié)構(gòu)，內(nèi)部含有許多花粉。花粉是由花粉母細(xì)胞經(jīng)過減數(shù)分裂而形成的，因此，花粉是單倍體的生殖細(xì)胞。被子植物花粉的發(fā)育要經(jīng)歷小孢子四分體時期、單核期和雙核期等階段。在小孢子四分體時期，4個單倍體細(xì)胞連在一起，進(jìn)入單核期時，四分體的4個單倍體細(xì)胞彼此分離，形成4個具有單細(xì)胞核的花粉粒。這時的細(xì)胞含濃厚的原生質(zhì)，核位于細(xì)胞的中央（單核居中期）。隨著細(xì)胞不斷長大，細(xì)胞核由中央移向細(xì)胞一側(cè)（單核靠邊期），并分裂成1個生殖細(xì)胞核和1

39、個花粉管細(xì)胞核，進(jìn)而形成兩個細(xì)胞，一個是生殖細(xì)胞，一個是營養(yǎng)細(xì)胞。生殖細(xì)胞將在分裂一次，形成兩個精子。所以植物精子的形成過程包括的分裂方式有 減數(shù)分裂 和 有絲分裂 。2、花藥培養(yǎng)產(chǎn)生花粉植株的兩條途徑： 花粉 脫分化 胚狀體 分化 叢芽 誘導(dǎo) 生根 植物體 、 花粉 脫分化 愈傷組織 再分化 叢芽 誘導(dǎo) 生根 植物體 兩種途徑 沒有絕對的界限，主要取決于培養(yǎng)基中 激素的種類和比例 。注意：無論哪種產(chǎn)生方式，都要先誘導(dǎo)生芽，再誘導(dǎo)生根胚狀體：植物體細(xì)胞組織培養(yǎng)過程中，誘導(dǎo)產(chǎn)生的形態(tài)與受精卵發(fā)育成的胚非常類似的結(jié)構(gòu)，其發(fā)育也與受精卵發(fā)育成的胚類似，有胚芽、胚根、胚軸等完整結(jié)構(gòu)，就像一粒種子，又稱

40、為細(xì)胞胚。3、花藥培養(yǎng)得到的是 單倍體 植株，其特點是 植株矮小，抗逆性差，不育 ，若要得到可育的植株采取的方法是 用秋水仙素處理幼苗植株 ，這種方法和單倍體育種相結(jié)合，具有 明顯縮短育種年限，得到純合體 的優(yōu)點。4、花藥培養(yǎng)的原理是: 細(xì)胞全能性 ,即， 花藥細(xì)胞含有發(fā)育成完整植株所必需的全部基因，其實驗流程包括 材料的選取 、 材料的消毒 、 接種 、 培養(yǎng) 和 移栽 ，材料的選?。哼x擇花藥時，一般要通過鏡檢來確定其中的花粉是否處于適宜的發(fā)育期。確定花粉發(fā)育時期的最常用的方法是醋酸洋紅法。但是，某些植物的花粉細(xì)胞核不易著色，需采用焙花青-鉻礬法，這種方法能將花粉細(xì)胞核染成藍(lán)黑色，在材料的消

41、毒這個步驟當(dāng)中，其具體的操作是：花蕾用 體積分?jǐn)?shù)70%的酒精 浸泡30s 無菌水 中清洗 無菌吸水紙吸干表面的水分 質(zhì)量分?jǐn)?shù)為 0.1%的 的 氯化汞 溶液中2-4min 無菌水沖洗3至5次； 在整個培養(yǎng)的過程當(dāng)中，光照是如何控制的？ 開始不需要光照，幼小植株形成后需要光照 。 ·專題4 酶的研究與應(yīng)用課題1 探討加酶洗衣粉的洗滌效果1加酶洗衣粉是指含有酶制劑的洗衣粉，目前常用的酶制劑有四類：蛋白酶、脂肪酶、淀粉酶和纖維素酶。其中，應(yīng)用最廣泛、效果最明顯的是堿性蛋白酶和堿性脂肪酶。堿性蛋白酶能將血漬、奶漬等含有的大分子蛋白質(zhì)水解成可溶性的氨基酸或小分子的肽，使污跡從衣物上脫落。同樣道

42、理，其他酶也是將大分子物質(zhì)分解為小分子物質(zhì)，從而使洗衣粉具有更好的去污能力。2、使用加酶洗衣粉時，影響酶活性的因素有溫度 、酸堿度、表面活性劑等，為此，科學(xué)家通過基因工程生產(chǎn)出了特殊的酶，并制成酶制劑，解決了這個問題。3、加酶洗衣粉可以降低表面活性劑和三聚磷酸鈉的用量，使洗滌劑朝低磷無磷的方向發(fā)展，減少對環(huán)境的污染。4、普通洗衣粉中通常包含有：表面活性劑、水軟化劑、堿劑、漂白劑等成分，有的洗衣粉中還含有增白劑、香精和色素，以及填充劑等。5、可在洗滌后比較污物的殘留狀況，如：已消失、顏色變淺、面積縮小等，最好能進(jìn)行定量的比較。6、普通洗衣粉與加酶洗衣粉的聯(lián)系與區(qū)別  普通洗衣粉加酶洗衣

43、粉相同點表面活性劑可以產(chǎn)生泡沫，可以將油脂分子分散開；水軟化劑可以分散污垢；等等。不同點酶可以將大分子有機(jī)物分解為小分子有機(jī)物，小分子有機(jī)物易于溶于水，從而與纖維分開。課題3 酵母細(xì)胞的固定化1、高果糖漿是指果糖含量為42%左右的糖漿，能將葡萄糖轉(zhuǎn)化為果糖的酶是葡萄糖異構(gòu)酶。2、使用固定化酶技術(shù)，將這種酶固定在一種顆粒狀的載體上，再將這些酶顆粒裝到一個反應(yīng)柱內(nèi)，柱子底端裝上分布著許多小孔的篩板。酶顆粒無法通過篩板的小孔，而反應(yīng)溶液卻可以自由出入。生產(chǎn)過程中，將葡萄糖溶液從反應(yīng)柱的上端注入，使葡萄糖溶液流過反應(yīng)柱，與固定化葡萄糖異構(gòu)酶接觸，轉(zhuǎn)化成果糖，從反應(yīng)柱的下端流出。反應(yīng)柱能連續(xù)使用半年，大

44、大降低了生產(chǎn)成本，提高了果糖的產(chǎn)量和質(zhì)量。3、固定化酶和固定化細(xì)胞是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。4、一般來說，酶更適合采用化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法固定，而細(xì)胞多采用包埋法固定化。這是因為細(xì)胞體積比酶分子的體積大；體積大的細(xì)胞難以被吸附或結(jié)合，而個小的酶容易從包埋材料中漏出。5、包埋法法固定化細(xì)胞，即將微生物細(xì)胞均勻地包埋在不溶于水的多孔性的載體中。常用的載體有明膠、瓊脂糖、海藻酸鈉、醋酸纖維素和聚丙烯酰胺等。6酵母細(xì)胞的活化就是處于休眠狀態(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。7、加熱溶化海藻酸鈉時要注意小火間斷加熱，重復(fù)幾次，并不斷攪拌，直

45、到海藻酸鈉溶化為止。如果加熱太快，海藻酸鈉會發(fā)生焦糊。8、將海藻酸鈉溶液冷卻至室溫，加入已活化的海藻酸鈉溶液，進(jìn)行充分?jǐn)嚢?，使其混合均勻，在轉(zhuǎn)移至注射器中。9固定化酵母細(xì)胞，以恒定的速度緩慢地將注射器中的溶液滴加到剛配制好的CaCl2溶液中，并浸泡30min（時間）左右。海藻酸鈉膠體在CaCl2這種電解質(zhì)溶液的作用下，發(fā)生聚沉形成凝膠珠，作用機(jī)理是鹽離子的電荷與膠體微粒電荷相互吸引，形成更大的膠體顆粒。10、如果制作的凝膠珠顏色過淺、呈白色，說明海藻酸鈉濃度濃度偏低，該種凝膠珠包埋的酵母細(xì)胞數(shù)目少，影響實驗效果；如果形成的凝膠珠不是圓形或橢圓形，則說明海藻酸鈉濃度濃度偏高，制作失敗，需要再作嘗

46、試。11、利用固定的酵母細(xì)胞發(fā)酵產(chǎn)生酒精，可以看到產(chǎn)生了很多氣泡，同時會聞到酒味。12、工業(yè)生產(chǎn)中，細(xì)胞的固定化技術(shù)是在嚴(yán)格無菌的條件下進(jìn)行的。13、直接使用酶、固定化酶和固定化細(xì)胞催化的優(yōu)缺點如下表所示。類型優(yōu)點不足直接使用酶催化效率高，低耗能、低污染等。對環(huán)境條件非常敏感，容易失活；溶液中的酶很難回收，不能被再次利用，提高了生產(chǎn)成本；反應(yīng)后酶會混在產(chǎn)物中，可能影響產(chǎn)品質(zhì)量。固定化酶酶既能與反應(yīng)物接觸，又能與產(chǎn)物分離，同時，固定在載體上的酶還可以被反復(fù)利用。一種酶只能催化一種化學(xué)反應(yīng)，而在生產(chǎn)實踐中，很多產(chǎn)物的形成都通過一系列的酶促反應(yīng)才能得到的。固定化細(xì)胞成本低，操作更容易。固定后的酶或細(xì)

47、胞與反應(yīng)物不容易接近，可能導(dǎo)致反應(yīng)效果下降等。14、酵母細(xì)胞的活化。在缺水的狀態(tài)下，微生物會處于休眠狀態(tài)。活化就是讓處于休眠狀態(tài)的微生物重新恢復(fù)正常的生活狀態(tài)。酵母細(xì)胞所需要的活化時間較短，一般需要0.51 h，15、加熱使海藻酸鈉溶化是操作中最重要的一環(huán)，涉及到實驗的成敗，如果海藻酸鈉濃度過高，將很難形成凝膠珠；如果濃度過低，形成的凝膠珠所包埋的酵母細(xì)胞的數(shù)目少，影響實驗效果。16、剛形成的凝膠珠應(yīng)在CaCl2溶液中浸泡一段時間，以便形成穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)。檢驗?zāi)z珠的質(zhì)量是否合格，可以使用下列方法。一是用鑷子夾起一個凝膠珠放在實驗桌上用手?jǐn)D壓，如果凝膠珠不容易破裂，沒有液體流出，就表明凝膠珠的制作

48、成功。二是在實驗桌上用力摔打凝膠珠，如果凝膠珠很容易彈起，也能表明制備的凝膠珠是成功的。專題5 DNA和蛋白質(zhì)技術(shù)1. 提取洋蔥的DNA實驗中，在切碎的洋蔥中加入一定的_洗滌劑_和_食鹽_，在_0.14mol/l NaCl 溶液中，DNA的溶解度最小；DNA的鑒定是在沸水浴的條件下，DNA遇_二苯胺 變藍(lán)色 2.DNA的析出中，將處理后的溶液過濾，加入與濾液體積相等的、冷卻的酒精溶液（體積分?jǐn)?shù)為95%）靜置2-3分鐘，溶液中出現(xiàn)白色絲狀物。3.PCR的中文全稱是：多聚酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)，是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)。原理是體外DNA復(fù)制，PCR反應(yīng)在一定緩沖溶液中，需提供DNA模板、4種脫氧核苷

49、酸、耐熱的DNA聚合酶、引物、同時控制溫度條件。PCR擴(kuò)增的過程為：(1)變性，當(dāng)溫度上升到90以上時，雙鏈DNA解旋為單鏈；(2)復(fù)性，當(dāng)溫度下降到50左右，兩種引物通過堿基互補(bǔ)配對與兩條單鏈DNA結(jié)合；(3)延伸，溫度上升到72左右，四種脫氧核糖核苷酸在DNA聚合酶的作用下，根據(jù)互補(bǔ)堿基配對原則合成新的DNA。DNA的合成方向是從子鏈的5-3。4.凝膠色譜法也稱作_分配色譜法_,是根據(jù)_相對分子質(zhì)量大小_分離蛋白質(zhì)的有效方法。其原理：大多數(shù)凝膠是由_多糖類化合物_構(gòu)成的小球體，內(nèi)部有許多貫穿的通道，當(dāng)不同的蛋白質(zhì)通過凝膠時，相對分子質(zhì)量較小 的蛋白質(zhì)容易進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，路程_較長_，移

50、動速度_較長_；而_相對分子質(zhì)量較大_的蛋白質(zhì)無法進(jìn)入凝膠內(nèi)部的通道，只能在_凝膠外部_移動，路程_較短_，相對分子質(zhì)量不同的蛋白質(zhì)因此得以分離，即分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)、分子質(zhì)量中等的蛋白質(zhì)和分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)洗脫出來的先后順序為 分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)最先洗脫出來、分子質(zhì)量中等的蛋白質(zhì)第二洗脫出來，分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)最后被洗脫出來 。5.在一定范圍內(nèi)，緩沖溶液能抵制_外界酸和堿_對溶液_PH_的影響，維持pH基本不變。6.電泳概念：帶電粒子在 電場 的作用下發(fā)生 遷移 的過程。其原理：許多重要的生物大分子，如_多肽_、_核酸_等都具有_可解離_的基團(tuán)，在一定pH下，這些基團(tuán)會帶上_正電_或_負(fù)電_

51、。在電場的作用下，這些帶電分子會向著_與其所帶電荷相反的電極_移動。電泳利用了分離樣品中各種分子_帶電性質(zhì)差異_以及分子本身的_大小_、_性狀的_不同，使帶電分子產(chǎn)生不同的_遷移速率_，從而實現(xiàn)樣品中各種分子的分離。7.蛋白質(zhì)提取分離一般分為_紅細(xì)胞的洗滌_、_血紅蛋白的釋放_、_分離血紅蛋白、_透析。8.血紅蛋白提取實驗選取的是 哺乳動物成熟 紅細(xì)胞為材料，原因是 沒有細(xì)胞核及其它較多的細(xì)胞器 ，紅細(xì)胞洗滌目的：去除雜蛋白。分離血紅蛋白溶液：將攪拌好的混合液離心后可觀察到試管中溶液分為4層。第1層：_無色透明_ 的甲苯層第2層：_脂溶性物質(zhì)_的沉淀層_白色_薄層固體第3層：_血紅蛋白_的水溶

52、液_紅色透明_透明第4層：其他雜質(zhì)的_暗紅色_色沉淀物 將液體用_濾紙_過濾，除去_脂溶性沉淀層_，于_分液漏斗_中靜置片刻后，分出下層的_紅色透明液體。9.血紅蛋白透析原理：透析袋能使 小分子 自由進(jìn)出，而將 大分子 保留在袋內(nèi)。目的：可以除去 樣品中分子量較小的雜質(zhì) ，或用于 更換樣品的緩沖液 10.測定（ 蛋白質(zhì)相對分子質(zhì)量 ）通常用十二烷基硫酸鈉（SDS）聚丙稀酰胺凝膠電泳。蛋白質(zhì)在聚丙烯酰胺凝膠中的遷移率取決于它所帶靜電荷的多少以及分子的大小等因素。11.凝膠色譜柱的裝填:凝膠用_蒸餾水_充分溶脹后，配成_凝膠懸浮液_，在與色譜柱下端連接的尼龍管打開的情況下，一次性緩慢倒入_色譜柱內(nèi)

53、_。注意色譜柱內(nèi)不能有 氣泡 存在，一旦發(fā)現(xiàn)，色譜柱必須 重裝 12.SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳判斷 純化 的蛋白質(zhì)是否達(dá)到要求，需要進(jìn)行蛋白質(zhì)的鑒定。在血紅蛋白的分離中，其分離成功的標(biāo)志 紅色區(qū)帶均勻一致的移動 。專題6 植物有效成分的提取無1天然香料的來源：_動物_、_ 植物 ；芳香油的提取方法： _蒸餾_、_ 壓榨 _、_ 萃取 _等。高中芳香油的性質(zhì)：_ 具有很強(qiáng)的揮發(fā)性 ，成分復(fù)雜，以萜類化合物及其衍生物為主。高2.水蒸氣蒸餾法：高原理：水蒸汽可將揮發(fā)性較強(qiáng)的植物芳香油攜帶出來形成 _油水混合物_ ，冷卻后 重新分離出油層和水層_。高中生酒和果醋的制作1、發(fā)酵：通過微生物技術(shù)的培養(yǎng)來生產(chǎn)大量代謝產(chǎn)物的過程。2、有氧發(fā)酵：醋酸發(fā)酵 谷氨酸發(fā)酵 ·無方法： _水中蒸餾 ：原料放在沸水中加熱蒸餾。高中_ 水上蒸餾 ：原料隔放在沸水上加熱蒸餾。高中 _水氣蒸餾 ：利用外來高溫水蒸氣加熱蒸餾。高中生物選不足：有些原料不適宜于水中蒸餾，如柑橘、檸檬