新生兒遺傳性耳聾基因篩查項目

1、新生兒遺傳性耳聾基因篩查項目Contents目錄目錄項目背景及意義項目背景及意義實驗流程及質(zhì)控實驗流程及質(zhì)控血片采集、遞送與保存血片采集、遞送與保存耳聾遺傳咨詢耳聾遺傳咨詢臨床案例臨床案例目目 錄錄項目背景及意義項目背景及意義part 1Contents 我國殘疾人群：我國殘疾人群：8502萬萬 聽力殘疾人群：聽力殘疾人群：2054萬萬數(shù)據(jù)來自：數(shù)據(jù)來自：關(guān)于使用關(guān)于使用2010年末全國殘疾人總數(shù)及各類、不同殘疾等級人數(shù)的通知年末全國殘疾人總數(shù)及各類、不同殘疾等級人數(shù)的通知，2010年末各類殘疾人比例年末各類殘疾人比例聽力殘疾比例高聽力殘疾比例高41.中國出生缺陷防治報告（2012）2.中國聽

2、力論壇（2013）80%的聾兒出生在聽力正常的家庭的聾兒出生在聽力正常的家庭每年新增每年新增3.5萬萬先天性聾兒先天性聾兒【1】每年新增每年新增3-4萬萬遲發(fā)性聾兒遲發(fā)性聾兒【2】我國耳聾出生缺陷現(xiàn)狀我國耳聾出生缺陷現(xiàn)狀5耳耳 聾聾Journal of Audiology and Speech Pathology. 2011,19(1):73-77遺傳是耳聾最大病因遺傳是耳聾最大病因6流調(diào)單位：流調(diào)單位：301醫(yī)院聾病分子診斷中心醫(yī)院聾病分子診斷中心流調(diào)范圍：全國流調(diào)范圍：全國 28 個省市個省市樣品規(guī)模：樣品規(guī)模：10880 例例正常人群中攜帶耳聾基因突變比正常人群中攜帶耳聾基因突變比例約為

3、例約為基因基因病征病征正常人攜帶比例正常人攜帶比例聾人中攜帶比例聾人中攜帶比例GJB2先天聾3%21%SLC26A4遲發(fā)聾2%14.5%12S rRNA藥物聾0.3%4.4%GJB3高頻聾我國本土上克隆的第一個遺傳疾病基因四大致聾基因四大致聾基因7GJB2基因：基因：先天性重度以上感音神經(jīng)性耳聾；當(dāng)先天性重度以上感音神經(jīng)性耳聾；當(dāng)GJB2基因發(fā)生純合突變時，患者出生即表基因發(fā)生純合突變時，患者出生即表現(xiàn)出耳聾癥狀；進行人工耳蝸移植效果良好現(xiàn)出耳聾癥狀；進行人工耳蝸移植效果良好SLC26A4基因（基因（PDS基因）：基因）：大前庭水管綜合征（大前庭水管綜合征（EVAS），當(dāng)患者患感冒、頭部受打擊

4、時，聽力急劇下降；），當(dāng)患者患感冒、頭部受打擊時，聽力急劇下降；避免顱壓增大，使用改善微循環(huán)藥物和神經(jīng)營養(yǎng)藥治療避免顱壓增大，使用改善微循環(huán)藥物和神經(jīng)營養(yǎng)藥治療線粒體基因突變：線粒體基因突變：氨基糖甙類藥物敏感性耳聾；患者使用氨基糖甙類藥物會導(dǎo)致重度耳聾的發(fā)生；母氨基糖甙類藥物敏感性耳聾；患者使用氨基糖甙類藥物會導(dǎo)致重度耳聾的發(fā)生；母系家族成員應(yīng)杜絕使用氨基糖甙類抗生素藥物系家族成員應(yīng)杜絕使用氨基糖甙類抗生素藥物GJB3基因：基因：后天高頻感音神經(jīng)性耳聾；表現(xiàn)為后天突發(fā)性耳聾；進行人工耳蝸移植效果良好后天高頻感音神經(jīng)性耳聾；表現(xiàn)為后天突發(fā)性耳聾；進行人工耳蝸移植效果良好基因型與致病關(guān)系基因型與

5、致病關(guān)系8新生兒篩查耳聾基因意義新生兒篩查耳聾基因意義及早確診先天性耳聾，避免由聾致啞及早確診先天性耳聾，避免由聾致啞及早發(fā)現(xiàn)遲發(fā)性耳聾，通過生活指導(dǎo)，避免或及早發(fā)現(xiàn)遲發(fā)性耳聾，通過生活指導(dǎo)，避免或延緩耳聾發(fā)生延緩耳聾發(fā)生及早發(fā)現(xiàn)藥物性耳聾，終身禁用耳毒性藥物，及早發(fā)現(xiàn)藥物性耳聾，終身禁用耳毒性藥物，并預(yù)防家族成員發(fā)生藥物性耳聾并預(yù)防家族成員發(fā)生藥物性耳聾遺傳咨詢遺傳咨詢9先天性聾兒先天性聾兒及早安裝助聽器或人工耳蝸植入及早安裝助聽器或人工耳蝸植入避免孩子由聾致啞避免孩子由聾致啞遲發(fā)性聾兒遲發(fā)性聾兒通過生活指導(dǎo)通過生活指導(dǎo)避免或延緩耳聾發(fā)生避免或延緩耳聾發(fā)生終身禁用耳毒性藥物終身禁用耳毒性藥物

6、并預(yù)防家族成員發(fā)生藥物性耳聾并預(yù)防家族成員發(fā)生藥物性耳聾藥物性聾兒藥物性聾兒10高危新生兒的干預(yù)措施高危新生兒的干預(yù)措施目前，新篩項目已經(jīng)在北京、成都、長治、南通、固始、鄭州等地方開展目前，新篩項目已經(jīng)在北京、成都、長治、南通、固始、鄭州等地方開展開展地區(qū)開展地區(qū)2014.1南通新篩項目培訓(xùn)南通新篩項目培訓(xùn)2014.8河南固始新篩項目培訓(xùn)河南固始新篩項目培訓(xùn)2013.6長治新篩項目長治新篩項目2012.4北京新篩項目北京新篩項目2012.10成都新篩項目成都新篩項目2014.10鄭州新篩項目鄭州新篩項目全國新篩項目開展情況全國新篩項目開展情況11全國受益新生兒達到全國受益新生兒達到100萬例！

7、萬例！全國新篩項目開展情況全國新篩項目開展情況12目目 錄錄實驗流程及質(zhì)控實驗流程及質(zhì)控part 2Contents晶芯晶芯九項遺傳性耳聾基因檢測試劑盒九項遺傳性耳聾基因檢測試劑盒四個基因的四個基因的9個突變位點：個突變位點：GJB2 35 del G、176 del 16、235 del C和299 del AT； SLC26A4 IVS7-2 AG、2168 AG；線粒體12s rRNA 1555 AG、1494 CT，GJB3 538 CT針對中國人設(shè)計，指標(biāo)覆蓋了國人中98%GJB2, 50%PDS, 90%藥物性耳聾患者?？?速：8小時靈 敏：2-20 ng/L 高通量：同時檢9個位

8、點準(zhǔn) 確：與測序驗證相符率100%芯片雜交儀芯片雜交儀芯片洗干儀芯片洗干儀芯片掃描儀芯片掃描儀14檢測流程檢測流程15血片接收及血斑提取血片接收及血斑提取2.5 h核酸擴增核酸擴增3.5 h芯片雜交及清洗芯片雜交及清洗 2h芯片掃描及結(jié)果判讀芯片掃描及結(jié)果判讀5 min芯片芯片及質(zhì)控及質(zhì)控IVS7-2MIVS7-2MIVS7-2M4321QC：表面化學(xué)質(zhì)控探針 BC：空白對照探針PC：雜交陽性對照探針 MC：磁珠質(zhì)控探針I(yè)C：基因擴增內(nèi)對照探針 NC：陰性對照探針野生型探針突變型探針16質(zhì)量控制質(zhì)量控制17通過芯片內(nèi)質(zhì)控與室內(nèi)、室間質(zhì)量控制，完全能夠滿足臨床對準(zhǔn)確性、一致性的需求！檢測結(jié)果展示

9、檢測結(jié)果展示18先天性聾先天性聾235 純合純合1555均質(zhì)均質(zhì)299 雜合雜合攜帶者攜帶者藥物聾敏感藥物聾敏感2168/IVS7-2復(fù)合雜合復(fù)合雜合先天性聾先天性聾結(jié)果發(fā)放結(jié)果發(fā)放19結(jié)果上傳結(jié)果上傳短信發(fā)送短信發(fā)送上網(wǎng)查結(jié)果上網(wǎng)查結(jié)果醫(yī)院就診醫(yī)院就診報告打印報告打印醫(yī)院就診醫(yī)院就診電話回訪電話回訪北京北京鄭州鄭州目目 錄錄血片采集、遞送與血片采集、遞送與保存保存Part 3Contents采血所需物品采血所需物品21物品準(zhǔn)備物品準(zhǔn)備采血針采血針濾紙片濾紙片知情同知情同意書意書血片架血片架打印紙打印紙自封袋自封袋同代謝病篩查采集血片要求！采血流程采血流程22分娩機構(gòu)信息登記采血晾干標(biāo)本血片遞

10、送市婦幼保健院簽署知情同意書采血實施采血實施23（一）簽署知情同意書 采血前將本次篩查的項目、條件、方式、費用等情況如實告知新生兒的監(jiān)護人、遵循知情選擇的原則。 采血實施采血實施24（二）信息登記 同代謝性疾病篩查： 認真填寫采血卡片，做到字跡清楚、登記完整。并注意在填寫過程中不要污染濾紙片?？ㄆ瑑?nèi)容包括：公/自費、采血單位、母親姓名、住院號、新生兒性別、出生日期、采血日期、居住地址、聯(lián)系 和采血人等信息。采血實施采血實施25（三）規(guī)范采血采血時間：與代謝性疾病同時采血方式：同代謝性疾病合格要求：不少于2個血斑 直徑大于8mm 血斑自然滲透，濾紙正反面血斑一致血斑無污染不合格血片展示不合格血片

11、展示26酒精污染的血斑，出現(xiàn)滲血環(huán)組織液污染樣本過少，滲透不良樣本過多采血實施采血實施27（四）血片遞送與保存1、采血單位 采血完成后制成干血片，完成初級質(zhì)控，集中放入自封袋，封好封口，以防霉變，放入專用運輸包，與代謝性疾病篩查血片同時送區(qū)縣婦幼，并做好交接登記。2、市婦幼保健院 完成血片二級質(zhì)控后，干燥密封保存，放入專用運輸包，遞送到篩查單位，并做好交接登記。3、篩查單位 完成交接，對血片進行三級質(zhì)控后，進行檢測并長期保存血片（2-8）。 因特殊情況未按期采血或不合格標(biāo)本退回需要重新采血者，應(yīng)當(dāng)及時預(yù)約或追蹤采集血片。目目 錄錄耳聾遺傳咨詢耳聾遺傳咨詢part 4Contents耳聾遺傳咨詢

12、意義耳聾遺傳咨詢意義29減輕患者身體和精神上的痛苦；減輕患者及其親屬的心理壓力；幫助他們正確對待遺傳性耳聾、了解發(fā)病概率；采取正確的預(yù)防、治療措施，從而最終降低人群遺傳性耳聾的發(fā)病率；意義：耳聾遺傳咨詢對象耳聾遺傳咨詢對象301. 已生育聾兒的正常夫婦詢問再發(fā)風(fēng)險者；2. 有耳聾家族史的正常夫婦，擔(dān)心后代會遺傳此病者；3. 未婚或已婚的男女雙方均為聾啞人或其中一人為聾啞人，需要給予婚前婚配指導(dǎo)或婚后生育指導(dǎo)者；4. 新生兒耳聾患者，指導(dǎo)用藥及生活指導(dǎo)； 此外，由于耳聾基因在正常人群中也有一定的攜帶率，因此有婚配或生育要求但無耳聾家族遺傳史的正常人也在耳聾遺傳咨詢服務(wù)對象范圍內(nèi)。遺傳咨詢工作流程

13、遺傳咨詢工作流程 u 第一步：樣本芯片檢測結(jié)果報告發(fā)送第一步：樣本芯片檢測結(jié)果報告發(fā)送u郵寄或者短信發(fā)送郵寄或者短信發(fā)送u 第二步：整理需要第二步：整理需要 追訪的名單追訪的名單u新生兒耳聾基因?qū)嶒炇覚z測及報告發(fā)送完成后，整理并打印新生兒耳聾基因?qū)嶒炇覚z測及報告發(fā)送完成后，整理并打印GJB2、SLC26A4、12S rRNA、GJB3基因突變攜帶者列表清單基因突變攜帶者列表清單u 第三步：第三步： 追訪并記錄追訪結(jié)果追訪并記錄追訪結(jié)果u確認新生兒家長收到報告并告知查看篩查結(jié)果確認新生兒家長收到報告并告知查看篩查結(jié)果u對于需要和希望進行門診復(fù)診的新生兒及家長，追訪中告知其來診的對于需要和希望進行

14、門診復(fù)診的新生兒及家長，追訪中告知其來診的預(yù)約方式及就診時間、流程等預(yù)約方式及就診時間、流程等u初次追訪失敗的，記錄追訪時間及失敗原因，需進行隨后的第二次初次追訪失敗的，記錄追訪時間及失敗原因，需進行隨后的第二次 追訪，若第三追訪，若第三次追訪失敗，送約定部門次追訪失敗，送約定部門31遺傳咨詢工作流程遺傳咨詢工作流程 u 第四步： 遺傳咨詢工作u身份確認：篩查編號、母親姓名、出生醫(yī)院u聽力檢測是否通過？是否有耳聾家族史？u聽力未通過者來門診復(fù)診u聽力通過者定期（每3月-半年）測查聽力至3歲或到門診進行聽力復(fù)診和遺傳咨詢u繪制藥物相關(guān)耳聾基因攜帶者母系家族譜，記錄家族中已有聽障者的發(fā)病年齡、原因

15、、聽力狀況，并通知其領(lǐng)取致聾藥物卡片等32遺傳咨詢工作流程遺傳咨詢工作流程 u 第五步：門診復(fù)診新生兒遺傳咨詢工作 登記復(fù)診新生兒耳聾基因篩查結(jié)果、編號、聽力篩查是否通過，詢問有無聽力障礙家族史 有家族史者繪制家系圖；繪制藥物相關(guān)耳聾基因攜帶者母系家系圖，記錄家族中已有聽障者的發(fā)病年齡、原因、聽力狀況，并通知其領(lǐng)取致聾藥物卡片等 OAE聽力測試 聽力檢測結(jié)果及基因篩查結(jié)果聯(lián)合分析 定期復(fù)查聽力、診斷性聽力學(xué)檢查或分子診斷 分子診斷程序：GJB2、SLC26A4全基因測序檢測33遺傳咨詢工作流程遺傳咨詢工作流程小結(jié)小結(jié) u 門診復(fù)診新生兒遺傳咨詢工作結(jié)合聽篩結(jié)果提供聽力及遺傳綜合資訊聽篩通過聽篩

16、未通過基篩通過基篩未通過基篩通過基篩未通過隨診程序分子診斷程序聽力/分子診斷程序聽力/分子診斷程序提供聽力及遺傳服務(wù)及康復(fù)指導(dǎo)，并長期隨訪觀察34目目 錄錄臨床案例臨床案例part 5Contents耳聾檢測應(yīng)用案例耳聾檢測應(yīng)用案例1野生型（正常）235delC純合（耳聾）235delC純合（耳聾） 235delC雜合（正常） 235delC雜合（耳聾）爺爺奶奶母親父親姑姑未知（過世） 在鄭州大學(xué)第三附屬醫(yī)院聽力篩查中心，孩子進行聽力篩查但未通過，抽血檢查耳聾基因，結(jié)果孩子是235純合突變，父親是235純合突變，母親是235雜合突變，爺爺和姑姑分別是235雜合突變和野生型，奶奶不在了，因父母均是聾啞