微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)的教學(xué)設(shè)計(jì)和習(xí)題

1、精選優(yōu)質(zhì)文檔-傾情為你奉上一、選擇題、 1下列有關(guān)培養(yǎng)基的敘述正確的是( ) A培養(yǎng)基是為微生物的生長(zhǎng)繁殖提供營(yíng)養(yǎng)的基質(zhì) B培養(yǎng)基只有兩類(lèi)：液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基 C固體培養(yǎng)基中加入少量水即可制成液體培養(yǎng)基 D微生物在固體培養(yǎng)基上生長(zhǎng)時(shí)，可以形成肉眼可見(jiàn)的單個(gè)細(xì)菌 2.不同培養(yǎng)基的具體配方不同，但一般都含( ) A碳源、磷酸鹽和維生素 B氮源和維生素 C水、碳源、氮源和無(wú)機(jī)鹽 D碳元素、氧元素、氫元素、氮元素 3獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是( ) A將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行滅菌 B接種純種細(xì)菌 C適宜環(huán)境條件下培養(yǎng) D防止外來(lái)雜菌的入侵 4下列常用的無(wú)菌操作中錯(cuò)誤的是( )

2、 A用酒精擦拭雙手 B用氯氣消毒水源 c實(shí)驗(yàn)操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進(jìn)行 D玻璃器皿(吸管、培養(yǎng)皿)可用酒精擦拭 5制備牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基的步驟是( ) A計(jì)算、稱(chēng)量、倒平板、溶化、滅菌 B計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、倒平板、滅菌 C計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、滅菌、倒平板 D計(jì)算、稱(chēng)量、滅菌、溶化、倒平板 6有關(guān)倒平板的操作錯(cuò)誤的是( ) A將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上 B使打開(kāi)的錐形瓶瓶口迅速通過(guò)火焰 C將培養(yǎng)皿打開(kāi)，培養(yǎng)皿蓋倒放在桌子上 D等待平板冷卻凝固后需要倒過(guò)來(lái)放置 7有關(guān)平板劃線操作正確的是( ) A使用已滅菌的接種環(huán)、培養(yǎng)皿，操作過(guò)程中不再滅菌 B打開(kāi)含菌種的試管需通過(guò)火焰滅菌，取出菌種后

3、需馬上塞上棉塞 c將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸人平板內(nèi)，劃三至五條平行線即可 D最后將平板倒置，放人培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 8有關(guān)稀釋涂布平板法，敘述錯(cuò)誤的是( ) A首先將菌液進(jìn)行一系列的梯度稀釋 B然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面 C再放在適宜條件下培養(yǎng) D結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)的菌落 9涂布平板操作需要用到( ) A接種環(huán)、滴管、酒精燈 B接種環(huán)、移液管、酒精燈 C涂布器、移液管、酒精燈 D涂布器、接種環(huán)、酒精燈 10將接種后的培養(yǎng)基和一個(gè)未接種的培養(yǎng)基都放入37恒溫箱的目的是( ) A對(duì)比觀察培養(yǎng)基有沒(méi)有被微生物利用 B對(duì)比分析培養(yǎng)基是否被雜菌污染 C沒(méi)必要放人未接種的培養(yǎng)

4、基 D為了下次接種時(shí)再使用 11關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是 A.是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的無(wú)機(jī)物只提供無(wú)機(jī)鹽 D.無(wú)機(jī)氮源也能提供能量 12作為自養(yǎng)生物唯一碳源的是（ ） A糖類(lèi) B 石油 C 二氧化碳 D 花生粉餅 13大腸桿菌的代謝類(lèi)型是（ ） A 自養(yǎng)需氧 B異氧嚴(yán)格厭氧 C異養(yǎng)需氧 D 異養(yǎng)兼性厭氧 14菌種保藏應(yīng)控制的條件是（ ） （1）濕度 （2） 低溫 （3） 干燥 （4） 有光 （5）隔絕空氣 （6）適當(dāng)有氧 A（1）（4）（6） B（2）（3）（6） C（1）（5）（6） D（2）（3）（5） 15下列物質(zhì)中，不能用作酵母菌碳源

5、的是（ ） A含碳有機(jī)物 B蛋白胨 C含碳無(wú)機(jī)物 D花生粉餅等天然物質(zhì) 16平板冷卻凝后要將平板倒置，其意義是（ ） A利于大腸桿菌的接種 B防止雜菌污染 C利于培養(yǎng)的冷卻 D 防止皿蓋冷卻水倒流入培養(yǎng)基 17。含C、H、O、N的大分子化合物可以作為（ ） A異養(yǎng)微生物的氮源、能源 B異養(yǎng)微生物的碳源、氮源 C自養(yǎng)微生物的氮源、能源、碳源 D自養(yǎng)微生物的氮源、能源、碳源 二、非選擇題 18鑒定培養(yǎng)基的制作是否合格的方法是：將制備好的培養(yǎng)基放在 中保溫1-2天看有無(wú) ，如果沒(méi)有 說(shuō)明制作合格，反之則不合格。 19請(qǐng)你判斷以下或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請(qǐng)選擇合適的方法。 (1)培養(yǎng)細(xì)菌用

6、的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿 (2)玻棒、試管、燒瓶和吸管 (3)實(shí)驗(yàn)操作者的雙手 (1) 、 (2) 、 (3) 2019世紀(jì)中期，關(guān)系到法國(guó)經(jīng)濟(jì)命脈的釀造業(yè)曾一度遭受毀滅性的打擊。在生產(chǎn)過(guò)程中，出現(xiàn)了葡萄酒變酸、變味的怪事。 (1)根據(jù)你所掌握的知識(shí)分析導(dǎo)致生產(chǎn)失敗的根源是什么? (2)由此得出研究和應(yīng)用微生物的前提是防止 21在倒平板的過(guò)程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個(gè)平板還能用來(lái)培養(yǎng)微生物嗎?為什么? 22在做第二次以及其后的劃線操作時(shí)，為什么總是從上一次劃線的末端開(kāi)始劃線? 參考答案： 一、1A 2C 3D 4D 5C 6C 7D 8D 9C 10B。 11D 12。C。1

7、3。D。14。B。15。C。16。D。17。B。 二、18 恒溫箱 菌落生長(zhǎng)，菌落生長(zhǎng) 19(1)需要滅菌 (2)需要滅菌 (3)需要消毒 20(1)導(dǎo)致生產(chǎn)失敗的根源在于發(fā)酵物中混入了雜菌。(2)雜菌入侵，獲得純凈的培養(yǎng)物。 21不能 因空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生，因此最好不要用這個(gè)平板培養(yǎng)微生物。 22因劃線后線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開(kāi)始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，這樣最終就能得到由單個(gè)細(xì)菌繁殖而來(lái)的菌落。 一：教學(xué)目標(biāo)1知識(shí)目標(biāo)：了解培養(yǎng)基的用途和種類(lèi)識(shí)記培養(yǎng)基制作中的一般成分掌握培養(yǎng)基制作的一般的步驟掌握微生物分

8、離中的劃線法和涂布法2能力目標(biāo)掌握微生物的生活史，對(duì)接種的微生物進(jìn)行鑒別學(xué)會(huì)一般的消毒、滅毒的方法學(xué)會(huì)實(shí)驗(yàn)的后期處理的方法3情感目標(biāo)培養(yǎng)學(xué)生環(huán)保的意識(shí)體驗(yàn)微生物與現(xiàn)代生物技術(shù)之間的密切的關(guān)系二：教學(xué)中的難重點(diǎn)重點(diǎn)：培養(yǎng)基的制備、微生物的培養(yǎng)的操作難點(diǎn)：培養(yǎng)基的制備和微生物的分離三：教學(xué)過(guò)程說(shuō)明：本實(shí)驗(yàn)，我準(zhǔn)備安排在選修一開(kāi)始就進(jìn)行。原因：如果開(kāi)展選修一，我準(zhǔn)備開(kāi)設(shè)“腐乳的制作”，用到大量的根霉菌和毛霉菌。準(zhǔn)備讓技術(shù)比較好的兩組同學(xué)接種創(chuàng)設(shè)情景，引入新課確定目標(biāo)，引導(dǎo)自學(xué)展示幾個(gè)問(wèn)題，讓學(xué)生整理什么叫培養(yǎng)基？有幾種類(lèi)型？培養(yǎng)基一般需要的營(yíng)養(yǎng)成分？了解牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)成分無(wú)菌操作包括幾部分

9、？小組討論，分別讓不同小組展示“如何進(jìn)行無(wú)菌操作”三：給出目標(biāo)，動(dòng)手實(shí)踐大屏幕展示： 馬鈴薯培養(yǎng)基：牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基：給出配方，將學(xué)生分組自主選擇制作的培養(yǎng)基。具體步驟：計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、滅菌、倒平板。要求學(xué)生在課上完成計(jì)算、稱(chēng)量、溶化、滅菌操作，然后利用之前學(xué)生或教師已經(jīng)完成滅菌的培養(yǎng)基倒平板。（2）倒平板操作的步驟：將滅過(guò)菌的培養(yǎng)皿放在火焰旁的桌面上，右手拿裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，左手拔出棉塞。右手拿錐形瓶，將瓶口迅速通過(guò)火焰。用左手的拇指和食指將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條稍大于瓶口的縫隙，右手將錐形瓶中的培養(yǎng)基（約1020mL）倒入培養(yǎng)皿，左手立即蓋上培養(yǎng)皿的皿蓋。等待平板冷卻凝固，大約需510min

10、。然后，將平板倒過(guò)來(lái)放置，使培養(yǎng)皿蓋在下、皿底在上。一二組完成根霉菌、毛霉菌（帶上口罩操作） ，三四組完成大腸桿菌的 操作課下思考課本上的思考課題目標(biāo)臨沭縣實(shí)驗(yàn)中學(xué)2010年7月29日 16:11（一）知識(shí)與技能了解有關(guān)培養(yǎng)基的基礎(chǔ)知識(shí)；掌握培養(yǎng)基的制備、高壓蒸汽滅菌和平板劃線法等基本操作技術(shù)（二）過(guò)程與方法 分析實(shí)驗(yàn)思路的確定和形成的原因，分析實(shí)驗(yàn)流程，對(duì)比前面的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)，歸納共性，分析差異，增加印象（三）情感、態(tài)度與價(jià)值觀 形成勇于實(shí)踐、嚴(yán)謹(jǐn)求實(shí)的科學(xué)態(tài)度和科學(xué)精神課題重點(diǎn)無(wú)菌技術(shù)的操作課題難點(diǎn) 無(wú)菌技術(shù)的操作教學(xué)方法 啟發(fā)式教學(xué)教學(xué)工具 多媒體課件教學(xué)過(guò)程（一）引入新課在傳統(tǒng)發(fā)酵技術(shù)的應(yīng)

11、用中，都利用了微生物的發(fā)酵作用，其中的微生物來(lái)自于制作過(guò)程中的自然感染。而在工業(yè)化生產(chǎn)中，為了提高發(fā)酵的質(zhì)量，需要獲得優(yōu)良菌種，并保持發(fā)酵菌種的純度。這就要涉及到微生物的培養(yǎng)、分離、鑒別等基本技術(shù)?，F(xiàn)在我們開(kāi)始學(xué)習(xí)微生物的培養(yǎng)和應(yīng)用專(zhuān)題。（二）進(jìn)行新課1基礎(chǔ)知識(shí)11 培養(yǎng)基的種類(lèi)包括 固體 培養(yǎng)基和 液體 培養(yǎng)基等。思考1瓊脂是從紅藻中提取的 多糖 ，在配制培養(yǎng)基中用作為 凝固劑 。【補(bǔ)充】培養(yǎng)基的類(lèi)型及其應(yīng)用：標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)基類(lèi)型配制特點(diǎn)主要應(yīng)用物理性質(zhì)固體培養(yǎng)基加入瓊脂較多菌種分離,鑒定,計(jì)數(shù)半固體培養(yǎng)基加入瓊脂較少菌種保存液體培養(yǎng)基不加入瓊脂工業(yè)生產(chǎn)，連續(xù)培養(yǎng)化學(xué)組成合成培養(yǎng)基由已知成分配制而

12、成，培養(yǎng)基成分明確菌種分類(lèi)、鑒定天然培養(yǎng)基由天然成分配制而成，培養(yǎng)基成分不明確工業(yè)生，產(chǎn)降低成本目的用途鑒別培養(yǎng)基添加某種指示劑或化學(xué)藥劑菌種的鑒別選擇培養(yǎng)基添加（或缺少）某種化學(xué)成分菌種的分離 12 培養(yǎng)基的化學(xué)成分包括 水 、 無(wú)機(jī)鹽 、 碳源 、 氮源 四類(lèi)營(yíng)養(yǎng)成分。思考2從細(xì)胞的化學(xué)元素組成來(lái)看，培養(yǎng)基中為什么都含有這些營(yíng)養(yǎng)成分？C、H、O、N、P、S是構(gòu)成細(xì)胞原生質(zhì)的基本元素，約占原生質(zhì)總量的97以上?！狙a(bǔ)充】碳源：如CO2、糖類(lèi)、脂肪酸等有機(jī)物，構(gòu)成微生物的結(jié)構(gòu)物質(zhì)和分泌物，并提供能量。氮源：如N2、氨鹽、硝酸鹽、牛肉膏、蛋白胨等，主要用來(lái)合成蛋白質(zhì)、核酸及含氮代謝物等。含有C、H

13、、O、N的化合物既可以作為碳源，又可以作為氮源，如氨基酸等。13 培養(yǎng)基除滿(mǎn)足微生物生長(zhǎng)的 pH 、 特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì) 和 氧氣 等要求?！狙a(bǔ)充】生長(zhǎng)因子：某些微生物正常生長(zhǎng)代謝過(guò)程中必須從培養(yǎng)基中吸收的微量有機(jī)小分子，如某些氨基酸、堿基、維生素等。思考3牛肉膏和蛋白胨主要為微生物提供 糖 、 維生素 和 有機(jī)氮 等營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)。思考4培養(yǎng)乳酸桿菌時(shí)需要添加 維生素 ，培養(yǎng)霉菌時(shí)需要將培養(yǎng)基pH調(diào)節(jié)為 酸性 ，培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)需要將pH調(diào)節(jié)為 中性或微堿性 。活動(dòng)2：閱讀“無(wú)菌技術(shù)”，討論回答下列問(wèn)題：14 獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵是 防止外來(lái)雜菌的入侵 。15 無(wú)菌技術(shù)包括：（1）對(duì)實(shí)驗(yàn)操作空間、操作者的衣著

14、和手進(jìn)行 清潔和消毒 ；（2）將培養(yǎng)器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進(jìn)行 滅菌 ；（3）為避免周?chē)⑸镂廴?，?shí)驗(yàn)操作應(yīng)在 酒精燈火焰附近 旁進(jìn)行；（4）避免已滅菌處理的材料用具與 周?chē)锲?相接觸。16 比較消毒和滅菌（填表）比較項(xiàng)理化因素的作用強(qiáng)度消滅微生物的數(shù)量芽孢和孢子能否被消滅消毒較為溫和部分生活狀態(tài)的微生物不能滅菌強(qiáng)烈全部微生物能 思考5無(wú)菌技術(shù)除了防止培養(yǎng)物被污染外，還具有的目的是 防止感染實(shí)驗(yàn)操作者 。17 消毒方法：（1）日常生活經(jīng)常用到的是 煮沸 消毒法；（2）對(duì)一些不耐高溫的液體，則使用 巴氏 消毒法（作簡(jiǎn)要介紹）；（3）對(duì)接種室、接種箱或超凈工作臺(tái)首先噴灑 石炭酸或煤酚皂

15、等溶液以增強(qiáng)消毒效果，然后使用 紫外線 進(jìn)行物理消毒。（4）實(shí)驗(yàn)操作者的雙手使用 酒精 進(jìn)行消毒；（5）飲水水源用 氯氣 進(jìn)行消毒。18滅菌方法：（1）接種環(huán)、接種針、試管口等使用 灼燒 滅菌法；（2）玻璃器皿、金屬用具等使用 干熱 滅菌法，所用器械是 干熱滅菌箱 ；（3）培養(yǎng)基、無(wú)菌水等使用 高壓蒸汽 滅菌法，所用器械是 高壓蒸汽滅菌鍋 。（4）表面滅菌和空氣滅菌等使用 紫外線 滅菌法，所用器械是 紫外燈 。思考6對(duì)接種環(huán)滅菌時(shí)要用酒精燈的 充分燃燒 層火焰灼燒可能伸入試管或培養(yǎng)皿的部位。思考7利用干熱滅菌箱對(duì)玻璃器皿滅菌時(shí)物品不能擺得太擠，目的是避免妨礙熱空氣流通。思考8物品裝入高壓蒸汽滅

16、菌鍋滅菌后，要首先打開(kāi)排氣閥，煮沸并排除鍋內(nèi)冷空氣，其目的是 有利于鍋內(nèi)溫度升高 ；隨后關(guān)閉排氣閥繼續(xù)加熱，氣壓升至 100k Pa，溫度為 121 ，并維持 1530 min；最后切斷熱源，使溫度自然降溫，氣壓務(wù)必降至 零 時(shí)打開(kāi)鍋蓋，其目的是防止 容器中的液體暴沸 ?！狙a(bǔ)充】培養(yǎng)基的配制原則：目的要明確：根據(jù)培養(yǎng)的微生物種類(lèi)、培養(yǎng)的目的等確定培養(yǎng)基的類(lèi)型和配制量。營(yíng)養(yǎng)要協(xié)調(diào)：培養(yǎng)基中各種營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的濃度和比例要適宜。例如：碳氮比41時(shí)，谷氨酸棒狀桿菌大量繁殖而產(chǎn)生谷氨酸少；碳氮比為31時(shí)，菌體繁殖受抑制而谷氨酸合成量大增。pH要適宜：細(xì)菌培養(yǎng)基pH中性或偏堿性，霉菌培養(yǎng)基呈酸性。2實(shí)驗(yàn)操作2

17、1 計(jì)算：根據(jù)配方比例，計(jì)算100mL培養(yǎng)基各成分用量。22 稱(chēng)量：準(zhǔn)確稱(chēng)取各成分。稱(chēng)取牛肉膏和蛋白胨時(shí)動(dòng)作要迅速，目的是防止牛肉膏吸收空氣中水分。23 溶化：加水加熱熔化牛肉膏；加入蛋白胨和氯化鈉繼續(xù)加熱；加入瓊脂；用蒸餾水定容到100mL。整個(gè)過(guò)程不斷用玻棒攪拌，目的是防止瓊脂糊底而導(dǎo)致燒杯破裂。24 調(diào)pH：用1mol/LNaOH溶液調(diào)節(jié)pH至偏堿性。25 滅菌：將配制好的培養(yǎng)基轉(zhuǎn)移到錐形瓶中，加塞包扎后用高壓蒸汽滅菌鍋滅菌；所用培養(yǎng)皿用報(bào)紙包扎后用干熱滅菌箱滅菌。26 倒平板：待培養(yǎng)基冷卻至50左右時(shí)在酒精燈火焰附近操作進(jìn)行。其過(guò)程是：在火焰旁右手拿錐形瓶，左手拔出棉塞；右手拿錐形瓶，

18、使錐形瓶的瓶口迅速通過(guò)火焰；左手將培養(yǎng)皿打開(kāi)一條縫隙，右手將培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿，立刻蓋上皿蓋。待平板冷卻凝固后，將平板倒過(guò)來(lái)放置。思考1錐形瓶的瓶口通過(guò)火焰的目的是消滅瓶口的雜菌，防止雜菌感染培養(yǎng)基。思考2倒平板的目的是防止培養(yǎng)基冷卻過(guò)程中形成的水滴落到培養(yǎng)基表面。思考3若皿蓋和皿底之間粘有培養(yǎng)基，則該平板能否培養(yǎng)微生物？為什么？不能?？諝庵须s菌會(huì)在這些粘附培養(yǎng)基上繁殖，并污染皿內(nèi)培養(yǎng)基。思考4配制斜面培養(yǎng)基中，試管要加塞棉塞的目的是保持通氣并防止雜菌感染。思考5試管培養(yǎng)基形成斜面的作用是增大接種面積。27 接種271微生物接種的最常用方法是平板劃線法和稀釋涂布法，另外還有穿刺接種和斜面接種等。

19、272平板劃線法：通過(guò)接種環(huán)在瓊脂固體培養(yǎng)基表面連續(xù)劃線的操作，將聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基表面。其操作步驟是：將接種環(huán)在酒精燈火焰上灼燒直至燒紅。在酒精燈火焰旁冷卻接種環(huán)，并打開(kāi)大腸桿菌的菌種試管的棉塞。將菌種試管口通過(guò)火焰達(dá)到消滅試管口雜菌的目的。將冷卻的接種環(huán)伸入到菌液中取出一環(huán)菌種。將菌種試管口再次通過(guò)火焰后塞上棉塞。將皿蓋打開(kāi)一條縫隙，把接種環(huán)伸入平板內(nèi)劃35條平行線，蓋上皿蓋，不要?jiǎng)澠婆囵B(yǎng)基。灼燒接種環(huán)，冷卻后從第一區(qū)劃線末端開(kāi)始向第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)上述過(guò)程，完成三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將第五區(qū)的劃線與第一區(qū)劃線相連。將平板倒置放在培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。思考6取菌種前灼燒接種環(huán)

20、的目的是消滅接種環(huán)上的微生物；除第一次劃線外，其余劃線前都要灼燒接種環(huán)的目的是消滅接種環(huán)上殘留菌種；取菌種和劃線前都要求接種環(huán)冷卻后進(jìn)行，其目的是防止高溫殺死菌種；最后灼燒接種環(huán)的目的是防止細(xì)菌污染環(huán)境和操作者。思考7在第1次劃線后都從上次劃線末端開(kāi)始的目的是獲得由單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。273稀釋涂布平板法：將菌液進(jìn)行一系列梯度稀釋?zhuān)⒉煌♂尪染悍謩e涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基上進(jìn)行培養(yǎng)。當(dāng)稀釋倍數(shù)足夠高時(shí)，即可獲得單個(gè)細(xì)菌形成的標(biāo)準(zhǔn)菌落。274系列稀釋操作：取盛有9mL水的無(wú)菌試管6支，編號(hào)101、102、103、104、105、106。用灼燒冷卻的移液管吸取1mL菌液注入編號(hào)為101試管中

21、，并吹打3次，使之混勻。從101倍液中吸取1mL菌液注入到編號(hào)為102試管內(nèi)吹打均勻，獲得102倍液。依此類(lèi)推。思考8操作中試管口和移液管應(yīng)在離火焰12cm處。整個(gè)操作過(guò)程中使用了1支移液管。3結(jié)果分析與評(píng)價(jià)31培養(yǎng)未接種培養(yǎng)基的作用是對(duì)照，若有菌落形成，說(shuō)明培養(yǎng)基滅菌不徹底。32在肉湯培養(yǎng)基上，大腸桿菌菌落呈白色，為圓形，光滑有光澤，邊緣整齊。33培養(yǎng)12h和24h后的菌落大小不同（相同、不同）；菌落分布位置相同（相同、不同）。原因是時(shí)間越長(zhǎng)，菌落中細(xì)菌繁殖越多，菌落體積越大；菌落的位置不動(dòng)，但菌落數(shù)增多。思考9在某培養(yǎng)基上出現(xiàn)了3種特征不同的菌落，原因有培養(yǎng)基滅菌不徹底或雜菌感染等。思考1

22、0頻繁使用的菌種利用臨時(shí)保藏法保存，長(zhǎng)期保存菌種的方法是甘油管藏法。前者利用固體斜面培養(yǎng)基培養(yǎng)后，保存在4冰箱中，每36個(gè)月轉(zhuǎn)種培養(yǎng)一次，缺點(diǎn)是保存時(shí)間較短，容易發(fā)生污染和變異；后者將菌種與無(wú)菌體積等量混合后保存在20冷凍箱中。（三）課堂總結(jié)、點(diǎn)評(píng)微生物的實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)培養(yǎng)基無(wú)菌技術(shù)純化大腸桿菌培養(yǎng)基的配制配制培養(yǎng)基的原則配制培養(yǎng)基的方法計(jì)算稱(chēng)量溶化調(diào)pH分裝加棉塞滅菌倒平板平板劃線法稀釋涂布法系列稀釋平板涂布 （四）實(shí)例探究例1關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是A.是碳源的物質(zhì)不可能同時(shí)是氮源 B.凡碳源都提供能量C.除水以外的無(wú)機(jī)物只提供無(wú)機(jī)鹽 D.無(wú)機(jī)氮源也能提供能量解析：不同的微生物，所需

23、營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有較大差別，要針對(duì)微生物的具體情況分析。對(duì)于A、B選項(xiàng)，它的表達(dá)是不完整的。有的碳源只能是碳源，如二氧化碳；有的碳源可同時(shí)是氮源，如NH4HCO3；有的碳源同時(shí)是能源，如葡萄糖；有的碳源同時(shí)是氮源，也是能源，如蛋白胨。對(duì)于C選項(xiàng)，除水以外的無(wú)機(jī)物種類(lèi)繁多，功能也多樣。如二氧化碳，可作為自養(yǎng)型微生物的碳源；NaHC O3，可作為自養(yǎng)型微生物的碳源和無(wú)機(jī)鹽；而NaCl則只能提供無(wú)機(jī)鹽。對(duì)于D選項(xiàng)，無(wú)機(jī)氮源提供能量的情況還是存在的，如NH3可為硝化細(xì)菌提供能量和氮源。答案：D例2下面對(duì)發(fā)酵工程中滅菌的理解不正確的是A.防止雜菌污染 B.消滅雜菌C.培養(yǎng)基和發(fā)酵設(shè)備都必須滅菌 D.滅菌必須在接

24、種前解析：滅菌是微生物發(fā)酵過(guò)程的一個(gè)重要環(huán)節(jié)。A說(shuō)的是滅菌的目的，因?yàn)榘l(fā)酵所用的菌種大多是單一的純種，整個(gè)發(fā)酵過(guò)程不能混入其他微生物（雜菌），所以是正確的；B是錯(cuò)誤的，因?yàn)闇缇哪康氖欠乐闺s菌污染，但實(shí)際操作中不可能只消滅雜菌，而是消滅全部微生物。C是正確的，因?yàn)榕c發(fā)酵有關(guān)的所有設(shè)備和物質(zhì)都要滅菌；發(fā)酵所用的微生物是滅菌后專(zhuān)門(mén)接種的，滅菌必須在接種前，如果接種后再滅菌就會(huì)把所接菌種也殺死。答案：B綜合應(yīng)用例3右表是某微生物培養(yǎng)基成分，請(qǐng)據(jù)此回答：編號(hào)成分含量粉狀硫10g（NH4）2SO40.4gK2HPO44.0gMgSO49.25gFeSO40.5gCaCl20.5gH2O100ml（1）右

25、表培養(yǎng)基可培養(yǎng)的微生物類(lèi)型是 。（2）若不慎將過(guò)量NaCl加入培養(yǎng)基中。如不想浪費(fèi)此培養(yǎng)基，可再加入 ，用于培養(yǎng) 。（3）若除去成分，加入（CH2O），該培養(yǎng)基可用于培養(yǎng) 。（4）表中營(yíng)養(yǎng)成分共有 類(lèi)。（5）不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都溶化后分裝前，要進(jìn)行的是 。（6）右表中各成分重量確定的原則是 。（7）若右表培養(yǎng)基用于菌種鑒定，應(yīng)該增加的成分是 。解析：對(duì)于一個(gè)培養(yǎng)基，它能培養(yǎng)何種微生物，要看它的化學(xué)成分。當(dāng)然這只適用于合成培養(yǎng)基，如果是一個(gè)天然培養(yǎng)基就不能從培養(yǎng)基的成分上區(qū)分它是培養(yǎng)何種微生物的。分析化學(xué)成分要從營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的類(lèi)型出發(fā)。右表中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)有水、無(wú)機(jī)鹽、氮源三類(lèi)，缺乏碳源和特殊營(yíng)

26、養(yǎng)物質(zhì)。對(duì)特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，有的微生物是不需要的，但沒(méi)有微生物是不需要碳源的。該培養(yǎng)基中沒(méi)有碳源，說(shuō)明培養(yǎng)的微生物是從空氣中獲得碳源的，即可培養(yǎng)的微生物就是自養(yǎng)型微生物了。該培養(yǎng)基中加入了過(guò)量食鹽，就可以成為金黃色葡萄球菌鑒別培養(yǎng)基，但金黃色葡萄球菌是異養(yǎng)型微生物，這個(gè)培養(yǎng)基就還需要加入有機(jī)碳源。該培養(yǎng)基若加入（CH2O），培養(yǎng)基中就有了碳源，但除去成分，卻使培養(yǎng)基中沒(méi)有了氮源，這時(shí)就只能用于培養(yǎng)固氮微生物了。對(duì)于菌種鑒定，往往用的是固體培養(yǎng)基，而表中沒(méi)有凝固劑，需要加入常見(jiàn)的凝固劑瓊脂。答案：自養(yǎng)型微生物 含碳有機(jī)物 金黃色葡萄球菌 固氮微生物 3 調(diào)整pH 依微生物的生長(zhǎng)需要確定 瓊脂（或凝固

27、劑）（五）鞏固練習(xí)1不可能作為異養(yǎng)微生物碳源的是A牛肉膏 B含碳有機(jī)物 C石油 D含碳無(wú)機(jī)物2根瘤菌能利用的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的組別是ANH3，（CH2O），NaCl BN2，（CH2O），CaCl2C銨鹽，CO2，NaCl DNO2，CO2，CaCl23配制培養(yǎng)基的敘述中正確的是A制作固體培養(yǎng)基必須加入瓊脂 B加入青霉素可得到放線菌C培養(yǎng)自生固氮菌不需氮源 D發(fā)酵工程一般用半固體培養(yǎng)基4自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別是A碳源 B氮源 C無(wú)機(jī)鹽 D特殊營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)5下表是有關(guān)4種生物的能源、碳源、氮源和代謝類(lèi)型的概述。其中正確的是( )生 物硝化細(xì)菌根瘤菌酵母菌谷氨酸棒狀桿菌能 源氧化NH3N

28、2的固定分解糖類(lèi)等有機(jī)物光 能碳 源C02糖類(lèi)糖類(lèi)糖類(lèi)氮 源NH3N2NH4+、NO3-尿 素代謝類(lèi)型自養(yǎng)需氧型異養(yǎng)需氧型異養(yǎng)兼性厭氧型自養(yǎng)需氧型 A根瘤菌、谷氨酸棒狀桿菌 B硝化細(xì)菌、酵母菌 C酵母菌、谷氨酸棒狀桿菌 D硝化細(xì)菌、根瘤菌6甲、乙、丙是三種微生物，下表、是用來(lái)培養(yǎng)微生物的三種培養(yǎng)基。甲、乙、丙都能在種正常生長(zhǎng)繁殖；甲能在中正常生長(zhǎng)繁殖，而乙和丙都不能；乙能在中正常生長(zhǎng)繁殖，甲、丙都不能。下列說(shuō)法正確的是 （ ）粉狀硫10gK2HPO44gFeSO40.5g蔗糖10g（NH4）2SO40.4gH2O100mlMgSO49.25gCaCl20.5g+-+-+A、甲、乙、丙都是異養(yǎng)微

29、生物B、甲、乙、丙都是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物C、甲是固氮微生物、乙是自養(yǎng)微生物、丙是異養(yǎng)微生物D、甲是異養(yǎng)微生物、乙是固氮微生物、丙是自養(yǎng)微生物7微生物（除病毒外）需要從外界吸收營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)并通過(guò)代謝來(lái)維持正常的生長(zhǎng)和繁殖。下列有關(guān)微生物營(yíng)養(yǎng)的說(shuō)法正確的是A乳酸菌與硝化細(xì)菌所利用的碳源物質(zhì)是相同的B微生物生長(zhǎng)中不可缺少的一些微量的無(wú)機(jī)物稱(chēng)為生長(zhǎng)因子 C培養(yǎng)基中的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)濃度越高對(duì)微生物的增殖越有利 D生長(zhǎng)因子一般是酶或核酸的組成成分，微生物本身合成這些生長(zhǎng)因子的能力往往不足。8某一種細(xì)菌株要從環(huán)境中提取現(xiàn)成的亮氨酸（20種氨基酸中的一種）才能生長(zhǎng)，此菌株對(duì)鏈霉素敏感。實(shí)驗(yàn)者用誘變劑處理此菌株，

30、想篩選出表中細(xì)菌菌株類(lèi)型。根據(jù)實(shí)驗(yàn)?zāi)昴康?，選用的培養(yǎng)基類(lèi)型是（）注：亮氨酸鏈霉素“”加入“”不加入如：不加亮氨酸：加入鏈霉素選項(xiàng)篩選出不需要亮氨酸的菌株篩選出抗鏈霉素的菌株篩選出不需要亮氨酸的抗鏈霉素的菌株9要將從土壤中提取的自生固氮菌與其他的細(xì)菌分離出來(lái)，應(yīng)將它們接種在 A加入氮源和殺菌劑的培養(yǎng)基上 B不加入氮源和不加殺菌劑的培養(yǎng)基上C加入氮源，不加殺菌劑的培養(yǎng)基上 D不含氮源和殺菌劑的培養(yǎng)基上10酵母菌培養(yǎng)液中常含有一定濃度的葡萄糖，但當(dāng)葡萄糖濃度過(guò)高時(shí)，反而抑制微生物的生長(zhǎng)，原因是A碳源供應(yīng)太充足 B細(xì)胞會(huì)發(fā)生質(zhì)壁分離C改變了酵母菌的pH值 D葡萄糖不是酵母菌的原料答案：DACAC CD

31、BBB課余作業(yè)、收集生活中與微生物有關(guān)的實(shí)例，并通過(guò)所學(xué)知識(shí)對(duì)其進(jìn)行解釋、我們打針輸液時(shí)，首先要用酒精擦拭針刺處，為什么？教學(xué)體會(huì)本節(jié)課可以通過(guò)生產(chǎn)實(shí)例導(dǎo)入，使學(xué)生認(rèn)識(shí)在微生物的培養(yǎng)過(guò)程中，保持培養(yǎng)物純凈的重要性。在課堂上可以跳出教材，充分發(fā)揮學(xué)生的主動(dòng)性，讓學(xué)生收集列舉更多的生產(chǎn)生活中的實(shí)例，從中體會(huì)培養(yǎng)物純凈的重要性。當(dāng)時(shí)由于微生物的微觀性和危害性，一定要教育學(xué)生培養(yǎng)良好的衛(wèi)生習(xí)慣。資料袋微生物的特點(diǎn)1.個(gè)體微小，結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單 在形態(tài)上，個(gè)體微小，肉眼看不見(jiàn)，需用顯微鏡觀察，細(xì)胞大小以微米和納米計(jì)量。2.繁殖快生長(zhǎng)繁殖快，在實(shí)驗(yàn)室培養(yǎng)條件下細(xì)菌幾十分鐘至幾小時(shí)可以繁殖一代。3.代謝類(lèi)型多，活性強(qiáng)。4.分布廣泛有高等生物的地方均有微生物生活，動(dòng)植物不能生活的極端環(huán)境也有微生物存在。5.數(shù)量多在局部環(huán)境中數(shù)量眾多，如每克土壤含微生物幾千萬(wàn)至幾億個(gè)。6.易變異相對(duì)于高等生物而言，較容易發(fā)生變異。在所有生物類(lèi)群中，已知微生物種類(lèi)的數(shù)量?jī)H次于被子植物和昆蟲(chóng)。微生物種內(nèi)的遺傳多樣性非常豐富。所以微生