生物大分子的分離純化和鑒定_第1頁
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1、生物大分子的分離純化和鑒定第1頁，共14頁。第2頁，共14頁。2 2、植物組織：、植物組織：1010小時內置小時內置-4 -30-4 -30冰箱儲藏備用冰箱儲藏備用3 3、微生物：胞外產物（如發(fā)酵液），低溫短時儲藏。、微生物：胞外產物（如發(fā)酵液），低溫短時儲藏。 胞內產物，則應收集菌體或細胞，制成凍干粉于胞內產物，則應收集菌體或細胞，制成凍干粉于44保存（數月不保存（數月不變質）變質） 除了體液和微生物胞外的某些蛋白質和多肽以外除了體液和微生物胞外的某些蛋白質和多肽以外, ,大多數生物大分子都大多數生物大分子都存在于細胞之內存在于細胞之內. .第3頁，共14頁。蛋白質的分離純化蛋白質的分離純化

2、第4頁，共14頁。第5頁，共14頁。3 3、有機溶劑分級法、有機溶劑分級法 有機溶劑引起蛋白質沉淀的主要原因之一是改變介質的介電常數，水是高介電常數（20時，80），有機溶劑是低介電常數物質（20時，甲醇33，乙醇24，丙酮21.4），因此有機溶劑的加入使水溶液的介電常數降低。這樣，蛋白質分子表面的可解離基團的離子化程度減弱，水化程度降低，因此促進了蛋白質分子的聚集和沉淀。有機溶劑引起蛋白質沉淀的另一重要方式可能與鹽析相似，與蛋白質爭奪水化（膜）水，致使蛋白質聚集體的形成并沉淀。 有機溶劑沉淀法一般與等電點沉淀法聯合使用。即操作時溶液的pH值應控制在欲分離蛋白質的等電點附近。第6頁，共14頁。第7頁，共14頁。第8頁，共14頁。第9頁，共14頁。第10頁，共14頁。層析技術第11頁，共

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