血必凈注射液對大鼠腎缺血再灌注損傷的保護作用

1、血必凈注射液對大鼠腎缺血再灌注損傷的保護作用作者：俞秀麗 黃勁松 謝蕾 岑立沖 朱雄鷹 【摘要】 目的探討血必凈注射液對大鼠腎缺血再灌注損傷的影響。方法觀察假手術(shù)對照組、缺血再灌注組和血必凈治療組大鼠腎臟缺血再灌注24 h后血清及腎組織勻漿丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）、血肌酐、血尿素氮和腎組織超微結(jié)構(gòu)的改變。結(jié)果缺血再灌注組大鼠血清及腎組織勻漿的MDA、SOD、血肌酐和尿素氮與假手術(shù)對照組比較，差異均有統(tǒng)計意義（t分別=-79.21、-12.27、-61.37、-39.37、-33.17、-16.11，P均0.05）；血必凈治療組大鼠血清及腎組織勻漿的MDA、SOD、血肌酐和尿素

2、氮與缺血再灌注組比較，差異均有統(tǒng)計意義（t分別=-41.52、-19.31、-58.31、-52.40、-12.39、4.07，P均0.05）。透射電鏡觀察發(fā)現(xiàn)，血必凈注射液明顯減輕腎組織超微結(jié)構(gòu)的損傷。結(jié)論血必凈注射液對大鼠腎缺血再灌注損傷有明顯保護作用。 【關(guān)鍵詞】 腎 缺血再灌注 血必凈注射液在腎移植、肝腎綜合征和休克復(fù)蘇中常發(fā)生腎臟急性缺血再灌注損傷。氧自由基引發(fā)的組織損傷在急性缺血再灌注損傷中起著重要作用1。本次研究就血必凈注射液對腎臟缺血再灌注損傷的保護作用進行了初步研究。 1資料與方法 1.1一般資料2008年8月至2008年9月選擇健康成年雄性SD大鼠30只（由浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院實

3、驗動物中心提供），體重250300g。隨機分成假手術(shù)對照組，缺血再灌注組及血必凈治療組，每組各10只大鼠，各組間大鼠體重具有可比性。 1.2動物模型制備實驗前禁食12 h，自由飲水，以4 %水合氯醛（1ml/100g）腹腔注射麻醉大鼠，作腹部正中切口，分離腎周組織，暴露雙側(cè)腎臟，切除右腎，用無創(chuàng)血管夾夾閉大鼠左側(cè)腎蒂，60 min后去除血管夾予再灌注24 h，即為急性腎缺血再灌注模型。假手術(shù)對照組除未予夾閉左側(cè)腎蒂外，余同前所述。缺血再灌注組去除血管夾后經(jīng)靜脈注射0.9 氯化鈉注射液2 ml。血必凈治療組去除血管夾后經(jīng)靜脈注射血必凈注射液（由天津紅日藥業(yè)股份有限公司生產(chǎn)），參照已有文獻選擇劑量

4、為8ml/kg 2。 1.3方法再灌注24 h后，麻醉大鼠，經(jīng)腹主動脈采集大鼠血液2 ml，靜置離心后分離血清待檢；取少量腎組織加0.9 氯化鈉注射液于玻璃勻漿管中制成10組織勻漿待檢。嚴格按照說明書以比色法檢測血清及腎組織勻漿的丙二醛（maleic dialdehyde, MDA）和超氧化物歧化酶（superoxide dismutase ,SOD）濃度。取采集到的血液1ml，自動生化儀檢測血肌酐、尿素氮。 實驗結(jié)束后立即取少量腎組織固定于2.5戊二醛溶液中，送浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院電鏡中心行透射電鏡檢查。 1.4統(tǒng)計學(xué)方法采用Stata 8統(tǒng)計軟件包處理數(shù)據(jù)。計量數(shù)據(jù)均以均數(shù)±標準差（）

5、表示。兩組間比較采用t檢驗，設(shè)P0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 2結(jié)果 2.1各組血清及腎組織勻漿MDA、SOD和血肌酐、尿素氮的變化見表1 由表1可見，血必凈治療組大鼠血清及腎組織勻漿的MDA、SOD、血肌酐和尿素氮與缺血再灌注組比較，差異均有統(tǒng)計意義（t分別=-41.52、-19.31、-58.31、52.40、-12.39、4.07，P均0.05）。缺血再灌注組大鼠血清及腎組織勻漿的MDA、SOD、血肌酐和尿素氮與假手術(shù)對照組比較，差異均有統(tǒng)計意義（t分別=-79.21、-12.27、-61.37、39.37、-33.17、-16.11，P均0.05）； 2.2各組腎組織超微結(jié)構(gòu)的改變見圖

6、1、2、3 由圖1可見，血必凈治療組細胞核完好，核膜存在，線粒體嵴略有減少，內(nèi)質(zhì)網(wǎng)稍擴張，部分核糖體尚存。由圖2可見，缺血再灌注組細胞核固縮，核膜消失，部分細胞質(zhì)空泡狀，線粒體腫脹，線粒體嵴大部消失成空泡狀，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)擴張明顯成空泡狀，核糖體脫落。 3討論 氧自由基可氧化生物膜內(nèi)的不飽和脂肪酸，裂解成包括MDA在內(nèi)的許多產(chǎn)物，引起細胞器管架系統(tǒng)及其功能的破壞1，2。還能通過干擾細胞蛋白激酶系統(tǒng)以及增強核轉(zhuǎn)錄因子的表達，造成細胞壞死或凋亡1，3。血必凈注射液有效成分由中藥原料藥紅花、赤芍、川芎、丹參、當歸中提取，研究證明其單味藥均具有抗氧自由基作用48。 本次研究發(fā)現(xiàn)，血必凈治療組血清及腎組織勻

7、漿MDA濃度較缺血再灌注組明顯下降（P均0.05），表明使用血必凈注射液以后缺血再灌注的腎臟組織受氧自由基的氧化損害明顯減輕。血必凈治療組血清及腎組織勻漿SOD濃度較缺血再灌注組明顯上升（P均0.05），表明機體SOD損耗減少，證明血必凈注射液有良好的清除自由基作用。透射電鏡觀察腎小管超微結(jié)構(gòu)發(fā)現(xiàn)，缺血再灌注組腎小管細胞的各種細胞器遭受嚴重破壞。而使用血必凈注射液后，腎小管超微結(jié)構(gòu)的損傷得到顯著改善。血肌酐值的變化亦表明使用血必凈注射液有利于腎功能恢復(fù)。本次研究結(jié)果顯示使用血必凈注射液后血尿素氮改變不明顯，可能同血尿素氮受影響因素較多，不能靈敏的反映腎功能變化有關(guān)。晉升網(wǎng)（）致力于成為醫(yī)務(wù)工作

8、者晉升職稱心靈導(dǎo)師；是目前國內(nèi)收錄醫(yī)學(xué)期刊、醫(yī)學(xué)雜志最多最權(quán)威的醫(yī)學(xué)學(xué)術(shù)平臺；提供免費醫(yī)學(xué)期刊在線閱讀；網(wǎng)羅和甄選海量優(yōu)秀醫(yī)學(xué)論文檢索，獨立研發(fā)醫(yī)學(xué)在線資源分享庫和醫(yī)學(xué)在線模擬考試庫；整合刊類、標題、關(guān)鍵詞檢索及全文檢索，并獨家研發(fā)刊社管理和刊社加盟系統(tǒng)、在線投稿、在線查稿、在線閱讀、遠程審稿、在線下載等系統(tǒng)；聚刊社力量，建服務(wù)平臺，讓晉升網(wǎng)通過“專業(yè)”走入每一個醫(yī)務(wù)人員的身邊是我們不懈的追求目標；【參考文獻】 Li CHY, Robert M.Reactive sepecies mechanisms of cellular hypoxia-reoxygenation injuryJ. Am

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