實(shí)驗(yàn)微量移液器的使用與校準(zhǔn)

1、實(shí)驗(yàn)一微量移液器的使用與校準(zhǔn)一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、了解吸液管的操作原理和熟練掌握吸液管的操作方法2、了解吸液管的校準(zhǔn)方法和保證實(shí)驗(yàn)的精確度二、實(shí)驗(yàn)原理依靠活塞的上下移動。其活塞移動的距離是由調(diào)節(jié)輪控制螺桿機(jī)構(gòu)來實(shí)現(xiàn)，推動按鈕帶動推桿使活塞上下移動，排出腔內(nèi)氣體。松手后，在復(fù)原彈簧的作用下恢復(fù)其原位，完成一次吸液過程。三、實(shí)驗(yàn)材料儀器：吸液管、尖端管、電子天平、防水膜試劑：蒸館水四、實(shí)驗(yàn)步驟（一）準(zhǔn)備工作選擇吸液管反復(fù)練習(xí)將防水膜放到電子天平中，并將天平調(diào)零（二）實(shí)驗(yàn)步驟1、轉(zhuǎn)動微量移液器的調(diào)節(jié)輪，使讀數(shù)顯示為所要取液體的體積2、把白套筒頂端插入吸頭，在輕輕用力下壓的同時(shí)，把手中的移液器按逆時(shí)針方向旋

2、轉(zhuǎn)一下。3、輕輕按下推動按鈕，推到第一檔4、將吸液尖垂直浸入蒸館水中，浸入深度為2-4mm。5、緩慢松開推動按鈕。6、將微量移液器垂直放在天平上，按動推動按鈕到第一檔，液體泄出，在繼續(xù)按動至第二檔，是液體完全排出，放松按鈕，使推動按鈕復(fù)原。7、觀察電子天平，記錄數(shù)值。8、每次用天平讀取數(shù)值后要?dú)w零。9、每次完成測取數(shù)值后，要把防水膜取出，放到收容器中。10、按下吸液管活塞下側(cè)的按鈕，將尖端管退到垃圾桶中。五、實(shí)驗(yàn)結(jié)果123平均誤差值六、討論及注意事項(xiàng)（一）誤差分析1、吸液過程中，使移液器傾斜，導(dǎo)致移液不準(zhǔn)確2、在實(shí)驗(yàn)過程中，沒有換吸頭3、一直使用一個(gè)移液器頭，使吸頭中有溶液的殘留液，出現(xiàn)誤差。

3、4、由于過快的放開按鈕，是溶液吸入過快、過多，出現(xiàn)誤差。5、溫度的關(guān)系，導(dǎo)致誤差。（二）注意事項(xiàng)1、設(shè)定移液體積：從大量程調(diào)節(jié)至小量程為正常的調(diào)節(jié)方法，逆時(shí)針旋轉(zhuǎn)刻度即可從小量程調(diào)節(jié)至大量程時(shí)，應(yīng)先調(diào)節(jié)至超過設(shè)定體積刻度，在調(diào)回至設(shè)定的體積。2、裝配移液槍頭：將移液槍垂直插入吸頭，左右旋轉(zhuǎn)半圈即可。3、移液槍不應(yīng)平放。4、每次試驗(yàn)后將刻度調(diào)制最大。5、移液槍所設(shè)量程不要超過規(guī)定量程。6、不能吸取強(qiáng)揮發(fā)性、強(qiáng)腐蝕性的液體。實(shí)驗(yàn)二用PH計(jì)測定緩沖溶液的PH值一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康?、了解電位法測定溶液PH的原理2、學(xué)會使用PH計(jì)測定溶液PH值的方法二、實(shí)驗(yàn)儀器和藥品儀器：數(shù)顯PH計(jì)，小燒杯、吸量管、復(fù)合電極

4、、溫度計(jì)藥品：0.10mol/LHAc、0.10mol/LNaAc、ph=4標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液，ph=6.86標(biāo)準(zhǔn)緩沖溶液，配制PH為2,4,6.5,7.4PBS溶液。三、酸度計(jì)的使用方法1、打開電源開關(guān)、把測量選擇開關(guān)撥向PH檔2、一次定位把電極用蒸館水清洗，濾紙吸干，插入PH=6.86的緩沖溶液中，然后調(diào)節(jié)定位調(diào)節(jié)器，使儀器指示的值與溶液PH值相同3、二次定位把電極用蒸館水清洗，濾紙吸干，插入PH=4的緩沖溶液中，然后調(diào)節(jié)斜率調(diào)節(jié)器，使儀器指示的值與溶液PH值相同4、取出電極，電極用蒸館水清洗，濾紙吸干。將電極插入到待測溶液中，待示數(shù)穩(wěn)定后，記下PH值。四、實(shí)驗(yàn)方法和實(shí)驗(yàn)后處理1、緩沖溶液的制備

5、。母液的配制0.2MNa2HPO4:稱取71.6gNa2HPO4-12H2O,溶于1000ml水0.2MNaH2PO4:稱取31.2gNaH2PO4-2H2O,溶于1000ml水各種溶度PB的配制：先配0.2MPB(PH=7.4,100ml):取19ml0.2mol/L的NaH2PO4,81ml0.2mol/L的Na2HPO40.1MPB:取500ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml0.01MPB:取500ml0.2MPB,加水稀釋至1000ml0.02MPB:取500ml0.2MPB,加水稀釋至1000mlD組：配制PH=7.4,0.2MNaH2PO419ml0.2MNa2HPO481m

6、l四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果溫度：27.3C杯編號1理論P(yáng)H值7.4PH實(shí)測值7.72五、PH值的測定(1) 將電極浸入待測燒杯中，輕輕搖勻(2) 測量待測緩沖溶液的溫度(3) 記錄電表的示數(shù)(4) 測定后將讀數(shù)開關(guān)放開，洗凈電極實(shí)驗(yàn)后處理將范圍選擇器撥向零，關(guān)閉電源開關(guān)蒸館水洗凈電極，取下復(fù)合電極，戴上橡皮帽，放回盒中洗凈容器，將桌面擦凈實(shí)驗(yàn)三納米粒子對地塞米松的吸附動力學(xué)實(shí)驗(yàn)1. 一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆兆贤夥止夤舛确y定地塞米松含量的基本原理和方法。2. 掌握確證分析方法的效能指標(biāo)內(nèi)容和要求。3. 熟悉建立分析方法的基本思路。二、實(shí)驗(yàn)原理紫外-可見光譜是用紫外-可見光測獲的物質(zhì)電子光譜，它研究產(chǎn)生于價(jià)電子在電

7、子能級間的躍遷，研究物質(zhì)在紫外-可見光區(qū)的分子吸收光譜。當(dāng)不同波長的單色光通過被分析的物質(zhì)時(shí)能測得不同波長下的吸收度或透光率。紫外吸收光譜的定性分析為化合物的定性分析提供了信息依據(jù)。動力學(xué)研究是整個(gè)吸附研究體系的重要組成部分，通過對吸附動力學(xué)的研究，可以對以后的研究起到一定指導(dǎo)作用，并能夠在動力學(xué)層面上反映體系對的吸附行為。需要同學(xué)們在本次實(shí)驗(yàn)采取不同初始濃度的地塞米松溶液，進(jìn)行吸附動力學(xué)實(shí)驗(yàn)，從中尋求結(jié)果。三、實(shí)驗(yàn)器材和儀器精密電子天平、超聲清洗機(jī)、紫外分光光度計(jì)、離心機(jī)10mL和2mL、容量瓶、燒杯、攪拌子、離心管、離心管盒、離心管架子、小型表面皿、實(shí)驗(yàn)室抹布、塑料洗瓶、燒杯刷、清潔劑、插

8、線板、玻璃移液管、吸耳球、封口膜、剪刀、PE手套、塑料吸管、小號稱量紙、ICM石英吸收池、擦鏡紙、標(biāo)簽紙、鑰匙、移液器吸頭、小號濾紙、卷紙、移液管架、吹風(fēng)機(jī)。PH標(biāo)定緩沖液各5包，氯化鈣、磷酸鈉、磷酸氫二鈉、磷酸二氫鈉、氫氧化鈉、鹽酸，甲醇各一瓶，乙醇2箱，地塞米松5克。多種納米粒子：D組：透明質(zhì)酸硅酸鈣四、實(shí)驗(yàn)步驟(1)吸附動力學(xué)實(shí)驗(yàn)1、分別配置100mL濃度為10mM的磷酸鈉溶液A和10mM的CaCl2溶液B,0.1M鹽酸溶液，0.1MNaOH溶液。2、稱取200mg納米粒子于10mL離心管中，加入5mL溶液A,超聲分散，常溫震蕩2h,離心，用去離子水清洗顆粒三次，37度干燥，得到磷酸化的

9、納米粒子。3、同上，將溶液A換為溶液B。4、用乙醇配置質(zhì)量濃度為100mg/L的地塞米松溶液1L。采用對半稀釋后得到質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液。5、分別配置100、50、25mg/L的地塞米松溶液a、b、c。量取20mg納米粒子至于燒杯中，分別加入100mL溶液abc,分散均勻。6、在指定時(shí)間點(diǎn)分別取出2mL上清液，離心，通過紫外分光光度計(jì)測量上清液濃度。計(jì)算吸附量，并做圖。7、剩余的納米粒子140mg加入濃度為100mg/L的地塞米松乙醇溶液280mL,封好，攪拌吸附過夜后離心，通過紫外分光光度計(jì)測量上清液濃度，計(jì)算載藥量。37度干燥，得到的粒子用于體外釋放實(shí)驗(yàn)。(2)體外釋放實(shí)驗(yàn)1、使用pH7.4的

10、PBS溶液配制質(zhì)量濃度為100mg/L的地塞米松溶液25mL。采用對半稀釋后得到標(biāo)準(zhǔn)樣品溶液。2、配制pH為5.7、6.5和7.4、8.0的0.01MPBS溶液。取5mg已吸附地塞米松的納米粒子于離心管中，分別加入pH不同的釋放介質(zhì)50mL。在指定時(shí)間取出釋放液5mL,并加入相同量的新鮮釋放介質(zhì)。紫外檢測取出的釋放液中地塞米松濃度。五、數(shù)據(jù)處理編p時(shí)間稀釋后的值吸光度值000A-5-c50.5981.196A-10-c100.5011.002A-15-c150.4190.838A-20-c200.4460.892A-40-c400.4490.898A-60-c600.5171.034A-5-b

11、50.9191.838A-10-b100.9231.846A-15-b150.9951.99A-20-b200.881.76A-40-b400.8571.714A-60-b601.0132.026A-5-a50.6562.624A-10-a100.6472.588A-15-a150.8613.444A-20-a200.883.52A-40-a400.7282.912A-60-a600.8743.496A的吸附動力學(xué)實(shí)驗(yàn)+100mg/Ly-50mg/L25mg/L1015204060T(min)編5時(shí)間稀釋后的值吸光度值000B-5-c50.4260.852B-10-c100.4720.944B

12、-15-c150.40.8B-20-c200.4290.858B-40-c400.4690.938B-60-c600.4720.944B-5-b50.951.9B-10-b100.9381.876B-15-b151.0182.036B-20-b200.831.66B-40-b401.0042.008B-60-b601.0182.036B-5-a50.9233.692B-10-a100.7873.148B-15-a150.9543.816B-20-a2014B-40-a401.0024.008B-60-a601.0514.204B的吸附動力學(xué)曲線T(min)100mg/L50mg/LY-25mg/L值度光吸體外釋放實(shí)驗(yàn)APK時(shí)間吸光度值6.060.50.00320.00640.00260.0516.80.50.0120.01440.01460.037.40.50.05920.04340.02360.068.20.50.10220.08640.05860.549A勺體外釋放實(shí)驗(yàn)PH6.06*PH6.8