無菌檢查用培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證報(bào)告

1、無菌檢查用培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證報(bào)告審核批準(zhǔn)表O方案經(jīng)以下部門審核和批準(zhǔn)后生效工程職責(zé)簽字日期起草質(zhì)保部質(zhì)保部審核質(zhì)保部長(zhǎng)批準(zhǔn)質(zhì)量副總1. 驗(yàn)證目的：為證明硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基、營養(yǎng)肉湯、改良馬丁培養(yǎng)基適合于細(xì)菌, 真菌的無菌檢查，總結(jié)本驗(yàn)證報(bào)告。2. 參照標(biāo)準(zhǔn)：?中國藥典?2022版二部附錄XI H無菌檢查法。3. 驗(yàn)證工程：硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基、營養(yǎng)肉湯、改良馬丁培養(yǎng)基適用性檢查。部門職責(zé)質(zhì)保部負(fù)責(zé)對(duì)驗(yàn)證進(jìn)行總結(jié)和評(píng)價(jià)批準(zhǔn)方案及報(bào)告質(zhì)保部負(fù)責(zé)制定確認(rèn)方案及報(bào)告的編制質(zhì)保部負(fù)責(zé)確認(rèn)過程的相關(guān)檢測(cè)，確保檢驗(yàn)結(jié)論正確可靠質(zhì)保部負(fù)責(zé)確認(rèn)過程的相關(guān)檢測(cè)，確保檢驗(yàn)結(jié)論正確可靠4.試驗(yàn)材料：4.1.品名:規(guī)格

2、:被驗(yàn)證培養(yǎng)基：硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基批號(hào)：生產(chǎn)廠家:品名:營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基規(guī)格:批號(hào)：生產(chǎn)廠家:品名:改良馬丁培養(yǎng)基規(guī)格:批號(hào)：生產(chǎn)廠家:4.2.儀器設(shè)備：4.2.1.壓力蒸汽火菌器： 型號(hào)：編號(hào)：4.2.2.雙人凈化工作臺(tái)：型號(hào)：編號(hào)：4.2.3.電熱鼓風(fēng)枯燥箱： 型號(hào)：編號(hào)：4.2.4.生化培養(yǎng)箱2328C:型號(hào)：編號(hào)：4.2.5.恒溫培養(yǎng)箱3035C型號(hào)：編號(hào)：4.3.稀釋劑:0.9%無菌氯化鈉溶液4.4.驗(yàn)證用培養(yǎng)基：名稱生產(chǎn)廠家批號(hào)營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基4.5.驗(yàn)證用菌株:驗(yàn)證菌株代次鋰傘甘 培養(yǎng)基培養(yǎng)溫度培養(yǎng)時(shí)間小時(shí)金黃色葡萄球菌CMCCXB26 00330 35 C18

3、24銅綠假單胞菌CMCCB10 10430 35 C18 24枯草芽抱桿菌CMCCB63 50130 35 C18 24生抱梭菌CMCC(B)6494130 35 C18 24白色念珠菌CMCF98 00123 28 C24 48黑曲霉菌CMCC(F)9800323 28 C57天5. 菌液制備：5.1. 取經(jīng)培養(yǎng)1824小時(shí)的金黃色葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌的營養(yǎng)肉 湯新鮮培養(yǎng)物1ml參加到9ml 0.9%無菌氯化鈉溶液中，10倍稀釋至小于100cfu / ml的 菌懸液備用。5.2. 取經(jīng)培養(yǎng)2448小時(shí)的白色念珠菌的改良馬丁培養(yǎng)物1ml參加到9ml 0.9%無菌氯化鈉溶液中，1

4、0倍稀釋至小于100cfu / ml的菌懸液備用。6. 菌液計(jì)數(shù)：每種菌液接種2個(gè)平皿分別取上述制備的金黃色葡萄糖球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌各1ml參加培養(yǎng)皿， 每種菌液平行做2皿，注入不超過45°C營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基1520ml，置3035°C培養(yǎng)箱 培養(yǎng)二天，取上項(xiàng)制備的白色念珠菌菌液1ml參加培養(yǎng)皿，平行做2皿，注入不超過45C的玫瑰紅鈉瓊脂培養(yǎng)基約1520ml，置2328C培養(yǎng)箱培養(yǎng)三天。硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基的配制：取硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基29.25g，加1L蒸餾水，加熱煮沸使其完全溶解，搖勻分裝到試管中，每只試管裝量12ml，121C滅菌15mi n。營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)

5、基的配制：取營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基18g,加1L蒸餾水，加熱攪拌使其完全溶解，搖勻分裝到試管中，每只試管裝量 12ml, 121 °C滅菌15mi n。改良馬丁培養(yǎng)基的配制：取改良馬丁培養(yǎng)基28.5g，加1L蒸餾水，加熱攪拌使其完全溶解，搖勻分裝到到試管中，每只試管裝量 9ml，121C滅菌15mi n。硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基和營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基 5支，置于3035C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)14天; 改良馬丁培養(yǎng)基5支，置于2328C的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)14天C，逐日觀察情況。表1培 養(yǎng)基 的無菌性檢查表培養(yǎng)基名稱管數(shù)培養(yǎng)時(shí)間天備注1234567891011121314硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基12345營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基

6、12345改良馬丁培養(yǎng)基12345結(jié)論注：“+為生長(zhǎng)，“-為不生長(zhǎng)7.1.硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基等靈敏度檢查至少應(yīng)進(jìn)行3次獨(dú)立的平行試驗(yàn)硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基的配制：取硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基29.25g，加1L蒸餾水，加熱煮沸使其完全溶解，搖勻分裝到試管中，每只試管裝量12ml, 121 °C滅菌15mi n。營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基的配制：取硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基18g，加1L蒸餾水，加熱攪拌使其完全溶解，搖勻分裝到試管中，每只試管裝量12ml, 121C滅菌15mi n。改良馬丁培養(yǎng)基的配制：取改良馬丁培養(yǎng)基 28.5g，加1L蒸餾水，加熱攪拌使其完全 溶解，搖勻分裝到到試管中，每只試管裝量 9m

7、l，121C滅菌15mi n。取每管裝量為12ml的硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基9支，分別接種小于100cfu/ml的金黃色 葡萄球菌、銅綠假單胞菌、枯草芽抱桿菌、生抱梭菌各 2支，另1支不接種作為空白對(duì) 照，培養(yǎng)3天；取每管裝量為9ml的改良馬丁培養(yǎng)基5支，分別接種小于100cfu/ml的 白色念珠菌、黑曲霉各2支，另1支不接種作為空白對(duì)照，培養(yǎng)5天。逐日觀察結(jié)果?？瞻讓?duì)照管應(yīng)無菌生長(zhǎng)，假設(shè)加菌的培養(yǎng)基管生長(zhǎng)良好，判該培養(yǎng)基的靈敏度檢查符合 規(guī)定。表2培養(yǎng)基靈敏度檢查表菌種類型培養(yǎng)基裝量ml培養(yǎng)基管數(shù)支硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基天備注123金黃色葡萄球菌121121枯草芽抱桿菌121121銅綠假單胞菌12

8、1121生抱梭菌121121空白對(duì)照121菌種類型:備注培養(yǎng)基裝量ml培養(yǎng)基管數(shù)支營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基天123金黃色匍萄球菌121121枯草芽抱桿菌121121銅綠假單胞菌121121生孢梭菌121121空白對(duì)照121菌種類型培養(yǎng)基裝量ml培養(yǎng)基管數(shù)支改良馬丁培養(yǎng)基天備注12345白色念珠菌9191黑曲霉9191空白對(duì)照91結(jié)論注：“ + 為生長(zhǎng)，“-為不生長(zhǎng)8驗(yàn)證周期：同種培養(yǎng)基的不同批號(hào)，不同生產(chǎn)廠家均應(yīng)進(jìn)行適用性驗(yàn)證。9結(jié)論：無菌檢查用培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證報(bào)告書驗(yàn)證工程無菌檢查用培養(yǎng)基適用性驗(yàn)證驗(yàn)證目的無困檢查用培養(yǎng)基適合于細(xì)困，真困的培養(yǎng)2022年 月日至2022年 月 日，驗(yàn)證小組根據(jù)批準(zhǔn)的“

9、驗(yàn)證方案對(duì)無菌檢查用培養(yǎng)基進(jìn)行無菌檢查和靈敏度驗(yàn)證，驗(yàn)證方案在實(shí)施過程中未做修改；根據(jù)?中 華人民共和國藥典?2022年版二部附錄無菌檢查法培養(yǎng)基的適用性檢查，結(jié)果。驗(yàn)證人員會(huì)簽：部門職責(zé)人員會(huì)簽質(zhì)保部負(fù)責(zé)對(duì)驗(yàn)證進(jìn)行總結(jié)和評(píng)價(jià)批準(zhǔn)方案及報(bào)告質(zhì)保部負(fù)責(zé)制定確認(rèn)方案及報(bào)告的編制質(zhì)保部負(fù)責(zé)確認(rèn)過程的相關(guān)檢測(cè)，確保檢驗(yàn)結(jié)論正確可靠質(zhì)保部負(fù)責(zé)確認(rèn)過程的相關(guān)檢測(cè)，確保檢驗(yàn)結(jié)論正確可靠批準(zhǔn)人：批準(zhǔn)日期：無菌培養(yǎng)基的適用性檢查記錄培養(yǎng)基：1.硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基批號(hào)：檢驗(yàn)日期2.宮養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基批號(hào)：檢驗(yàn)日期3.改良馬丁培養(yǎng)基批號(hào)：檢驗(yàn)日期一、培養(yǎng)基的無菌性檢查培養(yǎng)溫度：硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基C改良馬丁培養(yǎng)基C培

10、養(yǎng)基名稱管數(shù)培養(yǎng)時(shí)間天備注1234567891011121314硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基12345宮養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基12345改良馬丁123培養(yǎng)基45結(jié)論注：“ + 為生長(zhǎng)，“-為不生長(zhǎng)二、培養(yǎng)基的靈敏度檢查1.菌液制備：1金黃色葡萄球菌CMCC(B)26003第代0.9%無菌NaCI溶液至含菌量CFU/ml2枯草芽抱桿菌CMCC(B)63501第代0.9%無菌NaCI溶液至含菌量CFU/ml3銅綠假單胞菌CMCC(B) 10104第代0.9%無菌NaCI溶液至含菌量CFU/ml4生抱梭菌CMCC(B)64941第代0.9%無菌NaCI溶液至含菌量CFU/ml5白色念珠菌CMCC(F)98001第代0.9%無菌NaCI溶液至含菌量CFU/ml6黑曲霉CMCC(F)98003第代0.9%無菌NaCI溶液至含菌量CFU/ml2.檢查結(jié)果細(xì)菌培養(yǎng)溫度C 3天霉菌及酵母菌培養(yǎng)溫度C 5天菌種類型培養(yǎng)基裝量ml培養(yǎng)基管數(shù)支硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基天備注123金黃色葡萄球菌121121枯草芽孢桿菌121121銅綠假單胞菌121121生孢梭菌121121空白對(duì)照121菌種類型培養(yǎng)基裝量ml培養(yǎng)基管數(shù)支宮養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基天備注123金黃色匍萄球菌121121枯草芽孢桿菌1