胸腺肽聯(lián)合狂犬病疫苗接種對機(jī)體產(chǎn)生γ-干擾素、白細(xì)胞介素-2和中和抗體影響的研究.docx

1、-550-PADKINA.GOLDFRADC,BRADYAK,etal.Epidemiologyofseveresepsisoccurringinthefirst24hoursin1CUinEngland,WalesandNorthernIrelandJ.CritCareMed,2003,31(9)：2332-2338.6 STEPHANEH.SAXH,PHIUPPEEA,etal.NosocomialBloodstreaminfectionandclinicalsepsisJ.Emerginfectdis,2004,10(1)：76-81.8jNGUYENHB,C()RBE'ITSW

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4、甲腎上腺紊聯(lián)合左西蒙旦或多巴酚胺對膿毒性休克豬的影響J.東南大學(xué)學(xué)報(bào)：醫(yī)學(xué)版,2011,30(6):892-895.15戴林峰，王醒.膿毒癥與凝血功能異常JL東南大學(xué)學(xué)報(bào):醫(yī)學(xué)版,2012,31(3):359-362.16陳齊紅，鄭瑞強(qiáng)，林華，等.感染性休克集束治療對病死率影響的前船性研究J.中國危重病急救醫(yī)學(xué),2008,20(9):534-537.17郭琦，黎敏毅,農(nóng)凌波，等.嚴(yán)重感染集束治療的依從性研究J.中國危重病急救醫(yī)學(xué).2009,21(1):8-12.論著.胸腺肽聯(lián)合狂犬病疫苗接種對機(jī)體產(chǎn)生y干擾素、白細(xì)胞介素2和中和抗體影響的研究顧小軍，沈玲，黃英(東南大學(xué)附典第二醫(yī)院內(nèi)科，江蘇南

5、京210003)摘要目的：觀察胸腺肽聯(lián)合狂犬病疫苗接種對機(jī)體”干擾素、白細(xì)胞介素-2和中和抗體產(chǎn)生的影響。方法：II級以下狂犬病暴露人群100例隨機(jī)分為兩組：疫苗組50例，單用狂犬疫苗2.5U,常規(guī)免疫程序接種；胸腺肽組50例，給予50mg單劑量肌肉注射+狂犬疫苗2.5U,常規(guī)免疫程序接種。在注射前(IX)、注射7d(D7)、注射6個月(M6)、注射12個月(M12)測定外周血淋巴細(xì)胞總數(shù)及干擾素、白細(xì)胞介素-2水平，注射7d、注射6個月、注射12個月測定中和抗體水平。結(jié)果：外周血淋巴細(xì)胞總數(shù)兩組間無差異；胸腺肽組在注射后7d白細(xì)胞介素-2水平和廣干擾素水平均高于疫苗組(P<0.05)；

6、胸腺肽組在注射后7d中和抗體產(chǎn)生量高于疫苗組(P<0.05)。結(jié)論:加用胸腺肽組注射后7d中和抗體水平高于單用疫苗組，但6個月和12個月的抗體含量沒有差異；兩組接種后體內(nèi)白細(xì)胞介素-2和y-干擾素水平皆增高，白細(xì)胞介素-2增加的程度和抗體的產(chǎn)生量呈正相關(guān)。關(guān)鍵詞中和抗體；y-干擾素；白細(xì)胞介索-2；胸腺肽；狂犬疫苗；快速熒光灶抑制試驗(yàn)中圖分類號R512.99文獻(xiàn)標(biāo)識碼A文章編號1671-6264(2012)05-0550-05I收稿日期.2012-03-23修回日期2012-06-07I基金項(xiàng)目南京市衛(wèi)生局課題(ykkO8121)作者簡介顧小軍(I970-).刃，江蘇泰興人，副主任醫(yī)師，

7、醫(yī)學(xué)碩士。E-mail：999gu163.coni顧小軍，等.胸腺肽聯(lián)合狂犬病疫苗接種對機(jī)體產(chǎn)生y-干擾素、白細(xì)胞介素-2和中和抗體影響的研究-551doi：10.3969/j.issn.1671-6264.2012.05.004Studyofthymosincombinationwithrabiesvaccineinpostexposurepatientsinfluencedthelevelsofyinterferon,interleukin-2andneutralizingantibodyGUXiao-jun,SHENLing,HUANGYing(DepartmentofInternalM

8、edicine,theSecondHospitalAffiliatedtoSoutheastUniversity,Nanjing210003,China)Abstract,Objective:Toobservetheeffectofy-interferontinterleukin-2andneutralizingantibodylevelsinpatientswithrabiesvaccinationcombinationwiththymosin.Methods:100patientsweredividedintotwogroups.Thevaccinegroup,50casesofrabie

9、spostexposurepatientsweregivenvaccine2.5U,routineimmunizationprocedures；thethymosingroup,50casesweregivenasingledoseofthymosin50mgeachwithrabiesvaccine2.5Utogether.Bloodserumsweremaintainedbeforeinjection(DO),onthe7days(1)7),on6month(M6)and12month(M12).y-interferon,interleukin-2andneutralizingantibo

10、dyandlymphocytecountweredetectedtogether.Results:Nolymphocytecountsdifferenceswasfoundintwogroups.Leukocyteinterleukin-2andinterferon-ylevelsinthymosingroupat7daysafterinjectionwerehigherthanthoseinthevaccinegroup(P<0.05).Neutralizingantibodylevelwassignificantlyhigherinthymosingroupthaninvaccine

11、groupsonD7.Conclusion:ThelevelsandpositiverateofneutralizingantibodiesinthymosingrouparehigherthanthoseinvaccinegrouponD7,bulthereisnodifferenceonM6andM12.Interleukin-2andy-interferonlevelsareincreasedafterinoculationvaccine,thelevelofinterleukin-2increasedandtheamountofantibodyproductionispositivel

12、ycorrelated.LKeywordsneutralizingantibody；y-interferon；interleukin-2；thymosin；rabiesvaccine;rapidfluorescentfocusinhibitiontest種;胸腺肽組50例，在疫苗組基礎(chǔ)上首針加用單劑量:胸腺肽50mg肌肉注射。1.2試劑胸腺肽50mg支"，長春普華制藥生產(chǎn)；狂犬病疫苗2.5U支"，賽諾菲巴斯德公司生產(chǎn)。1.3實(shí)驗(yàn)方法狂犬病是由狂犬病病毒引起的人畜共患傳染病,病死率100%，全世界每年有6萬人死于該病，近幾年每年約12001500萬人接受狂犬病病毒暴露后接種目

13、前降低暴露后病人發(fā)病最關(guān)鍵和最有效的方法就是實(shí)施暴露后狂犬病疫苗免疫。在緊急暴露患者，特別是潛伏期較短的患者，如何使機(jī)體盡快產(chǎn)生抗狂犬病病毒的保護(hù)性中和抗體,或者在抗體產(chǎn)生前機(jī)體具有一定的抵抗力是宜接關(guān)系到免疫成敗的關(guān)鍵o有研究"勺顯示胸腺肽可加強(qiáng)狂犬病疫苗的接種效果，我們使用單劑地胸腺肽聯(lián)合狂犬病疫苗進(jìn)行接種，對其增強(qiáng)狂犬病疫苗的療效進(jìn)行觀察和研究。1對象和方法1.1研究對象及分組狂犬病暴露后的人群中n級咬傷者loo例，年齡18-59歲，身體健康，無不良嗜好。分成疫苗組50例.單獨(dú)給予狂犬病疫苗2.5U.按0、3、7、14、28接在注射前(D0)、注射后7d(D7)、注射6個月、注

14、射12個月測定外周血淋巴細(xì)胞總數(shù)、廣干擾素(IFN-y)、白細(xì)胞介素-2(IL-2)水平，在注射后7d、注射6個月、注射12個月測定中和抗體水平。外周血淋巴細(xì)胞總數(shù)采用全血細(xì)胞計(jì)數(shù)儀計(jì)數(shù)，由本院檢驗(yàn)中心完成。IL-2和IFN-y含量測定采用雙抗夾心酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測定，試劑購自上海森雄科技實(shí)業(yè)有限公司，嚴(yán)格按照試劑盒說明書操作。IL-2最低檢測值為16pg*ml,IFN-y最低檢測值為>8pg-mP'o中和抗體測定采用快速熒光灶抑制試驗(yàn)(RFFIT),按參考文獻(xiàn)6使用的方法檢測，具體操作由武漢生物制品研究所進(jìn)行C1.4統(tǒng)計(jì)學(xué)處理數(shù)據(jù)以*表示，采用SPSS19.0軟件

15、和EXCEL2007進(jìn)行分析，計(jì)量:資料的比較采用£檢驗(yàn)，陽性率的比較采用卡方檢驗(yàn),P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義°2結(jié)果2.1實(shí)驗(yàn)前后兩組外周血淋巴細(xì)胞總數(shù)比較兩組組內(nèi)及組間各時間點(diǎn)外周血淋巴細(xì)胞總數(shù)無差異（”>0.05）,見表1。表1各組外周血淋巴細(xì)胞測定結(jié)果（x±s）x109L*不同時間點(diǎn)淋巴細(xì)胞總數(shù)DOD7M6MI2疫苗組2.04±0.571.95±0.492.04土0.392.01±0.42胸腺肽組1.97±0.651.93±0.381.98±0.361.87±0.312.

16、2兩組不同時間點(diǎn)血清IL-2水平的比較疫苗組在注射后6個月IL-2水平升高，與注射前、注射后7d相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）；注射后12個月IL-2水平恢復(fù)至注射前水平，與注射后6個月相比差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.0l）o胸腺肽組IL-2水平在注射后7d開始升高（P<0.01）,7d與6個月差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（只>0.05）；注射后12個月下降至注射前水平，與注射后7d、6個月比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）o兩組間IL-2的水平在注射前、注射后6個月、12個月差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）,注射后7d胸腺肽組1L-2水平與疫苗組比較差異有統(tǒng)計(jì)

17、學(xué)意義（P0.05）°見表2。2.3兩組不同時間點(diǎn)IFNy水平的比較疫苗組IFN”水平在注射后7d明顯升高，與注射前比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01）,注射后6個月與注射后7d相比，IFN-y水平有所下降（<0.05）,注射后12個月降至注射前水平。胸腺肽組注射后7d及6個月，IFN->水平明顯升高（P<0.01）,注射后12個月恢復(fù)至注射前水平。胸腺肽組IFN-y水平在注射后7d明顯高于疫苗組（P<0.05）,其它時間點(diǎn)兩組差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（/>>0.05）。見表3。表2兩組不同時間點(diǎn)IL-2水平的比較（x±s,=50）與同組M

18、6比較,aP<0.01；與同組D7及M6比較,bP<0.01;與疫苗組同時點(diǎn)比較,cP<0.01組別不同時間點(diǎn)IL-2的水平D0D7M6M12疫苗祖62.00±13.07*59.83±8.35*70.76±12.4460.26±13.】0.胸腺肽組59.79±15.50b65.53±14.00*70.27±11.9058.70±17.03、表3兩組不同時間點(diǎn)IFN-y的比較（X±s,=50）pgmL組別不同時間點(diǎn)IFN-水平IX)D7M6M12疫苗組胸腺肽組15.35±3.03

19、"17.92±2.66*16.67±3.50b14.72±2.9!"15.49±1.85d19.05±2.73*16.57±2.2414.90±1.98*與同組D7比救,aP<0.01,bP<0.05；與同組M6比較,cP<0.05;與同組1）7、M6比較,dP<0.01；與疫苗組同時點(diǎn)比較,e"<0.052.4兩組不同時間點(diǎn)抗狂犬中和抗體水平的比較兩組組內(nèi)各時間點(diǎn)比較，中和抗體水平差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（尸<0.01）;胸腺肽組在注射7d時中和抗體水平明顯高于疫

20、苗組（P<0.01）,在注射后6個月和12個月與疫苗組比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）o見表4。在注射后7d疫苗組中和抗體水平>0.5IUml"病例數(shù)為3例，胸腺肽組為10例，胸腺肽組抗體產(chǎn)生率高于疫苗組（/=4.33,P<0.05）。在注射后6個月兩組都能產(chǎn)生右效抗體，陽性率是異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）,12個月時抗體都有下降，兩組問差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）o表4兩組不同時間點(diǎn)抗狂犬病中和抗體水平的比較（x±s,n=50）IUmL組別不同時間點(diǎn)中和抗體水平D7M6M12疫苗組0.46±0,11*4.07

21、7;1.13*0.68±0.38*閶腺肽組0.51±0.13少4.55±1.37,0.72±0.21*同組不同時點(diǎn)相比,aP<0.01；與疫苗組同時點(diǎn)相比,"<0.01顧小軍，等.胸腺肽聯(lián)合狂犬病疫苗接種時機(jī)體產(chǎn)生干擾素、白細(xì)胞介素-2和中和抗體影響的研究5532.5IL-2、yIFN和中和抗體的動態(tài)變化兩蛆體內(nèi)IL-2水平在注射后7d開始上升，到6個月時進(jìn)一步上升，到12個月時基本恢復(fù)正常，見圖1。DOD7M6MI2DOD7M6MI2050505877665一E蕓霎3與疫苗組比較,aP<0.01圖1兩組血清IL-2水平的動態(tài)

22、變化兩組體內(nèi)IFN-y在注射后7d上升明顯，到6個月時仍高于接種前，到12個月時恢復(fù)正常，見圖2。4208642022211111_§差該«卜作-4208642022211111_§差該«卜作-與疫苗組比較,aP<0.05圖2兩組血清IFN-y水平的動態(tài)變化兩組中和抗體在接種后7d即有上升,6個月時最高，12個月時下降明顯,但高于7d時的水平，見圖3。765432101，£fH/H-畏給蝠證子一765432101，£fH/H-畏給蝠證子一圖3兩組血清中抗狂犬中和抗體水平的動態(tài)變化2.6中和抗體和其他指標(biāo)的相關(guān)性疫苗組中和抗體與【

23、L-2水平的Pearson值為0.395(P<0.01),與淋巴細(xì)胞總數(shù)的Pearson值為0.146(?>0.05),與IFN-y的Pearson值為0(P>0.05)o胸腺肽組中和抗體與IL-2水平的Pearson值為0.235(P<0.01),與淋巴細(xì)胞總數(shù)的Peareon值為0.022(P>0.05),與IFN-y的Pearson值為0.011(P>0.05)o2.7疫苗和胸腺肽的安全性評估所有病例皆無明顯的不便反應(yīng)，注射部位紅腫23例(疫苗組1】例，胸腺肽組12例)，低熱15例(疫苗組7例，胸腺肽組8例)，乏力12例(疫苗組7例，胸腺肽組5例)，無

24、其他嚴(yán)重不良反應(yīng)，兩組比較不艮反應(yīng)發(fā)生率差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3討論研究顯示，狂犬病病毒暴露前免疫接種有利于狂犬病的預(yù)防。對于腥犬病緊急暴露后的處理措施,目前降低暴露后人群發(fā)病最關(guān)鍵和最有效的方法就是實(shí)施暴露后狂犬疫苗免疫?；颊咴诰o急狂犬病暴露時，尤其是明確的狂犬咬傷，要嚴(yán)格遵照動物咬傷的處理順序，局部傷口處理、疫苗接種和抗狂犬血清/免疫球蛋白缺一不可，II級傷口使用狂犬疫苗，III級傷口使用狂犬疫苗加抗狂犬免疫球蛋白。但盡管如此，在全國各地仍有嚴(yán)格按照預(yù)防接種程序處理后仍然發(fā)病的病例發(fā)生，其中免疫功能低下、有慢性消耗性疾病等都會影響抗體的產(chǎn)生"們。在緊急暴露人群，

25、特別是潛伏期較短者,如何使機(jī)體盡快產(chǎn)生抗狂犬病病毒的保護(hù)性中和抗體，或者在抗體產(chǎn)生前機(jī)體具有一定的抵抗力是直接關(guān)系到免疫成敗的關(guān)鍵。胸腺肽是-種很好的免疫調(diào)節(jié)劑，主要增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能，能連續(xù)誘導(dǎo)T淋巴細(xì)胞分化、成熟、發(fā)育，使CD4+T細(xì)胞數(shù)目增加；增強(qiáng)IL-2受體的表達(dá),增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞的能力，調(diào)節(jié)內(nèi)分泌。不同劑后的胸腺肽對機(jī)體免疫功能的調(diào)節(jié)也不同，較低劑靖產(chǎn)生免疫促進(jìn)作用，較高劑晴產(chǎn)生免疫抑制作用)。Cardenas等研究發(fā)現(xiàn)在小鼠感染狂犬病模型中,胸腺是最易受傷的的淋巴器官,小鼠死亡前胸腺細(xì)胞呈現(xiàn)高水平的CD4或CD8表達(dá),胸腺萎縮明顯，淋巴細(xì)胞凋亡。免疫低下或胸腺萎縮的人群接種疫苗效果

26、較差*。史秀山等w廠使用小鼠研究發(fā)現(xiàn)加用單劑技胸腺肽(2mg只”)后抗體效價高且抗體產(chǎn)生時間早，抗體水平高，減少免疫次數(shù)；而使用轉(zhuǎn)移因子則只能增強(qiáng)狂犬病疫苗免疫的效果，不能減少免疫次數(shù)。我們使用單劑量(1mg-kg'1)胸腺肽聯(lián)合狂犬病疫苗X寸II級咬傷的狂犬病暴露后人群進(jìn)行預(yù)防接種，動態(tài)觀察IL-2JNE-y水平和中和抗體含檢的變化，發(fā)現(xiàn)其能促進(jìn)注射后7d中和抗體的產(chǎn)生，但不能延緩抗體的有效保護(hù)時間。IL-2可作用于T細(xì)胞、B細(xì)胞，調(diào)節(jié)B細(xì)胞的分化、增殖及功能,在疫苗接種產(chǎn)生相應(yīng)抗體的過程中起著重要作用'W,如能夠降低免疫缺陷患者接種疫苗的副反應(yīng)，提高免疫的效果，使小鼠產(chǎn)生抗

27、體的時間提前，抗體效價高'“J;因此,接種狂犬疫苗后體內(nèi)幾-2的水平可以用于評價狂犬病疫苗的保護(hù)力*,犬接種狂犬病疫苗后體內(nèi)IL-2JFN-y水平皆出現(xiàn)明顯上升3時。在本次研究中，兩組接種疫苗后機(jī)體IL-2和IFN-丁水平皆有明顯上升，加用單劑量胸腺肽能增加接種7d后的抗體含量，加快抗體產(chǎn)生的速度，對于狂犬病暴露者胸腺肽是安全的,可作為一種免疫增強(qiáng)劑用于狂犬病疫苗接種。參考文獻(xiàn)1BLANTONJD,HANLONCA,RUPPRECHTCE.BabiessurveillanceintheUnitedStatesduring2006J.JAmVetMedAssoc,2007,231(4)：

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