傳遞窗紫外燈表面消毒效果驗證

1、傳遞窗紫外燈表面消毒效果驗證編 pCode：版本Version:編寫Preparedby:日期Date:審核Checkedby:日期Date:批準Approvedby:日期Date:生效日期DateofEffective:1、概述32、實施日期及時間安排33、驗證小組成員34、儀器和設備35、材料與試劑36、驗證過程47、驗證結果記錄68、再驗證周期79、相關SOP710、QA職責711、修改事項712、文檔71、概述進入微生物室的物品通過傳遞窗，經過紫外消毒后進入微生物室。為了確認傳遞窗紫外燈的消毒效果，特起草本方案對其進行驗證。本驗證用于QC微生物室、無菌室傳遞窗紫外燈表面消毒效果檢查。2

2、、實施日期及時間安排2012年月日開始進行驗證。3、驗證小組成員QA負責驗證方案的批準QA負責驗證方案的批準QC負責驗證方案、驗證報告的審核、組織驗證方案的培訓和實施負責驗證方案和驗證報告的起草驗證方案的實施4、儀器和設備儀器名稱型號或規(guī)格凈化工作臺HS-1300-V型菌落計數器紫外線強度測定儀穩(wěn)壓器220V細菌培養(yǎng)箱SHP-150型霉菌培養(yǎng)箱GNP-9270型5、器材5.1滅菌刻度吸管(1ml,10ml)5.2滅菌試管5.3滅菌平皿5.4酒精燈5.5載體：(1.0X1.0cm的玻片)6、材料與試劑純化水營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基改良馬丁培養(yǎng)基金黃色葡萄球菌CMCC(B)2

3、6003枯草芽抱桿菌CMCC(B)63501大腸桿菌CMCC(B)44102白色念珠菌CMCC(F)98001稀釋?夜(0.1%吐溫80,0.1%蛋白月東溶液)7、驗證過程試驗環(huán)境試驗在潔凈度10000級下的局部潔凈度100級的單向流空氣區(qū)域內進行，全過程嚴格遵守無菌操作。單向流空氣區(qū)、工作臺面及環(huán)境定期按醫(yī)藥工業(yè)潔凈室(區(qū))懸浮粒子、浮游菌和沉降菌的測試方法的現行國家標準進行潔凈度驗證。每次操作開始前，開紫外燈照射1小時。培養(yǎng)基的制備營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基配方：營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉31.0g純化水1000ml配制：根據需要量稱取營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基粉置適宜容器中，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調pH至

4、7.1=0.2,分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌121cX15分鐘。改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基配方：改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基粉42.0g純化水1000ml配制：根據需要量稱取改良馬丁瓊脂培養(yǎng)基粉，按配方比例加入純化水，水浴加熱使溶解，調pH至6.4=0.2,分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌115cx20分鐘。營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基配方：營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基20g純化水1000ml配制：稱取營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基20克，加1000ml純化水，加熱溶解，加熱至沸，冷卻至常溫，分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌121cM5分鐘。改良馬丁培養(yǎng)基配方：改良馬丁培養(yǎng)基粉28.0g純化水1000ml配制：根據需要量稱取改良馬丁培養(yǎng)基粉，按配方比

5、例加入純化水，水浴加熱使溶解，調pH至6.4=0.2,分裝于適宜容器，置高壓滅菌器滅菌115cx20分鐘。方法驗證試驗輻照強度測定開啟紫外燈5min后，用中心波長為253.7nm的紫外線強度測定儀在燈管下方垂直1m的中心處測量其輻照度值（uW/cm2）。測量時，電壓應穩(wěn)定在220V。普通型或低臭氧型直管紫外線燈（30W）,在燈管下方垂直1m的中心處，新燈管的輻照度值應90uW/cm2。使用中的燈管的輻照度值應70uW/cm2，低于此值者應予更換。照射劑量表面消毒接受的照射劑量，應達殺滅目標微生物所需。對大腸桿菌，照射劑量應達到X103uW-s/cm2,對金黃色葡萄球、白色念珠菌、枯草芽抱桿菌應

6、達到2.53X104uW-s/cm27.4.2.2照射劑量計算：照射劑量（uW-s/cm2）=紫外燈管強度（uW/cm2）x時間（s）7.4.3細菌及其芽抱和真菌殺滅效果的測定菌液的制備接種菌種名稱接種比加基培養(yǎng)條件金黃色葡萄球菌新鮮培養(yǎng)物營養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基3035c培養(yǎng)1824小時大腸桿菌新鮮培養(yǎng)物枯草芽抱桿菌新鮮培養(yǎng)物白色念珠菌新鮮培養(yǎng)物改良馬丁培養(yǎng)基2328c2448小時金黃色葡萄球菌、枯草芽胞桿菌、大腸桿菌、白色念珠菌培養(yǎng)后，將菌液進行活菌計數。將滅菌載體平放于滅菌平皿內，每個載體滴注定量菌懸液，（載體回收菌量達5X1055X106cfu/片），涂勻，放37c培養(yǎng)箱烘干。開啟紫外燈5min

7、后，將16個染菌玻片平放于滅菌平皿內，水平放于適當距離照射，于4個不同間隔時間（15min、30min、45min、60min）各取出4個染菌玻片，分別投入4個盛有5ml洗脫液試管中，振打80次。經適當稀釋后，取1ml洗脫液，作平板傾注，每個染菌玻片接種兩個，細菌放3035c培養(yǎng)48小時作活菌計數，真菌放2328c培養(yǎng)72小時作活菌計數。陽性對照， 除不做照射處理外， 取4個染菌玻片， 分別投入4個盛有5ml洗脫液試管中， 振打80次。 余按7.4.2.3同樣操作。計算殺滅率陽性對照回收菌數一試驗組回收菌數殺滅率（%）=X100%陽性對照回收菌數判定標準對指示菌殺滅率99.9%判為消毒合格。8

8、、驗證結果記錄：附件1.試驗菌數量測定原始記錄8、再驗證周期傳遞窗構造或紫外燈管放置位置發(fā)生改變時。9、相關SOP文件編號文件名稱020141微生物實驗室管理020143物品進出微生物檢驗室020342微生物檢驗區(qū)的清潔消毒020343培養(yǎng)基的配制020344細菌的接種、傳代和保存020377局壓滅菌021267微生物數量的測定10、QA職責QA必須參與驗證的評審階段；QA必須審閱最終報告（包括草案）；QA審閱者不應是參與實施的其他QA人員。11、修改事項在實施過程中，如果方案需要修改，必須提交書面的報告，闡述修改的原因，修改的內容，并經過驗證小組負責人及QA的認可。修改后的方案同先前執(zhí)行的方案一起歸檔。12、文檔所有的相關文檔都應該保留至少