第二章天然藥物化學(xué)成分的提取方法

1、1 1 生物堿：為一類存在于生物體內(nèi)分子中含有氮原子的有生物堿：為一類存在于生物體內(nèi)分子中含有氮原子的有機(jī)化合物的總稱；一般具有堿性，可與酸成鹽。游離生機(jī)化合物的總稱；一般具有堿性，可與酸成鹽。游離生物堿具親脂性；生物堿鹽具親水性。物堿具親脂性；生物堿鹽具親水性。2 2 苷類（甙類）：為一類經(jīng)水解后可產(chǎn)生糖和非糖兩部分苷類（甙類）：為一類經(jīng)水解后可產(chǎn)生糖和非糖兩部分的化合物。非糖部分叫苷元。苷具親水性，苷元具親脂的化合物。非糖部分叫苷元。苷具親水性，苷元具親脂性。性。 5 5 有機(jī)酸：廣義的有機(jī)酸泛指分子中有羧基的化合物。在植有機(jī)酸：廣義的有機(jī)酸泛指分子中有羧基的化合物。在植物中多以金屬離子或

2、生物堿鹽的形式存在。按分子大小又物中多以金屬離子或生物堿鹽的形式存在。按分子大小又分為小分子有機(jī)酸和大分子有機(jī)酸。前者極性大，具親水分為小分子有機(jī)酸和大分子有機(jī)酸。前者極性大，具親水性；后者極性小，具親脂性。性；后者極性小，具親脂性。 6 6 樹脂：為植物組織中樹脂道的分泌物。性脆，受熱時(shí)先樹脂：為植物組織中樹脂道的分泌物。性脆，受熱時(shí)先軟化而后變?yōu)橐后w，燃燒時(shí)發(fā)生濃煙并有明火。樹脂具親軟化而后變?yōu)橐后w，燃燒時(shí)發(fā)生濃煙并有明火。樹脂具親脂性。按結(jié)構(gòu)又分為樹脂酸（主要為二萜酸、三萜酸及其脂性。按結(jié)構(gòu)又分為樹脂酸（主要為二萜酸、三萜酸及其衍生物）、樹脂醇（分子中具羥基）、樹脂烴（為一類結(jié)衍生物）、

3、樹脂醇（分子中具羥基）、樹脂烴（為一類結(jié)構(gòu)復(fù)雜的含氧中性化合物）類。構(gòu)復(fù)雜的含氧中性化合物）類。 7 7 氨基酸、蛋白質(zhì)和酶：氨基酸、蛋白質(zhì)和酶：（1 1） 氨基酸：分子中含有氨基的羧酸。構(gòu)成蛋白質(zhì)的多氨基酸：分子中含有氨基的羧酸。構(gòu)成蛋白質(zhì)的多為為-氨基酸。為親水性。在等電點(diǎn)時(shí)，溶解度最小。氨基酸。為親水性。在等電點(diǎn)時(shí)，溶解度最小。（2 2） 蛋白質(zhì)、多肽：蛋白質(zhì)為二十多種蛋白質(zhì)、多肽：蛋白質(zhì)為二十多種-氨基酸通過氨基酸通過肽鍵首尾相連而成的高分子化合物，多肽亦為。但二者肽鍵首尾相連而成的高分子化合物，多肽亦為。但二者分子量不同，一般將分子量在分子量不同，一般將分子量在5 510103 3以

4、下稱為多肽，而以下稱為多肽，而介于介于5 510103 31110107 7之間稱為蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)在冷水中溶之間稱為蛋白質(zhì)。蛋白質(zhì)在冷水中溶解且成膠體，在熱水、解且成膠體，在熱水、60%60%以上乙醇及其它有機(jī)溶劑中以上乙醇及其它有機(jī)溶劑中變性沉淀。變性沉淀。（3 3） 酶：是有機(jī)體內(nèi)具有催化作用的蛋白質(zhì)，其催化酶：是有機(jī)體內(nèi)具有催化作用的蛋白質(zhì)，其催化作用具有專屬性，如特定的酶可催化水解特定的苷。酶作用具有專屬性，如特定的酶可催化水解特定的苷。酶的性質(zhì)和蛋白質(zhì)相同。的性質(zhì)和蛋白質(zhì)相同。 8 8 鞣質(zhì)：又稱單寧或鞣酸，為一類分子較大、結(jié)構(gòu)復(fù)鞣質(zhì)：又稱單寧或鞣酸，為一類分子較大、結(jié)構(gòu)復(fù)雜的多元酚

5、類化合物的總稱?？膳c蛋白質(zhì)結(jié)合成難溶雜的多元酚類化合物的總稱?？膳c蛋白質(zhì)結(jié)合成難溶于水的鞣酸蛋白。為親水性物質(zhì)。于水的鞣酸蛋白。為親水性物質(zhì)。 9 9 植物色素：為植物中具有顏色的成分的總稱。依溶解植物色素：為植物中具有顏色的成分的總稱。依溶解性又分為水溶性和脂溶性色素；前者主要指一些有顏性又分為水溶性和脂溶性色素；前者主要指一些有顏色的苷、花青素，后者主要包括葉綠素、胡羅卜素等色的苷、花青素，后者主要包括葉綠素、胡羅卜素等 10 10 油脂和蠟：油脂為一分子甘油和三分子脂肪酸脫水結(jié)油脂和蠟：油脂為一分子甘油和三分子脂肪酸脫水結(jié)合形成的酯。主要在種子中。常溫下為液體。蠟為高合形成的酯。主要在種

6、子中。常溫下為液體。蠟為高級不飽和脂肪酸和一元醇生成的酯。主要在植物莖、級不飽和脂肪酸和一元醇生成的酯。主要在植物莖、葉的表面。常溫下為固體。均為親脂性成分葉的表面。常溫下為固體。均為親脂性成分1、提?。豪眠m當(dāng)?shù)娜軇┗蚍椒?，將所要成分盡可能從原料中完全提出的過程。2、分離：將提取物中所含的各種成分一一分開，并將得到的單體加以精制的過程。一、溶劑提取法一、溶劑提取法二、水蒸氣蒸餾提取法二、水蒸氣蒸餾提取法三、超臨界流體萃取法三、超臨界流體萃取法 四、升華法四、升華法五、壓榨法五、壓榨法原理：原理： 根據(jù)中藥化學(xué)成分與溶劑間“極性相似相相似相溶溶”的原理，依據(jù)各類成分溶解度的差異，選擇對所提成分

7、溶解度大、對雜質(zhì)溶解度小的溶劑，依據(jù)“濃度差”原理，將所提成分從藥材中溶解出來的方法。1 1、溶劑對有效成分溶解度大，對雜質(zhì)、溶劑對有效成分溶解度大，對雜質(zhì)溶解度小溶解度小2 2、沸點(diǎn)適中容易回收、沸點(diǎn)適中容易回收3 3、溶劑不能與中藥的成分起化學(xué)變化、溶劑不能與中藥的成分起化學(xué)變化4 4、溶劑要經(jīng)濟(jì)、易得、使用安全等、溶劑要經(jīng)濟(jì)、易得、使用安全等* * 強(qiáng)極性溶劑：水強(qiáng)極性溶劑：水* * 親水性有機(jī)溶劑：親水性有機(jī)溶劑： 能與水任意混溶（甲醇、乙醇、丙酮）* * 親脂性有機(jī)溶劑：親脂性有機(jī)溶劑： 不與水任意混溶，可分層（正丁醇及其以后的試劑）常用溶劑的極性大小順序：石油醚石油醚 四氯化碳四氯

8、化碳 苯苯 乙醚乙醚 氯仿氯仿 乙酸乙酯乙酸乙酯 正丁醇正丁醇 丙酮丙酮 乙醇（甲醇）乙醇（甲醇） Ar-OH R-OH -NH2 -SH HN(CH3)2 -NO2 R- 中藥化學(xué)成分不但數(shù)量繁多，而且結(jié)構(gòu)千差萬別。所以極性問題中藥化學(xué)成分不但數(shù)量繁多，而且結(jié)構(gòu)千差萬別。所以極性問題很復(fù)雜。但依據(jù)以上三點(diǎn)，一般可以判定。需要大家判斷的大多數(shù)是很復(fù)雜。但依據(jù)以上三點(diǎn)，一般可以判定。需要大家判斷的大多數(shù)是母核相同或相近的化合物，此時(shí)主要依據(jù)取代基極性大小。母核相同或相近的化合物，此時(shí)主要依據(jù)取代基極性大小。N R2RR1C NROOC HOC R1RO CCCC極性較大的：極性較大的： 苷類、生

9、物堿鹽、糖類、蛋白質(zhì)、氨基苷類、生物堿鹽、糖類、蛋白質(zhì)、氨基酸、鞣質(zhì)、小分子有機(jī)酸、親水性色素。酸、鞣質(zhì)、小分子有機(jī)酸、親水性色素。極性小的：極性小的： 游離生物堿、苷元、揮發(fā)油、樹脂、游離生物堿、苷元、揮發(fā)油、樹脂、脂肪、大分子有機(jī)酸、親脂性色素。脂肪、大分子有機(jī)酸、親脂性色素。 以上不是絕對的，具體成分要具體分析。比如，有的苷類化合物極性以上不是絕對的，具體成分要具體分析。比如，有的苷類化合物極性很小，有的苷元極性很大。很小，有的苷元極性很大。 浸漬法 滲漉法 煎煮法 回流提取法 連續(xù)回流提取法 超聲法（不常用）浸漬法：浸漬法： 也叫冷浸法。將藥材粗粉以適當(dāng)溶劑在常溫下浸泡。多以水類也叫冷

10、浸法。將藥材粗粉以適當(dāng)溶劑在常溫下浸泡。多以水類或稀醇為溶劑?；蛳〈紴槿軇?。適于成分遇熱易破壞或含多糖較多的中藥的提取適于成分遇熱易破壞或含多糖較多的中藥的提取。缺點(diǎn)為浸出效果較差，水提取液易發(fā)霉，提取液體積大，浸出時(shí)間缺點(diǎn)為浸出效果較差，水提取液易發(fā)霉，提取液體積大，浸出時(shí)間長。長。滲漉法：滲漉法： 將中藥粗粉裝于滲漉筒中，不斷添加溶劑將中藥粗粉裝于滲漉筒中，不斷添加溶劑滲過藥粉，從滲漉筒下端不斷流出滲漉液。各滲過藥粉，從滲漉筒下端不斷流出滲漉液。各類溶劑均可。此法由于溶液濃度差大，浸出效類溶劑均可。此法由于溶液濃度差大，浸出效果好，且不破壞成分。但缺點(diǎn)為溶液體積大，果好，且不破壞成分。但缺

11、點(diǎn)為溶液體積大，時(shí)間長。提取效率高于浸漬法。時(shí)間長。提取效率高于浸漬法。煎煮法：煎煮法： 為中藥水提取最常用的方法。將中藥粗粉用水為中藥水提取最常用的方法。將中藥粗粉用水加熱煮沸，保持一定時(shí)間，成分即可浸出。煎煮法加熱煮沸，保持一定時(shí)間，成分即可浸出。煎煮法必須以水為溶劑。此法提取效率高，但遇熱破壞成必須以水為溶劑。此法提取效率高，但遇熱破壞成分要注意。且含多糖多的成分過濾困難。分要注意。且含多糖多的成分過濾困難?；亓魈崛》ǎ夯亓魈崛》ǎ?用于以有機(jī)溶劑加用于以有機(jī)溶劑加熱提取成分。優(yōu)點(diǎn)為提熱提取成分。優(yōu)點(diǎn)為提取效率高，但受熱易破取效率高，但受熱易破壞成分不宜用此法。缺壞成分不宜用此法。缺點(diǎn)為

12、溶劑消耗量大，需點(diǎn)為溶劑消耗量大，需回流設(shè)備，需幾次提取回流設(shè)備，需幾次提取方可提取完全。方可提取完全。連續(xù)回流法：連續(xù)回流法： 以索氏提取器（亦以索氏提取器（亦稱脂肪抽出器）回流提稱脂肪抽出器）回流提取。克服了回流法溶劑取?？朔嘶亓鞣ㄈ軇┬枰看?、需幾次提取需要量大、需幾次提取的缺點(diǎn)。缺點(diǎn)為提取時(shí)的缺點(diǎn)。缺點(diǎn)為提取時(shí)間長，受熱破壞成分不間長，受熱破壞成分不能用此法。能用此法。1、裝有藥物的濾紙筒3、溶劑蒸汽上升管4、虹吸回流管提取方法提取方法溶劑溶劑操作操作提取效率提取效率 使用范圍使用范圍備注備注浸漬法浸漬法水或有機(jī)水或有機(jī)溶劑溶劑不加熱不加熱效率低效率低各類成分，各類成分，尤遇熱不尤遇

13、熱不穩(wěn)定成分穩(wěn)定成分出膏率低，出膏率低，易發(fā)霉，需易發(fā)霉，需加防腐劑加防腐劑滲漉法滲漉法有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑不加熱不加熱脂溶性成脂溶性成分分消耗溶劑量消耗溶劑量大，費(fèi)時(shí)長大，費(fèi)時(shí)長煎煮法煎煮法水水直火加熱直火加熱水溶性成水溶性成分分易揮發(fā)，熱易揮發(fā)，熱不穩(wěn)定不宜不穩(wěn)定不宜用用回流提取回流提取法法有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑水浴加熱水浴加熱脂溶性成脂溶性成分分熱不穩(wěn)定不熱不穩(wěn)定不宜用，溶劑宜用，溶劑量大量大連續(xù)回流連續(xù)回流提取法提取法有機(jī)溶劑有機(jī)溶劑水浴加熱水浴加熱節(jié)省溶劑，節(jié)省溶劑，效率最高效率最高親脂性較親脂性較強(qiáng)成分強(qiáng)成分用索氏提取用索氏提取器，時(shí)間長器，時(shí)間長各種溶劑提取方法的優(yōu)缺點(diǎn)各種溶劑提取方法的優(yōu)

14、缺點(diǎn)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀 適于具有揮發(fā)性、可隨水蒸氣蒸餾不被破壞，與水不反應(yīng)、且與水分層的成分的提取。中藥中主要用于揮發(fā)油、某些揮發(fā)性生物堿、少數(shù)揮發(fā)性蒽醌苷元、香豆素苷元的提取。 以超臨界流體作為萃取介質(zhì)的一種提取新技術(shù)。最常用的是二氧化碳超臨界萃取法，環(huán)保、成本低、提取分離一步完成。超臨界流體：處于臨界溫度（Tc）、臨界壓力（Pc）以上，介于氣體與液體之間的流體。密度與液體近似密度與液體近似 黏度與氣體近似黏度與氣體近似 對很多物質(zhì)有很強(qiáng)對很多物質(zhì)有很強(qiáng)的溶解能力的溶解能力擴(kuò)散系數(shù)是液體的擴(kuò)散系數(shù)是液體的100100倍倍 （不及氣體）（不及氣體） 主要是根據(jù)超臨界流體對物質(zhì)有很強(qiáng)的溶解能力

15、，且改變溫度或壓力即可改變流體的密度、粘度和擴(kuò)散系數(shù)，流體對物質(zhì)的溶解特性也隨之改變，因此，可將不同性質(zhì)的成分分段萃取或分步析出，達(dá)到萃取分離的目的。2 2、二氧化碳、二氧化碳- -超臨界流體的溶解能力規(guī)律：超臨界流體的溶解能力規(guī)律： 在超臨界狀態(tài)下，CO2對不同溶質(zhì)的溶解能力差別很大。其取決于溶質(zhì)的極性、沸點(diǎn)、分子量。(1)對親脂性、低沸點(diǎn)成分溶解能力強(qiáng)，如揮發(fā)油、烴類、醚類、酯類等。(2)成分極性基團(tuán)（如OH、COOH）越多，越難提取。如糖類、氨基酸的萃取壓力要4104Pa以上。(3)成分分子量越大，越難提取。3 3、該方法的主要優(yōu)點(diǎn)：、該方法的主要優(yōu)點(diǎn)：1).可以在接近室溫下工作，防止熱

16、敏成分的破壞或逸散。2).萃取過程幾乎不用有機(jī)溶劑，萃取物中無溶劑殘留，對環(huán)境無污染。3).提取效率高，節(jié)約能耗。 4 4、超臨界流體萃取法的應(yīng)用、超臨界流體萃取法的應(yīng)用 超臨界流體萃取法始于20世紀(jì)50年代，到70年代末，該法廣泛應(yīng)用于煙草和食品工業(yè)，80年代以來，超臨界流體萃取技術(shù)在醫(yī)藥、化工、食品及環(huán)保等領(lǐng)域取得了迅速發(fā)展，特別是在中藥有效成分提取分離方面日益受到重視。 目前主要用于萜類、揮發(fā)油、生物堿、黃酮、苯丙素、皂苷和芳香有機(jī)酸等成分的提取分離。在青蒿素浸膏、蛇床子浸膏、胡椒精油、肉豆蔻精油等的制備分離方面已達(dá)到產(chǎn)業(yè)化規(guī)模。五、升華法 中藥中的某些固體成分在受熱低于其熔點(diǎn)的溫度下，

17、不經(jīng)液態(tài)直接成為氣態(tài)，經(jīng)冷卻后又成為固態(tài)，從而與中藥組織分離這種性質(zhì)稱為升華, 這種提取方法稱為升華法。 中藥成分有少量具有升華性，如游離羥基蒽醌類成分，一些小分子香豆素類，有機(jī)酸類成分等。 例如樟木中升華的樟腦（camphor），在本草綱目中已有詳細(xì)的記載，為世界上最早應(yīng)用升華法制取藥材有效成分的記述。六、壓榨法 機(jī)械壓力機(jī)械壓力提取的方式、溶劑的選擇：藥材的粉粹度： 藥粉越細(xì)、表面積越大，提取效率越高。但太細(xì)，藥粉越細(xì)、表面積越大，提取效率越高。但太細(xì)，藥粉對成分的吸附也越強(qiáng)。因此水提取宜用粗粉；用有藥粉對成分的吸附也越強(qiáng)。因此水提取宜用粗粉；用有機(jī)溶劑可細(xì)些機(jī)溶劑可細(xì)些, ,以以2020

18、目為好。目為好。溫度、時(shí)間： 一般提取時(shí)間長提出量大。但被提成分在細(xì)胞內(nèi)外一般提取時(shí)間長提出量大。但被提成分在細(xì)胞內(nèi)外溶解一旦平衡，時(shí)間長即無意義。一般熱水提以溶解一旦平衡，時(shí)間長即無意義。一般熱水提以1/2-1h1/2-1h為宜，乙醇提為宜，乙醇提1hr1hr為宜。為宜。分配系數(shù)的差異分配系數(shù)的差異 溶解度的差異溶解度的差異吸附性的差別吸附性的差別 分子大小的差別分子大小的差別 離解程度的不同離解程度的不同 中藥化學(xué)成分經(jīng)提取濃縮后，得到的仍是含有多種成分的混合物，需選用適當(dāng)?shù)姆椒▽⑵渲兴鞣N成分逐一分開，并把所得單體加以精制純化，這一過程稱為分離。原理：利用混合物中各成分在互不相溶的兩相

19、溶劑中分配系數(shù)不同而達(dá)到分離的方法。 各成分在兩相溶劑中分配系數(shù)相差越大，則分離效率越高。一般采用全量多次分配提高萃取效率。需要注意的是防止乳化。溶劑的選擇： 1、分離極性較大的成分，用正丁醇-水 2、分離中等極性成分，用乙酸乙酯-水 3、分離低極性成分，用氯仿（或乙醚、石油醚等）-水。所用裝置： 分液漏斗、連續(xù)液-液萃取裝置。（1 1）系統(tǒng)溶劑萃取法）系統(tǒng)溶劑萃取法 常用來粗級分離，是將總提物分散于水中，依次用石油醚（或環(huán)己烷）、氯仿、乙酸乙酯、正丁醇萃取，分別減壓回收溶劑得到相應(yīng)極性的成分。極性 成分類型 適宜溶劑強(qiáng)親脂性 揮發(fā)油、脂肪油、苷元 石油醚 脂溶性色素、甾醇 己烷親脂性 苷元、

20、生物堿、樹脂 乙醚 醛、醇、酯、有機(jī)酸 氯仿 小 強(qiáng)心苷 氯仿-乙醇（2：1）中極性 中 黃酮苷 乙酸乙酯 大 皂苷、蒽醌苷 正丁醇親水性 極性很大的苷、糖類 丙酮 氨基酸、某些生物堿鹽 甲醇、乙醇強(qiáng)親水性 蛋白質(zhì)、果膠、糖類、粘液質(zhì)、氨基酸 水 采用連續(xù)萃取器萃取。利采用連續(xù)萃取器萃取。利用兩溶液比重不同自然分層和用兩溶液比重不同自然分層和分散相液滴穿過連續(xù)相溶劑時(shí)分散相液滴穿過連續(xù)相溶劑時(shí)發(fā)生傳質(zhì)。此法可克服用分液發(fā)生傳質(zhì)。此法可克服用分液漏斗多次萃取操作的麻煩。漏斗多次萃取操作的麻煩。 利用兩相溶劑比重不同可自然分層和分散液滴穿過連續(xù)相溶劑時(shí)發(fā)生傳質(zhì)的原理，用一根或數(shù)根萃取管制成逆流連續(xù)

21、萃取裝置。管內(nèi)的瓷環(huán)，增加液滴上升的路程和在連續(xù)相中停留的時(shí)間，更重要的是上升的液滴因撞擊填充物而被分散，擴(kuò)大了兩相溶劑萃取的接觸面積，使萃取更完全。 * * 溶劑萃取法中溶劑系統(tǒng)的選擇：溶劑萃取法中溶劑系統(tǒng)的選擇： 兩相溶劑不相混溶，混合物中各單一成分在溶劑系統(tǒng)中的分配系數(shù)差別越大越好。分離酸堿兩性化合物時(shí)，緩沖液是很好的溶劑。* * 操作注意：操作注意： （1 1）先將兩相溶劑相互充分飽和。）先將兩相溶劑相互充分飽和。 （2 2）采用等體積兩相溶劑的方式。）采用等體積兩相溶劑的方式。 （3 3）欲分離混合物的濃度不宜過高。）欲分離混合物的濃度不宜過高。 沉淀法是在中藥提取液中加入某些試劑，

22、與其中一些成分生成沉淀，或加入某些試劑后可降低一些成分在溶液中的溶解度而自溶液中析出的一種方法。 如果所需要分離獲得的成分生成沉淀，則沉淀反應(yīng)必須是可逆的；如果是不需要的成分，則將生成的沉淀除去，可以是不可逆的沉淀反應(yīng)。（1 1）水提取醇沉淀法：）水提取醇沉淀法：于水提濃縮液中加入乙醇使含醇量達(dá)60%以上，可使多糖、蛋白質(zhì)等水溶性雜質(zhì)沉淀。（2 2）醇提取水沉淀法：）醇提取水沉淀法：于醇提取濃縮液中加入10倍量以上水，可使樹脂、葉綠素等脂溶性雜質(zhì)沉淀。 利用中性醋酸鉛或堿式醋酸鉛在水或稀醇溶液中能與許多物質(zhì)生成難溶的鉛鹽或絡(luò)鹽沉淀而分離的方法。1、中性醋酸鉛可沉淀具有鄰二酚羥基和羧基的酸性或酚

23、性物質(zhì)成分；沉淀有機(jī)酸、氨基酸、蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)、鞣質(zhì)、樹脂、酸性皂甙、部分黃酮等2、堿式醋酸鉛的沉淀范圍較廣，可沉淀含酚羥基和羧基及中性皂苷等。脫鉛方法：1通入硫化氫氣體法分解并轉(zhuǎn)為不溶性硫化鉛而沉淀2硫酸鹽或磷酸鹽 硫酸鉛、磷酸鉛沉淀3陽離子交換樹脂法脫鉛快而徹底 本法是利用某些成分在酸（或堿）中溶解，而在堿（或酸）中沉淀的性質(zhì)達(dá)到分離的方法。 1 1）酸提取堿沉淀：用于生物堿的提取分離。）酸提取堿沉淀：用于生物堿的提取分離。2 2）堿提取酸沉淀：用于酚、酸類成分和內(nèi)酯類成分的提取、分離）堿提取酸沉淀：用于酚、酸類成分和內(nèi)酯類成分的提取、分離 改變加入溶劑的極性或數(shù)量使沉淀逐步析出的方法。實(shí)

24、例： 多糖、蛋白質(zhì)的水溶液，分次加乙醇，使含醇量逐步提高，則可得到分子量由大到小的多糖、蛋白質(zhì) 皂苷的乙醇液，分次加入乙醚或乙醚-丙酮，可按極性從小到大逐步沉淀。 某些試劑能選擇性地沉淀某類成分，稱為專屬試劑沉淀法。實(shí)例： 1、雷氏銨鹽能與水溶性生物堿類（季銨堿）生成沉淀，可用于分離水溶性生物堿與其它生物堿 2、膽甾醇能和甾體皂苷沉淀，可使其與三萜皂苷分離 3、明膠能沉淀鞣質(zhì)，可用于分離或除去鞣質(zhì)等。 于中藥水提取液中加入某些無機(jī)鹽至一定濃度或達(dá)到飽和狀態(tài)，可使某些成分由于溶解度降低而沉淀析出。常用的無機(jī)鹽有NaCl、Na2SO4等。實(shí)例： 三七的水提取液中加硫酸鎂至飽和狀態(tài)，三七皂甙乙即可沉

25、淀析出 自黃藤中提取掌葉防己堿，自三顆針中提取小檗堿在生產(chǎn)上都是用氯化鈉或硫酸按鹽析制備。 從非結(jié)晶狀物質(zhì)通過處理得到結(jié)晶狀物質(zhì)的過程稱為結(jié)晶。用反復(fù)結(jié)晶的方法，從不純的結(jié)晶制得較純結(jié)晶的過程稱為重結(jié)晶。二者從操作角度差別是起始物不同。結(jié)晶和重結(jié)晶操作：結(jié)晶和重結(jié)晶操作： 提取或分離物提取或分離物 溶于選擇的溶劑，加熱成飽和溶液，過濾溶于選擇的溶劑，加熱成飽和溶液，過濾 溶液溶液 放置（冷藏）析晶，過濾放置（冷藏）析晶，過濾 粗結(jié)晶粗結(jié)晶 重復(fù)上述操作（重結(jié)晶）重復(fù)上述操作（重結(jié)晶） 結(jié)晶結(jié)晶 利用天然或人工合成的高分子膜，以外加壓力或化學(xué)位差為推動(dòng)力，對混合物溶液進(jìn)行分離、分級、提純和富集的

26、方法。 反滲透、超濾、微濾、電滲析及傳統(tǒng)的透析法均為膜分離技術(shù)。 原理： 大分子不能透過膜而被截留，小分子能透過膜，使分子大小不同的物質(zhì)得到分離。 技術(shù)關(guān)鍵： 根據(jù)欲分離成分的具體情況選用規(guī)格適宜的過濾膜。 不同膜過濾被截留的分子大小有區(qū)別。如運(yùn)用超濾，選用適當(dāng)規(guī)格的膜可實(shí)現(xiàn)對中藥提取液中多糖類、多肽類、蛋白質(zhì)類的截留分離。 利用混合組分中各成分的沸點(diǎn)不同而分離的一種利用混合組分中各成分的沸點(diǎn)不同而分離的一種方法。用于液體混合物的分離。方法。用于液體混合物的分離。 適用于能夠完全互溶的液體混合物的分離，常用適用于能夠完全互溶的液體混合物的分離，常用分餾法分餾法分離揮發(fā)油分離揮發(fā)油及一些液體生物

27、堿。及一些液體生物堿。分離毒芹總堿 ： 毒芹堿沸點(diǎn)為166-167 羥基毒芹堿沸點(diǎn)為226 ，彼此相差較遠(yuǎn)，即可以利用沸點(diǎn)的不同進(jìn)行分餾。 又稱層析法，是一種分離和鑒定化合物的有效方法，其最大的優(yōu)點(diǎn)在于分離效能高、快速簡便。對一些結(jié)構(gòu)性質(zhì)相似化合物的分離，用經(jīng)典的萃取法、沉淀法和結(jié)晶法等難以達(dá)到分離目的時(shí)，用色譜法往往可以收到很好的分離效果。 如中藥丹參的化學(xué)成分在30年代僅從中分離到3種脂溶性色素，分別稱為丹參酮、（結(jié)晶法）。但以后進(jìn)一步的研究，發(fā)現(xiàn)除丹參酮為純品外，、均為混合結(jié)晶。此后通過各種層析方法，迄今已發(fā)現(xiàn)15種單體（其中有4種為我國首次發(fā)現(xiàn)）。色譜法根據(jù)分離原理可分為：1、吸附色譜

28、:組分對吸附劑吸附能力不同2、分配色譜:利用物質(zhì)在固定相和流動(dòng)相之間分配系數(shù)不同而達(dá)到分離3、凝膠色譜:利用物質(zhì)分子的大小不同4、離子交換色譜：基于各成分解離度的不同而分離 通常又將一般的以流動(dòng)相為氣體的稱為氣相層析，流動(dòng)相為液體的稱為液相層析。原理： 利用同一種吸附劑對混合物中各種成分吸附能力的差異，而使各成分達(dá)到分離目的的色譜方法。應(yīng)用范圍： 特別適用于很多中等分子量的樣品（分子量小于1，000的低揮發(fā)性樣品）的分離，尤其是脂溶性成分一一般不適用于高分子量樣品如蛋白質(zhì)、多糖或離子型親水住化合物等的分離。 吸附色譜法的分離效果，完全由吸附劑，洗脫溶劑和被分離物質(zhì)的性質(zhì)決定。1）硅膠：原理：原

29、理：硅膠是一種多孔，中等極性的酸性吸附劑，吸附硅膠是一種多孔，中等極性的酸性吸附劑，吸附作用是由于顆粒表面有很多硅醇基，它可以和許多化作用是由于顆粒表面有很多硅醇基，它可以和許多化合物形成氫鍵而具有一定的吸附作用合物形成氫鍵而具有一定的吸附作用吸附規(guī)律：吸附規(guī)律：化合物極性越大、吸附能力強(qiáng)（難洗脫）化合物極性越大、吸附能力強(qiáng)（難洗脫） 應(yīng)用：應(yīng)用：適用于中性或酸性成分的層析。適用于中性或酸性成分的層析。2）氧化鋁：原理：原理：氧化鋁是中等極性的弱堿性吸附劑，化合物與氧氧化鋁是中等極性的弱堿性吸附劑，化合物與氧化鋁表面形成氫鍵化鋁表面形成氫鍵吸附規(guī)律：吸附規(guī)律：化合物極性越大、吸附能力強(qiáng)（難洗脫

30、）化合物極性越大、吸附能力強(qiáng)（難洗脫） 應(yīng)用：應(yīng)用：氧化鋁有弱堿性，氧化鋁有弱堿性，主要用于堿性或中性親脂性成主要用于堿性或中性親脂性成分的分離，如生物堿、甾、萜類等成分；分的分離，如生物堿、甾、萜類等成分；對于生物堿對于生物堿類的分離頗為理想。類的分離頗為理想。3）活性炭：原理：原理：活性炭是非極性吸附劑活性炭是非極性吸附劑 ，對非極性物質(zhì)吸附強(qiáng)。，對非極性物質(zhì)吸附強(qiáng)。吸附規(guī)律：吸附規(guī)律：活性炭的吸附作用，在水中最強(qiáng)，在有機(jī)溶活性炭的吸附作用，在水中最強(qiáng)，在有機(jī)溶劑中則較低弱。因此水的洗脫能力最弱，而有機(jī)溶劑則劑中則較低弱。因此水的洗脫能力最弱，而有機(jī)溶劑則較強(qiáng)。較強(qiáng)。 化合物極性越小、對活

31、性炭的吸附能力強(qiáng)化合物極性越小、對活性炭的吸附能力強(qiáng) 應(yīng)用：應(yīng)用：活性炭主要用于分離水溶性成分，如氨基酸、糖活性炭主要用于分離水溶性成分，如氨基酸、糖類及某些甙。類及某些甙。 從稀水溶液中富集微量物質(zhì)從稀水溶液中富集微量物質(zhì), ,脫色（脂溶性色素）脫色（脂溶性色素） 4）聚酰胺：原理：原理：聚酰胺中的酰胺基可與酚羥基、羧基、羰基、硝聚酰胺中的酰胺基可與酚羥基、羧基、羰基、硝基等形成氫鍵吸附?；刃纬蓺滏I吸附。吸附規(guī)律：吸附規(guī)律： 化合物中能形成氫鍵的基團(tuán)（酚羥基、羧基、羰基）越多，化合物中能形成氫鍵的基團(tuán)（酚羥基、羧基、羰基）越多，吸附越強(qiáng)吸附越強(qiáng) 能形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目相同，處于對位和間位的吸

32、附力強(qiáng)于能形成氫鍵的基團(tuán)數(shù)目相同，處于對位和間位的吸附力強(qiáng)于鄰位的鄰位的 芳香環(huán)和雙鍵多，吸附力強(qiáng)。芳香環(huán)和雙鍵多，吸附力強(qiáng)。應(yīng)用：應(yīng)用：適于分離黃酮、酚、醌類、有機(jī)酸及鞣質(zhì)，可使適于分離黃酮、酚、醌類、有機(jī)酸及鞣質(zhì)，可使性質(zhì)極相近的化合物得到分離性質(zhì)極相近的化合物得到分離 化合物被吸附劑吸附后，需用合適的溶劑進(jìn)行展開，這種溶劑稱為展開劑展開劑，在柱色譜中習(xí)慣稱為洗脫洗脫劑劑。展開劑在吸附色譜中主要作用是解吸附。 在吸附色譜中，洗脫劑的洗脫能力與其極性有關(guān)。對于極性吸附劑（硅膠、氧化鋁），洗脫劑的極性越大，其洗脫能力越強(qiáng)，化合物在色譜中移動(dòng)的速度就越快，而對非極性吸附劑（活性炭）則相反，洗脫劑

33、的極性越小，其洗脫能力越強(qiáng)。 被分離成分與吸附劑、洗脫劑共同構(gòu)成了吸附色譜中的三要素。 對硅膠、氧化鋁等極性吸附劑來說，對極性大的化合物吸附強(qiáng)，移動(dòng)慢，Rf值??；而對極性小的化合物吸附弱，Rf值大，從而將各成分分離開。 全面考慮吸附劑、展開劑和被分離成分三者的相互關(guān)系，是分離成敗的關(guān)鍵。 被分離物質(zhì)被分離物質(zhì)1 1） 薄層色譜：薄層色譜：制板 點(diǎn)樣 展開 顯色2 2） 柱色譜：柱色譜：裝柱 上樣 洗脫 收集 濃縮 檢識 合并 結(jié)晶 此法是將吸附劑均勻地鋪在玻璃板上形成薄層，把欲分離的試樣溶液點(diǎn)加到薄層板的一端，然后用合適的展開劑展開，使混合物中各成分得以分離的方法。 吸附薄層色譜的操作主要包括

34、鋪板（制板）、點(diǎn)樣、展開和顯色四個(gè)方面。實(shí)際工作中常用硅膠-羧甲基纖維素鈉（硅膠CMC-Na）薄層板，展開方式有上行法、下行法、單向展開、雙向展開等多種。 原點(diǎn)中心至斑點(diǎn)中心的距離原點(diǎn)中心至展開劑前沿的距離 Rf=將計(jì)算出的Rf值與已知化合物的Rf值對照，也可與文獻(xiàn)上記載的Rf值比較，進(jìn)行定性鑒別。 薄層色譜： 1、主要用于各類化學(xué)成分的預(yù)試驗(yàn)、分離鑒定及探索柱色譜分離的條件 2、應(yīng)用于中草藥品種、藥材及其制劑真?zhèn)蔚臋z查、質(zhì)量控制和資源調(diào)查。藥典一部采用薄層色譜法作鑒別的中藥材和中藥成方制劑品種已達(dá)1523種。 吸附柱色譜法是將試樣加入到一定規(guī)格裝有吸附劑的玻璃柱里，再用適當(dāng)?shù)娜軇┫疵摚菇Y(jié)構(gòu)

35、性質(zhì)不同的成分達(dá)到分離的方法。其分離原理、吸附劑和洗脫劑的選擇均與吸附薄層色譜法基本相同。柱色譜的具體操作可分為裝柱、加樣和洗脫三步。柱色譜主要用于化學(xué)成分的分離制備及含量測定原理： 分配色譜的原理來自于兩相溶劑萃取法。利用被分離成分在固定相和流動(dòng)相之間的分配系數(shù)的不同而達(dá)到分離的方法。分類： 按照固定相與流動(dòng)相的極性差別，分配色譜法有正相與反相色譜法之分。正相色譜：固定相極性 流動(dòng)相極性， 用于分離極性和中等極性的成分。反相色譜：固定相極性流動(dòng)相極性（反相分配色譜法應(yīng)用廣泛）（反相分配色譜法應(yīng)用廣泛） 用于分離非極性和中等極性的成分固定相： 常用的固定相有十八烷基硅烷（ODS）或C8鍵合相。

36、在普通硅膠表面進(jìn)行化學(xué)修飾，鍵合上長度不同的烴基（R）形成親脂性表面，習(xí)稱鍵合相，如十八烷基或辛基硅烷鍵合相。中藥中的各種苷類特別適合用反相色譜法分離。流動(dòng)相： 常用甲醇-水 或乙腈-水系統(tǒng)洗脫規(guī)律： 反相色譜中，極性大的化合物先被洗脫，極性小的化合物后被洗脫1 1）原理）原理 樹脂與被交換成分間同種電荷離子的等當(dāng)量替代作用。以離子交換樹脂為固定相，水或酸水、堿水為流動(dòng)相，在流動(dòng)相中的離子性物質(zhì)與樹脂進(jìn)行交換而被吸附，再用適合溶劑將被交換成分從樹脂上洗脫下來即可。陽離子交換樹脂：強(qiáng)酸型 R-SOR-SO3 3-H-H+ + 和弱酸型-COO-H-COO-H + + 。陰離子交換樹脂：強(qiáng)堿型 RNRN + + (CH(CH3 3) )3 3CICI- -（三甲胺基）和弱堿型 -NR2、 - - NHRNHR、-NH-NH2 2（伯、仲、叔胺）等。陽離子交換樹脂：陰離子交換樹脂：式中RSO3 H + 、RN +(CH3)3OH-分別代表陽離子和陰離子交換樹脂，在水中可分別電離出H +和OH -，其中H +與Na +交換，OH -與Cl -交換，使反應(yīng)不斷地向右方向進(jìn)行，直至交換完全，而且這種交換反應(yīng)是可逆的。當(dāng)再分別用HCl和NaOH洗脫柱子時(shí)，反應(yīng)按逆方向進(jìn)行，